不含人血清培养液在体外淋巴细胞转化试验中的应用

对不含血清培养液与含人ＡＢ型血清培养液进行体外淋巴细胞转化试验（３Ｈ－ＴｄＲ掺入法）比较。结果表明两者无显著差异（Ｐ＞０．０５）。提示用不含血清培养液测定淋巴细胞转化同样能获得良好的结果。     

^3H—TdRβ线与^60Coγ线引起的人淋巴细胞微核效应

采用人外周血淋巴细胞体外培养胞浆阻滞微核测试法，观察用＾３Ｈ－ＴｄＲβ线和＾６０Ｃｏγ线照射引起的剂量－效应关系，并计算了＾３Ｈ－ＴｄＲβ线的相对生物效应值。＾３Ｈ－ＴｄＲβ线内照射和＾６０Ｃｏγ线外照射的剂量效应关系均符合Ｙ＝Ａ＋ＢＸ＋ＣＸ＾２线性－平方数学模式，淋巴细胞微核频率随β线和γ线剂量的增加而增加。＾３Ｈ－ＴｄＲβ线的ＲＢＥ均值为１．１９，表明其β线产生的生物效应是γ线的１．１９倍。     

离心管技术构建的组织工程软骨细胞生物学特性的研究

目的 观察离心管技术构建的组织工程化软骨的细胞生物学特点，探讨该技术构建组织工程化软骨的可行性。方法 取3周龄兔关节软骨的表层软骨，经酶消化获得大量的软骨细胞，用离心管技术构建软骨组织，对培养3周的组织工程软骨进行组织学，免疫组织化学，透射电镜，^3H-TdR掺入量等检查。结果 组织学显示软骨细胞位于陷窝，基质异染，Ⅱ型胶原免疫组化阳性，细胞内富含高尔基体，分泌囊泡和糖原颗粒，^3H-TdR掺入量显示软骨细胞DNA较正常软骨细胞明显增强。结论 离心管内软骨细胞的增殖较正常关节软骨增强，离心管技术可用于组织工程软骨的构建。     

白血病细胞增殖动力学两项指标的对比研究

采用３Ｈ—ＴｄＲ掺入法研究细胞增殖动力学历史悠久，实验结果可靠。用核仁组成区银染法（Ａｇ－ＮＯＲ银染法）研究细胞增殖情况也已开展，两种方法是否有可比性的研究报告不多，现将我科研究的初步结果报告如下。１材料和方法１．ｌ３Ｈ－ＴｄＲ掺入法　取骨髓ｌｍｌ或外周血２ｍｌ，置肝素抗凝小瓶内，室温自然沉淀３０ｍｉｎ～ｌｈ，取富含白细胞的上层液体，用含１０％新生小牛血清的ＲＰＭｌｌ６４０培养液稀释至细胞数１×１０６／ｍｌ，每例测３孔，取平均值。在５％ＣＯ２简易培养箱内３７℃培养２ｈ，然后每孔加３Ｈ－ＴｄＲｌｕ…     

PWM激活的淋巴细胞亚群的功能研究

用放射性标记化合物掺入法研讨ＰＷＭ诱导人血淋巴细胞亚群的功能及其调节。实验表明，ＰＷＭ细胞对ＬＰＳ活的Ｂ细胞转化有促进作用，受４０Ｇｙ辐照后，它的作用显著下降，但仍有一定加强效应。ＰＷＭ细胞对ＰＷＭ激活的淋巴细胞转化的促进作用不明显，对ＣｏｎＡ和ＰＨＡ激活的细胞无效。用玫瑰花环法分离Ｔ、Ｂ细胞，用ＣＤ４、ＣＤ３和Ｂ３株单克降抗体（ＭｃＡｂ），以亲和层析和Ｐａｎｎｉｎｇ法分离各淋巴细胞亚群，分别研究ＰＷＭ对各亚群的激活及相互调节作用．结果表明：Ｂ细胞被ＰＷＭ激活强于Ｔ细胞，ＰＷＭ对Ｂ和非ＣＤ４细胞激活作用相当，ＣＤ２细胞次之，ＣＤ４细胞最弱．Ｔ细胞或ＣＤ４细胞与Ｂ细胞均有协同作用，前者作用更大．ＰＷＭ－非ＣＤ４和ＰＷＭ—Ｂ细胞无协同作用，ＣＤ６细胞与Ｂ细胞有抑制作用。     

F68及其联合DMSO对脐血造血细胞的低温保护作用

目的研究普鲁兰尼克(F68)及其联合DMSO在-80℃条件下对脐血造血干细胞的低温保护作用,为临床应用提供依据.方法脐血造血细胞冻存30、60、90 d后复苏,应用台盼蓝拒染率、集落形成试验、3H-TdR掺入率等,测定经F68保护体系冻存的脐血活力,并与目前通用的冷冻保护剂二甲亚砜及CP-1进行了对比研究.结果在-80℃条件下,F68对脐血造血细胞具有明显的冷冻保护作用,并与DMSO具有协同保护效果,联合F68及DMSO的保护体系可使MNC、CFU-GM的平均回收率及台盼蓝拒染率在第90天时分别达到(83.4±6.3)%,(68.8±7.9)%, (92.5±5.1)%,优于目前通用的细胞冻害保护液CP-1及DMSO.90 d的冻存期内,脐血细胞活力无明显下降.结论 F68及其与DMSO组成的冻存方案对脐血造血干细胞具有良好的冻存保护效果.     

~3H－TdRβ线与~（60）Coγ线引起的人淋巴细胞微核效应

采用人外周血淋巴细胞体外培养胞浆阻滞微核测试法，观察用３Ｈ－ＴｄＲβ线和６０Ｃｏγ线照射引起的剂量－效应关系，并计算了３Ｈ，ＴｄＲβ线的相对生物效应值。３Ｈ－ＴｄＲβ线内照射和６０ＣＯγ线外照射的剂量效应关系均符合Ｙ＝Ａ＋ＢＸ２＝ＣＸ２线性－平方数学模式，淋巴细胞微核频率随β线和γ线剂量的增加而增加。３Ｈ－ＴｄＲβ线的ＲＢＥ均值为１．１９，表明其β线产生的生物效应是γ线的１．１９倍。     

^3H—TdR参入DNA技术在组织培养中的应用

探讨＾３Ｈ－ＴｄＲ参入ＤＮＡ技术在组织培养中的合理应用。测定１６周龄ＳＨＲ和ＷＫＹ大鼠培养的胸主动脉血管平滑肌细胞的自然增长曲线以及接种后６０ｈ期间，每隔４－６ｈ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入的变化。ＳＨＲ大鼠ＡＳＭＣ分裂增殖能力比ＷＫＹ强，在１５％ＦＢＳ－１６４０培养基作用下，１－６０ｈ期间，ＳＨＲ ＡＳＭＣ ＾３Ｈ－ＴｄＲ高峰参入率在２０－２４，５０－５５ｈ之间，ＷＫＹ的高峰参入率在４０－５０ｈ之间。     

辐射对血管内皮细胞生物学特性的影响

目的研究辐射对人脐静脉内皮细胞系ECV-304生物学特性的影响,探讨放射性皮肤烧伤的愈合机制.方法倒置显微镜观察不同剂量辐射下ECV-304细胞形态学的变化;^3H-TdR掺入法和CB法检测辐射对ECV-304增殖抑制及微核发生率的影响;RT-PCR半定量法检测辐射对内皮细胞VEGF的表达.结果辐射可导致ECV-304细胞核体积增大,细胞均质性变差;且对ECV-304增殖的抑制作用呈剂量依赖性,随剂量增加而增大;随剂量增加,微核发生率明显增加;RT-PCR结果表明,VEGF在细胞受到辐射后8 Gy以上表达增高,而且持续表达至72 h.结论γ射线通过损伤DNA和细胞染色体抑制ECV-304增殖,同时VEGF在内皮细胞受辐射后表达升高,可能对细胞具有辐射防护作用,这为放射性烧伤的治疗奠定了理论基础.     

人脾转移因子对家兔特异抗原刺激过程的影响

作者为了观察注射转移因子对家兔特异抗原刺激过程的影响,在兔子的腘窝部每周一次注射转移因子0.5IU/kg,共注射三次后检查末梢血淋巴细胞绝对值,~3H—TdR掺入淋巴细胞转化实验,特异抗体价共三个指标。结果认为TF注射后能增强PHA诱导的淋巴细胞增殖能力,在特异抗体效价的反应中影响不明显,有待于在淋巴细胞亚群的反应上进一步探讨。     

胎肝细胞裂解产物对肿瘤患者外周血淋巴细胞^3H—TdR掺入率…

对３５例肿瘤患者放、化疗同时应用胎肝细胞裂解产物治疗，观察其外周血淋巴细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率和α－醋酸萘酚酶活性的变化，说明ＦＬＳ对免疫功能的增强效应，并对其机璋进行探讨。     

集落刺激因子对3H—TdR掺入骨髓细胞的刺激作用

应用３Ｈ—ＴｄＲ掺入试验，证明集落刺激因子（ＣＳＦ）具有刺激骨髓细胞增殖分化的能力，ＣＳＦ在２～１０ｍｇ／Ｌ之间，随浓度的增高，人胚骨髓细胞的放射性计数亦增高，并呈良好的线性关系。小鼠骨髓细胞的３Ｈ—ＴｄＲ掺入计数值，明显低于人骨髓细胞，表明ＣＳＦ具有种属差异性。     

野生马齿苋对家兔淋巴细胞PHA诱导下增殖的影响

为了探讨野生马齿苋对家兔免疫功能的影响，用３Ｈ－ＴｄＲ掺入ＤＮＡ法测定了马齿苋对家兔淋巴细胞增殖的影响。结果表明，正常淋巴细胞增殖试验，马齿苋组与正常对照组比较二者差异有显著性（Ｐ＜０．０５），在植物血凝素诱导的淋巴细胞增殖试验中，两组比较差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１）     

甲醛对V79细胞DNA、RNA合成影响的体外实验研究

目的　研究甲醛对V79细胞DNA和RNA的损伤作用 ,探讨甲醛遗传毒性的分子机制。方法　中国仓鼠肺细胞 (V79)分别暴露于浓度为 75 ,15 0 ,30 0 ,6 0 0 μmol/L的甲醛中 ,1h、2h、4h ,采用3 H -胸腺嘧啶核苷 ( 3 H -TdR)、14 C -尿嘧啶核苷 ( 14 C UR)掺入技术检测甲醛致V79细胞DNA和RNA损伤情况。结果　所有 4个浓度组甲醛均明显影响细胞DNA和RNA的合成 ,3 H TdR和14 C UR掺入计数每分衰变数 (dpm值 )显著低于对照组 (P <0 .0 1) ,并有明显的剂量 -效应关系 (P <0 .0 1)。细胞暴露在甲醛中 4h ,各浓度组3 H TdR和14 C UR掺入dpm值显著低于暴露于 1h和 2h各浓度组的dpm值 (P <0 .0 1)。 结论　甲醛可以影响V79细胞DNA和RNA合成 ,这对进一步研究甲醛遗传毒性的分子机制有重要意义     

人胎盘间充质干细胞对脐血淋巴细胞转化的影响

目的从人胎盘中分离间充质干细胞(MSC),研究胎盘MSC在脐血移植中的免疫调节作用。方法分离人胎盘组织灌流液中单个核细胞(MNC)贴壁培养、集落筛选,鉴定表面标志及纯度,向脂肪、成骨诱导鉴定多向分化潜能。应用3HTdR掺入法,观察胎盘MSC对成人外周血淋巴细胞及脐血淋巴细胞的免疫抑制作用。将不同数量胎盘MSC分别与成人外周血和脐血淋巴细胞共培养,加入植物血凝素(PHA)刺激淋巴细胞增殖,观察胎盘MSC对淋巴细胞转化的影响。结果从人胎盘组织中分离获得的贴壁细胞,具有同骨髓MSC相同的细胞表型及多向分化能力,可以显著抑制成人外周血和脐血淋巴细胞转化,抑制作用与MSC的数量呈正相关。与无MSC作用相比,当MSC为2×105/孔时对成人外周血和脐血淋巴细胞转化的抑制率分别为79.97%和64.06%,而当MSC为1.25×104/孔时抑制率则分别为46.83%和12.19%。结论从人胎盘中可以成功地分离出MSC,利用其对脐血淋巴细胞的免疫调节作用,除了可以作为与脐血造血干/祖细胞相适应的培养基质,还有望降低脐血移植中困扰已久的移植物抗宿主疾病(GVHD)问题,促进脐血移植的广泛应用。