异搏定加强白血病细胞体外净化作用的实验观察

异搏定加强白血病细胞体外净化作用的实验观察二院血液科卢远清石镌华骆忠莲白血病细胞体外净化是自体骨髓移植的关键步骤，高温加化疗药物是传统的净化方法之一。我们把异搏定引入这一净化体系，发现可以明显提高净化效果。方法１骨髓采自１２例急性非淋巴细胞白血病病人...     

IL-2与IFN-α联合激活的白血病缓解期骨髓对白血病细胞的净化作用

目的：体外研究白细胞介素Ⅱ(IL-2)和α-干扰素(IFN-α)联合激活对白血病缓解期骨髓自然杀伤细胞(NK)和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)活性的影响，以及对白血病细胞(K562细胞)的净化作用，并观察其对正常造血的影响。方法：标准4h^51Cr释放实验测定激活的白血病缓解期骨髓的细胞毒作用；集落培养法和逆转录多聚酶链反应检测激活的白血病缓解期骨髓对K562细胞的净化作用。结果：IL-2和INF-α单用虽均能增强白血病缓解期骨髓的NK活性和诱导LAK细胞的产生，但两者联合激活的白血病缓解期骨髓的NK和LAK活性，明显优于IL-2和IFN-α的单用(P＜0．05)。在体外净化实验中两种细胞因子均能激活白血病缓解期骨髓细胞对K562细胞的净化作用，但两种联合作用最强，且bcr／abl融合基因检测为两者联合组33．33％(4／12)，Rt-pcR法，而IL-2作用次之为66．67％(8／12)，最后是IFN-α为91．67％(11／12)。两种细胞因子中以IFN-α单用对CFU-GM的抑制有一定影响(P＜0．01)，而IL-2和两者联合对激活骨髓的CFU-GM无明显影响。结论：IL-2能激活白血病缓解期骨髓的NK细胞的活性和诱导LAK细胞的产生，IFN-α能增强IL-2激活白血病缓解期骨髓对白血病细胞的净化作用。     

急性白血病患者骨髓LAK细胞对骨髓白血病细胞的净化作用

急性白血病患者骨髓ＬＡＫ细胞对骨髓白血病细胞的净化作用广东中山医科大学孙逸仙纪念医院血液科（５１０１２０）谢德荣，张惠宜急性白血病化疗后完全缓解或自体骨髓移植后往往出现白血病复发。复发的原因主要是患者体内残存的白血病细胞未被清除［１］。尽管各种物理、...     

应用单克隆抗体净化白血病细胞后自体骨髓移植四例报告(摘要)

骨髓移植治疗白血病是一种有效的治疗措施,异基因骨髓移植(ALLO—BMT)存在供髓来源困难,又受年龄限制。自体骨髓移植(ABMT)不存在髓源困难,基本上不受年龄限制,但复发率较高。为减少ABMT后白血病复发,目前有许多学者正在探索企图净化残留在骨髓中的白血病细胞后进行ABMT。此种骨髓净化后的ABMT,在我国独生子女日益增多的情况下,应成为我们研究的一个重要课题。体外净化骨髓中残留的白血病细胞,免疫学方法特异性最强,是一种较理想的方法。1988年5月～1989年7月,我们对4例普通型急性淋巴细胞白血病(CALL)患者缓解后,采用单克隆抗体55(McAb55)在体外净化骨髓中残     

rhTNF—α联合IL—2对急性髓细胞白血病患者骨髓体外净化的研究

目的 探讨重组人肿瘤坏死因子α（rhTNF-α）联合白细胞介素2（IL-2）对急性髓细胞白血病（AML）骨髓体外净化的作用。方法 rhTNF-α(1000u/ml)和IL-2（500u/ml)联合，对17例AML患者骨髓体外净化培养1-3d，用甲基纤维素半固体培养法测定粒-巨噬细胞集落（CFU-GM）、白血病祖细胞（CFU-L）形成，并以免疫组化法测定CD33、CD38和CD34阳性表达率的变化。结果 （1）rhTNF-α对8例正常人和17例患者的CFU-GM均有明显的抑制作用。而与IL-2联合作用对CFU-GM则无明显影响；（2）单用rhTNF-α或IL-2与患者骨髓共同孵育1d和3d，CFU-L形成率均有所下降，但至孵育3d后，尚残余20%、6%的白血病克隆，不能完全根除CFU-L，而两者联合作用3d后，CFU-L抑制率达100%；（3）17例AML患者骨髓经rhTNF-α、IL-2净化培养3d后，白敌国病细胞CD33、左右8帮CD34阳性表达率发生了明显变化。结论 （1）单用rhTNF-α或IL-2净化效果不理想；（2）rhTNF-α联合IL-2对CD34阳性表达率发生了明显的变化。结论 （1）单用rhTNF-α或IL-2净化效果不理想；（2）rhTNF-α联合IL-2对CFU-L有选择性杀伤作用。而对正常CFU-GM无明显影响。净化效果较好；（3）白血病细胞CD33、CD38、CD34阳性率的变化可间接评价AML骰须净化效果。     

LAK细胞免疫净化自体骨髓移植的临床应用

由于不存在供者选择、移植物抗宿主病(GVHD)及传播人类疾病等特点，自体骨髓移植(ABMT)对根治白血病及其它恶性肿瘤有明显的优越性，而如何最大限度地清除自体骨髓中残留的肿瘤细胞即净化自体骨髓是保证ABMT效果和延缓复发的关键。我们于1902年3～7月应用体外培养自体骨髓中的LAK细胞(LAK)免疫净化自体骨髓中的肿瘤细胞，     

微波体外净化自体造血干细胞移植治疗急性白血病76例长期疗效分析

目的 观察微波体外净化自体造血干细胞移植治疗急性白血病的长期疗效。方法 自体骨髓35例，自体骨髓和自体外周血干细胞联合移植7例，自体外周血干细胞移植34例。移植前采用微波体外净化自体骨髓和自体外周血干细胞。结果 76例病人造血均获造血重建，随访5年，5年生存率37．1％，其中急性髓细胞性白血病5年生存率40．1％，急性淋巴细胞白血病5年生存率33．3％。结论 自体造血干细胞移植对急性白血病的治疗是有效的。     

新亲溶酶体剂IHW_2净化白血病骨髓研究

目的观察新亲溶酶体剂IHW_2对白血病骨髓净化效果,并验证该药物的靶向性。方法体外直接作用于L7811白血病细胞;观察该药物对AML患者骨髓白血病祖细胞和正常骨髓造血干细胞的效应;用615小鼠模拟白血病进行净化;电镜观察经药物作用后HL-60细胞超微结构的变化;临床对5名AML自体骨髓移植患者的骨髓进行净化。结果①IHW_2体外有选择性细胞毒作用;当用量为85μg/1×10~7细胞时,IHW_2能杀灭100白血病细胞而同时保留19.4±16.5％的正常造血干细胞;②模拟净化各组小鼠的生存期均超过36天。而未用药物的对照组仅存活15.5±1.5天(P<0.01);③超微结构证实IHW_2的作用靶点系溶酶体;④5例患者中,1例死于移植后ARDS,2例于移植后3、17个月复发,2例无病生存分别为84和86个月。结论IHW_2的作用靶点系溶酶体,是良好的骨髓净化剂,其应用有效和安全。     

慢性粒细胞白血症骨髓的体外净化

目的：探讨白细胞介素，干扰素α2α，bcr-abl反义寡核苷酸对慢性粒细胞白血病骨髓体外净化效果。方法：采用体外克隆形成培养技术，分别用白细胞介素，干扰素α2α，bcr-abl反义寡核苷酸不同的组合方案，进行体外净化5例慢性粒细胞白血病（CML）骨髓，结果：联用IL－2，IFN－α2α（各800um/ml),bcl-abl AS-ODN(30ug/ml)方案，对白血病细胞克隆形成单位（L－CFU）抑制作用有显著差异（P＜0．01），而相同条件下，GM－CFU及L－CFU的集落存活率 分别为26．91％和3．49％（P＜0．01），结论：联用IL－2，IFN－α2α（各800g/ml),bcr-abl AS-ODN(30ug/ml)方案，选择性体外净化慢性粒细胞白血病细胞的效果好，可用于临床净化CML骨髓。     

用胎肝抑瘤物体外净化白血病细胞行自体骨髓移植

用体外液体及半固体培养方法，观察了不同剂量人胎肝低分子天然抑瘤物对下沉造血细胞和髓系白血病生长的影响。筛选出的低剂量抑瘤物能明显抑制白血病细胞生长，崦对正常粒单系造血祖细胞的生长无明显影响。选用低剂量低分子抑瘤物体外净化２例急性粒系白血病患者的骨髓，随扣作自体骨髓移植均获造血重建。     

急性白血病骨髓基质细胞对HL-60细胞增殖、分化的影响

目的 为探讨急性白血病骨髓基质对HL-60细胞的影响。方法 骨髓基质与白血病细胞共培养，采用MTT检测基质对白血病细胞的粘附，流式细胞仪检测粘附的HL-60细胞周期，非特异性酯酶及过氧化物酶染色观察白血病细胞分化及绘制白血病细胞生长曲线。结果 白血病骨髓基质对HL-60细胞的粘附率及粘附的白血病细胞处于G0／G1期比例均明显高于正常骨髓基质；正常骨髓基质对HL-60细胞的生长抑制作用及诱导分化作用均明显强于白血病基质。结论 急性白血病骨髓基质对HL-60细胞的增殖、分化作用均存在异常。     

用胎肝抑瘤物体外净化白血病细胞行自体骨髓移植

用体外液体及半固体培养方法，观察了不同剂量人胎肝低分子天然抑瘤物对正常造血细胞和髓系白血病细胞生长的影响。筛选出的低剂量（５０μｇ／　ｍｌ）抑瘤物能明显抑制白血病细胞生长，而对正常粒单系造血祖细胞的生长无明显影响。选用低剂量低分子抑瘤物体外净化２例急性粒系白血病患者的骨髓，随后作自体骨髓移植均获造血重建。     

体外高热对急性非淋巴细胞白血病细胞的净化作用

本实验发现正常骨髓细胞经不同温度（３７℃～４３℃）、不同时间（３０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ和９０ｍｉｎ）其细胞形态和细胞化学染色均无明显变化。而急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）患者的骨髓白血病细胞随温度增高退化细胞和核溶解细胞增多。正常人骨髓粒单祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）生长仅在加热４３℃才明显减少，而白血病祖细胞（ＣＦＵ－Ｌ）的生长随温度升高呈指数性下降。证明ＣＰＵ－Ｌ对高热的敏感性高于ＣＰＵ－ＧＭ，高热能选择性杀伤白血病祖细胞。４２℃６０ｍｉｎ和４３℃３０ｍｉｎ能尽可能多杀伤ＣＦＵ－Ｌ，而保留较多ＣＦＵ－ＧＭ，不影响正常骨髓造血重建，是清除骨髓ＣＦＵ－Ｌ的最适合温度。但即使加热至４３℃９０ｍｉｎ仍有少量的白血病祖细胞存在，可造成复发，最好与其他方法联合净化骨髓ＣＦＵ－Ｌ，以利自体骨髓移植（ＡＢＭＴ）持久成功。     

局麻剂联合加热体外净化急非淋白血病骨髓3例初步临床应用

<正> 自体骨髓的体外净化是防止急性白血病移植后复发_的关键问题之一。但单用加热,体外净化的功效尚弱。近来实验研究认为局麻剂普鲁卡因联合加热能够显著增强加热对白血病祖细胞的杀灭作用,而对正常粒单祖细胞影响较小。我们对3例急非淋患者骨髓体外净化后进行了移植,获得成功,现报告如下。 1 临床资料 1.1 病例:3例均经本院作形态、组织化学、染色体检查确诊的急性早幼粒细胞白血病,2男、1女;年龄24至45岁;CR1为2例,CR2为1例;至净化移植时已缓解10至25个月。 1.2 方法 1.2.1 骨髓的采集:采髓前1周抽取患者自体血400mL,以供采髓时回输,采出髓液用含肝素及庆大     

白细胞介素-2、γ干扰素净化模拟白血病缓解期骨髓及用PCR检测净化效果

目的:探讨白细胞介素 2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)用于自体骨髓中残留白血病细胞的净化及用聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测净化效果.方法:将IL-2、IFN-γ与模拟慢性粒细胞白血病(CML)缓解期的骨髓在培养体系中分别培养 1～6d,通过RT-PCR方法来检测缓解期骨髓中bcr/abl mRNA消失情况.结果:模拟缓解期CML骨髓经与IL-2、IFN-γ 24h、48h和 72h培养后用RT-PCR方法仍可检测到bcr/abl mRNA,而经 6d培养后则已测不到.若将IL-2、IFN-γ合用,经 24和 48h培养的骨髓可检测到bcr/abl mRNA,但经 72h和 6d培养后便检测不到,而对照组在 1～6d培养后仍可检测到该基因.结论:初步实验结果表明IL-2、IFN-γ对缓解期骨髓中的K562白血病细胞系具有净化作用,若两者合用具有协同作用,RT-PCR可作为评估净化效果较为敏感和较为可靠的检测方法.     

AML骨髓LAK细胞抗肿瘤活性的体外研究

采用体外半固体培养技术,研究了10例急性髓细胞白血病(AML)患者和其中5例缓解期患者经IL-2体外诱导激活的骨髓LAK细胞对K_(562)白血病细胞系集落形成的抑制作用,以及对正常骨髓粒单系造血祖细胞集落(CFu-GM)的效应。结果显示:AML初诊及缓解期骨髓LAK细胞对K_(562)肿瘤细胞均有杀伤活性,缓解期骨髓LAK活性明显高于急性期,而对正常CFu-GM集落产率无明显抑制作用。为临床使用,尤其是ABMT的骨髓净化提供了实验依据。     

粒细胞集落刺激因子作用后骨髓象分析

目的总结粒细胞集落刺激因子（G—CSF）作用后骨髓象变化特征，以减少白血病误诊的发生。方法对42例多种原因导致的粒细胞缺乏症（粒缺）患者G-CSF使用前及使用5～7d进行骨髓象分析，观察其形态变化特征，并对粒系相对值进行统计比较。结果使用G—CSF5～7d后骨髓原始、早幼粒细胞比例明显增高，和使用前比较差异有显著统计学意义（P〈0．01），且形态和相应阶段正常形态变化较大，有其独特改变。结论G-CSF使用后原始、早幼粒细胞比例明显增高，部份病例甚至超过20％，易误诊为白血病；骨髓检验人员要熟悉并掌握G-CSF使用后骨髓象特征及变化规律，以减少白血病误诊的发生。     

鬼臼噻吩甙,高温联用体外诱导白血病细胞HL—60的凋亡及净化

目的 探讨高温联用鬼臼噻吩甙（Ｖｍ－２６）诱导白血病细胞的凋亡及净化。方法 １３例急性白血骨髓、１５例正常骨髓和１０例次ＨＬ－６０细胞株用形态学、ＤＮＡ凝胶电脉、流式细胞仪及半固定体集落培养技术，观察４２℃６０ｍｉｎ高温或联用噻吩甙（Ｖｍ－２６）诱导ＨＬ－６０细胞的凋亡及其体外净化白血病细胞的效果。结果 ＨＬ－６０细胞经４２℃ ６０ｍｉｎ、４２℃６０ｍｉｎ＋８．５μｍｉｎ／Ｌ Ｖｍ－２６处理后４８     

小儿白血病患者化疗后的护理

骨髓抑制期是指机体接受化疗后，白血病细胞被杀灭的同时，也损伤了大量正常造血细胞，使骨髓造血干细胞处于抑制状态，引起外周血全血细胞减少。如果缺乏有效的支持疗法及护理措施，患者可因严重的感染和出血而死亡。小儿白血病患者由于机体免疫系统、各脏器功能尚未发育健全，接受联合化疗后机体的反应与老年白血病患者不同，机体抵抗力降低明显，更容易发生感染，因此，联合化疗后骨髓抑制期的护理是预防小儿白血病患者感染、提高治疗效果的关键，现将2000年6月～2004年2月间在我院住院治疗的65例小儿白血病患者的护理体会报道如下。     

利用复合PCR扩增荧光自动STR分型方法认定犯罪嫌疑人1例报告

目的 探讨高温联用鬼臼噻吩甙(Vm-26)诱导白血病细胞的凋亡及净化。方法 13例急性白血病骨髓、15例正常骨髓和10例次HL-60细胞株用形态学、DNA凝胶电泳、流式细胞仪及半固体集落培养技术,观察42 ℃ 60 min高温或联用鬼臼噻吩甙(Vm-26)诱导HL-60细胞的凋亡其及体外净化白血病细胞的效果。结果 ①HL-60细胞经42 ℃ 60 min、42 ℃ 60 min+8.5 μmin/L Vm-26处理后48 h流式细胞检测的凋亡细胞(sub-G