EH型复合材料的研制和生物力学性能评价

ＥＡＭ树脂与羟磷灰石（ＨＡ）按一定比例调和形成一种新材料－ＥＨ型复合材料．对ＨＡ／ＥＡＭ不同重量比的ＥＨ型复合材料人工骨进行抗压强度和抗弯强度测定。结果表明：１．ＥＨ型复合材料的抗压和抗弯强度随ＨＡ含量的增加而增加。２．ＨＡ／ＥＡＭ为３／２和２／１的两组ＥＨ型复合材料的抗压和抗弯强度十分接近，而ＥＡＭ树脂含量增加，更易塑型。因此，我们把ＨＡ／ＥＡＭ为３／２的ＥＨ型复合材料作为我们实验和临床应用的标准材料。     

17β-雌二醇对人的类成骨细胞HOS TE85胞内游离钙、IP3及钙调蛋白影响

目的观察１７β－雌二醇（Ｅ２）对成骨细胞胞内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）、１,４,５－三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量及钙调蛋白（ＣａＭ）含量的影响。方法以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ为钙荧光指示剂,采用激光共聚焦显微系统测定细胞内钙荧光值的改变,以反映［Ｃａ２＋］ｉ含量的变化。用阳离子交换法测定ＩＰ３含量。以测定钙依赖的磷酸二酯酶活性方法测定ＣａＭ含量。结果给予０．１、１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２后５０ｓ胞内钙荧光值分别增加４．７和６．１倍,持续８０～１６０ｓ;以１００ｎｍｏｌ／Ｌｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ预处理细胞,Ｅ２仅使胞内钙荧光值升高１．５倍。加入１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２,ＩＰ３含量在给药后２０～３０ｓ和６０～７０ｓ呈双峰升高。同样剂量的Ｅ２可使ＣａＭ含量增加８５．２％。他莫西芬不能阻断Ｅ２引起的胞内钙荧光值、ＩＰ３及ＣａＭ含量升高的作用,而磷脂酶Ｃ抑制剂使Ｅ２的作用部分或完全抑制。结论Ｅ２作用于胞膜引起胞外钙内流,并通过ＩＰ３导致［Ｃａ２＋］ｉ进一步增加,激活ＣａＭ从而调节细胞功能。     

3—氨甲基吡啶树脂的合成及五种氨基吡啶树脂对金铂吸附性的比较

研究了反应物配料比３－ＡＭＰ／Ｃｌ（摩尔比）、反应温度与时间对大孔型３－氨甲基吡啶树脂（３—ＡＭＰＲ）性能的影响规律．在最佳合成工艺条件下制得３－ＡＭＰＲ的功能基含量为３．１６ｍｍｏｌ／ｇ树脂．３－ＡＭＰＲ对ＡｕＣｌ６（２－），ＰｔＣｌ６（２－），ＩｒＣｌ６（２－），ＰｄＣｌ４（２－），ＲｈＣｌ６（３－）的吸附容量分别为８００．８，３８７．８，３８６．３，１３３．０，１０５．５ｍｇ金属／ｇ树脂；配位比分别为１．２９，０．６３，０．６４，０．４０，０．３３。比较了３—ＡＭＰＲ、２－ＡＭＰＲ、４－氨基吡啶树脂（４－ＡＰＫ）、３—ＡＰＲ、２－ＡＰＲ五种树脂对ＡｕＣｌ４－、ＰｔＣｌ６（２－）的吸附性，其中３－ＡＭＰＲ为最佳。     

PAI－1糖基化位点突变体的构建及其在哺乳动物细胞中表达

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡＩ－１）是一种Ｍｒ为５０×１０３的单链糖蛋白，有３７９个氨基酸残基，３个Ｎ型糖基化位点。构建ＰＡＩ－１糖基化突变体，以便研究糖链的功能。用寡核苷酸定位突变技术将３个糖基化位点２０９，２６５，３２９位进行突变，把３个糖基化位点都发生了突变的ＰＡＩ－１ｃＤＮＡ组装到真核表达载体ｐＳＶ２中，得到真核表达质粒ｐＺＨ－ｐ１－Ｍ３Ｅ；在二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯｄｈｆｒ－）中进行短暂表达，用发色底物法和夹心ＥＬＩＳＡ方法检测培养液中ＰＡＩ－１的活性和含量。结果：糖基化位点突变的ＰＡＩ－１能在ＣＨＯ细胞中表达，但表达水平及活性较低。非糖基化ＰＡＩ－１的活性和抗原分别为４．３４ＩＵ／ｍｌ和３．１５μｇ／Ｌ结论：用寡核苷酸定位突变方法获得了ＰＡＩ－１糖基化突变体，并且在ＣＨＯ细胞中得到表达。     

骨髓增生异常综合征18例的转归

骨髓增生异常法综合征１８例中，ＲＡ４例，ＣＭＭＬ１例。ＲＡＥＢ１２例，ＲＡＥＢ－Ｔ１例。经用维甲酸、康力龙或丙睾或甲基强的松龙，胎肝悬液输注、输血、中药及小剂量阿糖胞苷、阿克拉霉素或ＨＯＡＰ、ＨＡ方案等基本缓解２例，明显进步３例，无效１３例．６例ＲＡＥＢ演变为急非淋Ｍ２型，演变时间１～７月，死亡，２例ＲＡ死亡。     

EHF病毒在人肾细胞融合中的结构蛋白分子定位分析和人胚？…

用辣根过氧化物酶标记ＭｃＡｂＦ（ａｂ′）２，ＭｃＡｂＬＶ４８Ａ，ＭｃＡｂ３Ｄ３８和ＭｃＡｂＡ３５，分别对２７例ＥＨＦ患者尿液中融合细胞（ＦＣ）进行免疫酶染色，结果ＭｃＡｂＦ（ａｂ′）２检出率为２７／２７（１００％）；ＭｃＡｂＬＶ４８Ａ为１９／２７（７０．３７％），ＭｃＡｂ３Ｄ８为２０／２７（７４．０７％）；ＭｃＡｂＡ３５为２／２７（７．４１％），人胚肾细胞感染ＥＨＦ病毒后，在偏酸性（ｐＨ６．０）条     

子宫肌瘤组织17β-羟类固醇脱氢酶活性的测定

为研究１７β－羟类固醇脱氢酶（１７β－ＨＳＤ）与子宫肌瘤的关系，用３Ｈ－Ｅ２（终浓度０．５ｍｏｌ／Ｌ）作底物，以３Ｈ－Ｅ２氧化为３Ｈ－Ｅ１的量表示１７β－ＨＳＤ的活性，经薄层层析后分别测定３Ｈ－Ｅ２、３Ｈ－Ｅ１的每分记数。结果显示，子宫内膜增殖期肌瘤组织Ｅ２含量低于正常肌层，而分泌期高于子宫肌层，但差别无显著性；分泌期子宫肌瘤Ｅ２转换率最低，提示此时１７β－ＨＳＤ活性最低。３３．３３％（４／１２）肌瘤患者子宫内膜反应不符合正常月经周期表现，４１．６％（５／１２）患者伴卵巢滤泡囊肿，９１．６％（１１／１２）属多发性子宫肌瘤。表明Ｅ２含量与１７β－ＨＳＤ活性改变有关，是子宫肌瘤发生、发展的主要原因之一     

抗戊型肝炎病毒开放读码框架及IgM和IgG抗体的消长规律及临床意义

目的研究戊型肝炎病人抗戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）开放读码框架２（ＯＲＦ２）和３（ＯＲＦ３）及ＩｇＭ和ＩｇＧ抗体的消长规律及其临床意义。方法采用ＨＥＶＯＲＦ２、ＯＲＦ３合成多肽单独和联合酶联免疫法,动态检测５２例病人血清抗ＨＥＶ。结果起病初期ＯＲＦ２抗体和ＯＲＦ３抗体水平均较高,随病程的延长两者均下降,ＯＲＦ３抗体尤为明显。联合检测ＯＲＦ２和ＯＲＦ３抗体可提高试验的敏感性。血清抗ＨＥＶＩｇＭ和抗ＨＥＶＩｇＧ阳性率于起病半个月内分别为７１．１％（３２／４５）和９７．８％（４４／４５）,随病程的延长抗ＨＥＶＩｇＭ较早阴转。结论ＨＥＶ抗体诊断试剂盒至少应含有ＯＲＦ２和ＯＲＦ３两种抗原。抗ＨＥＶＩｇＭ的特异性好而抗ＨＥＶＩｇＧ的灵敏度高。     

EHF病毒在人肾细胞融合中的结构蛋白分子定位分析和人胚肾细胞融合的电镜观察

用辣根过氧化物酶标记ＭｃＡｂＦ（ａｂ＇）_２、ＭｃＡｂＬＶ４８Ａ、ＭｃＡｂ３Ｄ_８和ＭｃＡｂＡ_（３５），分别对２７例ＥＨＦ患者尿液中融合细胞（ＦＣ）进行免疫酶染色。结果ＭｃＡｂＦ（ａｂ＇）_２检出率为２７／２７（１００％）；ＭｃＡｂＬＶ４８Ａ为１９／２７（７０．３７％）；ＭｃＡｂ３Ｄ_８为２０／２７（７４．０７％）；ＭｃＡｂＡ_（３５）为２／２７（７．４１％）。人胚肾细胞感染ＥＨＦ病毒后，在偏酸性（ｐＨ６．０）条件下可以产生特异性细胞融合现象，并经电镜证实了细胞之间膜的融合。此结果表明ＥＨＦ病毒可以导致人肾细胞融合，ＥＨＦ患者尿液中ＦＣ的形成可能与ＥＨＦ病毒膜蛋白在宿主细胞膜上的表达有关。     

食管癌不同染色体位点上等位基因杂合缺失的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，配合限制片段长短多态现象（ＲＦＬＰ）分析，对２２例食管癌病人３号染色体短臂３ｐ１４～２４，１７号染色体短臂１７ｐ１３．１杂合缺失（ＬＯＨ）进行了测定。结果显示：３ｐ２４、３ｐ２１、３ｐ１４和１７ｐ１３．１位点ＬＯＨ检出情况分别为８／１１、２／４、１／９和６／６，其中３ｐ２４和１７ｐ１３．１位点的ＬＯＨ较高，提示这一位点ＬＯＨ的测定有可能成为食管癌早期诊断的分子标志。实验发现，在３ｐ２４ＥＡｐＭＤ位点的ＬＯＨ检测中，哈萨克族杂合缺失为５／５，汉族为２／４，维吾尔族为１／２，这是否与种族遗传有关，有必要扩大病例进一步研究。     

抗HSV—1杂交瘤细胞系的建立及单抗特性研究

以ＨＳＶ－１为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，取其脾细胞在ＰＧＥ介导下与ＳＰ２／０细胞常规融合，ＩＦＡ法筛选鉴定，反复克隆，共获得７株能稳定、持续分泌抗ＨＳＶ的ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为８７￣１０３条之间，Ｉｇ类型分别为ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３，腹水抗体效价在１０＾－５￣１０＾－７之间免疫沉淀。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，２株与１３２Ｋ多肽发生特异性反应，只具有ＨＳＶ－１型特异性，其余３     

黄曲霉毒素B_1单克隆抗体的制备和鉴定

以自己合成的黄曲霉毒素Ｂ＿１一人血清白蛋白（ＡＦＴＢ＿１－ＨＳＡ）偶联物免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠，应用杂交瘤技术，建立了两株能持续分泌抗ＡＦＴＢ＿１单克隆抗体（ＡＦＴＢ＿１ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，命名为ＩＢ５和２Ｆ１，接种ＢＡＬＢ／ｃ鼠腹腔均能诱发产生含特异性抗体的腹水。用间接竞争抑制ＥＬＩＳＡ鉴定ＭｃＡｂ的反应特异性，使ＭｃＡｂ与固相黄曲霉毒素Ｂ＿１一牛血清白蛋白（ＡＦＴＢ＿１－ＢＳＡ）结合产生５０％抑制所需的ＡＦＴＢ＿１、Ｂ＿２、Ｇ＿１、Ｇ＿２浓度依次为：１Ｂ５４．０、３６．９、２３．３、４０３．３ｎｇ／ｍｌ，２Ｆ１２．４、２．６、２．８、４。７ｎｇ／ｍｌ。     

骨髓增生异常综合征18例的转归

骨髓增生异常综合征１８例中，ＲＡ４例，ＣＭＭＬ１例，ＲＡＥＢ１２例，ＲＡＥＢ－Ｔ１例。经用维甲酸、康力龙或丙睾或甲基强的松龙，胎肝悬液输注、输血、中药及小剂量阿糖胞苷、阿克拉霉素或ＨＯＡＰ、ＨＡ方案等基本缓解２例，明显进步３例，无效１３例。６例ＲＡＥＢ演变为急非淋Ｍ２型，演变时间１￣７月，死亡，２例ＲＡ死亡。     

香烟烟雾提取物对气道平滑肌细胞增殖及内皮素释放的影响

探讨气道平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）自分泌的内皮素（ＥＴ）是否介导了吸烟对ＡＳＭＣ的作用。方法在体外培养的家兔ＡＳＭＣ上加入香烟烟雾提取物（ＣＩＳＥ）测定细胞存活率，乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）水平，并用Ｈ－ＴｄＲ掺入法及放射免疫方法观察ＣＳＥ对ＡＳＭＣ的增殖作用，及对ＥＴ－１释放的影响。用３Ｈ－ＴｄＲ掺入实验，观察低浓度（５％）ＣＳＥ对ＡＳＭＣ增殖的影响及与ＥＴ的关系。结果１０％和３０％ＣＳＥ对ＡＳＭＣ呈现明显毒性作用，表现为细胞存活率降低，脂质过氧化终产物丙二醛（ＭＤＡ）含量增加和细胞ＬＤＨ漏出随时间进行性增加。５％ＣＳＥ呈时间依赖地刺激ＡＳＭＣ释放ＥＴ－１并促进ＡＳＭＣ（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入（较对照组增加５９．９％，Ｐ＜０．０１）。内皮素Ａ受体（ＥＴＡ受体）拮抗剂ＪＫＣ－３０１呈浓度依赖地抑制５％ＣＳＥ促ＡＳＭＣ增殖作用。结论吸烟可以刺激ＡＳＭＣ释放ＥＴ－１且通过ＥＴＡ受体介导ＡＳＭＣ增殖     

抗HSV－1杂交瘤细胞系的建立及单抗特性研究

以ＨＳＶ－１为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，取其脾细胞在ＰＧＥ介导下与ＳＰ２／０细胞常规融合，ＩＦＡ法筛选鉴定，反复克隆，共获得７株能稳定、持续分泌抗ＨＳＶ的ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为８７～１０３条之间，Ｉｇ类型分别为ＬｇＧ＿１、ＩｇＧ＿（２ｇ）、ＩｇＧ＿３，腹水抗体效价在１０￣（－５）～１０￣（－７）之间免疫沉淀。ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析，２株与１３２Ｋ多肽发生特异性反应，只具有ＨＳＶ－１型特异性，其余３株与１２０～１２８Ｋ多肽，２株与６０Ｋ多肽发生特异性反应，具有ＨＳＶ型共同抗原特异性。７株ＭｃＡｂ与ＣＭＶ均不发生特异反应。这些杂交瘤细胞系的建立对于ＨＳＶ的临床早期、快速诊断有重要的应用价值。     

兔眼虹膜睫状体促乙酰胆硷分泌的突触前5—HT受体的研究

目的：确定离体灌注状态下,兔眼虹膜睫状体的突触前５－ＨＴ受体对３Ｈ－乙酰胆硷释放的调节作用．方法：给体外灌注培养虹膜睫状体加入３Ｈ－胆硷,电刺激四次（Ｓ１,Ｓ２,Ｓ３,Ｓ４）,刺激强度为３Ｈｚ,５０ｍＡ,１ｍｉｎ．在Ｓ２,Ｓ３,Ｓ４前加入试剂．电刺激诱导的３Ｈ－乙酰胆硷释放的水平通过计算（Ｓｘ／Ｓ１）刺激比率来确定．离子交换色谱法分离灌注液样品中３Ｈ－乙酰胆硷．液内计数仪测定标本中３Ｈ－乙酰胆硷的含量．结果：５－ＨＴ（１ｎｍｏｌ／Ｌ～１０ｍｏｌ／Ｌ）诱导的虹膜睫状体３Ｈ－乙酰胆硷释放的剂量反应曲线呈浓度依赖性（ＥＣ５０＝５８ｎｍｏｌ／Ｌ）．浓度为１ｍｏｌ／Ｌ时,５－ＨＴ诱导的３Ｈ－Ａｃｈ释放量最大,增加了（４５．１４±７．４０）％（ｎ＝６）．给组织灌注５－ＨＴ３拮抗剂Ｔｒｏｐｉｓｅｔｒｏｎ（１ｎｍｏｌ／Ｌ）及５－ＨＴ１拮抗剂Ｍｅｔｈｉｏｔｈｅｐｉｎ（０．１μｍｏｌ／Ｌ）,５－ＨＴ（１μｍｏｌ／Ｌ）诱导的３Ｈ－Ａｃｈ释放分别为对照组的８９．９６％及８８．７８％;而加入非选择性５－ＨＴ拮抗剂Ｍｉ－ａｎｓｅｒｉｎ（１０μｍｏｌ／Ｌ）及５－ＨＴ４拮抗剂ＳＤＺ－２０５５５７（０．１μｍｏｌ／Ｌ）时,５－ＨＴ（１μｍｏ     

肝性脑病大鼠海马CA1区锥体细胞氨基酸激活电流改变

探讨氨基酸受体门控性离子通道电流改变在肝性脑病（ＨＥ）发生中的作用。方法用快速加药装置将５０μｍｏｌ／Ｌγ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）或１ｍｍｏｌ／ＬＮ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）＋１０μｍｏｌ／Ｌ甘氨酸（Ｇｌｙ）加于急性分离的大白鼠海马ＣＡ１区锥体细胞周围，用全细胞膜片钳技术记录ＧＡＢＡ或ＮＭＤＡ激活的电流。结果ＨＥ大鼠海马ＣＡ１区锥体细胞ＧＡＢＡ激活的内向电流的强度为４１３．３±４３６．８ｐＡ（３１例），比对照大鼠（２３３．４±１７９．７ｐＡ，２８例）有较大增强（ｔ＝２．１０４９，Ｐ＜０．０５）。并观察到ＨＥ大鼠ＧＡＢＡ激活电流的出现频率较对照大鼠高。ＨＥ大鼠ＮＭＤＡ激活的内向电流的强度为４０８．５±３１７．２ｐＡ（３７例），比对照大鼠（８８２．６±８９６．５ｐＡ，２６例）弱（ｔ＝２．５８５１，Ｐ＜０．０５）。两组大鼠ＮＭＤＡ激活电流的出现频率无明显差异。结论氨基酸受体门控性离子通道电流改变在肝性脑病发生中起一定作用。     

中国人遗传性脊髓小脑型共济失调患者三核苷酸突变频率的分布

目的评价ＳＣＡ１、ＳＣＡ２、ＭＪＤ／ＳＣＡ３ＣＡＧ三核苷酸扩增突变（ＣＡＧ）ｎ在中国人遗传性脊髓小脑型共济失调（ＳＣＡ）患者的分布频率。方法应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）和变性聚丙烯胺凝胶电泳技术，检测分析了５０名中国人常染色体显性遗传ＳＣＡ家系（其中患者７９例）的ＳＣＡ１、ＳＣＡ２、ＭＪＤ／ＳＣＡ３（ＣＡＧ）ｎ。结果在５０个ＳＣＡ家系中，１个ＳＣＡ家系有ＳＣＡ１（ＣＡＧ）ｎ突变，３个ＳＣＡ家系有ＳＣＡ２（ＣＡＧ）ｎ突变，２４个ＳＣＡ家系有ＭＪＤ／ＳＣＡ３（ＣＡＧ）ｎ突变，阳性率分别为２．０％、６．０％、４８．０％。２例ＳＣＡ１患者ＣＡＧ三核苷酸重复数为５３和６２次，而正常人为１２～３６次。７例ＳＣＡ２患者ＣＡＧ三核苷酸重复数４３～４７次，而正常人为２２～３０次。４２例ＭＪＤ／ＳＣＡ３患者ＣＡＧ三核苷酸重复数６３～７８次，而正常人为１５～３８次。另有２２个ＳＣＡ家系２８例患者，ＳＣＡ１、ＳＣＡ２、ＭＪＤ／ＳＣＡ３（ＣＡＧ）ｎ突变检测在正常范围内。结论中国ＳＣＡ主要为ＭＪＤ／ＳＣＡ３型，属于非葡萄牙型ＭＪＤ；而ＳＣＡ１型、ＳＣＡ２型少见。     

戊型肝炎病毒抗体检测及临床分析

采用ＥＬＩＳＡ法对２５５例肝炎病人分别检测抗－ＨＥＶ－ＩｇＭ、抗－ＨＡＶ－ＩｇＭ、抗－ＨＣＶ及ＨＢＶ－Ｍ。结果显示：５５例中抗ＨＥＶ－ＩｇＭ阳性乾６６例（２６．９＾），为检测例数中的第３位，男女比例为２：１，临表现类似甲型肝炎。一     

93例重型肝炎病毒标志物及临床分析

目的：研究重型 肝炎与病原学、临床类型和预后之间的关系；方法：采用酶联免疫吸附试验检测ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＤＶ和ＨＥＶ的血清学标志物；结果：①病原学：ＨＡＶ２例（２．２％）、ＨＢＶ８３例（８９．２％）、ＨＣＶ／ＨＢＶ／ＨＥＶ和ＨＤＶ／ＨＢＶ各１例（１．１％）、ＨＥＶ和ＨＥＶ／ＨＢＶ各３例（３．２％）；②临床类型：亚急性３７例（３９．８％）、慢性５６例（６０．２％）；③预后：治愈２３例（２４．