中药复方糖耐康对KKAy 小鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的：探讨中药复方糖耐康对KKAy小鼠肾小管上皮细胞转分化的影响及其可能机制。方法：12周龄雄性KKAy小鼠50只,按血糖随机分为模型组、缬沙坦组、糖耐康高、中、低剂量组,每组10只,另设10只C57BL/6J小鼠为正常组,正常组和模型组给予0.9%氯化钠溶液,其余组给予对应浓度的药液灌胃,用药8周后处死,取肾脏组织,进行Mosson、PAS染色,免疫组化染色观察平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达分布;Western Blot检测转化生长因子-β1（TGF-β1）表达。结果：与正常组相比较,模型组小鼠肾纤维化面积显著增大（P<0.01）,α-SMA 蛋白表达呈现较强阳性,E-cadherin 蛋白表达弱阳性。与模型组比较,缬沙坦组、糖耐康各剂量组肾纤维化面积显著减小（P<0.01）,α-SMA 蛋白表达显著减少（P<0.01）,而E-cadherin 蛋白表达明显增加（P<0.05）。KKAy小鼠肾脏组织TGF-β1蛋白表达较正常小鼠显著升高（P<0.01）;与模型组比较,缬沙坦组、糖耐康低、中和高剂量组TGF-β1蛋白表达含量都显著降低（P<0.01）,其中糖耐康高剂量组与缬沙坦组相比较TGF-β1显著降低。结论：中药复方糖耐康可抑制肾小管上皮细胞EMT的发生,减轻肾小管间质纤维化而发挥肾脏保护作用。     

糖耐康对自发性2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素信号转导的影响

目的:观察糖耐康对自发性2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素抵抗及胰岛素信号转导途径中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3-K)、葡萄糖转运子4(GluT4)mRNA表达的影响。方法:将SPF级KKAy小鼠40只按血糖值随机分为模型组、糖耐康高剂量组、糖耐康低剂量组、吡咯列酮组,并选C57bl/6J小鼠为正常对照组,连续灌喂给药60 d。60 d后测定空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(Fins)并计算胰岛素敏感指数(ISI)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),游离脂肪酸(FFA)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α),并对胰岛进行病理学检查。用实时定量RT-PCR法测定小鼠骨骼肌和脂肪组织中PI3-K及GluT4的mRNA的表达。结果:糖耐康高剂量组的FPG、TNF-α水平较模型组显著降低(P<0.05),高,低剂量组PI3-K及GluT4mRNA表达较模型组明显升高(P<0.05或P<0.01),且糖耐康在一定程度上能够保护胰岛β细胞,延缓β细胞衰竭,对血脂及FFA有降低趋势。结论:通过提高胰岛素信号转导受体后途径中PI3-K的表达,从而改善GluT4的转位是糖耐康改善胰岛素抵抗状态的可能作用机制之一。     

中药复方糖耐康对KKAy糖尿病小鼠低度炎症信号通路的影响

目的:观察中药复方糖耐康对KKAy小鼠血糖、体重及低度炎症通路中关键因子的影响。方法:选取自发性2型糖尿病动物模型KKAy小鼠65只及 C57BL/6J 小鼠13只屏障系统饲养,给予高脂饲料喂养,连续给药8周后,评价静脉空腹血糖(禁食8 h以上)及体重变化,采用半定量酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)的水平。蛋白免疫印迹法检测肌肉组织核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达水平。结果:中药糖耐康给药组中,尤其高剂量组,能够显著降低模型组血糖水平(P<0.05),具有一定控制体重增长趋势的作用; 可下调炎性因子TNF-α、IL-1β及MCP-1的水平(P<0.05),下调肌肉组织中NF-κB蛋白的表达水平(P<0.05)。结论:糖耐康可能通过抑制炎症信号通路中关键炎性因子的表达水平,抑制机体低度炎症反应,从而起到改善胰岛素抵抗及抗糖尿病的作用。     

糖耐康对糖尿病KKAy小鼠IL-6及TNF-α的影响

目的 观察中药糖耐康对2型糖尿病KKAy小鼠血清及脂肪组织IL-6和TNF-α的影响.方法 以发病周龄的KKAy小鼠为研究对象,加高脂饲料制备2型糖尿病模型,经灌胃精耐康8周后,血糖仪试纸法测空腹血糖(FBG),ELISA法测血清及脂肪组织IL-6和TNF-α的含量.结果 糖耐康能很好地降低血清及脂肪的IL-6和TNF-α水平(P均＜0.05),高低剂量疗效相近.结论 糖耐康可降低KKAy小鼠血清和脂肪细胞的IL-6和TNF-α水平;有助于降低血糖水平.     

中药复方糖耐康对糖尿病GK大鼠尿蛋白影响的实验研究

目的 观察中药糖耐康对自发性糖尿病大鼠尿蛋白的影响.方法 将50只GK大鼠随机分为模犁对照组、吡格列酮组、中药糖耐康低、中、高剂量组,另设正常对照组wistar大鼠10只.各治疗组大鼠干预8周后,检测肾莺/体重、尿蛋白等指标,同时光镜下观察肾小球病理变化.结果 糖尿病模型组各项实验室指标与正常对照组比较均有显著差异.而吡格列酮组和精耐康各剂量组经过8周干预后各项指标有所改善.治疗组肾小球内细胞外基质蓄积、基底膜的增厚及肾小球系膜细胞增牛指标均明显改善.结论 中药糖耐康能降低血糖,控制尿蛋白的排泄,并通过抑制大鼠糖尿病肾小球系膜细胞增生、基底膜基质合成以及肾小球内细胞外基质蓄积,从而改善肾小球的高滤过和高灌注,对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用.     

中药复方糖耐康干预KKAy小鼠胰岛素信号转导受体后通路作用机制研究

目的观察中药复方糖耐康对自发性2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素信号转导受体后通路的影响。方法将KKAy小鼠40只采用随机数字表法分为模型组、糖耐康高剂量组、糖耐康低剂量组、吡格列酮组各10只,另取10只C57bl/6J小鼠作为正常对照组。各药物组灌胃相应剂量药物,正常对照组及模型组灌胃无菌水,连续给药60天。给药期间每周测量小鼠随机血糖、饮水量及体重变化,60天后测定小鼠空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FIns),计算胰岛素敏感指数(ISI),Western blot法测定小鼠骨骼肌和脂肪组织中蛋白激酶B(PKB/Akt1αSer 473)磷酸化、糖元合成激酶3β(GSK-3β)蛋白的表达。结果随给药时间的延长,糖耐康对多饮症状的改善逐渐明显,对体重无明显影响。糖耐康高剂量组FPG、FIns、ISI水平均较模型组显著降低(P0.05),PKB/Akt1αSer 473蛋白磷酸化水平较模型组明显升高(P0.05),GSK-3β蛋白表达较模型组明显下降(P0.05)。结论调节胰岛素信号转导受体后途径中PKB/Akt1αSer 473磷酸化、GSK-3β蛋白表达,可能是中药复方糖耐康改善胰岛素抵抗状态的作用机制之一。     

中药复方益糖康对2型糖尿病模型大鼠脂代谢及氧化应激水平的影响

目的:复制2型糖尿病大鼠模型,探讨“益糖康”对2型糖尿病模型大鼠脂代谢的干预作用及体内氧化应激的影响。方法:60只大鼠购回后在室温为(20±2)℃,相对湿度在40%~60%的条件下适应性喂养1周。之后进行分组,正常组大鼠予普通饲料,其他大鼠给予高脂饲料,自由饮食饮水喂养4周。大鼠经高脂饲料饲养4周后,腹腔注射45mg/kg链脲佐菌素(STZ)复制2型糖尿病模型,以高、中、低三个剂量“益糖康”予以治疗,每周测量大鼠空腹血糖,治疗4周后测定各组大鼠的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDLC)、高密度脂蛋白(HDLC)、脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)及丙二醛(MDA)水平。结果:治疗4周后,高、中、低剂量益糖康组的大鼠血糖水平已经明显下降(P<0.01),接近空白组血糖水平。高、中、低剂量益糖康组大鼠的TG、LDL水平与模型组比较均有所降低(P<0.01或P<0.05),TC有降低趋势,但差异无统计学意义;高剂量组和中剂量组大鼠的HDL水平升高,与模型组比较(P<0.01)。与模型组相比,高剂量组的MDA、ATGL均有降低趋势(P<0.05或P<0.01)。各组均具有统计学意义。结论:“益糖康”可以显著调节2型糖尿病大鼠血糖水平和脂质紊乱,对糖尿病起到一定改善作用,对脂质代谢和氧化应激有一定改善作用,其作用机制可能与改善脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)、丙二醛(MDA)水平有关,具体机制有待进一步探讨。     

益气养阴散结中药方对KKAy糖尿病小鼠糖脂代谢的影响

目的:观察KKAy糖尿病小鼠的血糖、血脂变化,探讨益气养阴散结中药方对其糖脂代谢的影响。方法:选取雄性12周龄KKAy小鼠,将其随机分为模型组及中药组,同周龄雄性C57BL/6J小鼠为正常组。分别给药,中药组灌服益气养阴散结中药复方,模型组及正常组灌服等量蒸馏水,定期检测小鼠体重、血糖值,并分别于实验的第4、8、12周处死各组小鼠,检测三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)等血脂指标。结果:KKAy小鼠的血糖、血脂水平在初期呈不断上升趋势,随着周龄的增长,血糖血脂有所下降,但仍显著高于正常组,益气养阴散结中药复方干预的小鼠血糖血脂水平有所回落。结论:KKAy小鼠存在明显的血脂异常,益气养阴散结中药复方可有效改善血脂异常情况,延缓糖尿病并发症的发生发展。     

中药复方糖耐康对GK大鼠主动脉VEGF基因表达的影响

目的通过对自发性2型糖尿病GK大鼠的干预治疗,观察并探讨中药复方糖耐康对糖尿病大血管病变的保护作用。方法将51只GK大鼠随机分为模型组、盐酸吡格列酮组与中药糖耐康低、中、高剂量组5组;另设10只Wister大鼠为正常组。灌胃8周后,观察大鼠空腹血糖、血脂以及胸主动脉血管内皮生长因子（VEGF）基因表达的变化。结果与模型组比较,盐酸毗格列酮组和糖耐康低、中、高剂量组空腹血糖、甘油三酯均显著降低（P〈0．05）,盐酸吡格列酮组和糖耐康高剂量组低密度脂蛋白均显著降低（P〈0．05）。高倍镜下模型组GK大鼠动脉壁出现局限性内膜增厚,内弹力板呈波浪状或交织状排列,中膜浅层平滑肌增生、排列紊乱;糖耐康低、中剂量组动脉壁内膜轻度增厚,中膜浅层平滑肌轻度增生;盐酸吡格列酮组和糖耐康高剂量组动脉壁未见明显病理变化。各治疗组胸主动脉VEGF基因表达与模型组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论中药复方糖耐康能下调GK大鼠胸主动脉VEGF基因表达,可能是糖耐康治疗糖尿病大粗管病变的机制之一。     

中药复方糖耐康对GK大鼠主动脉VEGF 基因表达的影响

目的通过对自发性2型糖尿病GK大鼠的干预治疗,观察并探讨中药复方糖耐康对糖尿病大血管病变的保护作用。方法将51只GK大鼠随机分为模型组、盐酸吡格列酮组与中药糖耐康低、中、高剂量组5组;另设10只Wister大鼠为正常组。灌胃8周后,观察大鼠空腹血糖、血脂以及胸主动脉血管内皮生长因子（VEGF）基因表达的变化。结果与模型组比较,盐酸毗格列酮组和糖耐康低、中、高剂量组空腹血糖、甘油三酯均显著降低（P〈0．05）,盐酸吡格列酮组和糖耐康高剂量组低密度脂蛋白均显著降低（P〈0．05）。高倍镜下模型组GK大鼠动脉壁出现局限性内膜增厚,内弹力板呈波浪状或交织状排列,中膜浅层平滑肌增生、排列紊乱;糖耐康低、中剂量组动脉壁内膜轻度增厚,中膜浅层平滑肌轻度增生;盐酸吡格列酮组和糖耐康高剂量组动脉壁未见明显病理变化。各治疗组胸主动脉VEGF基因表达与模型组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论中药复方糖耐康能下调GK大鼠胸主动脉VEGF基因表达,可能是糖耐康治疗糖尿病大粗管病变的机制之一。     

开郁清热方对自发肥胖型2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响

目的:探讨开郁清热方对自发肥胖型2型糖尿病(T2DM)大鼠糖脂代谢的作用及机制。方法:自发T2DM大鼠OLETF为研究对象,其同品系非糖尿病大鼠LETO为正常对照,给药12周,检测其糖脂代谢,并以正糖钳夹试验评价其胰岛素抵抗水平。结果:开郁清热中药可降低OLETF大鼠口服糖耐量血糖曲线下面积,改善正糖钳夹实验葡萄糖输注率,下调胆固醇、甘油三酯、游离脂肪酸水平。结论:开郁清热中药能有效调节自发T2DM大鼠糖脂代谢水平。     

The effects of hypoglycemia and weight loss of total lignans from Fructus Arctii in KKAy mice and its mechanisms of the activity

Fructus Arctii (great burdock achene) is the dried ripe fruit of Arctium lappa L. (family Asteraceae) and is included in the Chinese pharmacopoeia. It has been reported that the clinical use of Fructus Arctii resulted in a satisfactory hypoglycemic effect in diabetic patients. This study aimed to investigate antidiabetic activity and mechanism of total lignans from Fructus Arctii (TLFA) in KKAy mice, a spontaneous Type 2 diabetic rodent model that exhibits marked obesity. In this study, KKAy mice were gavaged once daily with solvents (0.5% sodium carboxymethyl cellulose), TLFA (250 and 125 mg/kg), or metformin (200 mg/kg) for 11 weeks, and C57BL/6J mice treated with saline solution (0.9%, w/v) were used as normal control. The results indicate that TLFA has dual effects of hypoglycemia and weight loss, and administration of TLFA in KKAy mice could decrease fasting blood glucose, glycated hemoglobin, and body weight; improve oral glucose tolerance; increase high density lipoprotein cholesterol; and decrease triglycerides and free fatty acid in mice serum. Its efficacy may associate with multiple mechanisms of action such as stimulation of insulin secretion, activation of phosphatidylinositol 3‐kinase/protein kinase B, and adenosine‐monophosphate‐activated protein kinase signaling pathway, decreasing leptin.     

匙羹藤对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗及脂肪细胞因子的影响

目的 观察匙羹藤(gymnema Sylvestre,GS)对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及血清脂肪细胞因子的影响.方法 采用高脂饲料喂养加腹腔注射小剂量STZ的方法制备2型糖尿病动物模型,按随机数字表法分为模型组、GS高剂量组、GS低剂量组、吡格列酮组.灌胃治疗4周后检测,空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(INS)、甘油三酯...     

镰形棘豆总黄酮对2型糖尿病KKAy小鼠血糖和胰岛素抵抗的作用

目的:以糖尿病KKAy小鼠为研究对象,观察镰形棘豆总黄酮对2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素抵抗的作用。方法:将40只雄性SPF级KKAy小鼠随机分为5组,分别为模型组、镰形棘豆总黄酮低、中、高剂量组、阳性药组,每组8只;另选8只C57BL/6J小鼠为正常组。正常组和模型组ig生理盐水,镰形棘豆总黄酮低、中、高剂量组,分别按100,200,400 mg·kg-1·d-1剂量ig,阳性药组ig吡咯列酮10 mg·kg-1·d-1。连续4周。每周监测小鼠体重、空腹血糖和餐后血糖。4周后,眼眶静脉取血,离心取血清;取胰腺组织。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测小鼠空腹胰岛素水平,并计算胰岛素分泌指数(ISI),胰腺组织苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察胰岛结构变化。结果:与正常组比较,模型组KKAy小鼠空腹血糖明显升高,餐后2 h血糖明显升高,胰岛素水平明显升高,胰岛素敏感指数明显降低(P0.05),模型组KKAy小鼠胰腺组织病变较为明显;镰形棘豆总黄酮对降低糖尿病小鼠体重作用不明显,与模型组比较,在ig 7,28 d时,空腹血糖明显降低,在ig 14 d后,餐后2 h血糖明显降低(P0.05),在治疗28 d后,与模型组比较,镰形棘豆总黄酮高剂量具有促进胰岛素分泌的作用;中剂量组具有增强胰岛素敏感性的作用(P0.05),HE染色显示各药物组具有保护胰岛β细胞、延缓胰岛衰竭的作用。结论:镰形棘豆总黄酮在一定程度上具有降低2型糖尿病小鼠血糖,促进胰岛素分泌,改善胰岛素抵抗的作用。     

昆仑雪菊水提物对KKAy小鼠血清脂联素、抵抗素、血脂的影响

目的:探讨昆仑雪菊水提物对KKAy小鼠血清脂联素、抵抗素、血脂的影响。方法:将SPF级7~8周龄雄性自发性2型糖尿病KKAy小鼠50只按体质量随机分为模型组(MC组)、昆仑雪菊低剂量组(KD组)、中剂量组(KZ组)、高剂量组(KG组)、吡格列酮组(B组),正常对照组(NC组)选与KKAy小鼠同源的C57BL/6J小鼠10只(NC组)。模型组和正常组给予0.9%氯化钠溶液,其余组给予对应浓度的药液灌胃。35天后取材测血清脂联素、抵抗素、血脂水平。结果:与模型组比较,昆仑雪菊低剂量组脂联素水平明显升高,差异有统计学意义(P0.05);昆仑雪菊不同剂量组虽比模型组抵抗素水平降低,但差异无统计学意义(P0.05);昆仑雪菊低剂量组高密度脂蛋白(HDL-C)水平提高,差异有统计学意义(P0.05),而总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平无明显降低,差异无统计学意义(P0.05)。结论:昆仑雪菊水提物可能通过提升KKAy小鼠血清脂联素与HDL-C水平而发挥其改善胰岛素抵抗及脂代谢紊乱起作用。     

基于nano-LC-LTQ/Orbitrap-MS筛选黄芩-黄连药对干预2型糖尿病KKAy小鼠的骨骼肌差异表达蛋白

目的:采用nano-LC-LTQ/Orbitrap-MS鉴定2型糖尿病KKAy小鼠模型组与给药组的骨骼肌差异表达蛋白,推测黄芩-黄连药对(SC)防治2型糖尿病的作用机制。方法:取20只8~10周龄的雄性KKAy小鼠,给予全价高脂饲料,随机等分为2组,分别为黄芩-黄连药对组(27 g·kg~(-1))和模型组(灌胃等量水)。2组均连续灌胃8周,于最后1次给药后1 h处死小鼠,取骨骼肌在液氮中进行研磨,加裂解液及蛋白酶抑制剂提取蛋白,测定蛋白浓度,再进行蛋白变性、还原、烷基化、酶解及脱盐,利用nano-LC-LTQ/Orbitrap-MS检测,利用Xcalibur 2.2软件和Proteome Discoverer 1.4.0.288进行数据处理,采用Sieve v2.1(×64)进行无标样定量分析寻找相关差异蛋白,筛选并鉴定差异表达蛋白,并对差异表达蛋白进行生物信息学分析。结果:黄芩-黄连药对组与模型组共鉴定出107个差异表达蛋白质,经生物学分析筛选出与糖尿病相关的差异蛋白共5个,其中上调4个(5'-磷酸腺苷激活的蛋白激酶、脂联素等),下调1个(脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白4)。分析显示差异蛋白质主要涉及炎症反应、信号通路调节等生物过程。结论:通过有效的比较与分析,得到了一些参与胰岛素信号转导等通路的差异表达蛋白质,为研究黄芩-黄连药对防治胰岛素抵抗的分子机制提供了新靶点。     

益消方对自发性糖尿病模型KKAy小鼠认知功能影响的Morris水迷宫观察

目的：探讨益消方对糖尿病KKAy小鼠学习记忆行为的影响。方法：24只雄性KKAy小鼠随机分为模型组及中药组,12只雄性C57BL/6J小鼠为正常组。中药组予以中药复方益消方灌服,模型组及正常组予灌服等量蒸馏水,在灌胃4周和8周后分别进行Morris水迷宫观察。采用Morris水迷宫图像自动采集和软件分析系统记录逃避潜伏期、游泳轨迹、圆台穿越次数、初始角度等。结果：定位航行试验中,与正常组比较,灌胃4周、8周后模型组逃避潜伏期均明显延长,差异有统计学意义（P<0.05）;灌胃8周后,中药组逃避潜伏期在训练第4、5天时与模型组比较明显缩短,差异有统计学意义（P<0.05）。空间探索试验中,灌胃8周后模型组目标象限游泳时间占总时间百分比、圆台穿越次数较4周后有所减少,且与正常组及中药组差距增加,初始角度与正常组比较明显增加,差异有统计学意义（P<0.05）。结果显示益消方缩短糖尿病动物模型小鼠逃避潜伏期,增加原圆台穿越次数及目标象限游泳时间。结论：益消方具有一定延缓糖尿病小鼠认知功能障碍发生进程的功效,改善其学习记忆行为。