姜辛夏颗粒对哮喘大鼠气道重建中胶原蛋白及支气管壁厚度的影响

目的研究姜辛夏颗粒对卵蛋白(OVA)致敏哮喘大鼠模型肺组织中Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型胶原蛋白表达及对支气管壁厚度的影响。方法采用OVA致敏建立哮喘大鼠模型,观察姜辛夏颗粒对哮喘大鼠的疗效;免疫组化技术检测肺组织中Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型胶原蛋白的表达;支气管组织HE染色,计算机图像分析测定气道壁厚度。结果与模型组比较,姜辛夏颗粒能明显减轻哮喘大鼠的哮喘症状和支气管黏膜的炎症反应;明显缩小哮喘大鼠支气管总管壁面积(WAt)、内壁面积(WAi)及平滑肌面积(WAm)(P<0.01);明显降低肺组织中I、Ⅲ、V型胶原蛋白的表达(P<0.01,P<0.05)。结论姜辛夏颗粒可明显降低哮喘大鼠支气管上皮下Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型胶原蛋白的合成和沉积,减小支气管壁的厚度,改善支气管的通气功能,从而抑制哮喘气道重建的发生发展。     

TGF-β1、MMP-9在哮喘大鼠气道重建模型中的表达及丹参的干预作用

目的:观察TGF-β1、MMP-9在哮喘大鼠气道重建模型中的动态变化,探讨丹参干预气道重建的作用机制。方法:SPF级SD成年雄性大鼠70只随机分为正常对照组、哮喘模型组(哮喘2周组、哮喘4周组、哮喘8周组)、丹参干预组(丹参2周组、丹参4周组、丹参8周组)3个大组,7个小组。用卵蛋白(OVA)-氢氧化铝混悬液致敏与激发建立大鼠哮喘气道重塑模型,激发2、4、8周后处死。观察哮喘大鼠肺组织病理变化,采用ELISA法检测大鼠肺组织TGF-β1、MMP-9水平。结果:哮喘大鼠气道炎性细胞浸润及支气管平滑肌增厚,随着激发时间的延长逐渐加重;同时,哮喘大鼠肺组织TGF-β1、MMP-9水平逐渐升高,哮喘4周组、哮喘8周组较正常对照组显著升高(P0.05、P0.001);使用丹参干预后,丹参8周组较哮喘8周组显著降低(P0.001)。结论:气道重建的程度随着哮喘发作及时间推移而发生动态变化;TGF-β1、MMP-9参与哮喘气道重建过程;活血化瘀药丹参可通过抑制TGF-β1、MMP-9水平而干预阻断哮喘气道重建。     

平喘颗粒对哮喘大鼠气道重塑及TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的 观察平喘颗粒对哮喘大鼠气道重塑及TGF-β1/Smads信号通路的影响.方法 40只Wistar大鼠,随机分为对照组、哮喘组(OVA)、平喘颗粒组(OVA+平喘颗粒)、地塞米松组(OVA+地塞米松),每组10只.应用OVA致敏液[10 mg OVA+100 mg Al(OH)3]制备慢性哮喘大鼠模型.采用Mass...     

射干麻黄汤对慢性哮喘小鼠气道重塑和TGF-β_1的影响

目的:探讨射干麻黄汤对慢性哮喘小鼠气道重塑和转化生长因子-β_1(TGF-β_1)的影响。方法:健康清洁级BALB/c小鼠40只,每组10只,随机分为A组:正常对照组;B组:哮喘模型组;C组:地塞米松组;D组:射干麻黄汤组。建立慢性哮喘小鼠模型后,分别予以不同干预,取材后采用HE染色、病理图像分析、ABC-ELISA法、免疫组化、实时定量PCR技术等方法检测气道重塑及TGF-β_1的变化情况。结果:与A组比较,B、C、D组小鼠血管管壁厚度、气管平滑肌层厚度、气道旁和血管旁胶原纤维含量、BALF中TGF-β_1含量、肺组织TGF-β_1及TGF-β_1mRNA表达强度均明显增加,具有显著性差异(P0.05);与B组比较,C组、D组上述指标均明显降低,具有显著性差异(P0.05);C组与D组比较无显著性差异。结论:射干麻黄汤可抑制BALB/c哮喘小鼠气道重塑的发生,其机制有可能是通过降低TGF-β_1的表达而实现的。     

止喘胶囊对哮喘大鼠气道TGF-β1信号转导的干预作用

探讨止喘胶囊对哮喘大鼠气道TGF-β1信号转导的干预作用。通过长期反复给予致敏大鼠吸入不同浓度的卵蛋白,建立大鼠慢性哮喘模型。40只大鼠随机分为5组：正常对照组、模型组、中药组、西药组和中西结合组。原位杂交技术检测Smad．2mRNA、Smad．7mRNA表达水平。结果：各治疗组均可下调Smad-2mRNA的表达,与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）,其中尤以中西医结合组疗效最佳,中药组与西药组效果相当（P〉0．05）。中药组可显著上调Smad-7mRNA表达水平,与模型组比较差异显著（P〈0．05）;而西药组与模型组比较,无显著性差异（P〉0．05）。结论：止喘胶囊能通过下调Smad-2mRNA,上调Smad-7mRNA的表达,阻断TCF-β1的信号转导,从而阻断哮喘气道重塑的发展。     

姜辛夏冲剂对哮喘大鼠气道炎症的影响

目的:探讨姜辛夏冲剂对哮喘大鼠模型气道炎症的影响。方法:复制卵蛋白致敏哮喘模型。实验动物分正常对照组、哮喘模型组、姜辛夏冲剂大小剂量组、桂龙组、必可酮组,共6组。第一次诱喘后开始给药,共治疗14天。观察实验过程中各组大鼠的一般情况;计数大鼠BALF中炎性细胞的数量及所占百分比。结果:各治疗组大鼠的一般情况明显优于模型组;模型组大鼠BALF中有大量炎性细胞浸润,以嗜酸性粒细胞为主,而姜辛夏冲剂治疗组的炎性细胞数显著降低(P<0.05或0.01)。结论:姜辛夏冲剂能够抑制炎性细胞的浸润,具有减轻哮喘气道炎症的作用。     

姜辛夏颗粒对支气管哮喘大鼠肺组织基质金属蛋白酶及其抑制剂含量的影响

目的 观察姜辛夏颗粒对哮喘大鼠肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制剂-1(TIMP-1)含量的影响,探讨该方对哮喘气道重建的机制.方法将52只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、姜辛夏颗粒组.通过皮下和腹腔注射0.2 mL抗原液及反复雾化吸入卵蛋白溶液建立哮喘气道重建动物模型.在哮喘激发2周后行肺组织HE染色观察并检测肺组织MMP-9、TIMP-1含量的变化.结果 大鼠肺组织HE染色显示:模型组肺内支气管黏膜下可见大量炎细胞浸润,气道壁明显增厚,管壁周围及小血管周围有炎细胞浸润,上皮脱落,黏膜上皮增生活跃,管腔狭窄,基底膜及气道平滑肌层增厚明显,有部分肺泡壁变薄或断裂,融合成肺大泡;地塞米松组、姜辛夏颗粒组接近正常组,仅有轻度的炎症反应,与模型组相比,支气管及肺泡炎性浸润不明显,黏膜结构完整,肺泡间隔仅有部分断裂.模型组MMP-9和TIMP-1表达量明显增加,与正常组及地塞米松组和姜辛夏颗粒组比较差异有统计学意义(P＜0.01);地塞米松组和姜辛夏颗粒组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 姜辛夏颗粒可明显改善哮喘大鼠的一般状况,改善肺组织病理变化,并能调节MMP-9和TIMP-1的表达,减轻气道炎症及气道重建的发生和发展,降低气道高反应性,从而发挥治疗哮喘的作用.     

姜辛夏方对哮喘大鼠气道重建中HIF-1α及VEGF表达的影响

目的:研究姜辛夏方对OVA(卵蛋白)致敏哮喘大鼠模型肺泡灌洗液中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:60只雄性SD大鼠分为正常对照组、哮喘模型组、姜辛夏方高、中、低剂量干预组(23,17.5,11.5 g·kg-1·d-1),甲泼尼龙干预组(0.76 mg·kg-1·d-1)。除正常对照组用生理盐水注射及气道雾化外,其余各组动物均以新鲜配制的卵蛋白抗原液做皮下、腹腔联合注射及气道雾化,建立大鼠哮喘模型。注射每天1次,连续5 d,实验第8天,各组于引喘前30 min灌胃给药干预,正常对照组、模型组用生理盐水,其余各干预组给予相应的药物灌胃进行干预。每隔1天用药引喘1次,连续30 d,观察整个实验过程中各组大鼠的一般情况,实验第39天采集标本,酶联免疫吸附法检测HIF-1α,VEGF的表达,并进行统计学分析。说明姜辛夏方对哮喘大鼠的疗效。结果:经过用抗原液引喘后,模型组大鼠烦躁不安、打喷嚏、抓鼻、喘息、倚笼而立、腹肌抽搐、大小便失禁,毛色暗淡,用药干预组与模型组比较症状明显减轻,正常组大鼠的表现未见明显异常。与正常组比较模型组肺泡灌洗液中HIF-1α、VEGF含量明显升高有显著差异(P<0.01),与模型组比较,姜辛夏方能明显减轻哮喘大鼠症状;明显降低肺泡灌洗液中HIF-1α及VEGF的含量(P<0.01),且姜辛夏方大剂量组的效果优于其他剂量组(P<0.05)。结论:姜辛夏方能抑制哮喘大鼠肺组织中HIF-1α及VEGF的生成,改善气道平滑肌与基底膜的增厚,从而抑制哮喘气道重建的发生发展。     

麻杏二三汤对哮喘大鼠肺组织TGF-β1和ET-1表达的影响

目的：探讨麻杏二三汤对哮喘大鼠气肺组织 TGF-β1和 ET-1表达影响。方法：40只 SD 大鼠随机分为空白组、模型组、麻杏二三汤组、地塞米松组,各组共10只。除空白组,采用鸡卵清蛋白（Ovalbumin,OVA）＋氢氧化铝干粉联合致敏法造模2周,之后激发哮喘发作、分组给药,激发20 d 后处死大鼠,观察体重、肺系数、病理组织学变化和采用酶联免疫吸附试验（ELIEA）法检测肺组织 TGF-β1和 ET-1含量。结果：1）与空白组比,模型组大鼠体重较小、肺系数增大、支气管管壁和支气管平滑肌厚度增高以及肺组织 TGF-β1、ET-1表达升高（P ＜0.05）。2）与模型组比,两个药物干预组均可见肺系数、支气管壁和平滑肌厚度以及肺组织 TGF-β1、ET-1含量显著降低;麻杏二三汤组在降低支气管管壁和支气管平滑肌厚度上效果更佳（P ＜0.05）。结论：气道重塑构建中 TGF-β1、ET-1表达与其成正相关;麻杏二三汤可以延缓气道重塑进而治疗哮喘,其机制可能与下调 TGF-β1、ET-1含量有关。     

与TGF-β_1相关的干预哮喘气道重塑的方法研究进展

转化生长因子TGF-β(主要是TGF-β1)是引起哮喘气道重塑的重要细胞因子,针对TGF-β1研究干预哮喘气道重塑的方法可能取得新的突破.糖皮质激素、干扰素-r、一些中医药如川芎嗪、雷公藤、银杏叶等可能通过干预TGF-β1的表达来干预气道重塑.     

TGF-β1在哮喘大鼠模型中动态变化及柴朴汤的干预研究

目的：通过观察TGF-β1在哮喘大鼠模型中动态变化,并用柴朴汤进行干预,探讨柴朴汤在哮喘大鼠中的治疗作用,为哮喘的预防及治疗提供进一步的思路。方法：以卵清白蛋白致敏及反复激发复制哮喘大鼠模型,常规切片观察气道内管壁厚度及气道平滑肌厚度;用RT-PCR检测TGF-β1mRNA的表达;用免疫组化法检测TGF-β1蛋白的表达。结果：大鼠哮喘激发后2周出现气道平滑肌增厚,并且随着激发时间的延长,气道平滑肌逐渐增厚。同时,哮喘大鼠支气管肺组织中TGF-β1mRNA及TGF-β1蛋白表达随着激发时间的延长而逐渐升高,呈现出一定的动态变化。用柴朴汤干预后,TGF-β1的表达下调。结论：在哮喘气道重塑过程中,TGF-β1的表达随着激发时间的延长逐渐增加,是一个动态变化的过程,柴朴汤抑制气道重塑的机制可能与下调TGF-β1的表达有关。     

平喘汤”通过调控TGF-β1/Smad信号通路抑制哮喘大鼠气道重塑机制研究

目的:基于转化生长因子-β1(TGF-β 1)/Smad通路探讨效方"平喘汤"抑制哮喘大鼠气道重塑的作用机制。方法:36只SD大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0.001g/kg)及平喘汤低、中、高剂量(5.3g/kg、10.6g/kg、21.2g/kg)组,每组6只。除正常组外,其余各组大鼠采用卵清白蛋白(OVA)致敏和激发制备哮喘大鼠模型。注射OVA致敏后,于OVA溶液雾化激发的同时各给药组灌胃给予相应的药物,模型组与正常组予等量生理盐水灌胃,雾化激发与给药均每日1次,连续3周。采集各组3只大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),采用酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测BALF中TGF-β 1含量。取各组另3只大鼠肺组织,右肺组织苏木素-伊红(HE)染色后观察肺组织病理形态学变化,马松(Masson)染色后观察胶原纤维情况,免疫组化染色法检测肺组织TGF-β 1、Smad2和Smad3蛋白表达;左肺组织采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TGF-β 1、Smad2和Smad3蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠BALF中TGF-β 1含量、肺组织中TGF-β 1、Smad2和Smad3蛋白表达水平均显著升高(P<0.001),肺组织炎性细胞浸润、胶原纤维沉积明显。与模型组比较,各给药组大鼠BALF中TGF-β 1含量均显著降低(P<0.001),其中地塞米松组和平喘汤高剂量组大鼠BALF中TGF-β 1含量显著低于平喘汤中剂量组、低剂量组(P<0.001),且2组间比较差异无统计学意义(P>0.05),平喘汤中剂量组大鼠BALF中TGF-β 1含量显著低于低剂量组(P<0.001)。与模型组比较,各治疗组大鼠肺组织损伤、炎性细胞浸润、胶原纤维沉积情况均有不同程度的减轻,其中以地塞米松组和平喘汤高剂量组改善最为明显。与模型组比较,地塞米松组与平喘汤高、中剂量组大鼠肺组织TGF-β 1、Smad2、Smad3蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),其中地塞米松组改善最为明显(P<0.05,P<0.01,P<0.001),平喘汤高剂量组改善显著优于中、低剂量组(P<0.05,P<0.01,P<0.001),中剂量组改善显著优于低剂量组(P<0.05,P<0.001)。结论:平喘汤可能通过调控TGF-β 1/Smad信号通路,下调TGF-β 1、Smad2和Smad3表达,从而抑制哮喘大鼠的气道重塑,且其作用呈现明显的剂量依赖性。     

不同中医治法对哮喘大鼠气道重建的影响

目的:观察固本、宣肺、宣肺固本3种中医治法对哮喘大鼠气道重建的作用及机制.方法:利用卵蛋白复制哮喘大鼠模型,予以灌胃给药治疗,分别利用嗜酸性粒细胞计数液和ELISA方法检测大鼠肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)数和血清中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物-1(TIMP-1)的表达.结果:经过固本、宣肺、宣肺固本3种治法中药治疗,哮喘大鼠BALF中EOS计数均降低,血清中MMP-9的表达水平降低、TIMP-1的表达升高,与模型组均有统计学差异.结论:固本、宣肺、宣肺固本3种治法对哮喘大鼠炎症及气道重建均具有改善作用,其作用机制可能与减少嗜酸性粒细胞肺泡浸润,下调MMP-9表达与上调TIMP-1表达有关.     

肾糖颗粒对糖尿病肾病大鼠TGF-β1表达的实验研究

[目的]研究肾糖颗粒对糖尿病肾病大鼠TGF-β1表达的影响,从而探讨肾糖颗粒对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用机制。[方法]采用高脂饲料喂养+STZ腹腔注射制作糖尿病肾病大鼠模型。分为正常对照组、模型对照组、中药治疗组(肾糖颗粒)、西药治疗组(洛汀新)、中西药治疗组(肾糖颗粒+洛汀新),观察各组大鼠治疗后血糖变化。实验结束前进行留尿,测24h尿蛋白定量,尿微量白蛋白、尿α1-微球蛋白。免疫组化方法测定大鼠TGF-β1的表达。[结果]经肾糖颗粒治疗8周后,大鼠一般状况较模型对照组改善较好,体重增加。空腹血糖、24h尿蛋白定量、尿微量白蛋白、尿α1-微球蛋白均明显低于模型对照组。模型组的TGF-β1的表达显著高于各治疗组。[结论]肾糖颗粒对糖尿病肾病大鼠的肾保护作用与其抑制TGF-β1表达有关。     

咳喘宁对支气管哮喘大鼠肺组织转化生长因子-β1表达的影响

支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞(EOS)、肥大细胞和淋巴细胞等多种炎症细胞参与的慢性气道炎症,本病反复发作,可导致气道重塑,致使病情缠绵难愈.     

小青龙汤对哮喘大鼠气道结构重建的影响

目的:通过观察小青龙汤对气道结构重建的影响,探讨其治疗哮喘的作用机制。方法:SD雄性大鼠40只,随机分为4组:哮喘组(A组)、小青龙汤组(B组)、地塞米松组(C组)、正常组(D组),每组10只。每组动物连续灌胃雾化1个月后留取病理组织,采用计算机图像分析系统测定气管和支气管平滑肌、粘膜、基底膜的厚度,并剥取其气管平滑肌匀浆后,用ELISA法测定其内皮素(ET-1)的水平。结果:治疗组大鼠气管平滑肌、粘膜、基底膜的厚度明显低于哮喘组大鼠(P<0.05),与对照组、正常组无明显差别(P>0.05);治疗组大鼠ET-1水平明显低于哮喘组(P<0.05)。结论:小青龙汤用于哮喘防治的有效途径之一,可能是通过抑制气道平滑肌ET-1的分泌,改善哮喘大鼠气道结构重建。     

痔愈喷剂对大鼠创面TGF-β1表达的影响

目的:探讨痔愈喷剂对大鼠术后创面愈合的作用机制。方法:30只SD大鼠随机分为痔愈喷剂组、空白对照组、湿润烧伤膏组。按照制备大鼠皮肤创伤模型,分别于造模后第7、14、21天,取创伤周围少量皮肤组织。采用免疫组织化学技术观察创面肉芽组织中TGF-β1表达的变化。结果:造模术后第7、14、21天痔愈喷剂组TGF-β1含量明显高于空白对照组(P0.05),与湿润烧伤膏组相比无明显差异。结论:痔愈喷剂可增加术后创面TGF-β1表达量,促进创面愈合的作用。     

丹龙定喘汤对哮喘小鼠气道重塑及血清TGF-β1的影响研究

目的:研究丹龙定喘汤对哮喘小鼠气道重塑和血清TGF-β1的影响。方法:SPF级Balb/c小鼠56只随机分为正常组、模型组、西药组、丹龙定喘汤组。卵蛋白致敏激发小鼠制作哮喘气道重塑模型,在实验第41～69天,正常组、模型组以生理盐水灌胃,其余2组分别给予地塞米松及丹龙定喘汤治疗。实验结束后观察肺组织病理组织形态变化及采用ELISA法检测血清TGF-β1水平。结果:丹龙定喘汤能改善哮喘小鼠气道炎性细胞的浸润及支气管平滑肌的增厚;与正常组比较,模型组小鼠血清TGF-β1明显升高(P<0.01);与模型组比较,西药组和丹龙定喘汤组TGF-β1明显降低(P<0.01),且两组之间无明显差异(P>0.05)。结论:丹龙定喘汤能够降低哮喘小鼠血清TGF-β1含量,改善哮喘小鼠气道重塑状态。     

针刺对哮喘大鼠气道重构及转化生长因子-β_1表达的影响

目的:探讨针刺治疗哮喘的作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组和药物组。采用卵蛋白致敏的方法制备哮喘模型。针刺组选用邵氏"五针法",即"肺俞""大椎""风门"穴进行治疗,留针20min,每日1次,共10次。药物组以100mg/kg的剂量腹腔注射氨茶碱注射液。治疗结束后,取肺组织HE染色,采用图像分析的方法测定气道壁和气道平滑肌厚度,评价气道重构程度;免疫组化法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)在各组大鼠小气道中的表达情况。结果:模型组大鼠支气管管壁和平滑肌厚度明显高于空白组(P0.01),肺组织中TGF-β1表达明显高于空白组(P0.01);经治疗,药物、针刺两组支气管管壁和平滑肌厚度较模型组均有降低(P0.05),TGF-β1表达较模型组明显减少(P0.01);针刺组和药物组比较,支气管管壁和平滑肌厚度的差异无统计学意义(P0.05),TGF-β1表达针刺组明显低于药物组(P0.05)。结论:邵氏"五针法"能下调小气道中TGF-β1的表达,进而干预气道结构的改变,这可能是针刺防治哮喘的作用机制之一。     

基于TGF-β1/Smad3信号通路探讨针刺抗哮喘气道重塑的作用机制

目的：基于转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad家族成员3(Smad3)信号通路观察针刺双侧“肺俞”“定喘”和双侧“孔最”“鱼际”对哮喘大鼠气道重塑的影响，探讨两组腧穴配伍的疗效差异。方法：将40只4周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组10只、造模组30只。造模组大鼠采用卵清蛋白（OVA）致敏法复制哮喘模型，模型制备成功后将大鼠随机分为模型组、针刺“肺俞”“定喘”（AAF）组、针刺“孔最”“鱼际”（AAK）组，每组10只。实验第15天起，AAF组、AAK组每天于激发后5 min分别针刺双侧“肺俞”“定喘”及双侧“孔最”“鱼际”，每次30 min，每日1次，连续3周。应用肺功能检测仪检测大鼠气道阻力（RL）和肺顺应性（Cdyn）,HE染色法及Masson染色法检测肺组织形态，实时荧光定量PCR法及Western blot法检测肺组织TGF-β1、Smad3mRNA和蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组大鼠RL升高、Cdyn降低（P<0.01）；与模型组比较，AAF组和AAK组RL降低、Cdyn升高（P<0.01,P<0.05）。与空白组比较，模型组大鼠肺组织出现支...