人单核细胞白血病细胞系SHI-1的诱导分化和凋亡

  目的 对本实验室建立的一株新的人单核细胞白血病细胞系SHI-1进行诱导分化和凋亡的研究。方法 以瑞特染色、四唑氮蓝还原试验（NBT）、流式细胞仪（FCM）检测Annexin V以及CD11b和CD14表达的改变后和DNA凝胶电泳等方法观察三丁酸甘油酯（TB）作用后SHI-1细胞的改变;以瑞特染色、FCM检测Annexin V以及CD11b和CD14表达的改变等方法观察三氧化二砷（As2O3）作用后SHI-1细胞的改变。结果 SHI-1细胞经TB处理后,可出现典型的凋亡形态学改变,部分细胞出现部分分化,NBT实验显示还原率上升,FCM结果示CD11b的表达无改变,而CD14的表达上调,Annexin V的检测结果显示SHI-1细胞经TB作用24 h后凋亡率明显上升,可见典型的DNA梯带。SHI-1细胞经As2O3作用后可见典型的凋亡形态学改变,部分细胞可见部分分化的改变,SHI-1细胞CD14的表达上调,CD11b的表达无改变,FCM检测Annexin V显示凋亡率明显上升。TPA作用24 h后SHI-1细胞基本贴壁,形态不规则,有伪足形成。结论 TB对SHI-1细胞具有诱导分化和凋亡的双向调节作用。TPA可诱导SHI-1细胞分化和贴壁。0.5 μmol／L、1.0 μmol／L和2.0 μmol／L As2O3可诱导SHI-1细胞发生凋亡和部分分化。     

过表达RbAp46基因对白血病细胞系U937增殖与分化的影响

目的 探讨过表达的RbAp46基因对白血病细胞系U937生物学特性的影响。方法 运用电穿孔介导的转基因技术, 在U937中建立稳定表达外源RbAp46基因的细胞株。用锥虫蓝拒染法判定细胞活力,细胞计数判定细胞生长速率。将处在对数生长期U937/RbAp46和U937/CMV各以2×105/ml浓度接种,加入TPA 50ng/ml,同时以培养液作为空白对照,培养72 h后收集细胞,流式细胞术测定细胞表面分化抗原CD11b的表达,RT-PCR分析p21WAF1/CIP1mRNA的表达,流式细胞术检测细胞周期分布情况。结果 转染RbAp46 的U937细胞的生长速率要比对照组低1倍左右。无论TPA诱导与否,RbAp46都能增加U937细胞表面CD11b的表达。相对于对照组,正常条件下,RbAp46转染的细胞p21WAF1/CIP1mRNA水平没有明显增加,细胞在G1期分布增加,但是经TPA诱导后,p21WAF1/CIP1mRNA水平的明显增加,细胞阻滞在G1期。结论 过表达的外源RbAp46基因能抑制U937的增殖,并为细胞分化准备了条件,使细胞更易于启动分化,p21WAF1/CIP1可能参与该过程。     

增殖抑制因子与白血病细胞的分化

正常细胞的分化常伴有细胞增殖。一般来说细胞的分化受增殖能力的影响,即增殖旺盛的细胞分化程度低,而分化程度高的细胞增殖能力低,故细胞的增殖与分化的调节机制是紧密相关的。近年证明白血病细胞及多种癌细胞有分化能力,在特异的分化诱导物质作用下可分化成正常的成熟细胞。但这种癌细胞的分化诱导与正常细胞分化不同,不一定伴有细胞增殖,二者的增殖分化调节机制不同。最近有许多关于     

丹参酮ⅡA对HL—60细胞系体外诱导分化作用的研究

从细胞形态和细胞增殖动力学研究发现０．５μｇ／ｍｌ丹参酮ⅡＡ可诱导５８％的ＨＬ－６０细胞向中性粒细胞分化，其中，中晚幼粒４６％，什状及分叶核１２％；细胞生长被明显抑制；Ｂｒｄｕ标记率及ＰＣＮＡ阳性率分别为１９．７％和３０．３％均明显低于对照组，而与维甲酸组无差异；     

维甲酸对白血病的诱导分化及基因表达的影响

诱导分化治疗是近年来治疗肿瘤的新途径,在众多的分化诱导剂中,维甲类诱导分化效果最佳,并已开始应用于临床治疗白血病。本文综述了维甲酸对白血病细胞的诱导分化作用及其临床疗效。维甲酸通过结合其特异性的受体而发挥作用。本文还综述了维甲酸受体及其易位的分子生物学以及维甲酸对基因表达影响的研究进展。     

急性早幼粒细胞白血病的诱导分化治疗研究

将５３例急性早幼粒细胞白血病患者按诱导分化治疗方案分为４组：ＲＤＡ组２１例，ＲＤ组１１例，单用常规量ＲＡ组１４例，单用小剂量ＲＡ组７例。治疗结果显示，总完全缓解率为９２．５％，ＲＤＡ组达ＣＲ需要的时间明显短于其它各组（Ｐ＜０．０５），小剂量ＲＡ组的副作用少于其它各组。ＣＲ率、白细胞达峰值的时间及白细胞增加的倍数各组间无明显差异。对联合诱导分化治疗方案及ＲＡ的合理剂量进行了讨论。     

人类白血病诱导分化和凋亡的细胞及分子机制研究

在国家自然科学基金、863计划、上海市自然科学基金和卫生部科学研究基金项目的资助下，“人类白血病诱导分化和调亡的细胞及分子机制研究”项目组，从临床、细胞生物学和分子生物学等诸方面，对急性早幼粒细胞白血病（APL）的分化、凋亡调控进行了系统的、创造性的研究。项目组在原有全反式维甲酸（ATRA）对APL分化诱导治疗的基础上，进一步探索改进疗效的方法，发现小剂量A～（15lug／天）可取得与常规剂量（45lug／天）相同疗效，而副作用明显降低。还比较了不同缓解后的治疗方案的效果，证实化疗与ATRA合用的疗效最佳。该项目发现…     

急性早幼粒细胞白血病的诱导分化治疗研究

将５３例急怀早幼粒细胞白血病患者按诱导分化治疗方案分为４组：ＲＤＡ组２１例，ＲＤ组１１例，单用规量ＲＡ组１４例，单用小剂量ＲＡ组７例，治疗结果显示，总完全缓解率为９２．５％，ＲＤＡ组达ＣＲ需要的时间明显短于其它各组（Ｐ〈０．０５），小剂理ＲＡ组的艇少于其它各组。ＣＲ率、白细胞达峰值的时间及白细胞增加的的倍数各组间明显差异。对联合诱导分化治疗方案及ＲＡ的合理剂理进行了讨论。     

孕酮对白血病细胞的抑制增殖和诱导分化作用

 目的探讨孕酮对K562和NB4白血病细胞系的抑制增殖和诱导分化作用。方法采用细胞计数,XTT实验观察孕酮对白血病细胞增殖能力的影响,采用Wright-Giemsa染色,联苯胺染色,NBT还原实验和流式细胞术观察孕酮对白血病细胞的诱导分化作用。结果不同浓度孕酮连续作用白血病细胞5天,液体培养显示细胞数明显减少,第5天处理组的XTT值显著低于对照组,并呈剂量依赖关系;液体培养和XTT均显示孕酮对NB4细胞的增殖并无显著影响。K562细胞联苯胺染色 OD值显著升高,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）,NB4细胞NBT还原能力提高（P<0.01）,并呈剂量依赖性。形态学观察孕酮可诱导K562细胞和NB4细胞趋向成熟分化,流式细胞术检测孕酮处理后K562和NB4细胞膜CD71和CD11b分化抗原表达阳性率分别为85.72％和61.28％。结论孕酮可显著抑制K562白血病细胞增殖,诱导K562和NB4白血病细胞向成熟分化。     

氨基甾体 Z1对 MEG-01白血病细胞的抑制增殖及诱导分化作用

目的：观察氨基甾体Z1对人慢性粒细胞白血病MEG-01细胞的抑制增殖和诱导分化作用。方法采用液体培养实验、集落培养实验、MTT实验观察氨基甾体Z1对MEG-01细胞的抑制增殖作用;采用Wright染色、AS-D NAE染色、细胞膜CD41表面标记物检测氨基甾体Z1对MEG-01细胞的诱导分化作用。结果10－8～10－4 mol／L的氨基甾体Z1连续作用后,细胞和集落计数明显减少,处理组MTT值显著降低,且呈浓度依赖;Wright染色显示处理组细胞有分化表现,AS-D NAE染色A值升高（P＜0．01）,流式细胞术检测处理组细胞膜上CD41表面标记表达阳性率为76％。结论氨基甾体Z1能显著抑制MEG-01细胞增殖并诱导其向巨核细胞系分化,提示该药或可成为慢性粒细胞白血病的一种新型诱导分化剂。     

姜黄素在体外对白血病细胞及其时相性影响的观察

目的：研究姜黄素在体外对Ｋ５６２及原代白血病细胞的抑制增殖与诱导分化作用,观察其对白血病细胞的细胞周期时相的影响。方法：细胞生长曲线制作、形态学观察、ＭＴＴ法、联苯胺反应、流式细胞仪检测。结果：姜黄素对Ｋ５６２细胞具有明显的抑制作用,其ＩＣ５０为５．４６ｍｇ／Ｌ,呈剂量效应关系;姜黄素使细胞生长停滞于Ｓ期,使细胞在Ｓ期大量堆积,而不能进入下一个细胞增殖周期;光镜下可见细胞质内出现红色区域,联苯胺反     

VP16对急性非淋巴细胞白血病细胞诱导分化作用的实验研究

ＶＰ_（１６）对急性非淋巴细胞白血病细胞诱导分化作用的实验研究山东省临沂地区人民医院（２７６００３）贾庆瑞兰州医学院血液病研究所马兰芳白血病细胞可被一些化学物质诱导分化成熟，在诸多诱导物质中，小剂量化疗药物的研究更引起人们的重视。ＶＰ１６是一种半合成?..     

藤黄菌素和山萘黄素对人白血病细胞系HL-60体外增殖的抑制作用

目的观察藤黄菌素和山萘黄素对HL-60细胞体外增殖的抑制作用及其对细胞周期的影响。方法分别采用台盼蓝拒染法及流式细胞术，在不同条件下测定细胞增殖的抑制率及细胞周期的分布。结果应用台盼蓝拒染法，藤黄菌素和山萘黄素能显著抑制HL-60细胞的体外增殖并且呈现时效及量效关系。流式细胞术的结果表明，藤黄菌素和山萘黄素作用2小时可使HL-60细胞周期分别阻滞于G2／M期和G0/G1期。结论藤黄菌素和山萘黄素是两种能够明显抑制HL-60细胞体外增殖，影响其细胞周期分布的黄酮类化合物。     

癌肿（白血病与肝癌）诱导分化疗法研究进展

“八五”期间，我们对癌肿诱导分化剂的开发，全反式维甲酸临床治疗（急性早幼粒细胞白血病和肝癌），诱导分化治疗作用机制作了研究。一、寻找新的分化诱导剂筛选出一批新的有效的分化诱导剂。其中新型推甲类7个、天然产物3个、源哈类1个，其中部分新型维申类化合物已申请了国内和日本、欧美等国的专利。在新的癌分化诱导剂的药理（细胞与分子水平）学研究中发现在细胞被诱导分化时，PKC呈浓度时间依赖性增高，细胞膜PKC及蛋白磷酸化水平升高。细胞分化启动受c－myc、c－fos、N-ras、p53等癌基因的调控。FCM检查发现分化诱导剂主要将细…     

氯化镧对人白血病细胞系K562生长的影响

 目的 了解稀土氯化镧（LaCl3）对白血病细胞系K562生长和凋亡的影响,为临床应用LaCl3治疗白血病提供理论依据。方法 用MTT法鉴定LaCl3对K562细胞生长增生的影响;显微镜下观察细胞形态的变化,流式细胞术及TUNEL法鉴定细胞凋亡情况;流式细胞术分析细胞周期的变化。半固体琼脂糖培养法观察LaCl3对正常骨髓细胞形成粒－巨噬细胞集落的影响。结果 在所研究的浓度范围内,随着LaCl3浓度升高,K562细胞生长抑制率增高、凋亡率增加,呈剂量依赖性关系。随着作用时间延长,1 mmol／L LaCl3对细胞的抑制率增高、凋亡率增加,呈时间依赖性关系;K562细胞G0／G1期细胞百分率升高而S期细胞百分率下降。0.1及0.5 mmol／L LaCl3显示出对正常骨髓祖细胞有轻度刺激增生效果,而较高浓度（1.5～2.0 mmol／L）,正常骨髓祖细胞形成集落数下降且含有较多巨噬细胞,集落细胞形态正常,没有显示凋亡形态。结论 在所研究浓度范围内,稀土LaCl3能抑制K562细胞生长并且诱导细胞凋亡,呈剂量及时间依赖性关系;但对正常骨髓造血细胞的影响还有待于进一步研究。     

胡椒碱诱导人红白血病细胞株K562的分化

背景与目的:白血病是一种血液系统的恶性肿瘤,诱导分化是治疗白血病非常有效的方法之一。胡椒碱(piperine)是一种从胡椒属植物中提取的生物碱,具有镇静、抗炎、抗肿瘤等多种药理活性。本研究旨在探讨胡椒碱对K562细胞的增殖抑制和诱导分化作用。方法:采用台盼蓝染色计数法绘制生长曲线和流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,观察胡椒碱对K562细胞增殖的影响;通过观察细胞形态学变化、检测硝基蓝四氮唑(nitroblue tetrazolium,NBT)还原能力、流式细胞术检测细胞表面标志CD33和CD14的变化,探讨胡椒碱对K562细胞的诱导分化作用。结果:20μmol/L和40μmol/L胡椒碱可诱导K562细胞向巨噬细胞和单核系细胞分化。40μmol/L胡椒碱作用3d,K562细胞的NBT还原阳性率由(8.5±1.9)%上升到(76.7±5.3)%;20μmol/L胡椒碱作用3d,流式细胞术结果显示细胞表面分化抗原CD33的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)下降42.05%(P<0.01),而CD14的MFI则升高了1倍(P<0.01);20μmol/L以上浓度的胡椒碱对K562细胞的增殖具有抑制作用,其抑制作用随时间的延长或剂量的增加有增强的趋势。结论:胡椒碱可诱导K562细胞向巨噬和单核系细胞分化。