重组人红细胞生成素对脑出血大鼠血肿周围肿瘤坏死因子-α的影响

目的分析重组人红细胞生成素(rh EPO)对脑出血(ICH)大鼠神经功能障碍评分变化及血肿周围肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响,探讨重组人红细胞生成素对大鼠脑出血后血肿周围脑组织的保护作用。方法将90只SD雄性大鼠随机分成假手术组、ICH对照组及rh EPO治疗组,每组30只。对三组大鼠术后各个时间点神经功能障碍进行评分并比较,采用放射免疫法测定不同时点血肿周围脑组织TNF-α含量并比较。结果 ICH对照组在12 h、1 d、2 d、3 d、7 d和14 d的神经功能障碍评分显著低于假手术组相应时间点的评分,差异有统计学意义(P0.05);rh EPO治疗组在12 h、1 d、2 d、3 d和7 d的神经功能障碍评分显著低于假手术组相应时间点的评分,差异有统计学意义(P0.05);rh EPO治疗组在2 d、3 d和7 d的神经功能障碍评分显著高于ICH对照组相应时点的评分,差异有统计学意义(P0.05)。ICH对照组在12 h、1 d、2 d和3 d的TNF-α含量显著高于假手术组相应时点的TNF-α含量,差异有统计学意义(P0.05);rh EPO治疗组在1 d和2 d的TNF-α含量显著高于假手术组相应时点的TNF-α含量,差异有统计学意义量(P0.05);rh EPO治疗组在1 d、2 d的TNF-α含量显著低于ICH对照组相应时点的TNF-α含量,差异有统计学意义量(P0.05)。结论 rh EPO可减少ICH大鼠血肿周围TNF-α含量,改善其神经功能,对ICH后脑损害具有保护作用。     

脑出血大鼠血肿周围白介素-10的表达及其与脑水肿的相关性

目的 探讨脑出血(ICH)大鼠血肿周围白介素-10(IL-10)的表达及其与脑水肿的相关性.方法 130只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组和ICH组;应用肝素化Ⅶ型胶原酶建立大鼠ICH模型;制模后12 h、24 h、48 h、72 h、7 d及14 d应用Bederson量表评定神经功能缺损程度,干/湿重法测定脑组织含水量,免疫组化方法检测脑组织血肿周围IL-10的表达.结果 (1)ICH组大鼠神经功能缺损评分与脑组织含水量均在ICH 12 h升高,48 h达高峰,7 d后恢复正常.(2)ICH组脑组织IL-10表达ICH 12 h明显升高,14 d达高峰,各时间点间均显著高于正常对照组和假手术组(P＜0.05～0.01).(3)ICH组神经功能缺损评分与脑组织含水量呈正相关(r=0.761,P＜0.01),脑组织IL-10表达与脑组织含水量、神经功能缺损评分呈负相关(r=-0.65,-0.753,均P＜0.01).结论 ICH大鼠血肿周围脑组织IL-10表达逐渐升高,可能参与了ICH后减轻脑水肿、促进神经功能恢复的脑保护作用.     

粒细胞集落刺激因子对脑出血大鼠脑水肿及星型胶质细胞的影响

目的 研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对大鼠脑出血(ICH)后脑水肿和星型胶质细胞可塑性的影响及神经保护作用.方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组.断尾取自体血法制备大鼠ICH模型,治疗组于造模1h后腹腔注射重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF) 60 μg/kg.3组大鼠于术后6h、24h、48h、72h、7d、10d处死,干湿重法测定脑组织含水量、免疫组化检测血肿周围MMP-9、GFAP的动态变化.结果 模型组脑组织含水量明显高于假手术组(P＜0.05),造模后48h、72h最明显,与组内6h、24h、7d、10d相比差异显著(P＜0.05);治疗组脑组织含水量明显低于模型组(P＜0.05).模型组各时点MMP-9表达明显高于假手术组(P＜0.05),48h、72h表达最明显,与组内6h、24h、7d、1Od比较差异显著(P＜0.05);治疗组各时点MMP-9表达显著低于模型组(P＜0.05).假手术组脑组织含水量与MMP-9表达无相关性(r＝0.429,P＞0.05),模型组脑组织含水量与MMP-9表达呈正相关关系(r ＝0.922,P＜0.05),治疗组脑组织含水量与MMP-9表达呈正相关关系(r＝0.844,P＜0.05).假手术组未见GFAP阳性细胞表达;模型组6h出现少量GFAP阳性细胞表达,48h增多,72h大量表达,7d达高峰,10d表达减弱;治疗组GFAP阳性细胞表达6h与模型组相似,24h、48h、72h、7d、10d较模型组明显减少(P＜0.05).结论 ICH后G-CSF可抑制MMP-9表达减轻脑水肿程度,抑制星形胶质细胞过度活化,对出血后脑组织具有保护作用.     

实验性脑出血后脑组织核因子-κB表达和含水量的变化及其相关性

目的 研究实验性脑出血(ICH)后血肿周围脑组织核因子-κB(NF-κB)表达和脑组织含水量的改变及其相关性.方法 采用自体不凝血注人大鼠尾状核制备ICH模型;用免疫组化法检测血肿周围脑组织NF-κB表达;用干湿重法测脑组织含水量.结果 与对照组相比,ICH 6h组血肿周围脑组织NF-κB表达开始明显增加,ICH 48h组达高峰,并持续到ICH 1周(P＜0.01～0.05);脑组织含水量ICH 12h组开始增多,24h组显著增高,72h组达高峰;NF-κB表达和脑组织含水量ICH 24h～1周组与假手术组之间差异有统计学意义(均P＜0.01);ICH后NF-κB阳性细胞数与脑组织含水量呈正相关(r=0.644,P＜0.01),NF-κB表达从开始到高峰均早于脑组织含水量的变化.结论 ICH后脑组织NF-κB表达增加,NF-κB可能通过炎性机制参与了ICH后继发脑水肿的形成.     

实验性脑出血后脑组织核因子-κB表达和含水量的变化及其相关性

目的研究实验性脑出血（ICH）后血肿周围脑组织核因子-кB（NF-кB）表达和脑组织含水量的改变及其相关性。方法采用自体不凝血注入大鼠尾状核制备ICH模型;用免疫组化法检测血肿周围脑组织NF-кB表达;用干湿重法测脑组织含水量。结果与对照组相比,ICH6h组血肿周围脑组织NF-кB表达开始明显增加,ICH48h组达高峰,并持续到ICH1周（P〈0.01~0.05）;脑组织含水量ICH12h组开始增多,24h组显著增高,72h组达高峰;NF-кB表达和脑组织含水量ICH24h~1周组与假手术组之间差异有统计学意义（均P〈0.01）;ICH后NF-кB阳性细胞数与脑组织含水量呈正相关（r=0.644,P〈0.01）,NF-кB表达从开始到高峰均早于脑组织含水量的变化。结论ICH后脑组织NF-кB表达增加,NF-кB可能通过炎性机制参与了ICH后继发脑水肿的形成。     

CVF干预对大鼠实验性脑出血后C9表达及脑水肿的影响

目的 研究大鼠实验性脑出血后血肿周围补体成分C9的表达情况及其与脑水肿的关系,探讨补体C9在脑出血后继发性损伤中的作用以及应用眼镜蛇毒因子（CVF）干预后的影响.方法 采用立体定向技术,将自体不凝血注入大鼠尾状核制备脑出血模型,将动物分为假手术组、出血组和CVF干预组,分别在不同时间断头取脑,连续切片作补体C9免疫组化染色和HE染色.结果 脑出血后2 h血肿周围脑组织开始表达C9,24 h达高峰;各组与假手术组之间比较有差异（P＜0.01）;血肿周围脑组织含水量在ICH后6 h开始增加（P＜0.05）,12 h明显增加,24～72 h达高峰（P＜0.01）,此后逐渐回落,2 w基本恢复正常水平.对侧半球相应部位及假手术对照组脑组织含水量没有明显变化;C9的表达脑组织含水量呈正相关关系（r=0.833,P＜0.05）;经CVF干预后,血肿周围组织C9表达量及脑组织含水量明显下降,干预组与出血组之间比较有显著差异（P＜0.01）.结论脑出血后补体级联激活,C9表达明显增加,脑组织含水量增加,经CVF干预后,C9表达下降,脑水肿减轻,能达到神经保护作用.     

大鼠实验性脑出血后脑水肿与MMP-9表达的关系及依达拉奉干预效应的研究

目的 探讨脑出血后脑水肿和MMP-9表达的动态变化及依达拉奉的干预效应.方法 采用立体定向技术制作大鼠脑出血模型,干湿重法测量脑组织含水量和免疫组化法测定脑组织MMP-9的表达.结果 与假手术组比较,脑出血12h时脑组织含水量明显增加(P＜0.05), 72h时达到高峰,随后逐渐下降, 7d时仍高于假手术组(P＜0.05).出血组大鼠脑含水量与血肿周围MMP-9阳性细胞数呈正相关(r=0.846, P=0.034),且差异有统计学意义.(3)治疗组脑含水量和MMP-9阳性细胞数与假手术组比较差异有统计学意义,与出血组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论 MMP-9参与了脑出血后脑水肿的形成,依达拉奉对脑水肿有抑制作用.     

肿瘤坏死因子-α在大鼠实验性脑出血脑损伤中的作用

目的 探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在大鼠实验性脑出血（ICH）后脑损伤中的作用。方法 采用立体定向自体血注入大鼠尾状核建立ICH模型。观察ICH大鼠术前及术后各时点血肿周围脑组织的TNF-α水平、含水量变化及神经功能障碍评分,并与对照组比较。对TNF-α水平与脑含水量、神经功能障碍评分进行相关分析。结果 ICH组术后12～96hTNF-α水平明显高于对照组（均P〈0．05）。ICH组术后各时点神经功能障碍评分与相应时点脑组织TNF-α水平呈负相关（r=-0．678,P〈0．001）,脑含水量与TNF-α水平呈正相关（r=0．541,P〈0．05）。结论 大鼠ICH后腑组织TNF-α水平明显增加,加重脑损伤和脑水肿。     

COX-2在大鼠脑出血损伤机制中的实验研究

目的观察大鼠脑出血后环氧合酶2(COX-2)蛋白动态表达情况与血肿周围脑组织含水量的相互关系,及COX-2抑制剂对ICH大鼠脑水肿和神经功能的影响,探讨COX-2在ICH损伤机制中的作用。方法应用立体定向技术将自体血注入大鼠壳尾核制备脑出血模型,160雄性SD大鼠分为正常对照组、假手术组、脑出血组和尼美舒利治疗组。后3组每组50只,分6h、12h、24h、72h、7d五个时间点进行神经功能障碍评分,测定血肿周边脑组织含水量,免疫组织化学染色观察COX-2蛋白动态表达。结果脑出血组COX-2表达高于正常对照组(P<0.05),治疗组COX-2表达明显低于ICH组(P<0.05)。治疗组脑组织含水量明显低于ICH组(P<0.05)。治疗组各时间点神经功能评分明显高于ICH组(P<0.05)。ICH组COX-2蛋白表达与血肿周围脑组织含水量相关(r=0.911,P<0.001)。结论ICH后COX-2蛋白表达升高促进脑水肿形成,加重神经功能缺失。尼美舒利能抑制COX-2蛋白表达,减轻脑水肿,改善ICH后大鼠神经功能。     

眼镜蛇毒因子在大鼠脑缺血-再灌注损伤中的作用研究

目的 探讨眼镜蛇毒因子（CVF）抑制补体在大鼠脑缺血-再灌注损伤中的作用。方法 采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,缺血2h后再灌注。治疗组用CVF抑制补体腹腔内注射,对照组注射等量生理盐水,检测缺血-再灌注后不同时点各组脑组织补体C1q和C3d蛋白表达情况及神经功能缺损评分、脑组织含水量的变化。结果 治疗组补体C1q和C3d表达、神经功能评分及脑组织含水量均明显低于对照组（均P〈0.05）。结论 CVF具有脑保护作用。     

醒脑静对脑出血大鼠脑水肿及血肿周围基质金属蛋白酶-9和补体C3的影响

目的 探讨醒脑静改善脑出血后脑水肿的作用机制,及其对血肿周围基质金属蛋白酶-9和补体C3的影响.方法 72只健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组、出血组和醒脑静组.自体血注射法建立脑出血模型,Garcia法评价神经功能;于湿重法检测脑组织含水量;根据伊文蓝浓度评价血-脑屏障通透性;免疫组织化学检测血肿周围脑组织中基质金属蛋白酶-9和补体C3表达水平.结果 经醒脑静治疗后,大鼠神经功能评分逐渐增加(均P<0.05),至手术后72 h达峰值水平(P<0.05),且手术后48和72h神经功能评分均高于出血组(P<0.05).手术后72 h,出血组大鼠脑组织含水量升高,血-脑屏障通透性增加,基质金属蛋白酶-9和补体C3表达阳性细胞数目增多(均P<0.05);经醒脑静治疗后,脑组织含水量降低,血-脑屏障通透性下降,基质金属蛋白酶-9和补体C3表达阳性细胞数目减少,与出血组比较差异有统计学意义(均P<0.05).结论 醒脑静通过下调血肿周围脑组织中基质金属蛋白酶-9和补体C3表达水平而达到保护血-脑屏障、减轻血管源件腑水肿的作用.     

大鼠脑出血早期脑组织神经元型一氧化氮合酶mRNA表达及中药抵当汤干预对其的影响

目的 探讨大鼠脑出血（ICH）早期脑组织神经元型一氧化氮合酶（nNOS）mRNA表达,以及中药抵当汤干预对其的影响。方法 将72只大鼠随机分为ICH组、抵当汤组、NOS抑制剂组和对照组,采用立体定向技术注入自体不凝血建立实验性ICH模型,对照组注入等量的生理盐水;术后6h、24h及72h用Bederson3级标准法对大鼠进行神经功能障碍评定;然后断头取脑,以原位杂交方法检测脑组织中nNOS mRNA阳性细胞的表达。结果 神经功能缺损程度评分术后72h时ICH组与抵当汤组均见明显改善（均P〈0.05）,但抵当汤组的改善明显优于ICH组（P〈0．05）;ICH后6h血肿侧大脑皮质nNOS mRNA阳性细胞的表达较对照组已有明显增高,24h达高峰,72h时下降,但仍明显高于对照组（均P〈0．05）;抵当汤组血肿侧大脑皮质nNOS mRNA阳性细胞表达在各时间点较ICH组明显减少（均P〈0．05）,且与NOS抑制剂组变化规律一致。结论 抵当汤具有与NOS抑制剂相似的作用,通过抑制ICH后脑组织中nNOS mRNA的表达而产生脑保护作用。     

自体骨髓单核细胞移植对脑梗死的治疗作用

目的 观察自体骨髓单核细胞移植对大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠脑梗死体积、血脑屏障破坏程度及行为学评分等的影响,评价骨髓单核细胞移植对脑梗死的治疗价值. 方法 将72只成年雄性SD大鼠按完全随机数字表法分为假手术组、模型组、生理盐水组及骨髓单核细胞移植组,后三组采用线栓法制作MCAO大鼠模型.采用梯度离心法分离大鼠股骨骨髓腔中的单核细胞,并通过流式细胞术检测CD45+细胞比例.将分离得到的自体骨髓单核细胞经颈静脉途径移植到骨髓单核细胞移植组大鼠体内,生理盐水组大鼠给予等体积的生理盐水注射.造模后72 h时伊文氏蓝染色及脑组织含水量检测显示血脑屏障的破坏情况,造模后1d、3d、7d时通过Zea-Longer评分评价大鼠神经功能变化,最后一次Zea-Longer评分结束后TTC染色检测大鼠脑梗死体积. 结果 流式细胞术检测发现骨髓单核细胞中CD45+细胞的比例为91.2％.脑梗死体积、伊文氏蓝含量及脑组织含水量在模型组与生理盐水组中均较高,且相互比较差异无统计学意义(P＞0.05)；骨髓单核细胞移植组脑梗死体积、伊文氏蓝含量及脑组织含水量均明显下降,较模型组与生理盐水组差异均有统计学意义(P＜0.05).Zea-Longer评分显示,除假手术组外,其余大鼠均有不同程度的神经功能缺损；造模后7d时骨髓单核细胞移植组神经功能评分明显改善,与模型组及生理盐水组比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 骨髓单核细胞分离过程简单,利用其移植治疗脑梗死可以显著减轻脑损伤程度并促进神经功能恢复,对脑梗死具有很高的治疗价值.     

同型半胱氨酸加重大鼠脑出血：与促进血肿周围细胞氧自由基产生及脑出血后的细胞凋亡相关？

摘要 背景：目前公认同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy是脑血管疾病的独立危险因素之一,其在脑血管疾病中的作用日益受到重视。 目的：探讨实验性脑出血后Hcy的损伤作用机制,并为预防及治疗脑出血提供实验理论基础。 设计、时间及地点：开放性实验。实验于2007-04/2008-04在泸州医学院附属医院分子生物实验室完成。 材料：健康雄性SD大鼠75只,体重在280～320g,鼠龄5～7月,由中国医学科学院实验动物研究所提供（动物质量合格证号：SCXK（京）2007-2008）;原位凋亡检测试剂盒由美国Roche公司提供、超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒、丙二醛（MDA）测试盒由南京建成生物工程研究所提供;同型半胱氨酸(Hcy)由美国Sigma公司提供、1%戊巴比妥钠由泸州医学院药理教研室提供粉剂并于实验前配制。 方法：应用立体定向技术,将自体不凝血注入大鼠壳尾核制备脑出血模型,SD大鼠（n=75）随机分为假手术组(n=25)、ICH组(n=25)、Hcy组(n=25),Hcy组于术后30min分别予血肿同侧颅内直接注射Hcy,按断头取脑时间各分为6h、12h、24h、72h、1w 5个亚组,每亚组5只动物,采用Bederson标准测定神经功能障碍,干湿重法检测脑含水量,TUNEL原位染色法标记细胞凋亡,显微镜下计数阳性细胞,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,数据用SPSS13.0统计分析。 主要的观察指标：观察同型半胱氨酸(Hcy)对脑出血模型大鼠神经功能障碍、脑含水量、血肿周围神经细胞凋亡、超氧化物歧化酶(SOD)活性的表达、丙二醛(MDA) 含量的变化等表达的影响。 结果：（1）与假手术组比较,Hcy组神经功能障碍评分﹑SOD活性均明显下降（P<0.05）,脑含水量、MDA含量明显增高（P<0.05）;与ICH组比较,Hcy组神经功能障碍评分、脑含水量差异无统计学意义(P>0.05),SOD活性、MDA含量12h、24h、72h时间点差异有统计学意义(P<0.05)。（2）假手术组偶可见TUNEL细胞表达,ICH组和Hcy组6h在血肿周边可见少量TUNEL染色阳性细胞数出现,24h增高明显,72h达到高峰,在1w时仍可看到较多表达,各观察时间点与假手术组比较差异均有统计学意义（P<0.05)。Hcy组升高更为明显,与ICH组比较,12h、24h、72h时间点差异有统计学意义(P<0.05)。（3）ICH组和Hcy组各观察时间点神经功能障碍评分与相应时点血肿周围脑组织含水量呈明显负相关(r＝-0.714,P＝0.000<0.05;r＝-0.681,P＝0.000<0.05);与SOD活性呈明显正相关(r＝0.704,P＝0.000<0.05;r＝0.641,P＝0.001<0.05);与MDA含量呈明显负相关(r＝-0.696,P＝0.000<0.05;r＝-0.655,P＝0.000<0.05)。ICH组和Hcy组术后各观察时间点血肿周围脑组织含水量与相应时点血肿周围脑组织SOD活力呈明显负相关(r＝-0.448,P＝0.025<0.05;r＝-0.612,P＝0.001<0.05),与MDA含量呈明显正相关(r＝0.542,P＝0.005<0.05;r＝0.684,P＝0.000<0.05)。 结论：自体血注入法制作大鼠脑出血模型方法较为简单,成功率较高。无论脑出血大鼠是否应用Hcy干预,均出现出血后3天脑水肿最明显,SOD活性明显降低,MDA含量明显升高,细胞凋亡达到峰值。脑出血大鼠应用Hcy干预后发现Hcy并未明显引起脑出血后脑水肿加剧和神经功能缺损,考虑脑出血后脑水肿形成由多种因素综合作用,可能与Hcy只能作用于其中部分因素或者存在后期累加效应有关。脑出血大鼠应用Hcy干预后发现Hcy可以促进氧自由基产生,同时加重神经元的损伤,促进脑出血后的细胞凋亡,进一步证实Hcy为脑血管疾病的独立危险因素之一。为预防及治疗脑出血提供了实验理论基础。     

亚低温对局灶性脑缺血大鼠模型C3表达的影响

目的观察亚低温（32～35℃）对局灶性脑缺血后大鼠脑组织C3表达的影响。方法 100只大鼠随机分成假手术组、常温组和亚低温组,各组根据观察时间点分为术后6h、1d、2d、3d、7d五个亚组。建立大鼠左侧大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,应用冰袋降温的方法使亚低温组大鼠肛温10min内降至（33℃±1℃）,维持低温6h后复温。假手术组和常温组大鼠保持肛温（37℃±0.5℃）。在各时间点采用神经缺陷评分对各大鼠进行神经功能评分后断头取脑,行苏木素伊红染色观察脑缺血病理学改变,免疫组织化学染色观察不同时间点C3表达情况。结果假手术组大鼠清醒后无神经功能障碍,常温组及亚低温组大鼠清醒后均出现左侧Horner征及不同程度右侧前肢为重的偏瘫,两组大鼠神经功能缺损3d时最明显,7d时均有所减轻。除6h外各时间点亚低温组大鼠神经功能缺损评分均较常温组低（P〈0.05）,各时间点亚低温组大鼠脑组织病理学损伤较常温组轻。在各时间点假手术组大鼠脑组织中C3可见少许表达,各组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。常温组和亚低温组大鼠缺血侧脑组织于缺血后6h补体C3阳性细胞数均开始增加,至3d均达到高峰,到7d时C3阳性细胞数明显减少,与常温组相比,亚低温组各时间点缺血侧脑组织C3表达明显减少（P〈0.05）。结论脑缺血时,缺血侧脑组织C3有表达,亚低温可使C3表达减少。亚低温可能通过降低C3的表达减轻补体级联反应起脑保护作用。     

银杏内酯注射液联合氯吡格雷对大鼠局灶性脑缺血 侧支循环形成及HIF-VEGF-Notch通路的影响

目的 探究银杏内酯注射液联合氯吡格雷对大鼠局灶性脑缺血侧支循环形成及 HIFVEGF-Notch 通路的影响。方法 将 60 只 SD 大鼠随机分为假手术组、模型组、银杏内酯注射液组、氯吡 格雷组、银杏内酯注射液 + 氯吡格雷组。除假手术组外,其余各组以大脑中动脉线栓法建立脑缺血再 灌注大鼠模型,分组处理后,以 Longa 分级法对各组大鼠神经功能缺损进行评分,以三苯基氯化四氮唑 （TTC）染色观察各组大鼠脑梗死面积,以免疫组织化学染色检测各组大鼠脑组织微血管密度（CD31 阳性 细胞表达）,采用实时荧光定量（qRT-PCR）及蛋白免疫印迹法检测脑组织中 HIF-VEGF-Notch 通路相关蛋 白表达情况。结果 与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死面积、脑组织 CD31 阳性 细胞表达、HIF-1α、VEGF、Notch1 mRNA 及蛋白表达均升高（P＜ 0.05）。与模型组比较,银杏内酯注射 液组、氯吡格雷组、银杏内酯注射液 + 氯吡格雷组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死面积均降低（P＜ 0.05）, 脑组织 CD31 阳性细胞表达、HIF-1α、VEGF、Notch1 mRNA 及蛋白表达均升高（P＜ 0.05）;与银杏内酯注 射液组及氯吡格雷组分别比较,银杏内酯注射液 + 氯吡格雷组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死面积均降 低（P＜ 0.05）,脑组织 CD31 阳性细胞表达、HIF-1α、VEGF、Notch1 mRNA 及蛋白表达均升高（P＜ 0.05）。 结论 银杏内酯注射液及氯吡格雷均可促进大鼠局灶性脑缺血侧支循环形成及 HIF-VEGF-Notch 通路 表达,两者合用具有协同作用。     

实验性脑出血血肿周围组织中Rho激酶的研究

目的观察实验性脑出血(ICH)血肿周围组织中Rho激酶的表达及其与神经功能缺损的关系。方法将ICH模型大鼠随机分为ICH后1d、3d、5d及7d组;在相应时间点处死大鼠前进行神经功能评分;运用免疫组化法和原位杂交法观察每组大鼠血肿周围脑组织中Rho激酶蛋白及mRNA的表达。结果ICH后1d、3d、5d及7d组神经功能评分分别为1.63、2.25、3.13及2.88;血肿周围脑组织Rho激酶蛋白阳性细胞数分别为26.63、30.75、38.88及35.00;血肿周围Rho激酶mRNA阳性细胞数分别为27.25、32.25、40.88及38.00。1d、3d、5d组间神经功能评分、Rho激酶蛋白及mRNA的表达差异有统计学意义(P<0.05～0.01),5d组与7d组间差异无统计学意义;神经功能评分与Rho激酶蛋白及mRNA的表达呈正相关(r1=0.534,r2=0.675,均P<0.01)。结论ICH后血肿周围脑组织中Rho激酶可能被激活,并参与了ICH后血肿周围脑组织的损害过程。     

银杏叶提取物后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的 探讨银杏叶提取物EGb761对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 制作大鼠右侧大脑中动脉闭塞再灌注模型.将30只清洁级雄性SD大鼠随机分为3组,即假手术组（n-10）：给予5 ml生理盐水腹腔注射;对照组（n-10）：缺血90 min,再灌注24 h,5 ml生理盐水腹腔注射;实验组（n-10）：缺血90 min,再灌注24 h,在再灌注即刻20 mg/kg银杏叶提取物生理盐水稀释成5 ml腹腔注射.再灌注24 h后采用四分法测定大鼠的神经功能障碍评分（NDS）;实验结束后断头取脑采用TTC染色法测定脑梗死面积（以其同侧大脑半球体积的百分比表示）;采用western blot测定脑组织微管相关蛋白2（MAP2）的表达水平.结果 与假手术组比较,对照组、实验组小鼠NDS评分均显著升高,分别为（2.49±0.85）分和（1.58±0.62）分,3组间比较差异均明显（P＜0.05）;对照组、实验组脑梗死面积均显著增大（P＜0.05）,实验组脑梗死面积较对照组显著减小（P＜0.05）;与假手术组比较,与假手术组比较,对照组、实验组缺血侧MAP2蛋白的表达水平均显著降低（P＜0.05）,实验组缺血侧MAP2蛋白的表达水平较对照组显著升高（P＜0.05）.结论 银杏提取物EGb761对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有显著的保护效应,其效应与MAP2蛋白表达水平升高有关.     

大鼠脑出血后基质金属蛋白酶的动态表达及七叶皂苷钠对其表达的影响

目的 观察大鼠脑出血(ICH)后基质金属蛋白酶-2( MMP-2)、MMP-9蛋白动态表达及其与血肿周围脑组织含水量的关系,以及观察七叶皂苷钠对MMP-2、MMP-9表达的影响.方法 Wistar大鼠250只随机分为4组:正常对照组10只、假手术组、ICH组和七叶皂苷钠治疗组各80只,于制模后6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、120 h、7 d、15 d 8个时间点,测定各组血肿周围脑组织含水量、MMP-2和MMP-9的蛋白表达.结果 治疗组神经功能缺损较ICH组明显改善,尤以6 h～7 d时明显(P<0.01～0.05);6～120 h各治疗组血肿周围脑组织含水量较ICH组明显减少(P<0.01～0.05);ICH后MMP-2蛋白表达在6 h达到高峰,12 h时下降,与正常对照组相比具有统计学意义 (均P<0.01),治疗组MMP-2蛋白表达在各时间点较ICH组明显减少(均P<0.01);ICH后MMP-9蛋白表达在6 h开始上升,24～48 h达高峰,72 h时下降,与正常对照组相比,具有统计学意义(均P<0.01),其表达水平与血肿周围脑组织含水量呈正相关 (r=0.949, P<0.05);治疗组MMP-9蛋白表达在各时间点较ICH组明显减少(均P<0.01).结论 大鼠ICH后MMP-2、MMP-9蛋白的表达是ICH后早、中期脑水肿形成主要因素,七叶皂苷钠能降低MMP-2、MMP-9蛋白表达和脑组织含水量,对ICH具有保护作用.     

脑出血大鼠脑组织ROCK2与脑水肿、炎性损伤及细胞凋亡的关系

目的观察脑出血(ICH)大鼠脑水肿、炎性损伤及细胞凋亡的变化,探讨Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(ROCK2)是否与ICH后脑损伤相关。方法 60只大鼠采用自体不凝血注入法制备ICH模型,随机分为6组:假手术组、ICH 12h组、ICH 1d组、ICH 3d组、ICH 5d组、ICH 7d组。分别于相应时间点断头取脑,苏木精-伊红染色观察血肿形成及血肿周围组织炎性细胞浸润情况,并用干湿重法检测脑组织含水量,采用ELISA法检测脑组织IL-6、TNF-α水平,Western blot法检测血肿周围组织ROCK2、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果大鼠ICH后12h、1d、3d血肿周围组织ROCK2蛋白表达与假手术组相比明显增高,差异有统计学意义(P0.05)。大鼠ICH后12h、1d、3d、5d、7d脑组织含水量、IL-6、TNF-α相对含量明显增高,与假手术组相比差异有统计学意义(P0.05)。大鼠ICH后12h、1d、3d、5d、7d血肿周围组织Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达与假手术组相比明显增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 ROCK2可能参与了ICH后脑水肿、炎性损伤及细胞凋亡等病理过程,可能为ICH的治疗提供新的靶点。