大孔吸附树脂分离纯化五鹤续断总皂苷的工艺研究

［摘要］目的研究大孔吸附树脂分离纯化五鹤续断总皂苷的工艺，确定最佳工艺条件和参数。方法用95%乙醇溶液提取五鹤续断后，浓缩提取液至无醇味的浸膏，水溶解后上大孔吸附树脂柱，用香草醛 浓硫酸显色反应比色法在波长532 nm测定总皂苷的含量，以总皂苷的含量为考察指标,对影响总皂苷分离纯化的工艺参数进行考察。结果D101型大孔树脂为五鹤续断总皂苷的最佳分离纯化树脂，工艺条件：上样浓度为0.75 mg·mL 1，1 g树脂最大吸附量为0.85 g五鹤续断生药材，洗脱剂为50%乙醇，洗脱剂用量为5倍量树脂柱床体积。结论D101型大孔树脂在所确定的工艺条件下能较好地分离纯化五鹤续断总皂苷，其固形物中总皂苷的含量＞50%，总皂苷的回收率＞91%。该法适用于工业上大规模制备五鹤续断总皂苷。     

不同产地续断的质量比较

目的 比较不同产地续断的质量.方法 采用HPLC法测定续断中川续断皂苷Ⅵ的含量,比色法测定续断总皂苷的含量.结果 中国14个不同产地续断的总皂苷含量为2.20%～19.91%,川续断皂苷Ⅵ含量为0.51%～10.14%.结论 各产地续断中川续断皂苷Ⅵ和总皂苷含量差异较大,以川鄂道地产区含量较高,可为药材的质量评价及发展道地药材的生产提供依据.     

AB-8大孔树脂对甘草提取液的最佳动态纯化条件

为优选出AB-8型大孔树脂对甘草酸的最佳动态吸附及解吸条件。我们采用正交试验法优选AB-8大孔树脂对甘草提取物的最佳动态吸附工艺,采用单因素实验优选解吸纯化的最佳工艺进行综合分析。通过对数据的直观分析和方差分析得出上柱药液浓度对吸附量有显著影响,最佳上样条件为A3B1C2,即上柱液浓度为0．5g／ml,径高比为1：8,流速为2ml／min为最佳上样条件,采用30％的乙醇洗脱杂质,采用80％的乙醇富集甘草酸。     

大孔吸附树脂富集纯化黄药子总皂苷的研究

目的研究AB-8大孔吸附树脂富集纯化黄药子总皂苷的工艺条件。方法建立高氯酸比色法测定黄药子总皂苷含量,以黄药子总皂苷含量为指标,考察AB-8大孔吸附树脂富集纯化黄药子总皂苷的吸附性能和洗脱条件。结果黄药子样品液与树脂柱最佳体积比为15∶1,30%～70%乙醇洗脱时,纯度为74.9%。结论 AB-8型吸附树脂能够较好地富集纯化黄药子总皂苷,优选出的工艺条件科学合理、简便高效,便于推广。     

大孔吸附树脂法制备多被银莲花总皂苷工艺研究

目的考察8种不同型号的大孔吸附树脂对多被银莲花总皂苷的吸附性能。方法采用静态吸附方法确定适合的树脂型号;采用动态吸附方法,以总皂苷的得率为指标,确定工艺条件。结果HPD400型大孔吸附树脂对多被银莲花总皂苷具有良好的纯化富集作用,其工艺条件为:树脂药材质量比2∶1,上样液质量浓度为每10 mL含1 g药材,以10 BV.h-1的流速上样,洗脱溶剂用体积分数为70%的乙醇。结论用HPD400型大孔吸附树脂富集多被银莲花总皂苷所得提取物纯度较高,总皂苷得率75%以上,此工艺条件可行。     

续断配方颗粒中川续断皂苷Ⅵ含量比较

目的:测定不同厂家续断配方颗粒中川续断皂苷Ⅵ含量,为制定最佳提取工艺和统一的质量控制方法提供依据。方法:采用HPLC法测定,色谱柱为Diamonsil C18(2)(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-0.2%磷酸溶液梯度洗脱,检测波长212 nm,流速1 ml.min-1,柱温30℃。结果:川续断皂苷Ⅵ在0.603～3.016μg范围内呈良好的线性关系;供试品溶液在24 h内稳定,RSD为4.78%;加样回收率为99.49%(RSD=1.86%)。结论:所建立的方法适用于续断配方颗粒中川续断皂苷Ⅵ的含量测定。     

大孔吸附树脂分离纯化川明参茎叶中的总黄酮

目的 研究大孔吸附树脂分离纯化川明参茎叶中总黄酮的工艺条件及参数.方法 以川明参茎叶中总黄酮的吸附量和解吸率为指标筛选大孔吸附树脂,研究所选树脂对川明参茎叶中总黄酮的吸附和解吸特性,并优化纯化的条件.结果 AB-8型大孔树脂对川明参茎叶中总黄酮的静态饱和吸附量为50.52 mg·g~(-1)、解析率大于70%,动态吸附量为20.76 mg·g~(-1)、解析率86%;上柱前初提物中川明参总黄酮的含量为11.7%,经大孔吸附树脂分离纯化后产品中的总黄酮含量达26.74%,提高了2.29倍;总黄酮含量与抗氧化活性成正比.结论 AB-8型大孔吸附树脂对川明参茎叶中的总黄酮有较好的分离纯化效果,总黄酮是川明参茎叶中的主要抗氧化活性成分.     

LC-MS测定两种来源续断中的川续断皂苷Ⅵ

目的 测定两种不同来源续断药材中不同部位的川续断皂苷Ⅵ.方法 采用LC-MS法和质谱法定性定量测定川续断皂苷Ⅵ的含量,选用Eclipse XDB C18柱(150 mm ×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水溶液(30:70),流速1.0 mL·min-1,检测波长210 nm;并用ESI-MS定性分析川续断皂苷Ⅵ.结果 川续断皂苷Ⅵ进样量0.204～2.04μg与峰面积的线性关系良好(r=0.9992);平均回收率为99.92%,RSD=1.31%.川续断药材中根、茎、叶中均含有川续断皂苷Ⅵ,含量分别为2.48%、0.60%、0.50%;而鹤峰续断只有根中含有川续断皂苷Ⅵ,含量为2.42%.结论 所建方法简便可行、专属性强,可控制续断药材及其制剂的质量.两种来源的续断植物在茎、叶中的含量差异可为川续断属植物提供化学分类学依据.     

桔梗抗肺炎支原体有效部位的分离纯化工艺研究

目的:研究桔梗抗肺炎支原体有效部位分离纯化的最优工艺。方法 :利用大孔吸附树脂柱,以桔梗皂苷D、桔梗总皂苷的比吸附量、脱洗附率及在药材中的含量等为指标,对该有效部位分离纯化工艺中树脂类型(ME-1、AB-8、HPD400A、S-8)、干树脂与药材质量比、柱径高比、药液质量浓度、上样流速、洗脱流速及洗脱溶剂等因素进行优化。结果:最优工艺为AB-8型大孔吸附树脂,干树脂与药材质量比为1∶4,柱径高比为1∶20,上柱液质量浓度为1.0 g/ml,上样流速为2 BV(树脂体积)/h,洗脱流速为1.5 BV/h,分别以5 BV水、25%乙醇、50%乙醇洗脱,收集50%乙醇洗脱液,减压回收,干燥,即得。3次验证试验结果表明药材中有效部位得率可达1.95%以上、桔梗总皂苷质量分数在80%以上、桔梗皂苷D含量为51.28 mg/g。结论:该方法稳定可行,可用于桔梗抗肺炎支原体有效部位的分离纯化。     

大孔吸附树脂分离纯化白术水煎液中白术内酯Ⅲ的工艺研究

目的:研究大孔吸附树脂纯化白术内酯Ⅲ的最佳纯化工艺.方法:用吸附、解吸附试验从六种大孔树脂中筛选出最佳树脂,并考察不同工艺条件对纯化结果的影响.结果:纯化白术内酯Ⅲ的最佳工艺为:上样液中白术内酯川的浓度为40μg/mL,用70％的乙醇进行洗脱,洗脱流速为2BV/h,洗脱剂用量为9倍柱体积.结论:AB-8型大孔树脂适合白术水煎液中白术内酯Ⅲ的精制.     

HPLC法测定跌打促愈片中川续断皂苷Ⅵ的含量

目的：建立高效液相色谱法测定跌打促愈片中川续断皂苷Ⅵ含量的方法。方法：色谱柱为Hypersil C18（250 mm ×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈-水（30∶70）;检测波长为212 nm;流速为1.0 ml·min^-1;柱温为室温;进样量为10μl。结果：川续断皂苷Ⅵ进样量在0.04~0.32μg之间线性关系良好,r=0.9996,平均加样回收率为97.84%,RSD为1.70%（n=6）。结论：该含量测定方法简单易行,结果可靠,重复性好,可用于该制剂中川续断皂苷Ⅵ的含量测定。     

HPLC法测定活络镇痛膏贴中川续断皂苷Ⅵ的含量

目的：建立高效液相色谱法测定活络镇痛膏贴制剂中川续断皂苷Ⅵ含量的方法。方法：采用Agilent Extend C_（18）（250mm×4.6 mm,5μm）色谱柱;流动相：乙腈-水（28：72）;流速：1.0 ml·min~（-1）;波长：212 nm;柱温：25℃。结果：川续断皂苷Ⅵ含量线性范围：0：992~9.920μg（r=0.999 5）。平均加样回收率为97.44%（RSD=1.94%）。三批制剂中续断皂苷Ⅵ含量分别为173.31,173.09,172.78 mg/贴。结论：该测定方法简便、准确,可靠,可用于活络镇痛膏贴中川续断皂苷Ⅵ含量测定。     

巴豆总生物碱的纯化工艺研究

目的 研究大孔树脂分离纯化巴豆总生物碱的工艺.方法 采用分光光度法测定总生物碱,筛选HPD400、AB-8、NKA-9、ADS-17、D101树脂对巴豆总生物碱的吸附和解吸附能力,并优化分离纯化条件.结果 优选出D101树脂,上样液浓度为生药1.5 g ·mL-1,吸附流速1.5 BV·h-1,药材量∶树脂量=9∶2,4 BV水除杂后用4 BV 30％乙醇冲洗收集目标滤液.结论 该方法简便易行,适合于巴豆总生物碱的分离纯化.     

大孔树脂分离纯化刺五加中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的工艺研究

目的研究大孔树脂分离纯化刺五加中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的工艺。方法比较了4种不同类型的大孔树脂对刺五加中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的吸附解吸性能,确定适宜的树脂类型和最佳纯化工艺条件。结果AB-8型大孔树脂对紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的吸附性能及解吸效果较好。最佳工艺条件为上样浓度：0．5g·mL^-1,吸附流速：2BV·h^-1,上样量：5BV,洗脱剂：30％的乙醇,用量：11BV,洗脱流速：1BV·h^-1。纯化后的终产品中紫丁香苷、剌五加苷E和异嗪皮啶的含量分别为3．13％,1．82％和0．42％。结论AB-8型大孔树脂用于同时富集紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶效果最佳,是一种理想的分离纯化介质。     

HPLC法测定舒筋活络酒中川续断皂苷Ⅵ含量

目的:建立舒筋活络酒中川续断皂苷Ⅵ的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱条件为SunfireTM C18柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-水(31:69),检测波长为212nm,流速为1.0 ml·min-1.结果:川续断皂苷Ⅵ的回归方程为Y=166 564X+1 392.8,(r=0.999 8),线性范围0.32～3.2μg.平均回收率为98.66%,RSD为1.68%.结论:采用本法测定舒筋活络酒中川续断皂苷Ⅵ的含量,其操作简便,结果准确、可靠,可作为舒筋活络酒的质量控制标准.     

大孔树脂纯化核桃楸皮总黄酮工艺

目的大孔树脂纯化核桃楸皮总黄酮的工艺优化。方法以大孔树脂D-101、AB-8、NKA-2和HPD-826对总黄酮的吸附率和解吸率为指标筛选树脂种类,并对优选树脂的吸附特性和各影响因素进行研究,优化工艺条件。结果 AB-8具有较好的吸附率和解吸率,最佳纯化工艺为上样液的pH为7.0,总黄酮质量浓度为4.26 g·L^(-1),上样流速为0.9 mL·min(-1),上样流速为0.9 mL·min^(-1),洗脱溶剂为体积分数为50%的乙醇,洗脱体积为108 mL。经AB-8大孔树脂纯化1次后,核桃楸皮总黄酮含量提高至原来的3.12倍。结论 AB-8大孔树脂能较好地用于核桃楸皮总黄酮的纯化。     

北豆根总生物碱纯化工艺研究

目的：优化北豆根总生物碱纯化工艺条件。方法：采用紫外分光光度法测定北豆根总生物碱含量,优选大孔吸附树脂最佳纯化分离工艺。结果：AB-8型大孔吸附树脂柱对北豆根总生物碱最大吸附量为0.7 g/g(药材量∶树脂湿重),平均洗脱率66.56%,平均总生物碱转移率为 63.49%,最终产品的生物碱纯度达到 70.79%。结论：AB-8型大孔吸附树脂可用于纯化北豆根总生物碱,该方法简便可行。     

舒筋活络酒制备工艺的研究

目的：优选舒筋活络酒的浸渍提取工艺,确保制剂质量。方法：以川续断皂苷Ⅵ为指标对舒筋活络酒提取工艺进行考察,按制备工艺考察浸渍温度与时间对样品中川续断皂苷Ⅵ含量的影响。处方药材分别在模拟室温5℃,20℃,30℃条件下用白酒浸渍20,30,40,50,60d,并采用HPLC法分别测定川续断皂苷Ⅵ的含量。结果：样品中川续断皂苷Ⅵ的含量随着浸渍时间的延长与温度的提高而升高。以浸渍时间60d为例,室温5,20,30℃条件下样品中川续断皂苷Ⅵ的含量分别为57．42,84．80,89．35μg．ml^-1,5℃时样品中的含量仅为30℃时的64．26％。结论：以浸渍法制备舒筋活络酒时,应根据生产时的温度适当调整浸渍时间,夏季以40～50d,春秋季以50—60d为宜,冬季不宜生产。     

大孔吸附树脂优选短筒兔耳草总黄酮的纯化工艺

目的:研究大孔吸附树脂分离纯化短筒兔耳草总黄酮的最佳工艺条件。方法:采用紫外分光光度法和高效液相色谱法分别测定总黄酮质量浓度和木犀草素含量,从而考察8种不同类型的大孔吸附树脂(AB-8,DM130,DM301,S-8,NKA-9,D101,HPD100,H103)的吸附和解吸附性能。结果:AB-8型大孔树脂对短筒兔耳草总黄酮有较好的吸附和洗脱效果,其最佳分离纯化条件:上样液吸附pH值为3.81,上样液质量浓度为0.58 mg·mL^-1,树脂对上样液的吸附量为66 mL·g^-1,上样体积流量为1 mL·min^-1,依次用500 mL水洗脱,50 mL 65%乙醇洗脱。经AB-8树脂处理后的总黄酮的质量分数达67.39%、收率为94.73%。结论:AB-8型大孔吸附树脂用于富集纯化短筒兔耳草总黄酮效果较佳,优化后工艺条件稳定可行,适用于短筒兔耳草总黄酮的分离纯化。     

高效液相色谱法测定跌打丸中川续断皂苷Ⅵ的含量

目的 建立跌打丸中川续断皂苷Ⅵ的含量测定方法.方法 采用Aglient ZORBAX SBC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈水为流动相进行梯度洗脱,流速:1.0mL·min-1;柱温:30℃;检测波长212 nmo结果 川续断皂苷Ⅵ在0.696～6.960 μg,峰面积与选样量呈良好的线性关系,平均回收率为96.8％,RSD为1.2％.结论 本方法可作为跌打丸中川续断皂苷Ⅵ含量测定的一种准确、灵敏、可行的方法.