胰腺癌组织Syk和VEGF-D蛋白表达及其临床意义的研究

目的:探讨胰腺癌组织中Syk和VEGF.D蛋白的表达及临床意义.方法:应用免疫组化技术检测40例胰腺癌组织中Syk和VEGF-D蛋白的表达情况.结果:正常胰腺组织表达Syk蛋白,在慢性胰腺炎组织中有中等表达,其阳性率分别为100.0%(8/8)和77.8%(7/9);在胰腺癌组织中阳性率为27.5%(11/40),大多数呈中等或弱阳性表达,与首两者比较差异均有统计学意义,P值分别为0.000 2和0.007 9;Syk蛋白与肿瘤的发生部位、分化程度和有无淋巴结转移无关;与TNM分期有关,Ⅰ～Ⅱ期组表达明显高于Ⅲ～Ⅳ期组,P=0.024 5.胰腺癌组织中VEGF-D蛋白阳性率为55%(22/40),肿瘤周边部位显著高于肿瘤中心部位,差异有统计学意义.有淋巴结转移患者的VEGF-D表达显著高于无淋巴结转移患者的表达,P=0.025 3.Syk和VEGF-D的表达具有相关性.结论:Syk缺失后,VEGF-D表达增加,胰腺癌淋巴转移和浸润性增强.     

肝癌组织Notch受体表达水平的研究

目的:检测Notch受体在肝癌组织中的表达水平,为肝癌的治疗提供新的靶点.方法:应用免疫组化和荧光定量PCR(FQ-PCR)技术对35例肝癌组织和13例正常肝组织中的Notchl、Notch2和Notch4受体蛋白及基因表达情况进行检测分析.结果:免疫组织化学结果表明,Notch分子在肝癌组织中存在强弱不等的表达,Notch1和Notch4表达上调,Notch2表达下调,差异有统计学意义,P<0.05;FQ-PCR技术检测显示,肝癌患者Notch1和Notch4基因表迭阳性,DNA拷贝数显著高于对照组,差异有统计学意义,P<0.05;肝癌组Notch2基因表达阴性,显著低于正常对照组(P<0.05);Notch分子的蛋白表达水平与基因表达的拷贝数呈正相关,r=0.985,0.664.结论:Notch受体与肝癌的发生、发展密切相关,Notch受体在肝癌发生、发展中的作用机制将为肝癌的基因治疗及新药开发提供理论依据.     

Syk和VEGF-C蛋白在胰腺癌中的表达及其与淋巴转移的关系

目的探讨胰腺癌组织中Syk和VEGF—C蛋白的表达及其在淋巴转移中的临床意义。方法应用免疫组化技术检测40例胰腺癌组织中Syk和VEGF—C蛋白的表达情况。结果正常胰腺组织表达Syk蛋白，在慢性胰腺炎中有中等表达，其阳性率分别为100．0％和77．8％；在胰腺癌中阳性率为27．5％，大多数呈中等或弱阳性表达，与前两者比较有显著性差异（P=0．0002，P=0．0079）；Syk蛋白与肿瘤的发生部位、分化程度和有无淋巴结转移间无显著性差异；与TNM分期有关，Ⅰ～Ⅱ期组表达明显高于Ⅲ～Ⅳ期组（P=0．0245）。胰腺癌组织中VEGF—C蛋白阳性率为72．5％（29／40），肿瘤周边部位显著高于肿瘤中心部位，具有统计学意义。在VEGF—C蛋白阳性组，淋巴结转移（P=0．0398）增多。Syk和VEGF—C具有关联性。结论Syk蛋白在胰腺癌中表达缺失，并与胰腺癌的发展有关；VEGF—C参与胰腺癌血管生成和淋巴管生成的调控，促进肿瘤细胞淋巴道转移；两者的表达具有相关性。     

Syk在不同组织来源的人腺上皮恶性肿瘤中的表达

目的：探讨不同组织来源的人腺上皮恶性肿瘤细胞中Syk的表达,分析其临床意义。方法：应用免疫组织化学染色法分别检测7种人腺上皮恶性肿瘤细胞株、30例人乳腺癌组织及其35例人胰腺癌组织中Syk的表达。结果：人乳腺癌细胞株MCF-7中Syk表达阳性,MDA-MB-231则表达阴性；人胰腺癌细胞株PANC-1、SW1990和Canpan-2,人肺腺癌细胞株GLC-82和肝癌细胞株SMMC-7721中Syk均表达阳性。30例乳腺癌组织及其癌旁正常组织中Syk表达阳性率分别为60% (18/30)和90%(27/30),两者之间有显著性差异(P＜0．01)。22例胰腺癌组织及其癌旁正常组织中Syk表达阳性率分别54．5%(12/22)和86．3%(19/22),两者之间有显著性差异(P＜0．01)；13例经术前化疗的胰腺癌组织及其癌旁正常组织中Syk表达阳性率分别为69．2%(9/13)和92．3%(12/13),两者之间有显著性差异(P＜0．01)。结论：Syk在所检测的不同组织来源的人腺上皮恶性肿瘤细胞株中绝大部分(6/7)呈阳性表达；Syk蛋白在乳腺、胰腺正常组织中高表达,在相应肿瘤组织中低表达或不表达的特性,Syk有可能成为乳腺癌患者的预后判定、治疗计划的制定等较为特异性指标。     

酪氨酸激酶B在涎腺腺样囊性癌中的表达及与嗜神经侵袭的关系

目的检测酪氨酸激酶B(TrkB)在涎腺腺样囊性癌(ACC)的表达情况，探讨TrkB与ACC嗜神经侵袭的关系。方法研究对象为28例ACC，3例正常腮腺，3例正常颌下腺，3例正常舌下腺及5例涎腺腺泡细胞癌标本，采用免疫组织化学及图像分析法对组织切片中的TrkB进行检测。结果以病理学表现为标准，28例ACC中的嗜神经侵袭率为46．4％(13／28)，TrkB阳性率为92．8％(26／28)，存在嗜神经现象组中TrkB表达水平明显高于未见嗜神经现象组(P=0．001)。TrkB的表达在正常大涎腺的导管细胞为阳性，而在腺泡细胞癌胞浆内均为阴性。结论TrkB可能作为ACC嗜神经侵袭的生物学标志物。TrkB表达的增高可能是ACC嗜神经侵袭的机理之一。     

肝癌及癌旁肝组织的PCNA免疫组化研究

对３９例肝细胞癌（简称肝癌）及其癌旁肝组织作ＰＣＮＡ免疫组化研究，结果显示：癌与癌旁ＰＣＮＡ阳性率有非常显著差异，癌的阳性率为２５．５％，而癌旁仅１％。肝癌分化越差，ＰＣＮＡ阳性率越高。癌旁以小细胞性肝细胞异型增生阳性率较高，其阳性率与紧邻肝组织的阳性率有显著差异。肝癌ＰＣＮＡ阳性细胞数与核分开数之比为２１：１。肝癌ＰＣＮＡ阳性细胞数不成比例地多于核分裂数，认为可能是由于癌细胞ＤＮＡ内复制所致。因     

肝癌相关基因pp1158的表达及功能研究

目的 对pp1158基因的蛋白表达和体内外功能进行研究。方法 用pET-32a融合表达载体在大肠杆菌BL21（DE3）对该基因进行表达,制备兔源性多克隆抗体;用体外细胞集落形成试验、裸鼠体内成瘤实验、免疫组化及蛋白印迹,检测该基因对肿瘤细胞生长的影响及表达差异;用Northern blot检测pp1158在组织中的表达差异。结果 pp1158对BEL 7402肝癌细胞系的体外集落形成有明显抑制作用,抑制率为58．3％（P＜0．01）;对BEL 7402细胞的成瘤有明显抑制作用（P＜0．05）。蛋白印迹结果显示,转染pCMV-Script-pp1158的BEL 7402细胞表达pp1158蛋白。免疫组化结果显示,pp1158基因在人组织中的表达为：正常肝组织≥癌旁肝组织＞肝癌组织。Northern blot结果显示,pp1158在人胎盘组织中高表达,在心、肝、骨骼肌、胰腺、肺等脏器中度表达,而在脑和肾组织中表达很低。结论 pp1158为肝细胞性肝癌的侯选抑瘤基因。     

组织微阵列研究VEGF在原发性肝癌中的表达及预后

目的：探讨血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF)在原发性肝癌中的表达及其与预后的关系。方法：应用组织微阵列新技术（tissue microarray)和免疫组织化学染色方法回顾性研究165例行手术切除并经病理学证实的肝细胞肝癌标本中VEGF的表达情况,Log-rank法比较不同VEGF表达组间生存率和无瘤生存率的差别,COX回归模型进行单因素、多因素分析比较各有关因素对生存率的影响。结果：VEGF表达主要见于肿瘤胞浆内,肿瘤VEGF表达与肝癌表达病人总生存和无瘤生存率分别为51．69％、30．71％、11．08％和76．92％、38．46％、14．96％,P值分别0．0000和0．0056。COX回归模型单因素分析肿瘤大小、数目、分化程度、癌栓和VEGF表达是影响肝癌病人生存的相关因素,仅肿瘤大小、VEGF表达与无瘤生存相关;多因素分析则发现肿瘤分化程度和VEGF表达是肝癌患者生存的影响因素,仅VEGF表达与无瘤生存相关。结论：组织微阵列技术为一种高效、快速的分子生物学研究方法。VEGF表达与肝癌复发及预后密切相关,可作为肝癌病人的独立的预后指标。     

黏着斑激酶在大肠上皮不同病变中表达及意义的研究

目的 :探讨黏着斑激酶(focaladhesionkinase ,FAK )在大肠上皮不同病变中的表达及临床病理参数的相关性。方法 :应用免疫组织化学SABC法 ,分析 49例结直肠癌、2 3例腺瘤、10例非肿瘤型息肉。结果 :49例大肠癌中FAK表达 4例 ( 84 4% ) ,FAK的高表达与大肠癌的Duke’s分期、浆膜浸润、淋巴结转移均呈正相关。 2 3例腺瘤标本中 ,FAK表达水平相一致。结论 :大肠癌的侵袭转移与相关基因协同作用密切相关 ,在大肠癌的侵袭转移中 ,FAK的表达具有正负调节的协同作用可能 ,FAK可以作为预测大肠癌侵袭转移潜能的生物学指标     

肝细胞癌COX-2表达与新生血管生成关系的研究

目的:探讨环氧合酶2(cyclooxygenase2,COX2)表达上调与人肝细胞癌(HCC)新生血管生成的关系。方法:2002～2003年本院病理诊断为HCC的80例手术标本,采用免疫组化方法,检测癌组织中COX2和血管内皮生长因子(Vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和CD34的表达情况,使用Weidner分析方法来计算CD34标记的肿瘤微血管密度(microvasculardensity,MVD)。结果:COX2和VEGF在HCC中表达率分别为75.00%(60/80)和62.50%(50/80)。VEGF在COX2强阳性组和中弱阳性组的免疫染色积分分别是5.98±1.16和3.30±0.22;VEGF在COX2强阳性组和中弱阳性组的表达率分别是71.43%(25/35)和28.00%(7/25),两组间差异非常显著(P<0.01),COX2与VEGF表达有明显相关性(P<0.01)。MVD在COX2强阳性组和中弱阳性组的评分分别为73.81±12.43和33.42±7.52,两组间差异非常显著(P<0.01),COX2与MVD有明显相关性(P<0.01)。结论:COX2高表达与HCC血管生成密切相关。     

肾细胞癌中Egfl7表达与血管生成的相关性研究

目的:探讨肾细胞癌组织中Egfl7的表达对肾细胞癌血管生成的作用和意义.方法:应用SP 法对82 例肾癌及6例正常肾组织标本进行Egfl7和CD34 免疫组化染色,检测其Egfl7表达和CD34 标记的微血管密度(MVD)值,分析Egfl7表达和MVD之间,及其与肾癌临床病理之间的关系.结果:82 例肾癌病例中,57 例Egfl7表达阳性,总阳性率为69.5%.Egfl7表达与肾癌组织学分类、分期、分级和静脉浸润有关(P<0.05).Egfl7阳性表达和阴性表达组织中MVD 值分别为127.3±31.3和79.4±27.2, 差别有显著性(P＝0.001),且MVD 和Egfl7的表达呈正相关(r=0.875,P<0.05).结论:Egfl7可能在促进肾细胞癌血管生成中起重要作用.     

CEACAM1表达与乙肝相关性肝癌微血管生成的关系

目的：探讨癌胚抗原相关细胞黏附分子1（CEACAM1）在乙肝相关性肝癌中的表达与微血管生成的关系。方法：采用免疫组织化学方法（SP法）检测81例乙肝相关性肝癌组织中CEACAM1及CD105的表达情况,分析CEACAM1和CD105标记的MVD与乙肝相关性肝癌临床病理特征的关系。结果：81例乙肝相关性肝癌组织中CEACAM1表达阳性率为71.60%（58/81）,CD105在本组肝癌组织中的阳性表达率为100%（81/81）,CEACAM1及CD105-MVD分别与肿瘤直径、包膜浸润、门静脉侵袭、淋巴结转移和TNM分期密切相关（P〈0.05）,其中CEACAM1阳性组MVD值与阴性组间差异具有统计学意义（t=3.588,P=0.001）,CEACAM1阴性组MVD值较高。结论：乙肝相关性肝癌中CEACAM1的表达下调可能参与肿瘤微血管生成,提高其侵袭及转移能力。     

抑癌基因PTEN在人肝癌组织中的表达及其与HCV核心蛋白的关系

目的：研究抑癌基因PTEN在人肝细胞肝癌中的表达及其与HCV核心蛋白间的关系.方法：采用SP法检测人肝细胞肝癌组织中PTEN和HCV核心蛋白的表达.结果：42例肝癌组织中PTEN阳性表达14例（33.3%）,而在癌旁肝组织中全部为阳性表达（28例）,PTEN蛋白在癌旁组织中的阳性表达率明显高于肝癌组织（P＜0.01）,PTEN的表达在HCC组织病理分级间亦有显著差别（P＜0.01）;肝癌组织中HCV核心蛋白阳性表达17例（40.5%）,HCV核心蛋白的表达在HCC组织病理分级间无显著差别（P＞0.05）;spearman相关分析显示,在肝癌组织中HCV核心蛋白与PTEN表达之间呈负相关（r=-0.424,P＜0.01）,即HCV核心蛋白阳性表达的肝癌组织中PTEN低表达.结论：在人丙型肝炎相关性肝细胞肝癌中存在着PTEN的表达缺失或下降;在HCV导致的肝癌的发生中,丙肝核心蛋白可能通过抑制PTEN的表达最终导致癌变的发生.     

CEACAM1表达与乙肝相关性肝癌微血管生成的关系

目的:探讨癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)在乙肝相关性肝癌中的表达与微血管生成的关系。方法:采用免疫组织化学方法(SP法)检测81例乙肝相关性肝癌组织中CEACAM1及CD105的表达情况,分析CEACAM1和CD105标记的MVD与乙肝相关性肝癌临床病理特征的关系。结果:81例乙肝相关性肝癌组织中CEACAM1表达阳性率为71.60%(58/81),CD105在本组肝癌组织中的阳性表达率为100%(81/81),CEACAM1及CD105-MVD分别与肿瘤直径、包膜浸润、门静脉侵袭、淋巴结转移和TNM分期密切相关(P<0.05),其中CEACAM1阳性组MVD值与阴性组间差异具有统计学意义(t=3.588,P=0.001),CEACAM1阴性组MVD值较高。结论:乙肝相关性肝癌中CEACAM1的表达下调可能参与肿瘤微血管生成,提高其侵袭及转移能力。     

胃癌ＲＧＳ５蛋白的表达及其与肿瘤组织分化程度和血管生成的关系

目的　检测胃癌细胞Ｇ蛋白信号通路调节蛋白５（ＲＧＳ５）的表达及其与胃癌组织分化程度和微血管密度（ＭＶＤ）的关系。方法　采用免疫组化方法检测７６例胃癌（有淋巴结转移者２２例,无淋巴结转移者５４例）中ＲＧＳ５和ＣＤ３４的表达。结果　胃癌组织中ＲＧＳ５表达与肿瘤组织分化程度呈正相关（ｒ＝０.３４５,Ｐ＜０.００１）,与年龄、性别、肿瘤大小、临床分期和淋巴结转移无关（Ｐ＞０.０５）。ＭＶＤ值在淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组（Ｐ＜０.０５）。ＲＧＳ５表达与ＭＶＤ值呈负相关（Ｐ＜０.０５）。结论　ＲＧＳ５表达与胃癌分化程度和ＭＶＤ密切相关,可能是提示预后的重要指标。     

肝癌细胞CD80表达与MHC-I分子的关系

研究共刺激分子ＣＤ８０在肝癌细胞中的表达与ＭＨＣ－１（Ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ）分子相互关系，，以探讨在肿瘤细胞所诱发的免疫排以应中共刺分子对抗的提呈机制的影响。方法：通过逆转录病毒载体介导，将ＣＤ８０基因转入肝癌细胞系ＨＨＣＣ，以流式细胞仪检测其表面ＭＨＣ－Ｉ分子的表达情况。同时检测ＬＡＫ细胞转染前后的细胞的杀伤效果。结果：表达ＣＤ８０的肝癌细胞基表达ＭＨ     

Ａｎｇ-１、Ａｎｇ-２和Ｔｉｅ-２表达与肝癌血管生成的关系

目的：检测血管生成素１（Ａｎｇ-１）、血管生成素２（Ａｎｇ-２）及其共同受体Ｔｉｅ-２在肝癌中的表达及与肝癌血管生成的关系。方法：采用免疫组化（ＳＰ法）对５３例肝癌标本、３０例癌旁组织及１０例正常肝组织中Ａｎｇ-１、Ａｎｇ-２、Ｔｉｅ-２及ＣＤ３１标记的微血管密度（ＭＶＤ）进行检测,分析它们与肝癌血管生成的关系。结果：Ａｎｇ-２及Ｔｉｅ-２在肝癌组织中的阳性表达率分别为６７.９％、７５.５％,明显高于癌旁组织４３.３％、４２.３％和正常肝组织２０.０％、２０.０％（Ｐ＜０.０５）;Ａｎｇ-１在肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的阳性表达率无显著性差异（Ｐ＞０.０５）;ＣＤ３１标记的ＭＶＤ与Ａｎｇ-２、Ｔｉｅ-２表达密切相关。ＣＤ３１标记的ＭＶＤ与Ａｎｇ.２、Ｔｉｅ.２在肝癌组织中表达呈正相关（Ｐ＜０.０５）。结论：Ａｎｇ-１、Ａｎｇ-２和Ｔｉｅ-２的表达在调节肝癌的血管生成中可能起重要作用。     

鼻咽癌细胞凋亡与血管生成的关系

目的：探讨鼻咽癌（ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＮＰＣ）细胞凋亡及瘤内血管生成与患者预后的关系。方法：采用ＴｄＴ酶介导的生物素化ｄＵＴＰ缺口末端标记技术（ＴＵＮＥＬ）和免疫组化Ｓ＝Ｐ法，分别检测２０例正常鼻咽粘膜及７３例ＮＰＣ组织的细胞凋亡率（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｒａｔｅ，ＡＲ），瘤内微血管密度（ｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌ ｄｅｎｓｉｔｙ，ＭＶＤ）及血管内皮细胞生长因子（ｖａｓｃｕ