大黄素增强吉西他滨对裸鼠SW1990细胞移植瘤的抑瘤作用

目的:探讨大黄素增强吉西他滨对裸鼠SW1990细胞移植瘤的抑瘤作用及其机制。方法:在裸鼠SW1990细胞移植瘤的动物模型上,分为生理盐水组(N组),大黄素组(E组,40 mg.kg-1),吉西他滨组(G组,125 mg.kg-1),联合用药组(E+G组,大黄素40 mg.kg-1+吉西他滨80 mg.kg-1)。各组均采取腹腔注射药物,3 d 1次,前后共11次。观察各组用药过程中肿瘤体积、瘤重、体重的变化。末次用药后1周处死裸鼠取肿瘤组织。采用Tunel法检测各组肿瘤组织凋亡情况。采用免疫组织化学染色法和Western blot法检测肿瘤组织凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2和Cytochrome C的表达变化。结果:末次用药后1周E+G组肿瘤体积和瘤重明显小于其他各组;Tunel法显示E+G组肿瘤细胞凋亡比其余各组显著增多;免疫组织化学染色和Western blot法显示E+G组的Bax,Cytochrome C的表达比其他各组显著增多,而Bcl-2的表达比其余各组明显降低,经计算Bcl-2/Bax显著下降。结论:大黄素能显著增强吉西他滨对裸鼠体内人胰腺癌SW1990细胞移植瘤的抑瘤效果,其机制可能是大黄素通过促进胰腺癌SW1990细胞中Bax的表达和抑制Bcl-2的表达,降低Bcl-2/Bax,继而促进线粒体Cytochrome C释放,从而增强吉西他滨对胰腺癌SW1990细胞移植瘤的促凋亡作用,达到增强吉西他滨在体内的抑瘤效果。     

NF-κB在大黄素联合吉西他滨治疗裸鼠胰腺癌肝转移中的作用

目的：观察大黄素联合吉西他滨对裸鼠胰腺癌肝转移模型的影响及其可能机制。方法：建立裸鼠胰腺癌肝转移模型,随机（随机数字法）分为对照组、大黄素组、吉西他滨组和联合用药组（n=10）,观察各组荷瘤裸鼠肝转移瘤生长情况;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67和CD-34的表达;Tunel法检测肿瘤组织细胞凋亡;凝胶电泳迁移率实验（EMSA）检测肿瘤细胞中NF-κB活性;Western blotting法检测肿瘤组织中Survivin、Caspase-3、VEGF和MMP-9的表达。结果：相对吉西他滨组,吉西他滨联合大黄素可显著抑制胰腺癌肝转移瘤生长;与吉西他滨组相比较,大黄素单独或联合吉西他滨可抑制体内胰腺癌肝转移瘤中Ki-67和CD34的阳性表达,并降低NF-κB活性以及Survivin、VEGF和MMP-9的表达水平,同时上调Caspase-3的表达。结论：大黄素可增强吉西他滨对体内外胰腺癌肝转移瘤的增殖抑制和诱导凋亡作用,该作用可能通过下调NF-κB及其调控蛋白而实现。     

加味乌梅丸联合吉西他滨对胰腺癌移植瘤细胞凋亡机理的实验研究

目的:探讨加味乌梅丸对胰腺癌移植瘤细胞凋亡的机理。方法:建立皮下移植瘤模型,将40只裸鼠按体质量随机分为4组,模型组、中药组、化疗组、中药+化疗组,记录各组移植瘤的生长情况,计算肿瘤体积,绘制生长曲线;21天后处死,计算抑瘤率。TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫组化法检测肿瘤组织中凋亡基因Bcl-2和Bax的表达情况。结果:用药组移植瘤的体积增长明显小于模型组(P0.05)。中药组、化疗组和中药+化疗组的抑瘤率分别为24.36%、48.59%、63.88%,其中中药+化疗组的实际抑瘤率(63.88%)大于中药组、化疗组的理论相加抑瘤率(61.11%);中药组、化疗组和中药+化疗组的凋亡细胞均数与模型组相比,差异均有统计学意义(P0.05);中药组、化疗组和中药+化疗组的Bcl-2、Bax的蛋白表达与模型组相比,差异均有统计学意义(P0.05);其中中药+化疗组与化疗组的Bax蛋白表达相比,差异亦有统计学意义(P0.05)。结论:加味乌梅丸可抑制胰腺癌移植瘤的生长,与吉西他滨联合有协同抑制作用,其抑瘤机制主要是促进肿瘤细胞的凋亡,而促进细胞凋亡的机制则与降低凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,升高凋亡促进蛋白Bax的表达有关。     

绿原酸联合吉西他滨对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨绿原酸联合吉西他滨对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响。方法:以绿原酸、吉西他滨单独用药作用于体外培养的PANC-1细胞,采用细胞毒实验(MTT)法检测细胞半抑制浓度(IC50),确定药物给药浓度;以绿原酸(3μmol/L)、吉西他滨(0.2μmol/L)单独及联合作用于PANC-1细胞,采用台盼蓝染色法检测细胞存活率,PI染色检测细胞凋亡;采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力;采用Western blot检测P-JNK、Bcl-2、IL-6、PSTAT3、NF-κB、COX-2蛋白表达。结果:与对照组比较,联合用药组的细胞凋亡率显著升高,存活率显著降低(P<0.01)。细胞划痕实验表明,联合用药组细胞迁移能力显著低于对照组(P<0.01)。Western blot结果表明,联合用药组显著下调COX-2、Bcl-2、IL-6、P-STAT3蛋白的表达,上调P-JNK蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:绿原酸和吉西他滨联合应用能增强对胰腺癌细胞系PANC-1的增殖抑制和促凋亡作用。     

大黄素抑制体内外胰腺癌转移的实验研究

目的:探讨大黄素抑制体内外胰腺癌转移的作用及其机制.方法:不同浓度大黄素(10,20,40μmol·L-1)作用人胰腺癌细胞株SW1990 2 h后,观察大黄素对SW1990细胞迁移和侵袭的作用;不同浓度大黄素(10,20,40 μmol·L-1)作用SW1990细胞48 h后,Western blot印迹检测胰腺癌细胞中NF-kB和MMP-9表达的变化;建立胰腺癌原位移植模型,分成对照组、大黄素低、高剂量组(20,40 mg·kg-1),实验结束后观察大黄素对裸鼠胰腺癌转移的抑制作用;免疫组织化学法检测裸鼠胰腺肿瘤组织中CD34,NF-kB,MMP-9的阳性表达.结果:大黄素可抑制体外人胰腺癌SW1990细胞迁移和侵袭,呈浓度依赖性;大黄素可下调人胰腺癌SW1990细胞中NF-kB和MMP-9的表达水平;与对照组相比较,大黄素低、高剂量均可明显抑制瘤荷裸鼠中胰腺癌转移,并下调CD34,NF-kB和MMP-9在胰腺肿瘤组织中的阳性表达(P＜0.05).结论:大黄素可抑制体内外胰腺癌转移,该作用可能通过下调NF-kB和MMP-9表达而实现.     

大黄素联合吉西他滨抑制体外人胰腺癌Panc-1细胞增殖及最佳用药时机选择

目的:探讨大黄素(emodin)联合吉西他滨(gemcitabine)对人胰腺癌细胞株Panc-1的增殖抑制作用及大黄素联合吉西他滨的最佳时机。方法:人胰腺癌细胞株Panc-1经大黄素10,20,40,80,160μmol·L-1分别作用24,48,72 h;以及在吉西他滨20μmol·L-1作用前24 h,0 h,后24,48,72 h分别联合大黄素20μmol·L-1作用24 h。应用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞增殖;镜下观察细胞形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡。结果:大黄素对Panc-1细胞的增殖抑制作用呈明显浓度和时间依赖性;大黄素单独或联合吉西他滨可显著诱导胰腺癌细胞凋亡;大黄素在吉西他滨作用前24,0 h,后24,48,72 h加入联合作用24 h后胰腺癌Panc-1细胞的生长抑制率分别为54.13%,49.58%,48.72%,40.74%,44.16%,大黄素作用吉西他滨前24 h组与其他各组相比较,均有统计学意义(P<0.05)。结论:大黄素可显著抑制人胰腺癌Panc-1细胞生长,大黄素可增强吉西他滨对人胰腺癌Panc-1细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,大黄素联合吉西他滨的最佳时机可能是在吉西他滨作用前24 h加入。     

复方天仙胶囊体内诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用研究

目的:本研究旨在评价复方天仙胶囊诱导鼻咽癌裸鼠移植瘤细胞凋亡作用的能力。方法:将移植人鼻咽癌CNE1细胞的裸鼠随机分为3组:复方天仙胶囊组、空白对照组、环磷酰胺(CTX)组,定期检测裸鼠的体重及肿瘤体积,给药一个疗程(30d)后解剖获取肿瘤组织,称量瘤体重量,计算抑瘤率。运用TUNEL法检测细胞凋亡;免疫组化法检测瘤组凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达改变。结果:动物实验表明,复方天仙胶囊对CNE1移植瘤有明显的抑瘤作用,TUNEL法检测复方天仙胶囊组凋亡指数明显高于对照组(P<0.01);且Bcl-2蛋白的表达在移植瘤中明显低于对照组(P<0.05),而Bax蛋白的表达明显升高(P<0.05)。结论:复方天仙胶囊在体内具有抑制鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的作用,其抑瘤作用机制与诱导细胞凋亡有关。     

大黄素联合吉西他滨对体外人胰腺癌细胞株BxPC-3生长及凋亡的影响

目的 探讨大黄素(emodin)联合吉西他滨（gemcitabine）对人胰腺癌细胞株BxPC-3的影响。 方法 人胰腺癌细胞株BxPC-3经不同浓度大黄素(0、10、 20、40、80、160 μmol/L)分别作用 24、48、72 h;及大黄素(40 μmol/L) 联合吉西他滨(20 μmol/L)作用72 h。应用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测大黄素及大黄素联合吉西他滨对BxPC-3细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测BxPC-3细胞凋亡情况。 结果 大黄素对BxPC-3细胞的增殖抑制作用呈明显浓度和时间依赖性,40 μmol/L大黄素作用于BxPC-3细胞24、48、72 h后的细胞存活率分别为79.39%、46.35%、45.44%;大黄素(40 μmol/L) 联合协同吉西他滨(20 μmol/L)作用72 h后胰腺癌BxPC-3细胞的存活率仅为26.62%,与吉西他滨组（42.78 %）及大黄素组（47.18%)比较,差异有统计学意义（P<0.05）。大黄素(40 μmol/L)和吉西他滨(20 μmol/L)单独作用于BxPC-3细胞24 h后,诱导胰腺癌细胞早期凋亡率分别为（4.70±1.54）%和（11.20±1.41）%,与联合组［细胞凋亡率为（20.60±3.23）%］比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 大黄素可显著抑制人胰腺癌BxPC-3细胞生长;大黄素有效增强吉西他滨对人胰腺癌BxPC-3细胞的增殖抑制作用;其协同作用以诱导胰腺癌细胞凋亡方式为主。     

三氧化二砷对胰腺癌 BXPC-3 细胞移植瘤的体内抑制作用

目的探讨三氧化二砷在体内对胰腺癌BXPC-3细胞移植瘤的抑制作用,并探讨其初步机制。方法建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为4组:模型组,低剂量、高剂量(2.5、5.0 mg/kg)三氧化二砷组和吉西他滨组,各组ip给药,作用2周后,检测实验前后裸鼠体质量变化,观察药物对肿瘤生长的影响,免疫组化检测肿瘤细胞增殖因子ki-67的表达,TUNEL法检测移植瘤组织的细胞凋亡。结果给药2周后,各组裸鼠体质量变化差异不显著,三氧化二砷和吉西他滨均可抑制裸鼠移植瘤的体积和质量,且三氧化二砷(5 mg/kg)组作用较强;免疫组化结果显示三氧化二砷可明显降低细胞增殖因子ki-67的阳性表达;TUNEL检测表明三氧化二砷可明显诱导移植瘤肿瘤细胞凋亡。结论三氧化二砷可抑制胰腺癌BXPC-3细胞在裸鼠体内的生长;作用机制可能为抑制肿瘤细胞增殖及促进肿瘤细胞凋亡。     

清胰化积方联合吉西他滨对人胰腺癌SW1990移植瘤细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究中药清胰化积复方联合化疗药物吉西他滨对人胰腺癌细胞SW 1990凋亡及Bc l-2蛋白表达的影响。方法:将荷SW 1990裸小鼠随机分为模型组、化疗组、化疗联合中药高、中、低剂量组,计算各组治疗后抑瘤率,并采用流式细胞术检测药物作用后肿瘤细胞的凋亡率,采用免疫组化法检测各组Bc l-2蛋白的表达情况。结果:化疗联合中药各组的瘤重均小于化疗组,化疗联合中药中剂量组的肿瘤细胞凋亡率高于化疗组,Bc l-2蛋白表达程度下降,有显著性差异。结论:清胰化积复方与吉西他滨联合应用,对人胰腺癌细胞SW 1990体内生长具有协同抑制作用,下调Bc l-2蛋白的表达,促进细胞凋亡可能是其作用机理之一。     

茶多酚对小鼠高脂血症与脂肪肝的预防作用

目的:观察茶多酚对小鼠高脂血症和脂肪肝的预防作用。方法:实验小鼠分为正常组、高脂组、脂必妥组和茶多酚组。喂养6周后,测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇脂(LDL-c)、高密度脂蛋白胆固醇脂(HDL-c)、丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活力,测定肝脏匀浆液的丙二醛(MDA)含量并观察肝脏冰冻切片脂肪染色。结果:茶多酚对高脂血症小鼠血清TC,TG,LDL-c,ALT和AST值均有显著降低,HDL-C有明显升高,肝脏组织中MDA含量也有所降低,肝脏冰冻切片的脂肪染色显示茶多酚明显减少肝脏中脂肪含量。结论:茶多酚对高脂血症和脂肪肝的形成有明显的预防作用。     

华蟾素不同组份对荷人胰腺癌SW1990裸小鼠的抑瘤作用

目的观察华蟾素不同组份对荷人胰腺癌SW1990裸小鼠的抑瘤作用。方法采用大孔吸附树脂技术分离华蟾素的极性组份和非极性组份,将荷人胰腺癌SW1990裸小鼠随机分为生理盐水、华蟾素（25g/kg）、华蟾素非极性组份（60．50、31．25mg/kg）、华蟾素极性组份（90．63、181．25mg／kg）、华蟾素联合组份（非极性组份＋极性组份,125．00、250．00mg／kg）等8组。定期测量各组小鼠的肿瘤大小,并于治疗4周后计算抑瘤率。结果华蟾素（25．00g/kg）、华蟾素非极性组份和华蟾素联合组份对荷人胰腺癌SW1990裸小鼠肿瘤生长均有抑制作用,平均瘤重均小于生理盐水组（P〈0．05）;其中联合组份（125．00mg／kg）的抑瘤率为62．97％,优于华蟾素和非极性组份,但差异无统计学意义。结论华蟾素非极性组份和联合组份对荷人胰腺癌细胞株SW1990裸小鼠均有一定的抑瘤作用,非极性组份为华蟾素的有效组份。     

Bcl-2和Bax在吸烟诱导大鼠肺血管重建中的作用研究

目的探讨Bcl-2和Bax在吸烟诱导大鼠肺血管重建中的作用。方法制备大鼠慢性吸烟动物模型;右心导管法测定并记录肺动脉平均压(mPAP);计算右心室肥厚指数(RV/(LV+S));HE染色计算腺泡内环肌型动脉(CMA)、部分肌型动脉(PMA)和非肌型血管(NMA)3种类型血管的构成比;免疫组织化学方法检测肺小动脉SM-α-actin、Bcl-2蛋白及Bax蛋白的表达;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺小动脉Bcl-2mRNA、Bax mRNA的表达。结果吸烟组大鼠mPAP均高于正常对照组(P均<0.01);吸烟能明显引起右心室肥厚(P<0.01),且随时间的延长差异更显著(P<0.05);吸烟组大鼠CMA占血管总数的百分值、肺小动脉SM-α-actin、Bcl-2蛋白、Bcl-2 mRNA表达均高于正常对照组(P均<0.05),Bax蛋白、Bax mRNA表达及Bax mRNA/Bcl-2 mRNA、Bax/Bcl-2比值均显著低于正常对照组(P均<0.01),并随时间的延长吸烟组Bax mRNA/Bcl-2 mRNA、Bax/Bcl-2比值降低均更显著(P均<0.05)。直线相关分析发现各组大鼠SM-α-actin与Bcl-2 mRNA均呈正相关(P均<0.01),与Bax mRNA均呈负相关(P均<0.05)。结论慢性吸烟可导致肺血管重建、肺动脉高压、肺动脉Bcl-2和Bax的表达异常和Bax/Bcl-2平衡失调,Bax/Bcl-2平衡失调可能是吸烟引起肺动脉平滑肌细胞增殖、肺血管重建及肺动脉高压形成的机制之一。     

黄芩汤体外诱导人结肠癌SW620细胞凋亡及其对凋亡相关因子表达的影响

目的：研究黄芩汤对人结肠癌SW620细胞凋亡的作用及其机制。方法：CCK-8和MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot方法检测Bcl-2、Bax蛋白表达;酶标免疫测定Caspase-3和Caspase-8的相对活性。结果：与对照组相比,不同浓度黄芩汤处理的细胞增殖抑制率显著增加（P<0.05或P<0.01）,细胞凋亡率升高（P<0.05或P<0.01）,抑制细胞凋亡蛋白Bcl-2表达降低而促细胞凋亡蛋白Bax表达明显增高（P<0.05或P<0.01）,Caspase-3和Caspase-8活性增强（P<0.05或P<0.01）,并呈量效依赖关系。结论：黄芩汤能够有效的促进结肠癌SW620细胞凋亡,其机制可能与抑制Bcl-2表达而促进Bax表达并增强Caspase的活性有关。     

红花桑寄生多糖抑制小鼠S180肉瘤生长的研究

目的:研究红花桑寄生多糖的体内外抑瘤作用.方法:采用水提醇沉法提取分离红花桑寄生多糖(Scurrula para-sitica polysaccharides,SP),MTT法检测了SP对S180,K562和HL-60细胞增殖的抑制作用,腹腔给药检测SP对S180的体内抑瘤效果,并采用免疫组化方法分析了SP对瘤组织中Ki-67,CyclinD1,Bax和Bcl-2等细胞增殖与凋亡抗原表达的影响.结果:SP体外无抑瘤作用,体内抑制S180实体瘤生长的最适剂量为100 mg·kg~(-1)·d~(-1),抑瘤率为54%,SP对小鼠体重增长无影响.SP可下调瘤组织中Ki-67,CyclinD1和Bcl-2抗原的表达,上调Bax的表达.结论:SP可通过体内途径抑制瘤细胞增殖和促进瘤细胞凋亡而起到抗肿瘤作用.     

参芪扶正注射液通过肿瘤相关巨噬细胞提高人乳腺癌MDA-MB-231细胞对顺铂的敏感性

目的:观察参芪扶正注射液通过免疫调节提高顺铂化疗的敏感性,并探讨其作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定参芪扶正注射液1,10,100 m L·L^-1对细胞的敏感性,流式细胞法检测细胞凋亡率,酶联免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞因子表达水平。结果:参芪扶正注射液能显著抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231与THP-1共培养细胞生长,参芪扶正注射液10,100 m L·L^-1时,其细胞存活率分别为71.8%,59.9%;参芪扶正注射液10 m L·L^-1与顺铂联合运用,提高了共培养细胞对顺铂的敏感性,顺铂的半数抑制浓度(IC50)由30μmol·L^-1降低至15μmol·L^-1;联合运用参芪扶正注射液10 m L·L^-1和顺铂,比15μmol·L^-1顺铂诱导的细胞凋亡率增加了15.5%(P<0.05);联合用药均能明显抑制B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),B细胞淋巴瘤-w(Bcl-w)和细胞外大淋巴瘤(Bcl-xl)的表达,增加Bcl-2相关X蛋白(Bax)和人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)的表达(P<0.05);参芪扶正注射液降低顺铂诱导的白细胞介素-10(IL^-10)和前列腺素E2(PGE2)的释放(P<0.05)。结论:参芪扶正注射液通过调节免疫细胞改善了乳腺癌细胞MDA-MB-231对顺铂的敏感性,起到协同抑制肿瘤细胞增殖的作用。该研究为益气扶正防治肿瘤提供实验依据,为中医药缓解肿瘤耐药研究提供实验参考。