实验性哮喘小鼠肺组织中转录因子GATA-3的表达及意义

 目的探讨GATA-3表达在支气管哮喘(哮喘)小鼠发病机制中的作用.方法12只C57BL/6小鼠随机均分为2组,对照组(A组)、哮喘组(B组).B组建立哮喘模型,各组小鼠HE染色切片观察小鼠气管、肺组织病理变化,免疫组化测定肺组织中GATA-3表达及含量.结果在同一视野对照组支气管黏膜下未见炎性细胞,哮喘组可见大量炎性细胞浸润.免疫组化染色A组GATA-3表达(6±0.5),B组GATA-3表达(64±0.2).结论哮喘小鼠肺部存在GATA-3高表达,支气管哮喘小鼠肺组织存在多种炎性细胞浸润,其机制之一与支气管小鼠肺组织中GATA-3高表达有关.     

C57BL/6小鼠CIA模型的建立及其监测体系的初步筛选

目的 建立稳定的C57BL／6小鼠胶原诱导关节炎(CIA)模型,构建进一步进行类风湿关节炎(RA)发病机制及治疗研究的体系。方法 取40只雄性C57BL／6小鼠,随机分为模型组和对照组。模型组采用鸡Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂在尾部皮内注射,21天后同样方法加强免疫。定期观察两组小鼠的关节和关节外表现以及病理学改变;用三重免疫荧光标记、胞内细胞因子测定流式细胞术检测外周血T细胞亚群。结果 对照组小鼠均未发病。模型组小鼠在50天的发病率达70％,关节炎评分在3～8分,持续时间大约100天;病理切片显示典型的炎性细胞浸润,滑膜增生,软骨及软骨下骨破坏．外周血Th1／Th2比值升高。结论 应用Ⅱ型胶原能在C57BL／6小鼠上成功建立CIA模型,该模型是进行RA研究的良好动物模型。     

抗独特型抗体对小鼠特异性低免疫反应状态的诱导作用

目的：探讨抗独特型抗体对小鼠特异性低免疫反应状态的诱导作用。方法：以C57BL／6小鼠脾细胞免疫BALB／C小鼠制备抗同种品系抗体（Abl),Abl交联KLH后,免疫BALB／C小鼠诱导产生抗独特型多克隆抗体（Ab2),以之为移植受体,,观察Ab2对小鼠特异性低免疫反应状态的诱导作用。结果：Ab1交联KLH和弗氏佐可有效诱导抗独特型抗体（Ab2),和对照组相比,Ab2诱导组小鼠移植物的存活时间明显延长,结论：移植前在受体体内诱导产生以移植物抗原为模拟抗原的抗独特型的抗体,可以对小鼠特异性低免疫反应状态起到有效的诱导作用。     

中国流行株C基因型HBV稳定复制表达小鼠模型的建立

目的 构建稳定复制中国流行株C基因型HBV的小鼠模型.方法 将携带1.3倍C基因型HBV基因组(adr血清型)的重组腺相关病毒rAAV8-1.3HBV-C转导人肝癌细胞HuH7,采用ELISA法评估HBV抗原(HBsAg、HBeAg)在肝癌细胞中的表达.筛选高表达的重组病毒,经尾静脉注射入6～8周龄C57BL/6小鼠体内,建立HBV-C复制小鼠模型(实验组,n=8);同时建立文献已报道HBV-D复制小鼠模型(对照组,n=7,rAAV8-1.3HBV-D,ayw血清型).动态监测两组小鼠血清(眼底静脉丛采血)HBV DNA载量和HBsAg、HBeAg的抗原表达量;于第9周处死小鼠,HE染色观察肝组织病理改变,免疫组化染色分析HBsAg和HBcAg的表达.结果 重组病毒rAAV8-1.3HBV-C体外转导人肝癌细胞HuH7,72h后细胞上清中可检测到HBsAg和HBeAg的表达.小鼠注射重组病毒后第2、3、5、7、9周,血清HBV DNA存在稳定复制,血清HBeAg表达水平较稳定,但血清HBsAg表达存在波动.两组小鼠肝组织未见明显的炎性细胞浸润及组织结构异常,但可检测到HBsAg和HBcAg蛋白.结论 利用高嗜肝性重组8型腺相关病毒载体携带1.3倍C基因型HBV基因组体内转导C57BL/6小鼠,成功地建立了稳定复制并持续表达C基因型HBV的小鼠模型.     

姜黄素对胸部爆震致小鼠肺组织氧化应激损伤的影响

目的 探讨姜黄素对胸部爆震致小鼠肺组织氧化应激损伤的影响.方法 将30只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、模型+姜黄素组,伤后24 h处死小鼠,左肺进行10％甲醛固定,石蜡包埋切片,右肺-80℃保存.HE染色观察肺组织爆震后病理改变;活性氧生成(reactive oxygen species,ROS)检测肺组织...     

丹参多酚酸盐对小鼠肝脏缺血再灌注后肺损伤的保护作用

目的 研究丹参多酚酸盐对小鼠肝脏缺血再灌注后肺损伤的保护作用及其机制.方法 24只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、对照组和丹参多酚酸盐组,每组8只.假手术组小鼠仅接受麻醉、开腹及关腹操作;丹参多酚酸盐组及对照组小鼠建立肝脏90min缺血再灌注模型,缺血前丹参多酚酸盐组小鼠经尾静脉注射丹参多酚酸盐60mg/kg,对照...     

白藜芦醇对冲击波致小鼠脑组织炎症损伤影响研究

目的 观察白藜芦醇(RES)对冲击波致小鼠脑组织炎症损伤的影响,并探讨其可能的分子机制.方法 将30只健康雄性C57BL/6小鼠随机分入对照组(Control组)、爆震组(Blast组)、爆震+给药组(RES组),每组各10只.伤后24 h进行Y迷宫试验;采集脑组织标本,HE染色检测脑组织爆震后炎症情况;酶联免疫吸附试...     

中性粒细胞胞外诱捕网在热射病小鼠急性肝损伤中的作用及其机制

目的 探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在热射病(HS)小鼠急性肝损伤发病中的作用及其机制。方法 56只SPF级雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法随机分为对照组(予以假加热,n=8)、热打击(HS)组(n=32)、氯脒(CA)组(给予假加热及CA预处理,n=8)及热打击+氯脒预处理组(HS+CA组,n=8)4组;HS组进一步按热打击结束后的时间点分为4个亚组,分别为HS 0 h组、HS 3 h组、HS 6 h组和HS 9 h组,每组8只。另取48只C57BL/6小鼠,随机分为对照组、CA组、HS(9 h)组和HS+CA组,每组12只,用于观察216 h生存率。通过人工气候舱制备热打击小鼠模型,监测小鼠直肠温度(Tr),记录Tr达到42.9℃的时间。于热打击结束后根据分组时间点处死小鼠,采用全自动生化分析仪测定血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性,HE染色观察肝组织病理损伤情况,试剂盒检测血浆游离DNA和髓过氧化物酶(MPO)-DNA复合物浓度,激光共聚焦显微镜观察肝组织瓜氨酸化组蛋白(Cit H3)和MPO的表达,ELISA法测定肝脏组织匀浆IL-1β浓度,Weste...     

依达拉奉对实验性小鼠自身免疫性脑脊髓炎的抑制作用

目的：研究依达拉奉对实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis , EAE）小鼠的抑制作用。方法将60只雌性C57BL/6小鼠随机分为3组：正常对照组、EAE组、EAE＋依达拉奉组,每组20只。正常对照组用PBS作为对照。后两组应用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55、完全福氏佐剂（ CFA）、结核分枝杆菌,制成的抗原乳剂进行造模。免疫2 d后,EAE＋依达拉奉组腹腔注射依达拉奉5 mg/（ kg· d）。3组均监测20 d,每日称重,观察小鼠的摄食和发病情况,并进行神经功能评分。20 d后取小鼠脊髓组织,进行病理学观察。结果 EAE组小鼠的发病率（80％）高于EAE＋依达拉奉组（45％）,差异有统计学意义（P＜0．05）。 EAE＋依达拉奉组神经功能评分各个时间点都低于EAE组,差异有统计学意义（P＜0．05）,其中,监测10 d后,EAE组神经功能评分（3．6±0．4）级;而EAE＋依达拉奉组评分为（1．3±0．5）级。 HE染色后发现,EAE组小鼠的脊髓内有大量的炎性细胞浸润,白质脱髓鞘改变明显。而EAE＋依达拉奉组小鼠有较少的炎性细胞浸润,且没有白质脱髓鞘改变。结论依达拉奉对EAE的保护作用可能与其清除自由基、减轻炎性反应有关。     

二氢卟吩e6介导的光动力疗法联合免疫检查点抑制剂治疗肺癌的实验研究

目的 评估脂质体包裹二氢卟吩e6光动力疗法(Lip@Ce6-PDT)联合免疫检查点抑制剂PD-L1抗体治疗Lewis肺癌模型的疗效。方法 (1)采用薄膜蒸发法合成Lip@Ce6,并测定其包封率和载药率。(2)将40只C57BL/6 Lewis肺癌模型小鼠随机分为模型对照组(A组)、PD-L1抗体组(B组)、Lip@Ce6-PDT组(C组)、Lip@Ce6-PDT联合PD-L1抗体组(D组)和正常对照组(E组),共5组,每组8只小鼠。B组小鼠经腹腔内注射PD-L1抗体,剂量为100μg/只;C组小鼠经尾静脉给药1 h后经皮穿刺引入光纤,在肿瘤内部进行激光照射治疗。D组在Lip@Ce6-PDT治疗后腹腔注射与B组等剂量的PD-L1抗体,E组和A组注射等量磷酸盐缓冲液(phosphate buffered solution, PBS),每隔3 d治疗1次,共治疗5次。治疗期间,每日测量肿瘤体积和计算抑瘤率。在第5次治疗结束后3 d,解剖小鼠取肿瘤组织进行HE染色、Bax和Bcl-2免疫组化,通过免疫荧光检测肿瘤组织中CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞和...     

小鼠原发性肝癌短期诱导模型的建立和评价

目的用一个月的时间建立小鼠原发性肝癌模型。方法用二乙基亚硝胺（DEN）通过腹腔注射的方式对C57BL/6小鼠进行肝脏物理损伤和毒性诱导,再经过30%部分肝切除（PH）刺激肝再生,同时辅以二乙酰基芴（2-AAF）抑制肝实质细胞分裂,使DEN的毒性诱导作用直接作用于肝脏卵圆细胞（OVC）,诱导突变。结果 模型组存活8只（8/12）,将存活的各组小鼠通过放射免疫分析（R IA）、免疫组化（IHC）和免疫印迹（WB）方法鉴定短期诱导小鼠原发性肝癌建模是否成功,结果发现原发性肝癌的绝大多数指标明显改变。结论鉴定结果表明采用化学损伤结合部分肝切除方法,经过一个月时间成功诱导并建立了C57BL/6小鼠的原发性肝癌模型。     

有氧运动对C57BL/6小鼠骨骼肌肌浆网钙释放相关基因表达的影响

目的:运用基因芯片技术研究6周有氧跑台运动对C57BL/6小鼠骨骼肌基因表达的影响,探究长期有氧运动引起小鼠骨骼肌组织的适应性改变。方法:本研究采用雄性C57BL/6小鼠20只,随机分为安静对照组(C)和有氧运动组(E),每组10只。运动组采用75%最大摄氧量强度的有氧跑台运动,1次/天,60分/次,5次/周,为期6周。实验后各组随机选取4只小鼠骨骼肌进行基因芯片分析。分离小鼠股四头肌,提取总RNA,经荧光标记后进行芯片杂交,利用芯片扫描仪记录荧光信号,并利用相关软件对所得数据进行分析,以发现组间差异表达具有显著性的基因。结果:6周有氧运动后,与对照组相比,有氧运动组共筛选出差异表达基因723个,其中,表达上调基因510个,表达下调基因213个;钙信号通路相关差异表达基因6个,其中Gna11和Pdgfra表达上调,Phka1、Plcd4、RYR1和Ppid表达下调。     

主要组织相容性复合物Ⅱ对Graves病发病影响的研究

目的应用主要组织相容性复合物（MHC）Ⅱ与人TSH受体（TSHR）共表达细胞（hM12细胞）模拟Graves病（GD）时的甲状腺细胞,免疫C57BL／6小鼠,诱导GD动物模型,以研究异常表达于GD患者甲状腺滤泡上皮细胞上的MHC—Ⅱ分子是否是GD的致病因素。方法试验组C57BL／6小鼠8只,用hM12细胞进行腹腔免疫,每2周1次,共6次,对照组C57BL／6小鼠5只,用M12细胞免疫,方法同试验组。受试小鼠末次免疫5周后,检测以下指标：甲状腺激素水平;甲状腺刺激性抗体（TSAb）;甲状腺组织学检查。结果C57BL／6小鼠试验组2／8小鼠诱导为Graves甲亢。C57BL／6小鼠的T细胞（MHC—Ⅱ为H-2^b）不能识别由hM12细胞（H～2^d）提呈的抗原,C57BL／6小鼠出现GD样变化可能是hM12细胞表达的TSHR被小鼠体内职业性抗原递呈细胞（APCs）获取,经加工处理提呈给T细胞,诱发自身免疫反应的结果。结论异常表达于GD患者甲状腺滤泡上皮细胞上的MHC—Ⅱ分子可能与GD的发病无关,而是一种自身免疫反应的继发现象。     

C57BL/6和BALB/C小鼠创伤反应差异性初步探讨

目的 观察C57BL／6和BALB／C小鼠对相同创伤的反应能力有无差异。方法 采用冲击波致伤C57BL／6（171只）BALB／C（159只）近交系小鼠,观察两种小鼠伤后即刻（0）、1、6,24,72h的死亡率,对两种小鼠的肺损伤严重度进行病理形态学比较。 结果 在相同冲击伤条件下,C57BL／6和BALB／C小鼠伤后72h内的死亡率和肺损伤程度比较,差异有非常显著性意义（P＜0．01）,其中C57BL／6表现出对冲击波具有较强的耐受能力,肺损伤程度也明显较BALC／C小鼠轻。两种小鼠内雌雄之间的死亡率和肺损伤程度比较,差异无显著性意义,并且绝大部分动物死亡发生在伤后6h以内。结论 C57BL／6和BALB／C小鼠对相同创伤的反应能力比较,差异具有显著性意义,这种差异性可能与它们在遗传背景上的差异有关。     

Engraftment of bone marrow-derived cells after nonlethal radiation in syngeneic C57BL/6 mice

Objective To study the characteristics of cell engraftment in mice at a lower dose under nonlethal radiated condition.Methods A syngeneic C57BL/6 mouse model,transplanted with 1 × 107 bone marrow cells...     

地塞米松对小鼠体成分的影响

 目的 探讨地塞米松对两种不同年龄小鼠体成分的影响,筛选出较为理想的肌肉衰减综合征模型。方法 C57BL/6雄性小鼠,8~10周龄随机分为2组,对照组(NA)和实验组(DA),6~7月龄随机分为2组,对照组(NM)和实验组(DM)。每组8只,对照组注射生理盐水,实验组注射5 mg/kg 地塞米松,皮下注射19 d。每3 d测量小鼠体成分,最后一次给药24 h后,利用Echo MRITM检测小鼠体成分。结果 干预后,DA组与NA组相比,体重降低5.97%(P<0.05),肌肉量降低14.33%(P<0.01),脂肪量增加32.94%(P<0.05)。DM组和NM组相比,体重增加13.67%(P<0.05),肌肉量降低6.06%(P<0.05),脂肪量增加43.77%(P<0.01)。6~7月龄和8~10周龄小鼠相比,地塞米松对肌肉的干预效果无统计学差异(P=0.148),地塞米松对脂肪的干预效果具有统计学差异(P<0.05),6~7月龄小鼠脂肪的增加高于8~10周龄小鼠。结论 本实验的干预条件下,6~7月龄小鼠较8~10周龄小鼠更适于做长期研究的肌肉衰减综合征模型。     

Susceptibility to radiation-induced leukaemia/lymphoma is genetically separable from sensitivity to radiation-induced genomic instability

PURPOSE: To determine whether there is a relationship between the genetics underlying the susceptibility to radiation-induced leukaemia in CBA/H (acute myeloid leukaemia, AML) and C57BL/6 (thymic lymphoma, TL) mice, and the genetics underlying the sensitivity of CBA/H (sensitive) and C57BL/6 (resistant) mice to radiation-induced chromosomal instability. MATERIALS AND METHODS: CBA/H, (CBA/H x C57BL/6)F1, F1 x CBA/H, F1 x C57BL/6 and F1 x F1 mice were exposed to a single acute dose of 3.0 Gy X-rays. AML and TL were diagnosed over the subsequent 30 months. RESULTS: There was no statistically significant difference in the incidence of AML in F1, F1 x F1, F1 x CBA/H and F1 x C57BL/6 mice, which was approximately 50% that in CBA/H mice. AML susceptibility is therefore a dominant polygenic trait, and both susceptibility and resistance (variable penetrance) CBA/H and C57BL/6 loci are involved. The incidence of TL in the FM and F1 x CBA/H mice was negligible, indicating that TL susceptibility is a recessive trait. As the TL incidence in the F1 x C57BL/6 mice was about half that in C57BL/6 mice, one recessive locus is probably involved. CONCLUSIONS: AML susceptibility in CBA/H mice is a dominant trait in contrast to the recessive inheritance of CBA/H sensitivity to radiation-induced chromosomal instability. TL-susceptibility in C57BL/6 is a recessive trait in contrast to the dominant inheritance of C57BL/6 resistance to radiation-induced chromosomal instability.     

Susceptibility to radiation-induced leukaemia/lymphoma is genetically separable from sensitivity to radiation-induced genomic instability

Purpose : To determine whether there is a relationship between the genetics underlying the susceptibility to radiation-induced leukaemia in CBA/H (acute myeloid leukaemia, AML) and C57BL/6 (thymic lymphoma, TL) mice, and the genetics underlying the sensitivity of CBA/H (sensitive) and C57BL/6 (resistant) mice to radiation-induced chromosomal instability. Materials and methods : CBA/H, (CBA/H ×C57BL/6)F 1, F 1 ×CBA/H, F 1 ×C57BL/6 and F 1 ×F 1 mice were exposed to a single acute dose of 3.0 Gy X-rays. AML and TL were diagnosed over the subsequent 30 months. Results : There was no statistically significant difference in the incidence of AML in F 1, F 1 ×F 1, F 1 ×CBA/H and F 1 ×C57BL/6 mice, which was ~50% that in CBA/H mice. AML susceptibility is therefore a dominant polygenic trait, and both susceptibility and resistance (variable penetrance) CBA/H and C57BL/6 loci are involved. The incidence of TL in the F 1 and F 1 ×CBA/H mice was negligible, indicating that TL susceptibility is a recessive trait. As the TL incidence in the F 1 ×C57BL/6 mice was about half that in C57BL/6 mice, one recessive locus is probably involved. Conclusions : AML susceptibility in CBA/H mice is a dominant trait in contrast to the recessive inheritance of CBA/H sensitivity to radiation-induced chromosomal instability. TL-susceptibility in C57BL/6 is a recessive trait in contrast to the dominant inheritance of C57BL/6 resistance to radiation-induced chromosomal instability.     

腺苷A2A受体对小鼠精神运动和情绪行为的调控作用

目的探讨腺苷A2A受体基因敲除、A2A受体激动剂干预或A2A受体抑制剂干预对小鼠运动活性、焦虑和抑郁样行为的影响。方法取腺苷A2A受体基因敲除(A2AKO)的雄性小鼠(A2AKO组)及同窝野生型(WT)C57BL/6小鼠(WT组)待用。另取雄性清洁级C57BL/6小鼠,随机分为SCH58261组、CGS21680组和对照组,分别给予腺苷A2A受体特异性拮抗剂SCH58261(2mg/kg)、腺苷A2A受体特异性激动剂CGS21680(0.5mg/kg)和同体积(0.25ml)载体溶液(二甲基亚砜+生理盐水)腹膜腔注射,10min后待用。前述各组别小鼠均进行旷场、高架十字迷宫和强迫游泳实验,测定各组小鼠的运动活性、焦虑和抑郁样行为。结果与WT组比较,A2AKO组旷场总运动路程缩短(P<0.001),周边区域的滞留时间延长(P<0.05),进入高架十字迷宫开臂的次数及在开臂滞留时间减少(P<0.05),强迫游泳的累计不动时间无显著差异(P>0.05),而CGS21680组旷场总运动路程缩短(P<0.01),周边区域滞留时间延长(P<0.01),进入高架十字迷宫开臂的次数及在开臂的滞留时间减少(P<0.01),强迫游泳的累计不动时间延长(P<0.001),而SCH58261组旷场总运动路程和中心区域活动路程延长(P<0.001),强迫游泳的累计不动时间缩短(P<0.01),高架十字迷宫试验各项指标无显著差异(P>0.05)。结论腺苷A2A受体激动剂可减少小鼠的自发和探索行为,加重焦虑和抑郁情绪,该效应与腺苷A2A受体基因敲除引发的效应相似,与腺苷A2A受体拮抗剂引发效应相反。