四君子汤含药血清调控hTERT，TRF1，Tankyrase表达及对UCAC的影响

目的:应用四君子汤含药血清干预肠癌SW480细胞,观察人端粒酶逆转录酶(hTERT),端粒结合因子1(TRF1),端锚聚合酶(Tankyrase)mRNA及蛋白的表达变化,探讨其防治溃疡性结肠癌相关癌变(UCAC)的可能机制。方法:体外培养肠癌SW480细胞,分别予空白胎牛血清、四君子汤含药血清、美沙拉嗪含药血清干预,将经过干预后的SW480细胞,采用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法检测肠癌SW480细胞中hTERT,TRF1及Tankyrase mRNA和蛋白表达水平。结果:与空白血清组比较,四君子汤(2.16,4.32,8.64 g·kg-1)含药血清组和美沙拉嗪含药血清组均能降低hTERT,TRF1,Tankyrase mRNA表达(P0.05);与美沙拉嗪含药血清组比较,四君子汤(4.32,8.64 g·kg-1)含药血清组明显降低hTERT,TRF1 mRNA表达(P0.05),四君子汤(2.16,4.32,8.64 g·kg-1)含药血清组Tankyrase mRNA表达明显升高(P0.05)。与空白血清组比较,四君子汤(2.16,4.32,8.64 g·kg-1)含药血清组和美沙拉嗪含药血清组hTERT,TRF1蛋白表达均降低(P0.05),美沙拉嗪含药血清组Tankyrase蛋白表达降低(P0.05);四君子汤含药血清组Tankyrase蛋白表达呈下降趋势,但无统计学差异;与美沙拉嗪含药血清组比较,四君子汤(8.64 g·kg-1)含药血清组hTERT蛋白表达明显降低(P0.05),四君子汤(4.32,8.64 g·kg-1)含药血清组TRF1蛋白表达明显降低(P0.05),四君子汤(2.16 g·kg-1)含药血清组Tankyrase蛋白表达明显升高(P0.05)。结论:四君子汤含药血清可能通过下调hTERT,TRF1,Tankyrase表达,抑制癌细胞增殖,诱导癌细胞凋亡,达到防治UCAC的作用。     

急支糖浆或抗生素治疗单纯急性气管-支气管炎的随机对照临床研究

目的:评价口服急支糖浆或抗生素治疗单纯急性气管-支气管炎的疗效。方法:采用随机对照方法,将180例患者随机分为急支糖浆90ml组、60ml组和阿莫西林组。急支糖浆90ml组,一次30ml,一日3次;急支糖浆60ml组,一次20ml,一日3次;阿莫西林组,一次0.5g,一日3次。疗程2周。主要疗效指标为频繁咳嗽天数。结果:频繁咳嗽天数急支糖浆90ml组(中位数8天,95%可信区间7.06~8.94天;均数8.71天,95%可信区间7.81~9.62天)和60ml组(中位数9天,95%可信区间8.01~9.88天;均数9.68天,95%可信区间8.78~10.56天)低于阿莫西林组(中位数11天,95%可信区间8.67~13.33天;均数10.45天,95%可信区间9.57~11.34天),3组比较差异有统计学意义(P0.05);疾病痊愈率急支糖浆90ml组(91.7%)和60ml组(83.3%)高于阿莫西林组(73.3%),3组比较差异有统计学意义(P0.05)。不良反应发生率急支糖浆组(3.3%)少于阿莫西林组(11.7%)。结论:急支糖浆治疗单纯急性气管-支气管炎的疗效优于阿莫西林胶囊,不良反应发生率低。     

加味补阳还五汤对氧化型低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

目的:观察加味补阳还五汤(BHT)含药血清和含药血浆对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤血管内皮细胞(VEC)的保护作用及机制,同时比较加味BHT含药血清和含药血浆对VEC生成影响的差异。方法:制备加味BHT含药血清和含药血浆,体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),采用ox-LDL造模,通过噻唑蓝(MTT)法观察细胞活力和Hoechst33258染色法、流式细胞术观察细胞凋亡率,并通过测定一氧化氮(NO),丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力,探讨加味BHT含药血清和含药血浆对ox-LDL损伤VEC的保护作用及含药血清和含药血浆之间的差异。结果:与空白组比较,模型组细胞死亡和凋亡率明显升高(P0.05),和模型组比较,加味BHT含药血清组和含药血浆组能显著降低ox-LDL造成的HUVECs的凋亡和死亡率(P0.05),细胞活性显著增强(P0.05),NO含量,SOD和GPx活力显著提高,MDA含量均显著下降(P0.05)。此外,含药血清组与含药血浆组比较细胞凋亡和死亡率更低(P0.05),含药血浆组与含药血清组比较产生NO含量明显增加(P0.05)。结论:加味BHT含药血清和含药血浆对于oxLDL损伤的VEC具有一定保护作用,其机制可能与改善内皮细胞功能、抗氧化损伤、抑制细胞凋亡有关。在一定条件下对于加味BHT含药血浆保护VEC的作用强于含药血清。     

服含土鳖虫煎剂出现腹痛2例

服用急支糖浆出现药疹1例沈烈行,池兆萍(山东省立医院济南250021)患者女,63岁。1周前感冒引起咳嗽,昼夜不止,夜不能安眠,纳食不香,咯痰色黄,量多,曾服用止咳药物多种,且服用螺旋霉素,咳痰症状未能控制。改用急支糖浆治疗,每次口服20ml,每日3次。服药第2天,咳嗽明显好转,但患者出现全身皮肤搔痒,有烧灼感,伴恶心欲吐。查患者全身皮肤潮红,可见密集红斑及针头大小的丘疹。患者否认以往曾服过此药,也无其它药物过敏史。急支糖浆系?...     

四逆散含药血清对皮质酮损伤PC12细胞钙敏感受体相关作用机制研究北大核心CSCD

目的探讨四逆散对皮质酮诱导PC12细胞损伤的干预作用是否与钙敏感受体(CaSR)以及细胞凋亡密切相关。方法以四逆散含药血清为干预药物,将PC12细胞分为空白血清组、皮质酮组、2.5%、5%、10%含药血清组,MTT法检测细胞存活率。通过AnnexinⅤ/PI流式细胞分析法、蛋白免疫印迹技术对细胞凋亡率以及C-Caspase3、C-Caspase9、Bax(6A7)、细胞Cytochrome C蛋白进行检测。通过AnnexinⅤ/PI流式细胞分析法检测四逆散含药血清联合CaSR激动剂(GdCl3)或CaSR抑制剂(NPS2390)各组细胞的凋亡率。结果与空白血清组比较,皮质酮组存活率、CaSR蛋白表达量降低(P<0.01,P<0.05);皮质酮组凋亡率、C-Caspase3、C-Caspase9、Bax(6A7)以及胞浆Cytochrome C蛋白表达量增加(P<0.01,P<0.05)。与皮质酮组比较,含药血清组存活率增加(P<0.01),5%、10%含药血清组CaSR蛋白表达量及皮质酮+NPS2390组凋亡率增加(P<0.01,P<0.05);含药血清组、皮质酮+GdCl3组凋亡率降低(P<0.01)和10%含药血清组C-Caspase3、C-Caspase9、Bax(6A7)、胞浆Cytochrome C蛋白表达量降低(P<0.01)。与皮质酮+10%含药血清组比较,皮质酮+10%含药血清+NPS2390组凋亡率增加(P<0.01)。与皮质酮+GdCl3组比较,皮质酮+10%含药血清+GdCl3组凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论四逆散含药血清可以抑制皮质酮诱导的PC12细胞凋亡,其作用机制与CaSR有关。     

阳和汤对乳腺癌MDA-MB-231细胞NF-κB、IL-8表达的影响

目的:观察阳和汤含药血清作用于乳腺癌MDA-MB-231细胞后,核因子(Nuclear Factor,NF)-κB、白介素(Interleukin,IL)-8的变化,了解阳和汤含药血清对乳腺癌细胞活性与分泌能力的影响。方法:用不同药物剂量(4.5g/kg、9g/kg、18g/kg)制备的含药血清分别干预乳腺癌MDA-MD-231细胞,在24小时、48小时、72小时、96小时,用MTT法检测细胞生长情况。在24小时、48小时、72小时,用Western blot检测NF-κB蛋白表达情况。在24小时、48小时,用ELISA检测IL-8的分泌量。结果:MTT法检测表明随着含药血清药物剂量增加,OD值增加,细胞活力降低,差异有统计学意义(P0.05)。Western blot结果显示,随着含药血清药物剂量的增加,NF-κB的表达逐渐降低,随着含药血清作用时间的延长,NF-κB的表达也逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05)。ELISA检测显示,随着含药血清药物剂量的增加,细胞IL-8分泌量减少,差异有统计学意义(P0.05)。结论:阳和汤抑制MDAMB-231细胞的增殖,下调NF-κB的表达、减少IL-8的分泌。     

运用血清药理学方法研究生脉散对豚鼠离体工作心脏的作用

目的观察家兔灌胃给予生脉散后,其含药血清对豚鼠离体工作心脏血流动力学的影响。方法家兔按分组灌胃分别给予生脉散5,10 ml.kg-1,2次/d,连续3 d,末次给药后60 min取血,分离血清。制备豚鼠离体工作心脏,观察含药血清对心率(HR)、动脉血压(AP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张期末压(LVEDP)、左室内压最大上升及下降速率(±dp/dtmax)的影响。结果含药血清在给药后不同时间具有减慢HR,降低AP,LVEDP,增高LVSP和±dp/dtm ax的作用,且呈明显的剂量依赖关系(P<0.01)。结论含药血清具有正性肌力和负性频率作用。     

解毒化瘀药含药血清对白血病HL60/ADR细胞Survivin基因表达影响的研究

目的:探讨解毒化瘀药含药血清对白血病HL60/ADR细胞Survivin基因表达的影响。方法:应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测解毒化瘀药含药血清处理后HL60/ADR细胞Survivin基因的表达,并与干扰素作对照。结果:解毒化瘀药含药血清能够降低HL60/ADR细胞Survivin基因的表达。结论:解毒化瘀药含药血清通过降低HL60/ADR细胞Survivin基因的表达,逆转白血病细胞耐药。     

急支糖浆多糖的成分分析及质量评价

目的 研究急支糖浆多糖组分的化学成分组成、重均相对分子质量以及单糖组成,并比较不同批次急支糖浆多糖组分,为其质量控制提供依据。方法 采用比色法、高效凝胶色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)和高效阴离子交换色谱法(high performance anion exchange chromatography,HPAEC)测定急支糖浆多糖的基本化学组成、重均相对分子质量及分散系数、单糖组成。结果 15批急支糖浆多糖的中性多糖、糖醛酸和蛋白质的平均质量分数分别为47.60%、33.38%、9.30%;重均相对分子质量及分散系数分别为11 757~26 367和1.89~2.65。15批急支糖浆多糖中均含有岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、木糖、半乳糖醛酸及葡萄糖醛酸,平均质量分数分别为1.94、20.13、115.54、99.25、117.45、13.62、6.03、215.23、9.61 µg/mg,物质的量比结果为1.5:14.4:100.0:71.6:84.7:9.8:5.2:144.1:6.4。将急支糖浆与川贝枇杷糖浆、杏苏止咳糖浆、小儿热速清糖浆和小儿肺热咳喘口服液进行比较,结果发现单糖组成物质的量比结合HPAEC指纹图谱可用于急支糖浆多糖的质量控制。结论 15批急支糖浆多糖的化学组成、重均相对分子质量及单糖组成具有较高的一致性,HPAEC指纹图谱具有特异性,可用作急支糖浆多糖的质控指标。     

理中丸含药血清对中焦湿阻证Cajal间质细胞代谢作用的影响

目的:初步探索理中丸含药血清对体外中焦湿阻证Cajal间质细胞(ICC)的代谢作用的影响,进一步探索理中丸在治疗胃肠动力障碍性疾病中的作用机制。方法:采用本实验室建立的湿困脾胃证大鼠模型造模方法造模,分别取湿阻模型动物血清、正常组动物血清、给药组动物血清及自然恢复组血清,采用Ⅱ胶原酶消化法体外培养ICC,鉴定成功后,用湿阻模型组血清建立"中焦湿阻证Cajal间质细胞模型",模拟湿证大鼠模型体内ICC的生长,通过细胞造模后给药(含药血清)与细胞不造模给药(含药血清)两种给药法的对比,观察细胞内LDH和SDH活力的影响。结果:(1)细胞内LDH活力结果提示:细胞造模后给药和细胞不造模给药后,与正常血清和自然恢复血清比较,理中丸含药血清均能降低ICC细胞内LDH活力(P0.01);(2)细胞内SDH活力结果提示:细胞造模后给药和细胞不造模给药(即含药血清直接给药)后,与正常血清和自然恢复血清比较,理中丸含药血清均能提高ICC细胞内SDH活力(P0.01);结论:通过理中丸降低中焦湿阻证Cajal间质细胞模型细胞内LDH和提高其细胞内的SDH活力,说明理中丸含药血清能提高体外湿阻中焦证Cajal间质细胞的有氧代谢。     

南蛇藤提取物含药血清对小鼠肝癌Hepa1-6细胞的增殖能力和VEGF-c表达水平的影响

目的:制备南蛇藤提取物(Celastrus orbiculatus extracts,COE)兔含药血清,初步研究其对小鼠肝癌Hepa1-6细胞株的增殖能力及血管内皮生长因子-c(VEGF-c)表达水平的影响。方法:取新西兰白兔,以20 mg·kg-1.d-1南蛇藤提取物ig,按通法制备含药血清。设立低、中、高剂量组(分别含有10%,20%,30%的南蛇藤提取物含药血清),作用小鼠肝癌Hepa1-6细胞,同时设阴性对照组及5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)阳性对照组,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测含药血清对细胞增殖的影响,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞培养上清VEGF-c的含量。结果:形态学上,3组COE含药血清均使细胞发生典型的凋亡改变;MTT结果显示COE中、高剂量组的含药血清能抑制Hepa1-6细胞增殖,并呈明显的时效关系;ELISA结果表明COE含药血清作用24 h后,中、高剂量组VEGF-c水平降低,与对照组相比有显著性差异。结论:COE含药血清能够有效地抑制小鼠肝癌Hepa1-6细胞的增殖,并降低细胞VEGF-c的表达水平。     

桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的:研究桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用.方法:SD大鼠灌胃给予桃红四物汤提取液(生药1.75 g·mL-1),每天2次,按10 mL·kg-1连续给药3d后,制备桃红四物汤含药血清.MTT法考察桃红四物汤含药血清(终浓度为5％,10％,15％)预处理对H2O2诱导细胞活力减少的作用;显微镜观察细胞形态学变化;以丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及AO/EB染色考察桃红四物汤含药血清对HUVECs凋亡及抗氧化能力的影响;Western blot法检测细胞Caspase-3的表达.结果:与空白血清对照组比较,经400 μmol·L-1H2O2刺激后细胞活性显著降低,含药血清组可显著提高SOD活力、降低MDA和LDH含量,并抑制Caspase-3表达.AO/EB染色及相差倒置显微镜也观察到桃红四物汤含药血清能降低H2O2诱导的细胞凋亡.结论:桃红四物汤含药血清对H2O2诱导的HUVECs损伤有显著地保护作用.     

小儿肺热咳喘颗粒治疗小儿急性咽气管炎(感冒风热夹痰证)的多中心临床试验研究

目的评价小儿肺热咳喘颗粒治疗小儿急性咽-气管炎(感冒风热夹痰证)的有效性与安全性。方法采用分层区组随机、阳性药(急支糖浆)平行对照、双盲双模拟、非劣效检验、多中心临床研究的方法。结果共收集病例210例,两组各105例。试验组、对照组疾病疗效总有效率分别为96.04%、96.08%(PPS),中医证候疗效总有效率分别为97.03%、98.04%(PPS),经非劣效性检验,试验组疾病疗效及证候疗效均不劣于对照组。两组咽红肿或痛症状消失率分别为57.43%、43.14%(PPS),试验组优于对照组,差异有统计学意义(P0.05),其他单项症状消失率及并发症发生率比较,差异不显著。两组均无不良反应发生。结论小儿肺热咳喘颗粒的总体治疗效果不劣于急支糖浆,对于咽红肿或痛的治疗消失率高于急支糖浆,且临床应用安全性良好。     

基于黔产刺梨“消食”作用的减肥活性及其机制研究

目的:探讨基于黔产刺梨“消食”作用的减肥活性并初步研究其机制。方法:昆明种小鼠正常组(ig,生理盐水)和刺梨果汁组(ig,含生药1.66kg·L-1),每组10只,各组小鼠每日ig给药1次,连续给药6天,观测小鼠体质量并记录。健康成年雄性SD大鼠30只,用刺梨果汁(含生药浓度为1.66kg·L-1)进行灌胃,每天2次,连续给药7天制备刺梨含药血清。体外培养小鼠巨噬细胞(RAW264.7细胞),分为正常组、刺梨含药血清组、刺梨果汁组、M1型巨噬细胞组、M1+刺梨含药血清组、M1+刺梨果汁组、M2型巨噬细胞组、M2+刺梨含药血清组、M2+刺梨果汁组。每组3个复孔,进行分组造模给药。RT-PCR检测各组RAW264.7细胞PPAR-α、PPAR-γ及IL-6、IL-10基因表达。结果:与正常组小鼠相比,刺梨果汁组小鼠体质量在给药第6天时明显低于正常对照组(P0.05)。与M1组相比,刺梨含药血清组和刺梨果汁组的PPAR-α基因表达显著升高(P0.05),M1+刺梨含药血清组PPAR-γ基因表达显著升高(P0.05),M1+刺梨含药血清组、M1+刺梨果汁组IL-6基因相对表达显著降低(P0.05),M1+刺梨含药血清组IL-10基因相对表达显著升高(P0.05);与M2型组相比,M2+刺梨果汁组PPAR-γ基因表达显著降低(P0.05),M2+刺梨果汁组IL-6基因相对表达显著降低(P0.05)。结论:黔产刺梨具有降低小鼠体质量的作用;黔产刺梨含药血清可以诱导PPAR-α表达升高,加速脂肪组织分解利用;诱导M1表型巨噬细胞PPAR-γ基因表达显著增加,促使脂肪组织巨噬细胞由M1表型向M2表型转化;降低炎症因子IL-6的表达,升高抗炎因子IL-10的表达,可能与其促进脂肪组织巨噬细胞表型向M2表型转化有关。     

藿香正气散含药血清对小鼠Cajal间质细胞GLUT2、GLUT4含量的影响

目的研究藿香正气散含药血清对小鼠小肠Cajal间质细胞(ICC)中GLUT2、GLUT4含量的影响。方法采用综合造模法建立小鼠胃肠动力障碍模型;采用Ⅱ型胶原酶消化法体外培养ICC,通过给ICC细胞加入藿香正气散抑制型、稳定型和亢进型三种含药血清,测定GLUT2、GLUT4的含量。结果造模2天抑制型含药血清对GLUT2的影响,与空白抑制组比较,模型抑制组、模型恢复抑制组降低,其中模型给药抑制组升高且高于空白抑制组水平,模型恢复抑制组低于空白抑制组水平(P0.01);对GLUT4的影响不大(P0.05)。造模2天稳定型含药血清对GLUT2的影响,与模型稳定组比较,模型恢复稳定组升高(P0.05)。造模2天稳定型含药血清对GLUT4的影响,与空白稳定组比较,模型稳定组、模型恢复稳定组升高(P0.05);与模型稳定组比较,空白稳定组、模型给药稳定组降低接近空白稳定水平(P0.05);造模2天亢进型含药血清对GLUT2的影响,与空白亢进组比较,模型亢进组、模型给药亢进组、模型恢复亢进组皆降低,其中模型给药亢进组降低明显,但是都比空白亢进组低(P0.01);与模型亢进组比较,空白亢进组升高,模型给药亢进组、模型恢复亢进组降低(P0.01);对GLUT4的影响不大(P0.05)。结论藿香正气散抑制型、稳定型和亢进型三种含药血清对小鼠小肠Cajal上的GLUT2、GLUT4含量有影响,其中藿香正气散抑制型和亢进性含药血清对GLUT2影响较大,稳定型含药血清对GLUT4影响较大,藿香正气散可能对小鼠胃肠运动具有双向调节作用及肠推动功能有明显、稳定的促进作用,这可能与GLUT2、GLUT4参与胃肠动力调节有关。     

西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移的影响

目的:研究西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移以及对环氧化酶2(COX-2)转录的影响,以期探讨西黄丸对三阴性乳腺癌细胞的作用。方法:大鼠灌胃给药制备西黄丸含药血清,实验设置大鼠空白血清组和西黄丸含药血清组,以含药血清干预三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕实验检测细胞迁移,RT-PCR法检测COX-2、TNF-αmRNA表达。结果:西黄丸含药血清可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,可以促进MDA-MB-231细胞凋亡,并且西黄丸含药血清可以降低MDA-MB-231细胞划痕愈合率,可以降低在炎性环境下MDA-MB-231细胞中COX-2 mRNA表达(P<0.05)。结论:西黄丸含药血清可以有效地抑制MDA-MB-231细胞增殖,促进其细胞凋亡,可能抑制细胞迁移,并且可以减少炎性因子的转录。     

白血病K562/A02细胞Mdr1基因的表达及解毒化淤药干预作用研究

目的探讨解毒化淤药含药血清对白血病K562/A02细胞Mdr1耐药基因表达的影响。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测解毒化淤药含药血清处理后K562/A02细胞Mdr1基因的表达,并与干扰素作对照。结果解毒化淤药含药血清能够降低K562/A02细胞Mdr1基因的表达。结论解毒化淤药含药血清通过降低K562/A02细胞Mdr1耐药基因的表达,逆转白血病细胞耐药。     

半夏泻心汤含药血清对胃癌微环境中BMSCs生长增殖的影响

目的:观察半夏泻心汤及不同配伍药组含药血清对胃癌微环境中骨髓间充质干细胞(BMSCs)生长增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:设BMSCs常规培养为空白组;模型组采用transwell小室将人胃癌BCG-823细胞与大鼠BMSCs非接触共培养建立胃癌微环境;半夏泻心汤及不同配伍含药血清组(全方组、辛开组、苦降组、甘补组)在上室内加入体积浓度为10%的相应配伍药含药血清。倒置显微镜观察BMSCs细胞形态、噻唑蓝(MTT)比色法观察BMSCs的增殖率,流式细胞术(FCM)检测BMSCs的细胞周期,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测原癌基因(c-Myc)和端粒酶逆转录酶(TERT)蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测c-Myc和TERT mRNA的表达。结果:全方组、辛开组、苦降组、甘补组含药血清在4,5,6,7 d对BMSCs的增殖有明显抑制作用,全方组明显优于甘补组(P0.05);第7天的检测结果显示全方组、辛开组、苦降组、甘补组含药血清均可降低c-Myc和TERT表达水平,升高G1期细胞比例,降低S期细胞比例,全方组明显优于甘补组(P0.05)。结论:半夏泻心汤及不同配伍药组含药血可抑制胃癌微环境中BMSCs的异常增殖,半夏泻心汤全方为最佳配伍。     

慈菇消脂丸含药血清对HepG2细胞脂性凋亡的影响

目的探讨慈菇消脂丸含药血清对游离脂肪酸诱导HepG2细胞脂性凋亡的影响。方法 SD大鼠给予慈菇消脂丸药液(2 mL/100 g)灌胃以提取并配制不同浓度含药血清;以500μmol/L游离脂肪酸诱导HepG2细胞构建模型,随机分为空白对照组、模型组(500μmol/L FFA)、慈菇消脂丸含药血清低剂量组(500μmol/L FFA+2%含药血清),慈菇消脂丸含药血清高剂量组(500μmol/L FFA+6%含药血清),JNK抑制剂组(500μmol/L FFA+20μmol/L SP600125),诱导培养24 h,电镜观察细胞超微结构,荧光染色观察caspase-8、Fas-L、p-JNK,试剂盒检测SOD、MDA、ALT、 AST。结果空白对照组细胞内未见脂滴,模型组出现脂滴,其余各组脂滴减少。与空白对照组比较,模型组caspase-8、Fas-L、p-JNK表达增高(P0.01),细胞培养液ALT、AST、MDA水平增高及SOD水平降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,慈菇消脂丸含药血清各剂量组caspase-8、Fas-L表达降低(P0.01),慈菇消脂丸含药血清高剂量组ALT、AST、MDA水平降低及SOD水平升高(P0.05,P0.01)。结论慈菇消脂丸含药血清对游离脂肪酸诱导的HepG2脂性凋亡有干预作用,可能与凋亡蛋白caspase-8、Fas-L相关。     

桃红四物汤含药血清对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞TNF-α、MCP-1和IL-1β表达的影响

目的:研究桃红四物汤含药血清对脂多糖(LPS)诱导刺激下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用。方法:SD大鼠灌胃给予桃红四物汤提取液(生药1.75 g·m L-1),每天2次,按10 m L·kg-1连续给药3d后,制备桃红四物汤含药血清。MTT法检测桃红四物汤含药血清(终浓度为5%、10%和15%)预处理对LPS诱导细胞生存率减少的作用;real-time RT-PCR检测TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达情况;Western Blot方法检测MCP-1和NFκB蛋白表达;检测活性氧(ROS)含量,研究桃红四物汤含药血清对HUVEC抗氧化能力的影响。结果:与空白血清对照组比较,经LPS(1μg·m L-1)刺激后细胞ROS含量明显增高而生存率显著降低,同时细胞炎性因子TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达增高;含药血清组可显著提高HUVECs活力、降低ROS含量和TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达。结论:桃红四物汤含药血清对LPS诱导的HUVECs损伤有显著地保护作用。