圆二色和等温滴定微量热技术研究人血清白蛋白与锌离子的结合机制

目的：体外利用圆二色和等温滴定微量热技术获得人血清白蛋白（HSA）与锌离子（Zn²⁺）相互作用的二级结构信息与热力学参数,认识Zn²⁺与HSA之间的相互作用机制,为探索并发挥微量元素在人体内的作用潜力提供科学依据。方法：采用圆二色技术和等温滴定微量热技术;HSA浓度设置为由低到高的梯度,分别为0.025 mmol·L^-1、0.05 mmol·L^-1、0.1 mmol·L^-1、0.2 mmol·L^-1,Zn²⁺浓度5 mmol·L^-1。结果：圆二色检测到不同浓度的HSA与Zn²⁺相互作用后二级结构发生变化,由低到高浓度的HSA与Zn²⁺结合后α-螺旋含量随之降低,当HSA浓度为0.2 mmol·L^-1时α-螺旋含量表现特殊;进而所进行的等温滴定微量热实验获得一整套有关分子相互作用的热力学信息,包括结合常数（Kb）、反应的化学计量数（N）、熵（ΔS）和焓（ΔH）,发现当ZnSO₄（mmol·L^-1）?HSA（mmol·L^-1）=5?0.2时,有两类结合位点。不同浓度的HSA分别与Zn²⁺结合,表现出不同构象变化,特别当HSA浓度达到0.2 mmol·L^-1时,α-螺旋含量急剧降低,蛋白质疏水性减弱,肽链伸展。在进一步的等温滴定微量热实验中,发现ZnSO₄（mmol·L^-1）?HSA（mmol·L^-1）=5?0.2的条件下,ZnSO₄-HSA有两类结合位点,即吸热位点和放热位点。结论：揭示HSA上的吸热结合位点对Zn²⁺有高特异性,但非结合优先性。这一结果为Zn²⁺在未来成为打开HSA上吸热位点的“钥匙”提供可行性依据。     

碳纤维电极溶出伏安法同时测定丹参中锌和镉

目的：用自制碳纤维电极,采用线性扫描溶出伏安法实现锌、镉同时在碳纤维电极上的检测。方法：考察了电解质底液、富集电位、富集时间及扫描速度对Zn²⁺、Cd²⁺溶出伏安行为的影响。结果：在1 mol?L^-1硫酸介质中,Zn²⁺、Cd²⁺分别在-0.97 V和-0.77 V附近产生灵敏的阳极溶出峰,峰电流与浓度呈良好的线性相关,相关系数R²分别为0.996 5和0.995 4。锌、镉的检出限（S/N=3）分别为1.5×10^-9 mol?L^-1和1.0×10^-10 mol?L^-1, 平均加标回收率分别为98.9%和98.1%,相对标准偏差（n=6）分别为2.72%和2.45%。结论：用碳纤维电极同时检测Zn²⁺和Cd²⁺的方法具有简便、灵敏和准确的特点。     

高效液相色谱法检测米雅利桑爱儿A颗粒中B族维生素

 目的:测定米稚利桑爱儿A颗粒中维生素B₆、泛酸钙、维生素B_{2的含量。方法:米用高效液相色谱法，用Waters CLC-ODS柱，以乙睛-0. 25 mol· L^-1磷酸二氢钾(pH 3.2±0.4)为流动相梯度洗脱，对乙酰氨基酚为内标，泛酸钙检测波长为210 nm，维生素B6、内标和维生素B2的检测波长为280 nm。结果:维生素B6}、泛酸钙、维生素B₂ 分别在20～130μg·ml^-1( r = 0.999 3,n=6),20～130μg·ml^-1(r =0.998 6,n=6), 5～30μg · ml^-1(r = 0.999 3, n=6)浓度范围内呈线性关系。维生素B6、泛酸钙、维生素B₂平均回收率分别为99.7%,RSD=0.86%;100.0%,RSD=0.95% ;98.2%, RSD=1.02%。结论:方法简便、快速、准确、重现性好。     

原子吸收光谱法测定人工肾透析液的含量

 目的：直接测定人工肾透析液中Na⁺,K⁺,Casup>2+,Mgsup>2+的含量。方法：采用原子吸收光谱法(AAS)，同时加入10g·L^-1CsCl和10g·L^-1La(NO3)3消除K⁺,Na⁺，Casup>2+,Mgsup>2+共存时的增感效应。结果：方法回收率分别为(102.1±1.60)%(Na+)，(101.0±1.32)%(K⁺)，(99.8±1.78)%(Casup>2+)，(100.5±1.21)%(Mgsup>2+)。结论：该测定方法简单、快速，结果准确可靠。     

三妙胶囊治疗前列腺增生药理研究

目的 :观察三妙胶囊对丙酸睾丸素致大、小鼠前列腺增生的影响。方法 :皮下注射丙酸睾丸素 (雄性小鼠 5g·kg^-1·d^-1,21d ;雄性大鼠 3g·kg^-1·d^-1,14d)造成前列腺增生动物模型。给药组分别灌胃 :三妙胶囊组小鼠 3 6.3 ,18.2 g·kg^-1,大鼠 25.2,12.6g·kg^-1;前列康组 1.9g·kg^-1。正常对照组和模型对照组灌胃等体积生理盐水。末次给药后 24h ,测定雌二醇 (E2)、碱性磷酸酶 (AKP)和血清锌 (Zn²⁺) ;处死动物 ,取前列腺称重 ,计算前列腺指数并进行病理学检查。结果 :三妙胶囊可降低前列腺增生模型大、小鼠的前列腺湿重和前列腺指数 (P <0.01) ,提高血清E2活性 (P<0.01) ,抑制血清Zn²⁺浓度 (P<0.01)。结论 :三妙胶囊有治疗前列腺增生作用 ,其机理可能与提高血清E2活性、降低Zn2 +浓度有关。     

离子对高效液相色谱法测定复方甲硝唑片中甲硝唑和维生素B6含量

 目的：建立同时测定复方甲硝唑片中甲硝唑和维生素B₆含量的离子对HPLC法。方法：采用ODS色谱柱,磷酸二氢钾、庚烷磺酸钠溶液（取磷酸二氢钾13.6 g与庚烷磺酸钠1.0 g,加水溶解并稀释成1000 ml）-甲醇-三乙胺（85∶15∶0.4）,用磷酸调pH至2.8为流动相;检测波长290 nm,峰面积外标法。结果：甲硝唑和维生素B₆线性范围分别为100～300 μg·ml^-1 （r=0.9999）,5～50 μ·ml^-1（r=0.9999）;平均回收率分别为100.2% (RSD=0.93%),100.4% （RSD=0.44%）,n=6。结论：离子对HPLC法测定复方甲硝唑片中甲硝唑和维生素B₆含量,方法准确,操作简便,回收率高。     

贝那普利预防动脉粥样硬化的实验研究

 目的：研究贝那普利对家兔实验性动脉粥样硬化(As)的预防作用及其机制。方法：建立家兔As模型,观察比较高脂对照组和大剂量贝那普利组(po4mg·kg^-1·d^-1)。小剂量那普利组(po2mg·kg^-1·d^-1)血脂、血浆纤维蛋白原(F)、6-酮-前列环素F_1α(6-keto-PGF_1α)、血栓素B₂(TXB₂)的含量及血压、心率、主动脉病变的差异。结果：三组血脂、Fg和TXB₂含量均无差异。大剂量贝那普利组主动脉As斑块面积及厚度均小于高脂组,并明显升高6-keto-PGF_1α含量,降低收缩压和舒张压(P<0.05),小剂量贝那普利无此作用。结论：大剂量贝那普利可预防家兔实验性As病变,对血脂、Fg和TXB₂含量无影响。这种作用与其升高6-keto-PGF_1α含量和降低血压相关。     

高效液相色谱法同时测定滴鼻剂中盐酸麻黄素和氢化可的松的含量

 目的：用HPLC法同时测定滴鼻剂中盐酸麻黄素氢化可的松的含量。方法：采用C₁₈色谱柱，流动相为甲醇-0.05 mol·L^-1KH₂PO₄-三乙胺（50∶50∶0.2），用磷酸调pH3.7，检测波长257 nm。结果：盐酸麻黄素在360～600 μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好（r=0.9999），回收率101.3%，RSD为1.0%。氢化可的松在36～60μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9998)，回收率101.5%，RSD为1.0%。结论：该方法可同时测定滴鼻剂中盐酸麻黄素氢化可的松含量。     

HPLC同时测定赤芝中4种三萜酸的含量

目的：建立HPLC同时测定赤芝药材中灵芝酸C₂、灵芝烯酸A、灵芝酸A和灵芝酸D含量的方法。方法：采用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.03%磷酸水溶液采用梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长252 nm,柱温35 ℃。结果：灵芝酸C₂、灵芝烯酸A、灵芝酸A和灵芝酸D的线性范围分别为：5.0～50.0 mg·L^-1(r=0.999 9),7.2～72 mg·L^-1(r=0.999 9),11.67～116.7 mg·L^-1(r=0.999 9)和5.32～53.2 mg·L^-1(r=0.999 8);平均回收率(n=3)分别为98.8%(RSD1.5%),99.1%(RSD1.9%),99.5%(RSD1.4%)和98.5%(RSD1.9%)。结论：该方法简便、准确,重复性好,为赤芝药材的质量控制提供了实验依据。     

HPLC同时测定赤芝中4种三萜酸的含量

目的：建立HPLC同时测定赤芝药材中灵芝酸C₂、灵芝烯酸A、灵芝酸A和灵芝酸D含量的方法。方法：采用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.03%磷酸水溶液采用梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长252 nm,柱温35 ℃。结果：灵芝酸C₂、灵芝烯酸A、灵芝酸A和灵芝酸D的线性范围分别为：5.0～50.0 mg·L^-1(r=0.999 9),7.2～72 mg·L^-1(r=0.999 9),11.67～116.7 mg·L^-1(r=0.999 9)和5.32～53.2 mg·L^-1(r=0.999 8);平均回收率(n=3)分别为98.8%(RSD1.5%),99.1%(RSD1.9%),99.5%(RSD1.4%)和98.5%(RSD1.9%)。结论：该方法简便、准确,重复性好,为赤芝药材的质量控制提供了实验依据。     

高效液相色谱法同时测定氯霉素地塞米松滴眼液两组分的含量

 目的：采用HPLC法测定氯霉素地塞米松滴眼液中氯霉素和地塞米松磷酸钠的含量。方法：采用C₁₈色谱柱，流动相为甲醇-0.025 mol·L^-1的磷酸二氢钠溶液（48∶52 V/V），检测波长为240 nm。结果：氯霉素的线性范围为75～175 μg·ml^-1，r＝0.9994，回收率99.66％。RSD=1.03％；地塞米松磷酸钠的线性范围为15～35 μg·ml^-1；r＝0.9992，回收率104.24％。结论：该方法简便、准确，可同时测定滴眼液中氯霉素和地塞米松磷酸钠的含量。     

反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中美洛昔康浓度及其药动学

 目的：建立血浆中美洛昔康浓度的高效液相色谱分析方法,用此方法对大鼠灌胃给药，对3种剂量的美洛昔康进行药动学研究。方法：色谱条件：色谱柱为C₁₈ (4.6 mm×150 mm，5 μm)，流动相为甲醇-水-冰醋酸-乙腈(600∶500∶20∶50), 流速1.0 ml.min^-1，检测波长355 nm,柱温40℃, 血药浓度-时间数据采用PKBP-N1程序拟合其药动学参数。结果：血浆中内源性杂质不干扰美洛昔康及其分解产物的测定，血浆中回收率为98.80%，RSD为1.78%。日间RSD＜7.17%,日内RSD＜6.69%。大鼠灌胃给药1.0,2.0，6.0 mg·kg^-1美洛昔康后,血药浓度时间曲线符合二室开放模式,并由此测得美洛昔康在大鼠体内的半衰期分别为43.25,38.60,37.10 h,达峰时间分别为2.02,1.90,1.94 h。峰浓度分别为2.52,4.85,10.62 μg·ml^-1，AUC分别为112.8，142.2，412.0 μg·h·ml^-1。结论：本方法简便,准确,能较好地满足美洛昔康血药浓度监测及药动学的要求。     

双氯芬酸钾双层片与普通片在兔体内的生物等效性

 目的：研究双氯芬酸钾（DP）双层片在兔体内的药动学特征。方法：8只家兔分别单剂量口服DP双层片（Ⅰ）和普通片凯扶兰（Ⅱ）各50 mg，采用高效液相色谱法测定不同时间的血药浓度。经TOPFIT程序拟合，求算药动学参数。结果：Ⅰ和Ⅱ的药动力学参数MRT分别为（19.7±3.0）h和（7.7±0.9）h，t_1/2为（10.6±1.1）h和（3.2±1.0）h，T_max为（8.5±3.0）h和（5.0±1.2）h，C_max为(16.6±3.7) μg·ml^-1和(26.6±4.1) μg·ml^-1，AUC为(266.4±45.1) μg·h·ml^-1和（9237.0±19.1）μg·h·ml^-1。DP双层片和普通片的MRT、t_1/2、T_max、C_max差异有显著性，AUC、CL差异无显著性。体内吸收分数与体外释放度之间线性关系良好，r=0.9885。结论：双层片具有明显的缓释特征，吸收程度与普通片等效。     

依帕司他血药浓度测定方法及其在药代动力学研究中的应用

 目的：建立反相高效液相色谱法测定血装中依帕司他浓度,研究该药物在人体内的药代动力学。方法：血浆样品用甲醇沉淀蛋白后直接进样,选地西泮作内标。采用μBpndapak C〈sub〉18〈/sub〉（300 mm×3.9 mm,10 μm）柱,流动相：甲醇-0.O1 mol·L〈sup〉-1〈/sup>K〈sub〉3〈/sub〉PO〈sub〉4〈/sub〉-乙腈(50：37：13),流速1.4 ml·min〈sup〉-1〈/sup>,设程序波长0～4 min 389 nm,4～7 min 237 nm UV检测。结果：该方法回收率为101.09%～105.97%,最低检测浓度为5.1ng·ml〈sup〉-1〈/sup>,日内RSD<4.48%(n=5),日间RSD<4.53%(n=5),线性范围：20.4～12750 ng·ml〈sup〉-1〈/sup>。10例健康青年志愿者单剂量po,依帕司他片剂50 mg后,达峰时t〈sub〉max〈/sub〉为(1.79士0.57)h,峰血药浓度c〈sub〉max〈/sub〉为(3840.6±968.5)ng·ml〈sup〉-1〈/sup>,消除半衰期t〈sub〉1/2β〈/sub〉为((1.11±0.35)h。结论：本法快速,准确,灵敏,能较好地满足依帕司他临床药代动力学研究需要。     

高效液相色谱法同时测定复方氯唑沙宗片中两组分血药浓度

 目的 建立同时测定血清中复方氯唑沙宗片两组分浓度的HPLC。方法 血清样品经饱和硫酸锌溶液沉淀,乙醚提取,氮气挥干,加甲醇溶解进样,以Hypersil ODS C₁₈色谱柱,甲醇-水(45∶55)为流动相,非那西丁为内标,在波长280 nm处检测。结果 氯唑沙宗在1～32 μg·ml^-1、对乙酰氨基酚在1.2～38.4 μg·ml^-1浓度范围内,样品峰面积比与浓度呈良好线性关系,r氯=0.9994,r对=0.9999。最低检测浓度分别为0.5和0.6 μg·ml^-1,平均回收率分别为95.3%和91.6%。RSD 分别为6.0%,5.1%。结论 此法可同时测定复方氯唑沙宗片两组分的浓度,为药物动力学和生物利用度研究提供了简单可行的方法。     

HPLC同时测定氯氮平及其代谢物去甲氯氮平血药浓度

 目的:建立同时测定血清中氯氮平及其代谢物去甲氯氮平的浓度的高效液相色谱法(HPLC)。方法:血清乙醚提取浓集后进样,采用反相C₁₈柱,以甲醇-水-四甲乙二胺-冰醋酸(68∶32∶0.40∶0.35)为流动相,地西泮为内标,在波长254nm处测定。结果:氯氮平和去甲氯氮平的线性范围分别为50ng·ml^-1～1500ng·ml^-1和20ng·ml^-1～1000ng·ml^-1,两者平均回收率均大于85%,日内和日间误差小于4%。结论:本法简便、灵敏、准确,适用于治疗药物监测和药动学研究。     

HPLC同时测定布洛伪麻颗粒剂中布洛芬和伪麻黄碱含量

 目的 建立同时测定布洛伪麻颗粒剂中布洛芬和盐酸伪麻黄碱含量的反相HPLC测定法。方法 以双氯芬酸为内标;色谱柱为Shim-pack CLC-DOS柱,流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液(含0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾和0.01 mol·L^-1磷酸氢二钾)(64∶36),流速为1.0 ml·min^-1,定时程序控制检测波长(0～6 min为215 nm,6～10 min为260 nm);进样量20 μl。结果 布洛芬和盐酸伪麻黄碱分别在0.02～0.40 mg·ml^-1和3.0～60.0 μg·ml^-1范围内线性关系良好,相关系数分别为r=0.9997和r=0.9998。两组分的回收率分别介于98.02%～101.12%和97.71%～101.15%之间,日内和日间 RSD 均低于5%。结论 本法可同时测定布洛伪麻颗粒剂中布洛芬和盐酸伪麻黄碱的含量,而且简便、准确、快速,可用于多批样品的含量测定及质量控制。     

RP-HPLC测定正常人口服复方川芎汤剂后血清中游离的阿魏酸

 目的：建立一种测定正常人po复方川芎汤剂后血清中游离阿魏酸（FA）浓度的方法。方法：采用高效液相色谱法，以香豆素为内标（42μg·ml^－1），甲醇 醋酸 水（38∶0．3∶61．7）为流动相，Lichrosorb RP₁₈（150mm×4．6mm，5μm）为分析柱，紫外检测波长为320nm。取500μl血清，加入内标，水浴（90℃）5min，超微搅拌器搅拌15s，离心（3000r·min^－1）15min取上清液进样分析。结果：FA的检测限为6ng·ml^－1（S／N＝3．5），最低检出血清浓度为8．8ng·ml^－1，线性范围为17．6ng·ml^－1～1408．0ng·ml^－1，r＝0．9995，方法平均回收率为（99．04±2．26）％，日内精密度RSD≤4．10％，日间精密度RSD≤5．82％。结论：本法简便、快速、灵敏，内源性物质及复方各组分药物不干扰测定。另还测定了正常人应用本口服液后的药动学参数。     

反相离子对色谱法测定人血浆中芬太尼浓度

 目的：建立测定人血浆中芬太尼(Fen)浓度的HPLC测定法，为临床Fen的药动学研究提供科学的分析技术。方法：Fen测定以μ-Bondapak-C₁₈为固定相,水(含0.005mol·L^-1.辛烷磺酸钠和0.01mol·L^-1磷酸) 乙腈(69∶31)为流动相，以阿芬太尼为内标物，紫外检测波长为220nm。结果：验证实验表明，Fen与内标物分离良好，血浆中Fen的平均回收率为99.97%，日内、日间的RSD值均小于8%。血药浓度在10ng·ml^-1～200ng·ml^-1范围内与峰面积呈线性关系，r=0.9996。本方法最低检测浓度为5ng·ml^-1。结论：本方法具有较高的准确度，方法灵敏，专一性好，适用于临床Fen血药浓度的测定。