舌癌组织及细胞系中细胞周期蛋白D基因的转录与蛋白的合成

目的:研究舌部鳞状细胞癌的细胞系以及根据不同的分化程度和是否有淋巴结转移来分类的舌癌组织中细胞周期蛋白D(cyclinD)的基因转录和蛋白合成情况。方法:应用免疫组织化学ABC法检测cyclinD蛋白合成;原位杂交技术检测cyclinD基因的转录。结果:1cyclinD单克隆抗体标记后,经免疫组织化学染色78.6%(33/42)显示cyclinD蛋白过度表达;2cyclinD探针随机引物标记,经原位杂交后显示,cyclinDmRNA的阳性表达率为66.7%(28/42);3cyclinD的表达与是否有淋巴结的转移有相关性,12例有转移的舌癌组织中通过免疫组织化学染色和原位杂交染色后分别有10例(83.3%)和9例(75%)有cyclinD的表达,而在30例无淋巴结转移的舌癌组织中,分别仅有13例(43.3%)和11例(36.7%)出现cyclinD的表达。结论:cyclinD在舌癌中有高水平的表达,且临床分期越晚,恶性程度越高,其表达率也较高,提示cyclinD的过度表达与舌癌的特性密切相关;cyclinD标记指数与舌癌是否有淋巴结转移呈正相关。cyclinD阳性检出率有助于判断舌癌恶性程度及预测肿瘤的转移,在基因诊断方面确定肿瘤生物学特性的诊断标准     

高迁移率族蛋白在舌癌组织中的表达及意义

目的:探讨舌癌组织中高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达情况。方法:采用免疫组化SABC方法和高分辨率溶解法,检测43例舌癌组织、11例正常舌组织中HMGB1蛋白及mRNA的表达情况,分析其与肿瘤大小、分化程度、转移和复发的关系。结果:HMGB1蛋白在舌癌组织中表达强阳性率为72.1%,弱阳性率为27.9%,在正常舌组织中弱阳性表达(P<0.01),HMGB1mRNA在舌癌组织的定量明显高于正常组织(P<0.05);HMGB1表达强度与舌癌分化程度无关(P>0.05),与病灶大小、淋巴结转移、临床分期、复发相关(P<0.05)。结论:HMGB1在舌癌组织中呈强阳性表达,可作为舌癌复发、转移及预后的判定指标之一。     

P16蛋白在颊癌及癌前病变中的表达及临床意义

目的:探讨P16在口腔颊癌中的表达特点及其与临床病理和预后的关系。方法:采用免疫组化和图像分析技术,检测32例颊黏膜白斑和扁平苔藓,30例颊癌组织中P16蛋白的表达水平,并将结果与临床分期、转移等指标进行统计分析。结果:正常颊黏膜鳞状上皮和上皮单纯性增生中均有P16蛋白表达为100%(10/10,22/22);上皮异常增生中P16蛋白的表达率为90.0%(9/10);颊癌P16的表达率为40.0%(12/30),颊癌P16的表达率比上皮异常增生明显降低(P(0.01)。P16缺失表达的患者绝大多数处于临床Ⅲ、Ⅳ期(16/18)。临床Ⅲ、Ⅳ期病例P16蛋白表达水平比Ⅰ、Ⅱ期者明显降低(P(0.01);有颈淋巴结转移组P16蛋白阳性表达率低于无转移组(P(0.05)。结论:P16蛋白的表达与颊癌临床分期及颈淋巴结转移有关;P16蛋白缺失时,颊癌预后较差。P16可作为临床评估颊癌浸润、转移和预后的参考指标。     

口腔鳞癌中Rb/cyclinD1/p16通路表达及其病理意义

目的：探讨口腔鳞癌(OSCC)中Rb／cyclinD1／p16通路表达及其病理意义。方法：使用免疫组化方法在37例OSCC标本中检测Rb、cyclinD1、p16蛋白表达,并与患者临床病理参数进行相关性分析。结果：Rb、p16、cyclinD1阳性表达率分别为76％、49％和57％;Rb和p16表达呈负相关(P=0．02);cyclinD1表达与肿瘤大小(P=0．02)和淋巴结转移(P=0．01)呈正相关;p16表达与年龄呈负相关(P=0．02)。结论：1)OSCC中和Rb和p16之间可能存在的调控机制;2）p16缺失是OSCC发生中的早期事件;3)cyclinD1对肿瘤的生长作用大于对肿瘤的发生作用,与OSCC的增殖和淋巴结转移关系密切,并可能作为标志物对OSCC的预后和转移作出评估。     

Livin、Bcl-2在舌癌中的表达及临床意义

目的:探讨舌癌组织中Livin蛋白的表达及其与Bcl-2蛋白表达的相关性。方法:采用免疫组织化学法(SABC法)检测Livin、Bcl-2在舌癌和正常舌黏膜组织中的表达。应用SPSS 13.0统计软件对数据进行统计学分析。结果:舌癌与正常舌黏膜组织中Livin蛋白阳性表达率分别为68.89%和10%,二者有非常显著的差异(P<0.01);Livin的高表达与舌癌组织学分化程度相关(P<0.05),与颈淋巴结转移密切相关(P<0.05)。舌癌与正常舌黏膜组织中Bcl-2蛋白阳性表达率分别为60.0%和0,二者有非常显著的差异(P<0.01);经Spearman等级相关分析,Livin与Bcl-2之间呈正相关(r=0.353,P=0.027)。结论:Livin蛋白在舌鳞癌组织中高表达,显著高于正常舌黏膜组织:Bcl-2蛋白在舌鳞癌组织中高表达,而在正常舌黏膜组织中无表达:在舌鳞癌组织中Livin与Bcl-2蛋白表达呈正相关。     

CCND1、ORAOV1、ERCC1在舌鳞状细胞癌中的表达和临床意义

目的:通过观察 CCND1、ORAOV1、ERCC1在舌鳞状细胞癌中的表达情况,探讨CCND1、ORAOV1、ERCC1与舌癌发生、发展的相关性。方法:应用免疫组织化学染色方法检测38例舌鳞状细胞癌组织芯片及4例正常舌组织芯片中CCND1,ORAOV1,ERCC1蛋白表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。结果:舌癌组织中CCND1蛋白的阳性表达率明显高于正常舌组织(P<0.05),但其过表达水平与正常舌组织相比无统计学差异;CCND1阳性表达率及过表达水平与患者年龄、性别、肿瘤组织学分级及肿瘤有无淋巴结转移之间无明显相关。ORAOV1在舌癌组织中的表达明显升高(P<0.05),且与肿瘤有无淋巴结转移之间显著相关(P<0.05);ORAOV1在舌癌中的过表达水平与对照组相比无明显差异,但随着肿瘤分化程度的降低ORAOV1的过表达水平显著上升(P<0.05)。ERCC1蛋白在舌鳞状细胞癌组织中的阳性表达率及过表达水平均明显低于正常舌组织(P<0.05),并均与肿瘤有无淋巴结转移之间显著相关(P<0.05);且与高、中分化组相比,低分化组ERCC1蛋白过表达水平上升,但无统计学差异。结论:在舌鳞状细胞癌组织中CCND1和ORAOV1显著高表达,ERCC1表达显著降低,三者的检测对早期诊断舌癌具有指导意义。     

CD44V6、MMP-9在舌癌中的表达及其意义

目的：观察CD44V6和MMP-9在舌癌（tongue squarnous cell carcinomas,TSCC）组织中的表达及其与临床病理因素和预后的关系。方法：采用免疫组织化学PV9000法检测60例舌癌、21例转移淋巴结及15例癌旁正常组织中CD44V6和MMP-9的表达。结果：CD44V6在舌癌中的阳性表达率略低于癌旁组织,无显著意义;MMP-9在舌癌中的阳性表达率明显高于癌旁正常组织（P〈0.05）,并与舌癌的组织学分级呈正相关（P〈0.05）;在有颈淋巴结转移组中的舌癌组织CD44V6和MMP-9阳性表达率明显高于无颈淋巴结转移组（P〈0.05）;舌癌中CD44V6和MMP-9表达强阳性者有4例复发（5年内）。结论：CD44V6和MMP-9在舌癌组织中的表达与颈淋巴结转移密切相关,可作为评价舌癌颈淋巴结转移和预后的生物学指标。     

CXCR4在舌癌及转移颈淋巴结组织中的表达及意义

目的检测CXC趋化因子受体4（CXCR4）mRNA及其蛋白在舌癌组织及转移颈淋巴结组织中的表达水平．并探讨其在舌癌预后和颈淋巴结转移中的作用。方法采用免疫组化SABC法检测41例舌癌组织及41例颈部淋巴结标本中CXCR4的表达及定位．用半定量RT．PCR检测各标本CXCR4的mRNA相对表达值。结果免疫组化结果显示，舌癌原发灶和颈淋巴结转移灶表达CXCR4，正常舌组织不表达CXCR4或仅呈弱阳性表达，正常淋巴结不表达CXCR4：RT-PCR结果显示．舌癌以及转移淋巴结表达CXCR4 mRNA，正常舌组织和正常淋巴结不表达或低表达CXCR4 mRNA。结论舌癌组织及转移颈淋巴结中有CXCR4 mRNA及蛋白的表达，其表达与舌癌的预后及颈淋巴结的转移有关。     

舌癌P53蛋白的表达及p53基因的突变

目的:检测舌癌中P53蛋白表达和p53基因突变及其与临床病理的相关性。方法:应用免疫组织化学和聚合酶链反应—单链构象多态性分析(PCR-SSCP)检测10例舌白斑和32例舌癌,并结合临床资料进行分析。结果:PCR-SSCP检测舌白斑和舌癌p53基因突变率分别为20.0%(2/10)和59.4%(19/32)。突变的19例舌癌,12例出现第5外显子突变,7例出现第6外显子突变,2例出现第7外显子突变,15例出现第8外显子突变。其中单外显子突变10例,多外显子突变9例。免疫组化结果表明,舌白斑和舌癌P53蛋白阳性率分别为20.0%(2/10)和46.9%(15/32);P53的表达与临床分期及有无淋巴结转移密切相关。临床I、Ⅱ期病例P53蛋白表达水平低于Ⅲ、IV期病例(P<0.05)。无颈淋巴结转移病例的P53蛋白表达水平低于有转移的病例(P<0.05)。采用免疫组化和PCR-SSCP检测舌癌的符合率为75.0%(24/32)。结论:舌癌发生过程中p53基因有突变,最多发生在第8外显子,其次为第5、6外显子;P53蛋白阳性的舌癌患者多处于临床晚期,易发生淋巴结转移,且预后较差。     

p53上调凋亡调控因子在舌鳞癌中的表达及临床意义

目的：观察p53上调凋亡调控因子(p53 up-regulated modulator of apoptosis,PUMA)在舌鳞癌组织、舌癌旁组织及正常舌黏膜组织中的表达,探讨其在舌鳞癌发生、发展中的作用及临床意义。方法：通过免疫组化检测30例舌鳞癌组织、13例舌癌旁组织及10例正常舌黏膜组织中PUMA的表达水平,分析PUMA在舌鳞癌中的表达与临床分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移之间的关系。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果：PUMA在舌鳞癌组织、舌癌旁组织及正常舌黏膜组织中的阳性表达率分别为36.67%、53.85%和80.00%,3组之间PUMA表达均有显著差异(P<0.05)。淋巴结转移组中PUMA的阳性表达率为18.18%,而无淋巴结转移组中PUMA的阳性表达率为47.37%,2组差异显著(P<0.05)。而在不同年龄、性别、临床与病理分期、肿瘤分化程度的舌鳞癌组织中,PUMA的表达差异无显著性(P>0.05)。结论：PUMA蛋白表达降低在舌鳞癌的发生、发展及转移过程中具有重要作用,对判断舌鳞癌的预后及治疗有一定的指导意义。     

Immunoexpression of matrix metalloproteinase-2 and matrix metalloproteinase-9 in the metastasis of squamous cell carcinoma of the human tongue

Background: Squamous cell carcinoma of the tongue has frequent lymph node metastases and poor prognosis. Matrix metalloproteinase‐2 (MMP‐2) and matrix metalloproteinase‐9 (MMP‐9) are reported to degrade basement membrane, facilitating invasion and metastasis. This study determined the expression of MMP‐2/MMP‐9 in primary tongue cancer with or without cervical metastases and analysed the significance of such expression in relation to the presence or absence of metastases. Methods: Expressions of MMP‐2/MMP‐9 were detected by immunohistochemistry in 10 specimens of normal oral mucosa, 20 lymph node‐negative tongue cancers, 41 lymph node‐positive tongue cancers and their metastasized tumours in cervical lymph nodes. Results: MMP‐2/MMP‐9 expression was seldom found in normal epithelium. In lymph node‐negative tongue cancer, 45% and 40% of these primary tumours were positively stained for MMP‐2/MMP‐9, respectively. Importantly, in lymph node‐positive tongue cancer, 71% and 79% of these primary tumours were positive for MMP‐2/MMP‐9, respectively. Overexpression of MMP‐2/MMP‐9 was present in the metastatic lymph nodes. Conclusions: Our results imply that MMP‐2 and/or MMP‐9 play an important role in invasion and metastasis in tongue cancer, and that analysis of MMP expression and/or activity in primary tumours may have a predictive value for the actual or potential presence of cervical metastases.     

ALDH1A1在舌癌及淋巴结中的表达及其临床意义

目的:检测乙醛脱氢酶1A1(aldehyde dehydrogenase1A1, ALDH1A1)在舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma, TSCC)原发灶及颈淋巴结标本中的表达水平,分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法:采用免疫组化SP法检测50例舌鳞状细胞癌原发灶和10例正常舌组织、29例转移淋巴结和9例未转移淋巴结标本中ALDH1A1的表达水平。结果:舌鳞状细胞癌原发灶中ALDH1A1表达高于正常舌组织,差异有统计学意义(P＜0.05);转移淋巴结中ALDH1A1表达高于未转移淋巴结,差异有统计学意义(P＜0.05)。在舌鳞状细胞癌原发灶中,ALDH1A1表达与患者的临床分期、有无淋巴结转移、原发灶大小及组织学分级有关(P＜0.05);在淋巴结中,ALDH1A1表达与患者的临床分期、有无淋巴结转移及原发灶大小有关(P＜0.05)。Kaplan-Meier分析表明舌鳞状细胞癌原发灶ALDH1A1高表达提示不良预后。结论:ALDH1A1的表达与舌鳞状细胞癌的生物学行为及预后密切相关,有望作为舌鳞状细胞癌预后相关因子,可能为舌鳞状细胞癌提供新的治疗靶点。     

舌鳞癌淋巴管生成与颈淋巴结转移的关系

目的：研究舌鳞癌淋巴管生成及淋巴管密度／淋巴管相对面积（LVD／LVA）与颈淋巴结转移的关系，为术前准确判断颈淋巴结状况提供参考。方法：口腔颌面外科接受舌癌切除及颈淋巴清扫术的标本63例：对HE染色阴性的淋巴结，应用细胞角蛋白CK（AE1／AE3）标记检测微转移，以免疫组织化学检测结果判断淋巴结转移；以LYVE—1作为淋巴管内皮标志物，研究舌癌淋巴管生成参数——淋巴管密度（LVD）和淋巴管面积（LVA）与颈淋巴结转移及其他临床病理变量（年龄、性别、T分类、病理分级、浸润方式）之间的关系。应用SPSS10．0统计软件包对所得数据进行Mann-whitney U检验。结果：应用细胞角蛋白CK（AE1／AE3）标记免疫组化法检测微转移，提高了淋巴结转移的检出率；舌癌实质内未见到LYVE—1^＋的脉管结构，LYVE—1^＋脉管多位于癌周，癌周LVD、LVA与颈淋巴结转移及其他临床病理变量均无关。结论：舌癌癌周淋巴管密度（LVD）、淋巴管面积（LVA）与颈淋巴结转移及其他临床病理变量均无关，不宜作为术前评估淋巴结状况的指标。     

Expression of cIAP-1 correlates with nodal metastasis in squamous cell carcinoma of the tongue

Cellular inhibitor-of-apoptosis protein 1 (cIAP-1) is a member of the inhibitor-of- apoptosis protein family, which predominantly regulates apoptosis. It has been suggested that expression of cIAP-1 correlates with certain clinicopathological features. The possible significance of cIAP-1 expression in cervical lymph node metastasis of tongue squamous cell carcinoma (SCC) is investigated. Seventy-five tongue SCCs were analyzed by immunohistochemistry. cIAP-1 immunoreactivity patterns were nuclear in 38 (51%), cytoplasmic in 47 (63%), and concurrent in 37 (49%) cases. Nuclear, cytoplasmic and concurrent cIAP-1 immunoreactions were significantly correlated with lymph node metastasis in tongue SCCs (P=0.0011, 0.0012, and 0.0006, respectively). The cleaved caspase-3, which is a marker of tumor apoptosis, and Ki-67 index, which is a marker of tumor proliferation, were immunohistochemically examined in 21 tongue SCCs with concurrent nuclear and cytoplasmic cIAP-1 expression and with metastasis, and in 23 tongue SCCs without concurrent nuclear and cytoplasmic cIAP-1 expression and without metastasis. Concurrent cIAP-1 expression was inversely correlated with caspase-3 (P=0.0066), but was positively correlated with Ki-67 expression (P=0.0028). The mode of invasion was associated with lymph node metastasis (P=0.014) and differentiation (P=0.013), but was not correlated with cIAP-1 expression. There was no statistically significant correlation between nuclear or cytoplasmic cIAP-1 expression and the clinicopathological factors of gender, age, clinical stage or differentiation. These results suggest that both patterns of cIAP-1 are useful markers for predicting cervical lymph node metastasis in tongue SCC.     

Prediction of occult cervical lymph node metastasis in patients with stage I -II squamous cell carcinoma of the oral cavity

The presence of lymph node metastasis is the most important prognostic factor in oral cancer. The purpose of this study was to find useful markers for predicting occult cervical lymph node metastasis in patients with stage I or II squamous cell carcinoma of the oral cavity. We investigated 6 clinicopathologic factors and 2 genetic markers to predict late or occult cervical metastasis in 33 patients with stage I and II oral squamous cell carcinoma who underwent partial glossectomy through the mouth without elective neck dissection. In this study, we performed fluorescence in situ hybridization (FISH) with specimens obtained by fine-needle aspiration biopsies (FNA biopsies) of primary oral cancer material, to investigate numerical aberration of the gene. Late cervical lymph node metastasis occurred in 16 of the 33 patients (48.5%) during follow-up after treatment of the primary tumor. Factors significantly associated with the development of cervical metastasis were the mode of invasion (p = 0.009), cyclin D1 (p = 0.003) and EGFR numerical aberration (p = 0.024). The rate of disease-free survival from metastatic disease was significantly lower in patients with mode of invasion 4 C-4 D than in those with 1-3, and was significantly lower in patients with cyclin D 1 or EGFR gene numerical aberrations than in those without such aberrations (log rank test, p = 0.0064, p = 0.0016 or p = 0.0150). Our results indicate that patients with stage I - II squamous cell carcinoma of the oral cavity with the mode of invasion 4 C or 4 D, cyclin D 1 and EGFR gene numerical aberration should be considered a high-risk group for late cervical lymph node metastasis.     

40例舌癌组织VEGF表达及微血管密度观察

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)表达及微血管密度(MVD)与舌癌组织临床病理指标的关系.方法:40例手术切除的舌癌原发病灶蜡块标本常规切片,免疫组化染色法观察各标本VEGF表达及MVD.结果:VEGF阳性表达的舌癌组织有较高的微血管密度(p＜0.01);VEGF表达和MVD在淋巴结转移组间有显著性差异(p＜0.01)、病理分型组间有显著性差异(p＜0.05),而在原发病灶临床分级组间差异无统计学意义(p＞0.05).结论:VEGF表达和MVD与舌癌病理分型及淋巴转移关系密切,可作为预测性检测指标.     

兔舌癌哨位淋巴结C/Gd复合物间质磁共振造影的实验研究

目的:探讨新型显影剂C/Gd纳米复合物间质磁共振造影（IMRLG）诊断兔VX2舌癌模型颈部哨位淋巴结转移的应用价值。方法:将VX2癌组织块植入16只健康新西兰大白兔左侧舌缘。25 d后,于兔双侧舌缘黏膜下注入造影剂C/Gd纳米复合物0.25 mL。分别于注射前及注射后5、10、15、20、30、40 min及24 h进行磁共振淋巴成像。计算特定时间节点的信号强化率(E%),定位哨位淋巴结,观察淋巴系统。注射造影剂24 h后,于双侧舌下黏膜注射0.2 mL亚甲蓝,行活体淋巴染色,解剖颈部淋巴结,行组织病理学检查。采用SPSS19.0软件包对数据进行统计学分析。结果:成功建立兔VX2舌癌模型16只（16/16）,其中发生淋巴结转移16只（16/16）。注射造影剂后10 min,肿瘤侧与对照侧淋巴结磁共振成像的E%具有显著差异（P<0.05）。IMRLG判断转移哨位淋巴结18个,在亚甲蓝活体染色下,解剖出淋巴结32个,其中病理学检测转移淋巴结17个,IMRLG的准确率为94.45%（17/18）,两者诊断SLN转移无统计学差异（P>0.05）。结论:应用C/Gd纳米复合物行IMRLG,可较准确地判断兔舌癌哨位淋巴结状况,为判断舌癌淋巴结转移提供了新的思路,有潜在应用价值。     

舌鳞癌组织及转移淋巴结中MT和Cu/Zn-SOD的表达及意义

目的 探讨金属硫蛋白(metallothionein,MT)及铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)在舌鳞癌组织和淋巴结中的表达及其意义.方法 用免疫组化方法,观察41例舌鳞状细胞癌组织和颈淋巴结中MT和Cu/Zn-SOD的表达、定位,并进行定量分析和比较.结果 舌鳞状细胞癌标本中,有淋巴结转移的原发病灶与无淋巴结转移的原发病灶MT和Cu/Zn-SOD表达的差异有统计学意义.结论 MT和Cu/Zn-SOD表达与肿瘤的分化程度和转移相关.     

iASPP在舌鳞癌组织中的表达及意义

目的：探讨iASPP在舌鳞癌组织中的表达及意义。方法临床收集16例舌鳞癌癌旁组织、71例舌鳞癌组织,通过免疫组化检测 iASPP的表达情况,并对其表达水平进行统计学分析。结果在舌癌旁组织中, iASPP少量位于棘层细胞胞浆中,呈淡黄色颗粒。在舌鳞癌组织中iASPP主要分布于上皮全层,其表达显著高于舌癌旁组织(P<0．05)。不同分化程度及是否淋巴结转移舌鳞癌患者中,iASPP的平均表达水平有显著性差异(P<0．05)。低分化者表达水平最高,高分化者表达水平最低,有淋巴结转移者表达水平高于无淋巴结转移者( P<0．05)。不同临床分期iASPP的表达无显著差异。结论 iASPP表达的改变可能与舌鳞癌的发生发展有关。