重组Calpain蛋白的免疫原性及其诊断上的应用研究

目的研究在大肠杆菌中表达的日本血吸虫Calpain蛋白的免疫原性及其在日本血吸虫诊断上的应用. 方法用重组Calpain蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA法测定特异性IgG抗体的动态变化及其IgG亚型(IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3)产生特征;同时用重组Calpain蛋白作为诊断抗原,粪检血吸虫病阳性患者血清作为一抗,肝吸虫阳性患者血清作为考核交叉反应血清. 结果重组Calpain抗原免疫小鼠后,产生了一个极高的抗Calpain特异性抗体,免疫4周后IgG类抗体达到高峰,与对照组鼠相比较,免疫鼠血清中IgG1, IgG2a, IgG2b特异性抗体也有显著性的上升; Calpain重组抗原血清诊断日本血吸虫和粪检的符合率为100%, 粪检阳性EPG低的个体抗Calpain抗体滴度高, EPG高的患者抗Calpain抗体滴度反而低, 与肝吸虫的交叉反应率为37%. 结论日本血吸虫Calpain是一个具有免疫原性的蛋白,能够激发宿主产生高水平的免疫球蛋白,能够敏感地测定日本血吸虫的感染, 说明Calpain可以发展成为日本血吸虫病的诊断抗原和日本血吸虫疫苗候选分子.     

日本血吸虫31/32kDa重组抗原对小鼠免疫保护性研究

目的：探讨日本血吸虫31／32kDa重组抗原（rSj31/32)抗血吸虫感染的免疫效果。方法：日本血吸虫31／32kDa单克隆抗体免疫筛选的阳性克隆312经IPTG诱导表达，表达产物rSj31/32加福氏佐剂免疫小鼠后进行攻击感染实验。结果：与对照组相比较，rSj31/32可诱导小鼠产生30．1％的减虫率，63．2％的减卵率（P＜0．01），虫卵肉芽肿平均面积和周长均明显降低，rSj31/32免疫能诱导一定水平的抗血吸虫抗体。结论：结果表明，rSj31/32可诱导小鼠产生一定程度的保护免疫力，有可能作为血吸虫疫苗候选抗原分子。     

日本血吸虫抗体动态变化SAS软件分析

目的应用SAS软件对日本血吸虫感染小鼠血清中可溶性虫卵抗原(SEA)特异性抗体进行动态趋势分析。方法将2种品系小鼠(BALB/c和C 57 BL/6)分别分成3组,感染、治疗和重复感染组,通过内眦静脉定期采集小鼠血样,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中可溶性虫卵抗原IgG抗体水平;应用SAS软件分析检测结果。结果自感染日至感染后20 d,日本血吸虫可溶性虫卵特异性抗体IgG无明显变化(P0.05);感染后30～60 d IgG明显上升,差异有统计学意义(P0.01);感染后70～120 d IgG亦无明显变化(P0.05)。结论 SAS提供的混合线性模型及相应的PROCMIXED过程可以应用于医学数据的相关性分析。     

不同采血部位血清样本对于间接血凝法检测日本血吸虫抗体的一致性研究

目的研究不同采血部位血清样本对间接血凝法检测日本血吸虫抗体的影响。方法对铸造厂生产工艺及照明情况进行调查,对照明改造前后工作场所照度进行检测,并进行比较分析。结果人体不同部位采集的血清样本,用间接血凝法检测日本血吸虫抗体时检测结果一致。对血清样本抗体检测成阴性、阳性的判定不产生影响。结论基于血清样本易获得、采集快捷、减轻病患痛苦等因素,建议可采用手指血采集的血清样本用于血吸虫抗体检测。     

树突状细胞和巨噬细胞提呈日本血吸虫抗原作用

目的　探讨树突状细胞和巨噬细胞提呈日本血吸虫抗原的作用。方法　利用日本血吸虫可溶性虫卵抗原 (SEA)致敏树突状细胞和巨噬细胞 ,将致敏的细胞免疫小鼠 3次 ,检测血清抗体水平。结果　抗原致敏树突状细胞免疫组小鼠血清平均抗体水平 ( 0 10 6 8± 0 0 16 )高于抗原致敏巨噬细胞免疫组小鼠 ( 0 0 880± 0 0 17) ,且高于未处理树突状细胞免疫组小鼠 ( 0 0 82 5± 0 0 12 )。结论　树突状细胞提呈日本血吸虫抗原的作用强于巨噬细胞 ,是日本血吸虫感染中的主要抗原提呈细胞     

四种血吸虫排泄—分泌抗原的比较

曼氏和日本血吸虫寄生在胃肠道的小静脉内,而埃及血吸虫则寄生在泌尿生殖器的小静脉内,这些吸虫释放出的排泄—分泌抗原直接进入血流被宿主处理,其中一些抗原在肝脏降解成小分子量的非抗原物质而被排泄,另一些抗原则以抗原形式排泄在尿和乳汁中。查出血吸虫特异性抗原的抗体即表示过去或现在有感染,在某些病例中免疫应答的水平与临床表现有相互关系,在宿主中发现血吸虫特异抗原表示有活动性感染,在某些病例中测得的抗原的总量与感染强度有关。     

东方田鼠血清被动转移小鼠对血吸虫的发育及虫卵肉芽肿的影响

实验研究表明，人工感染日本血吸虫尾蚴能穿透东方田鼠的皮肤并移行至肺脏，感染后第１２天虫体发育停滞，逐渐萎缩，至第２０天消失［１］。为了探明东方田鼠血清抗体对血吸虫的作用，１９９６年３月～１１月，我们用东方田鼠血清被动转移小白鼠，观察小白鼠体内血吸虫的...     

人体血吸虫再感染与免疫

在血吸虫病以人群化疗为主要防治对策条件下 ,人群再感染规律的研究被认为是血吸虫病流行病学研究的核心问题。研究表明 ,人体的免疫状况与血吸虫再感染有着密切的关系。流行病学研究发现一种与年龄相关的获得性免疫在血吸虫再感染中起重要作用 ,而对抗血吸虫特异抗原的各种抗体在再感染中的作用进行了深入的研究。其次 ,多数研究认为对血吸虫再感染的免疫力的表达可能是同型抗体介导的“效应免疫应答”与“阻断抗体应答”之间动态平衡的结果 ,也有研究着重于各种同型抗体及 Th2类免疫反应的在血吸虫再感染中的作用。     

酶联免疫双抗原夹心法检测梅毒螺旋体抗体

在我国近年来梅毒的发病率有逐年上升的趋势 ,研制出快速、简便、灵敏且特异的诊断方法是当前的主要研究方向。梅毒螺旋体感染机体后可产生两种抗体 ,一种是抗心磷脂抗体 ,即非特异性抗体 ,亦称反应素。主要检测方法有性病研究实验室试验 (VDRL )和血浆反应素环状卡片试验 (RPR     

日本血吸虫病的免疫诊断现状与研究进展

简要概述了用于检测抗日本血吸虫抗体的理化纯化抗原、免疫纯化抗原、基因重组抗原和抗独特型抗体-内影像抗原等诊断用抗原和用针对日本血吸虫某一抗原组分的单克隆抗体检测日本血吸虫循环抗原的敏感性、特异性和实用性,及改变标记物、载体系统和标本类型等新的血清学诊断方法的研究进展.     

单克隆抗体生物素-亲和素系统诊断日本血吸虫病的研究

目的 探讨TM5．28单克隆抗体-生物素-亲和素系统检测日本血吸虫循环抗原及其诊断效果。方法 制备TM5．28抗日本血吸虫肠相关抗原单克隆抗体,建立单抗-生物素-链霉亲和素检测系统,对各类血清（50份急性血吸虫病人、224份慢性血吸虫病人、49份晚期血吸虫病人;46份血吸虫病治疗前、治疗后6个月和治疗后1年的连续追踪病人;19份华支睾吸虫病人;31份肺吸虫病人;23份乙型肝炎病人;100份正常人）进行检测。结果 检测系统对慢性血吸虫病人和正常人检测的敏感性和特异性分别为83．1％和94．0％,Youden指数为0．771;对急性血吸虫病人的检出率94．0％;对肺吸虫、华支睾吸虫和肝炎病人的交叉反应为12．9、15．8和13．0％。血吸虫病人治疗后6个月和1年的阴转率分别为43．9％和62．1％,其OD值几何均数从治疗前的0．172下降到治疗后6个月的0．081和1年的0．068,下降了60．30％。轻、中感染度慢性血吸虫病人的检出率相近,分别为83．9％和82．1％,重感染度病人的检出率最高达90．00％。结论 该系统对血吸虫病人检测显示了较高的诊断效能和化疗后阴转率,对人群感染状况的判定和个体诊断有一定的应用价值,为日本血吸虫病的免疫诊断和疗效考核提供了一种可行方法。     

人体血吸虫现感染与免疫

在血吸虫病以人群化疗为主要防治对策条件下，人群再感染规律的研究初认为是血吸虫病流行病学研究的核心问题，研究表明，人体的免疫状况与血吸虫再感染有着密切的关系。流行病学研究发现一种与年龄相关的获得性免疫在血吸虫再感染中起重要作用。而对抗血吸虫牧民抗原的各种抗体在再感染中的作用进行了深入的研究。其次，多数研究论地血吸虫再感激免疫力的表达可能是同型抗体介导的“效应免疫应答”与“阻断抗体应答”之间动态平衡     

日本血吸虫成虫吡喹酮用药前后差异表达序列的筛选

目的应用抑制性消减杂交（SSH）技术构建吡喹酮治疗日本血吸虫感染新西兰大白兔前后肝脏内差减cDNA文库,为筛选吡喹酮治疗过程中日本血吸虫体内药物反应分子靶标奠定基础。方法日本血吸虫感染新西兰大白兔,吡喹酮治疗者为实验组,未经吡喹酮治疗者为对照组,应用PCRSelectcDNASubtraction试剂盒进行SSH分析,分别构建正向和反向消减cDNA文库,对文库进行筛选,挑取阳性克隆测序获得差异表达EST或新EST,并进行生物信息学分析。结果从2个消减文库中共筛选到39个有效阳性克隆,其中正向文库22个,反向文库17个,分析表明这些EST编码主要是一些酶及与蛋白质合成和降解相关的蛋白质。结论成功构建日本血吸虫成虫吡喹酮治疗前后消减文库,为进一步研究吡喹酮治疗血吸虫病的分子机制奠定了基础。     

Ⅱ、从小白鼠内脏制取环卵沉淀试验虫卵的方法

前言作者首先就日本血吸虫病的毛蚴制动试验进行了各种研究,报导了本试验对于感染日本血吸虫家兔的血清出现了某种程度的特异性反应,但与非特异性反应的区别并非容易。也就是说在感染家兔血清中毛蚴的运动显然受到抑制,但由于在正常血清中也看到这种抑制现象(只是时间上稍有差异),所以实际判断时难以区别。     

日本血吸虫31/32kDa抗体的检测及其在诊断中的作用

利用纯化日本血吸虫３１／３２ｋＤａ抗原（Ｓｊ３１／３２）与可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）ＥＬＩＳＡ方法检测急、慢性日本血吸虫病血清,以探讨其作为抗原诊断血吸虫病的特异性、敏感性及疗效考核价值。结果急、慢性血吸虫病人血清抗Ｓｊ３１／３２抗体检出率为１００％和９５％,与正常人、肝吸虫和肺吸虫病人血清未出现交叉反应;抗ＳＥＡ抗体检出率为９７．４％和９０％,与正常人和肝、肺吸虫有不同的交叉反应。血吸虫病人治疗后     

免疫吸附法纯化日本血吸虫抗体

免疫吸附法,因其免疫学特异性高,作为纯化抗体的方法,正受到人们重视。我们用本法纯化了日本血吸虫抗体。免疫吸附法是以 Porath 等方法作为标准,制造激活溴化氰(activated CNBr),使不溶性聚合物吸附抗原旦白而分离特异抗体。抗原是使用了日本血吸虫的冻干虫体的生理盐水浸出液(1:100),也就是说,使血清     

HIV与血吸虫共同感染的研究进展

关艾滋病与血吸虫病的研究已较深入，但关于两种病原体共同感染的报道较少。早在1990年就有学者提出血吸虫感染动物产生的抗体能特异地与HIV的一种蛋白质     

东南亚血吸虫病的流行病学与防治

根据病原体和媒介螺蛳,东南亚人体血吸虫可以分为三组:1.以钉螺为中间宿主的日本血吸虫,见于菲律宾和印尼;2.以拟钉螺为中间宿主的湄公血吸虫,见于老挝和柬埔寨;3.类日本血吸虫,泰国及马来西亚有报告。一、日本血吸虫感染     

检查梅毒新方法

梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种通过性接触而传播的疾病。梅毒螺旋体是一种小而纤细的螺旋体状微生物,因其透明不易染色,所以又称为苍白螺旋体。梅毒螺旋体感染人体后,可以产生两种抗体,即针对梅毒螺旋体的特异性抗体,和针对类脂质的非特异性抗体——反应素。通过测定病人血清中特异性和非特异性抗体的存在,为     

人工感染日本血吸虫病胸腺萎缩实验

寄生在宿主肝门静脉和肠系膜静脉的血吸虫成虫以及由雌虫排出的虫卵,在肝脏和肠壁可引起肉芽肿反应。三种主要人体血吸虫:日本、曼氏和埃及血吸虫中,日本血吸虫引起的病症最严重,慢牲晚期患者以肝脏