白癜风患者血清抗黑素细胞抗体的免疫荧光检测

目的建立抗黑素细胞抗体免疫荧光检测方法,测定白癜风患者血清中抗黑素细胞抗体。方法取外科手术后人眼睑正常皮肤,用胰蛋白酶消化后制成细胞悬液,在M2黑色素细胞选择性培养基中培养,每周传代1次,经4～5次传代,以免疫荧光和多巴胺染色检测培养细胞的纯度和生物学特性,转移到明胶包被的玻璃片上生长至70％融合,丙酮固定后,与不同稀释度的白癜风患者和正常对照血清反应,加入FITC标记的兔抗人抗体,观测荧光染色效果。结果黑素细胞能在培养基中选择性生长,经4～5W培养获得纯的黑素细胞,无成纤维细胞和角质形成细胞的污染。19例发展期患者抗黑素细胞抗体阳性15例,抗体阳性率79％;10例高于1：50,5例抗体滴度为1：10。稳定期15例中,抗黑素细胞抗体阳性4例,抗体阳性率27％。结论建立了抗黑素细胞抗体免疫荧光检测方法,白癜风患者血清中有抗黑素细胞抗体,且其滴度与病情发展相关。     

不孕妇女抗精子抗体和抗子宫内膜抗体检测分析

抗精子抗体 (ＡｓＡｂ)、抗子宫内膜抗体 (ＥｍＡｂ) ,在女性体内为同种异体和自身两种抗体 ,是引起女性免疫不孕的重要因素 ,我们通过对 2 17例不孕妇女ＡｓＡｂ和ＥｍＡｂ的检测 ,探讨其临床意义。1　材料与方法1 1　观察对象　本组 2 17例均为门诊病人 ,原发性不孕10 6例 (2 2～ 38岁 ) ,不孕 1年～ 12年。继发性不孕 11例 ,其中反复自然流产 32例 (2 2～ 30岁 ) ,流产次数 2～ 4次 ,人工流产 79例 (2 2～ 2 8岁 ) ,流产次数 1～ 2次。对照组 :30例为体检健康孕妇 (2 3～ 2 8岁 ) ,孕龄 (2 1～ 32周 )。1 2　检测方法　取孕妇静脉血 2ｍ…     

红斑狼疮(SLE和DLE)抗核抗体、抗ENA抗体和抗dsDNA抗体的检测及意义

目的：探讨抗核抗体（ANA）、抗ENA抗体和抗dsDNA抗体在红斑狼疮（SLE和DLE）的实际临床实用价值和特点。方法：ANA和抗dsDNA抗体采用间接免疫荧光检测，ANA检测灵长类动物的肝组织印片和人类上皮细胞（Hep-2细胞）为抗原底物，抗dsDNA抗体的实验基质为血鞭毛虫属的绿蝇短膜虫。抗ENA抗体检测采用酶免疫斑点（条带）实验。结果：ANA在SLE患者阳性率为90．4％，DLE患者为75．0％，dsDNA阳性率为63．5％，ENA总阳性率为84．5％。结论：ANA是诊断红斑狼疮的重要指标，但与病情活动性平行关系，抗dsDNA抗体是SLE活动的重要标志。     

间接血凝法检测抗Sm抗体和抗RNP

应用间接血凝法测定抗Sm抗体和抗RNP抗体。对不同疾病的检测结果表明,我们建立的这种方法与免疫电泳法结果无显著性差异(P〉0.05)。对SLE病45例检测抗Sm抗体阳性率为100％,抗RNP抗体阳性率为91％。抗Sm抗体可作为SLE的特异性标志抗体,抗RNP抗体在RA,PSS,DM,MCTD病人中检出,其中MCTD病23例,抗RNP抗体阳性率高达96％,且凝集效价高,可作为此病诊断的重要依据。     

输血中采用微柱凝胶抗人球蛋白法检测不规则抗体的临床分析

目的分析在输血中采用微柱凝胶抗人球蛋白法检测不规则抗体的意义。方法针对近期需要输血的1983例病例（2010年4月-2012年3月）实施不规则抗体检测,所有病例均采用微柱凝胶抗人球蛋白法,统计阳性率并行抗体分析。结果5例病例的检测结果呈阳性,阳性率统计值0．25％（5／1983）,2例（0．10％）表现为抗-E,1例（0．05％）表现为抗-cE,1例（0．05％）表现为抗-c,1例（0．05％）表现为抗-D。结论在输血中采用微柱凝胶抗人球蛋白法检测不规则抗体具有较高的灵敏性,能有效的减少溶血反应,提高输血安全性。     

抗青霉素抗体引起直接抗球蛋白试验阳性的探讨

目的 探讨血清中存在抗青霉素抗体的输血患的安全输血。方法 患血清标本与4名献血标本经血型检测(ABORh)，直接抗人球蛋白试验、RBC抗体筛选试验、热放散试验、交叉配血试验等方法鉴定。结果 患血液与4名献血标本交叉配血主侧相合，次侧不相合；放散后红细胞与4名献血标本资侧相合；抗人球蛋白实验阴阳性对照结果准确；自身对照阳性。结论 证实患红细胞上具有在抗人球蛋白的实验条件下反应的IgG抗青霉素抗体。     

种间抗—HBs的抗独特型抗体诱导特异性抗—HBs

用亲和层析纯化的马抗-HBs 四次免疫家兔,获得含抗-马抗-HBs 的抗独特型抗体血清。该血清反复通过正常马 IgG 偶联的亲和层析柱,除去血清中的抗同型和抗同种异型抗体后,再通过马抗-HBs 偶联的免疫吸附柱,经洗脱获得抗-马抗-HBs 的抗独特型抗体。用纯化的抗独特型抗体免疫两只家兔,四次免疫后,两只家兔都产生了特异性的抗-HBs,其滴度均为1:512。这说明,种间的抗-HBs 的抗独特型抗体也能模拟 HBsAg诱导抗-HBs。     

抗精子抗体检测在不孕不育中的意义

抗精子抗体是由于男性血睾屏障受损,精子或可溶性抗原逸出,使机体产生抗精子的自身抗体;而女性则由于精子和精浆中的抗原物质进入阴道和子宫被吸收后分泌产生的抗体。AsAb是导致不明原因不孕不育症的主要因素之一。我们检测了152例不明原因不孕不育症患者的AsAb,现将结果报告如下。1对象和方法2000年7月-2005年6月,共检测152例不孕不育症患者,全部为门诊病人,其中,男性76例,女性76例,年龄20~45(平均32·5)岁,其中25~30岁有96例;31~40岁有46例;41岁以上8例。空腹静脉抽血4 m l,用AsAbg酶联免疫诊断试剂盒检测,严格按照说明书操作,试剂由上…     

基因免疫法制备小鼠抗人肝素酶多克隆抗体

目的:利用基因免疫的方法制备抗人肝素酶抗体.方法:用本室构建的表达肝素酶全长质粒pcDNA3.1(+)-HPA为基因免疫载体,免疫6～8周龄雄性BALB/c小鼠,使得质粒上的目的基因在动物体内表达,诱导动物体对DNA编码的外源蛋白产生抗体而获得肝素酶的抗血清,通过间接ELISA方法测定小鼠抗血清效价,Western 印迹鉴定抗血清特异性.结果:获得了效价较高的小鼠抗血清,最高效价可达到1∶5×104;抗体特异性与标准品一致.结论:建立了一种制备肝素酶抗体的新方法.     

驻京总直单位新兵麻疹抗体水平调查

为了掌握驻京总直单位新兵的麻疹抗体水平，为预防工作提供客观依据，我们对驻京总直单位1992年底入伍的560名新兵，进行f麻疹抗体水平调查，现将结果报告如下。对象与方法一、调查对象1992年底入伍的560名新兵，分别来自江苏、四川、河南、河北、山东、山西，陕西七省的部分城市和农村，年龄均在17～19岁，分属总参、总政、总后、国防大学和武警北京总队。二、检测方法干新兵抵达集训地1周内采集静脉血2ml，将血清置一20oC保存。麻疹抗体水平检测采用酶联免疫吸附试验（ELISA），分别做1：200和1：800两种滴度。试剂由中国预防医学科学…     

血清结核抗体检测对诊断女性盆腔结核的价值

目的　评价三种结核抗体检测试剂盒对女性盆腔结核的诊断价值。方法　用MycoDot、TB 快速卡和ICT TB卡检测了 6 3例女性盆腔结核患者血清 ,其中子宫内膜结核 18例 ,盆腔腹膜结核包裹性积液 2 4例 ,输卵管卵巢脓肿 11例 ,腹膜结核合并妇科肿瘤 10例 ,并与 84例妇科肿瘤患者、6 0例健康人血清结核抗体检测结果对比观察。结果　ICT TB、MycoDot、和TB 快速卡检测结核抗体的敏感性分别为 6 0 32 %、5 8 73%、79 36 % ,三者间差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。三种方法测均为 (+)的占 2 6 99% ,任意两种方法 (+)的占 5 3 95 % ,两者相加总阳性率 80 95 %。与非结核组比较差异有统计学意义 (P <0 0 1)。结论　血清结核抗体检测 ,特别是上述 3种方法同时检测结核杆菌多种抗体是女性盆腔结核诊断和鉴别诊断的一项重要辅助手段 ,有较高的临床价值。     

ANA阴性、抗SS-A抗体阳性干燥综合征长期漏诊1例

病例女,65岁,主因＂无明显诱因反复口腔溃疡5年,间断发热1个月,加重伴乏力7 d＂,于2014年7月入院。患者3年前曾因反复口腔溃疡（3～5次/年）,口干,多饮,眼干涩,就诊于当地医院,除外糖尿病后未予重视。其后多次因反复口腔溃疡,肺炎伴发热,贫血,于当地医院住院治疗,曾考虑结缔组织病,但因间接免疫荧光法（ⅡF）检测抗核抗体（ANA）阴性,未进一步检测抗核抗体谱（ANAs）,所以未能明确诊断,仅予以抗病毒、抗感染、纠正贫血治疗。     

抗核抗体和抗双链DNA检测诊断胶原性疾病

抗核抗体是以细胞内结构为抗原抗体 ,此抗体是非种属的脏器特异性抗体 ,可出现在很多结缔组织病患者中在自身免疫病的患者中特别是系统性红斑狼疮病人中显示很高的特异性 ,未经治疗的阳性率可达 90～ 10 0 % ,硬皮症效价也很高 ,激素治疗 (强的松 )后对ＡＮＡ和抗ｄｓ-ＤＮＡ有抑制作用。因此 ,血清ＡＮＡ效价可作为动态观察的指标。1　材料方法①大鼠冷冻切片 ,②ＰＨ7 40 0 1ＭＰＢＳ(磷酸盐缓冲液 ) ,③荧光标记的兔 (羊 )抗人ｒ球蛋白抗体按一定量稀释度稀释。1.2　检查方法ＡＮＡ和抗双链ＤＮＡ的检查方法很多 ,有免疫荧光法 ,酶联免…     

抗分枝杆菌纯蛋白衍生物抗体特征的研究

 目的 调查不同人群血清抗10种分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD)抗体的特征.方法 采用ABC-ELISA法检测结核患者、健康体检者与OT阴性、强阳性新兵血清抗10种PPD抗体水平.结果 结核患者血清抗BCG和抗胞内分枝杆菌PPD抗体水平显著高于抗人型结核菌PPD抗体水平(P＜0.01);OT强阳性新兵血清抗非结核分枝杆菌PPD抗体水平显著高于OT阴性新兵和健康查体者(P＜0.01).结论 个体环境分枝杆菌接触史对结核患者体液免疫应答有重要影响.胞内PPD和BCG-PPD可用于结核病血清学诊断.     

武警部队1999年度新兵艾滋病病毒抗体检测质量调查分析

为了解各部队艾滋病初筛实验室对新兵艾滋病病毒(ＨＩＶ)抗体检测情况,了解各实验室的技术人员检测ＨＩＶ抗体技术水平,我们随机抽查了24个实验室对新兵ＨＩＶ抗体的检测资料,调查结果与讨论分析如下。1　材料和方法11　仪器　ＣＦ-5000型酶标仪(中国航天工业总公司二八三厂生产)。ＤＮＸ-9620型洗板机(北京普朗新技术公司生产)。12　试剂盒　艾滋病病毒抗体酶联免疫诊断试剂盒由金豪生物工程公司生产(简称金豪)及北京华美制药有限公司生产(简称华美)提供。13　方法　分别按金豪、华美试剂盒使用说明操作。2　调查结果21　阳性对照测定吸光…     

从人源大容量噬菌体抗体库中筛选抗生存素抗体

目的从大容量天然噬菌体抗体库中筛选抗生存素(survivin)的人源单链抗体(single chainfragment variable,scFv)并进行鉴定。方法以survivin为抗原,固化在抗原管上,通过吸附—洗脱—扩增过程,从大容量天然噬菌体抗体库中筛选特异性噬菌体抗体,并转染HB2151菌,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导制备成可溶性抗体,采用酶联免疫吸附测定法对其抗原结合活性进行检测,指纹图谱分析法分析抗体基因的种类。结果经过4轮筛选,共获得21个与survivin结合的阳性克隆,其中10个特异性结合的克隆,指纹分析有8种不同的抗survivin的scFv基因,在这8种中有5种获得可溶性表达。结论利用噬菌体抗体库技术获得了特异性的人源抗生存素抗体,为其在今后肿瘤治疗中的应用奠定基础。     

新兵丙型肝炎病毒抗体(抗—HCV)调查

随着丙型病毒性肝炎(丙型肝炎)病原学的确定及抗—HCV检测方法的建立,国内外对丙型肝炎的研究日趋深入。在流行病学研究方面积累了不少资料,但对部队刚入伍新兵抗—HCV检出情况报导甚少。为了解丙肝病毒(HCV)在刚入伍新兵中感染情况,为部队的丙肝防治提供依据,我们于1996年初对驻成都某部队226各新兵进行了抗—HCV普查,现报告如下。     

ANA阴性Jo-1抗体阳性皮肌炎1例并文献复习

目的探讨抗核抗体谱检测在以间质性肺病为主要临床表现的皮肌炎诊断中的作用。方法回顾性分析1例被误诊为间质性肺炎、过敏性血管炎的皮肌炎患者的诊断及治疗过程,并结合自身抗体检测方法的特点及文献进行讨论。结果皮肌炎因常合并间质性肺病而被误诊,实验室可检测到自身抗体阳性,其中以抗核抗体(ANA)和Jo-1抗体阳性较为常见,是鉴别诊断的重要手段之一。但Jo-1抗体阳性也可出现在抗核抗体阴性的皮肌炎患者。结论对不明原因肺损害患者应考虑自身免疫性疾病的可能性,除了ANA以外,还应做抗核抗体谱的检测。     

血清抗脑抗体定量方法的建立与应用

抗脑抗体(antibrainantibody,ABAb)是针对脑组织抗原的自身抗体,见于精神分裂症、癫等。目前抗脑抗体的测定多采用人脑、兔脑组织匀浆粗提抗原进行间接血凝、补体结合试验和间接酶联免疫吸附测定(ELISA)等方法[1～3]。我们从胎牛脑组织中,用pH7.8的Tris缓冲液(含10ml/LTritonX-100及10g/L脱氧胆酸钠,简称TDOC缓冲液)提取,亲和层析技术纯化脑组织抗原(B-Ag),并制备兔抗B-Ag抗血清,建立了定量检测ABAb的ELISA,结果满意。1　对象和方法1.1　对象　经临床确诊精神分裂症住院患者197例(均符合精神分裂症CCMD-2-R诊断标准),男145…     

重组人抗HBsAg Fab抗体的纯化方法比较研究

目的研究重组人抗HBsAg Fab抗体的纯化条件。方法采用羊抗人Fab抗体亲和层析柱、14F7单克隆抗体亲和层析柱、离子交换-分子筛层析柱,分别纯化由酵母工程菌(Gs115／Fab)发酵的重组人抗HBsAg Fab抗体,并对3种纯化方法所得Fab抗体的纯度、收率、与HBsAg的结合活性进行比较。结果3种纯化方法中,14W单克隆抗体柱纯化的Fab抗体的纯度达98％左右,Fab抗体柱纯化的Fab抗体的纯度为95％,但这两种亲和柱的目的蛋白收率都不高,分别为35％、55％。而离子交换柱纯化的Fab抗体的纯度为93．8％,经分子筛柱进一步纯化后,可达98％以上,Fab抗体蛋白收率可达80％以上。经ELISA分析,3种方法纯化的Fab抗体均具有较高的HBsAg抗原结合力和特异性。结论通过对3种纯化方法的比较得出,离子交换一分子筛层析法是重组人抗HBsAg Fab抗体的最佳纯化方法,这为抗HBsAg Fab抗体的产业化生产和临床研究打下良好基础。