牵张成骨矫治腭裂新骨生成区超微结构特征的研究

目的:观察不同时间间期牵张生成的新骨组织的超微结构特征,探讨新骨生成的规律。方法:建立12只动物的人工腭裂实验模型,实验组动物10只:应用牵张成骨术,以每日2次,每次014 mm的速度和恒定的方向整复其腭部软硬组织缺损,至裂隙完全封闭。于术后固定期第2、4、6、8及12周分别安乐处死2只实验动物,切取标本后于扫描电镜下观察,并与实验对照组及空白对照组(动物各2只)观察结果对比。结果:第2周时,牵张区以大量沿牵张方向排列的胶原纤维束为主,成纤维细胞大量增殖,新生骨小梁钙化程度低。第4~6周时,成骨活动极其活跃,骨小梁较致密,其表面密集排列成骨细胞。新骨呈/蜂巢样0结构。第8~12周时,骨小梁结构逐渐钙化成熟。实验对照组裂隙创缘处无明显新骨形成。结论:应用牵张成骨术矫治腭裂骨质缺损,以原位产生新骨,增加骨量的方式推移骨运送盘封闭腭裂裂隙。术后早期即有膜内成骨的新骨形成,并最终改建成熟为适应正常生理功能需要的骨质结构。     

腭裂缘骨膜牵张成骨不同阶段的组织学变化分析

目的 对腭裂裂隙缘的骨膜进行牵张,研究新骨形成的过程及规律,初步探讨骨膜牵张成骨方法修复腭裂的机制.方法 选用健康杂种幼犬8只制作腭裂动物模型,采用安置骨膜牵张器的方法对裂隙缘的一侧骨膜进行牵张,牵张力为(2.45±0.20)N.在牵张器放置后20、30、40、60 d各处死动物2只,未放置一侧为对照侧.结果 裂隙缘骨膜受牵张后,新生成骨细胞数量随时间变化而增多,大量沿牵张方向排列的胶原纤维组织在增生的成骨细胞作用下,钙化沉积成新骨,并逐渐改建成熟.结论 新骨形成是沿牵张方向的膜内成骨方式完成的,在骨膜牵张器放置20d后牵张区已有新骨形成,随着牵张时间的延长,成骨量逐渐增加,40d时的成骨活动最活跃,至60d时新骨钙化程度较成熟,以骨改建和塑形为主.     

山羊下颌骨三焦点牵张成骨的超微结构观察

目的：为探索三焦点牵张成骨的成骨方式及新骨改建过程提供实验依据。方法：取6只山羊下颌骨牵张成骨形成的新生骨组织及其邻近原骨组织,硬组织磨片,扫描电镜观察骨组织断面的超微结构,同时用硬组织磨片四环素荧光双标记技术分析。结果：牵张间隙超微结构观察显示大量新生骨小梁,骨质密度好,中央区新生类骨质沿牵张方向排列,新骨与原骨边界呈骨性融合,在牵张区内有大量的荧光结合,并与周围原有组织有明显的界限。结论：山羊下颌骨三焦点牵张成骨形成的新生骨段可逐渐改建为具有正常结构的骨组织。     

应用牵张成骨术整复腭裂骨质缺损的组织学研究

目的 :观察牵张成骨术整复腭裂过程中 ,新骨组织形成与改建活动的特点 ,探讨新骨生成的规律。方法 :家猫 14只为实验对象。其中 12只建立人工腭裂实验模型。实验组 (动物 10只 ) :以 0 .4mm× 2次 /d的速度与频率牵张整复腭裂缺损。于术后固定期 2、4、6、8及 12周 ,观察期结束前 6d ,各对 2只动物肌注四环素标记 ( 30mg/kg)。 6d后取标本 ,切片行荧光显微镜及组织学观察 ,并与实验对照组及空白对照组 (动物各2只 )结果对比。结果 :实验组标本牵张区新骨组织均为膜内成骨 ,由中央向外分为胶原纤维区、新骨形成区及改建成熟区 ;随时间发展 ,新生骨逐渐取代纤维组织并改建成熟。软组织也得到相应伸展。对照组裂隙无自行修复。结论 :应用牵张成骨术矫治腭裂骨质缺损 ,以原位产生新骨 ,增加骨量的方式推移骨运送盘封闭腭裂裂隙。在良好固定条件下 ,新骨形成与改建活跃 ,最终整复腭裂骨质缺损并适应功能需要     

牵张成骨矫治腭裂动物模型新骨Ca、P元素能谱分析

目的应用牵张成骨术整复腭裂实验动物（猫）模型硬腭部骨质缺损的基础上，观察研究不同时间间期牵张区新生骨质的Ca、P元素含量的动态变化，并探讨新骨生成与改建的发展变化规律。方法家猫20只为实验对象。其中18只动物建立人工腭裂实验模型。实验组（动物15只）：应用牵张成骨术，以每；P-0.4mm的速度，每日两次的频率和恒定的方向整复其腭部软硬组织缺损，至裂隙完全封闭。于牵张术后第2、4、6、8及12周分别对3只动物施以安乐死，取标本测定Ca、P元素能量谱曲线并计算Ca、P元素质量比及原子计数比。结果与实验对照组（动物3只）及空白对照组（动物2只）对比。结果通过对新骨的Ca、P元素能量谱、Ca／P质量比及原子计数比的分析可将DO后的固定期分为三个阶段，即2周左右为新骨形成早期，4-6周为中期，8-12周时为后期，显示了新骨不断钙化成熟的趋势。结论牵张推移骨运送盘至健侧裂隙缘后，牵张间隙有规律地为新骨组织完全修复，最终恢复骨连续性且结构正常。DO新生骨组织显示了不断钙化成熟的趋势，证明D0的成骨活动未经过软骨中介体。     

弹性镍钛记忆合金牵张成骨修复犬腭裂

目的:研究镍钛记忆合金牵张成骨修复犬腭裂的愈合过程。方法:健康杂种幼犬8只,建立人工腭裂模型。1周后,在6只实验组犬硬腭上制作骨转移盘,植入镍钛记忆合金牵张装置,用300g的力持续向内侧和后侧牵引,关闭硬腭裂隙后保持3周。再分别于2、4、8周处死动物模型,采用直接观察、X线和组织学方法评价记忆合金与组织的相容性及中线骨组织愈合情况。结果:牵张8～10d后裂隙关闭,骨组织后移,硬腭平均延长4.5mm,两侧骨板在中间融合。结论:记忆合金牵张成骨可使腭部两侧骨板在中线区形成骨融合。     

羊颧骨缝三维牵张成骨的组织学观察

目的探索不截骨的骨缝牵张成骨组织学变化。方法采用10～13个月龄普通山羊为实验对象，每只动物左颧骨行三维牵张成骨，固定1、3、5、8周后取材，和对侧空白对照标本比较，观察缝区组织变化、新骨形成情况。结果骨缝被牵开后1周，成纤维细胞、成骨细胞、毛细血管增生，大量纤维软组织排列有序并连接骨缝两侧，骨缝两侧组织面不整齐，牵张侧成骨活跃，大量类骨质形成；3周时形成较成熟的骨小梁；5周时编织骨形成；8周时结构成熟完整。结论不截骨的骨缝三维牵张成骨，骨缝牵张侧新骨快速形成；     

下颌骨牵张成骨过程中新骨生成的定量组织学观察

目的：对下颌牵张成骨过程中的新骨生成进行动态定量组织学观察,探讨下颌牵张成骨过程中新骨生成的规律。方法：采用牵张成骨术延长10只山羊双侧下颌骨10mm,于术后第10、15、25、35和45天各处死2只动物;另选取2只山羊．不实施手术作为正常对照组。用骨组织形态法评价新生骨组织的形态结构变化;用四环素荧光标记法间接测定新骨的中成速率．外用方置分析法对数据进行统计学分析。结果：从10天组到45天组的平均骨小梁体积分数、平均骨小梁厚度、平均骨小梁数目和新生骨小梁体积密度比均表现为向正常对照组阶梯式递增（P〈0．05）,而平均骨小梁分隔距离和新生骨小梁表而积密度则表现为向正常对照组阶梯式递减（P〈0．05）。从15天组到45天组,成骨细胞活性均显著高于正常对照组（P〈0．05）;而破骨细胞活性则表现为向正常对照组阶梯式递增（P〈0．05）。从15天组到45天组,新骨生成速率与正常对照组相比有3个数量级的差异（P〈0．05）。结论：在下颌骨牵张过程中,新生骨小梁由少到多,从幼稚到成熟：新骨生成过程持续活跃：骨吸收改建过程逐渐增强：牵张期新骨生成速率快于固定期。     

牵张成骨腭裂整复术新骨组织骨形成蛋白的表达分布与X线影像特征

目的:观察牵张成骨术矫治腭裂新骨形成的X线影像学特征,骨形成蛋白(BMP)的表达与分布。方法:以家猫14只为实验对象,其中12只建立人工腭裂实验模型。实验组(10只):造裂手术同时安置口内腭裂牵张装置。4 周后,二期手术形成骨运送盘,术后第6日起,以每次014 mm,每日两次的频率和恒定方向进行牵张,至腭部软硬组织裂隙封闭。固定期第2、4、6、8及12周安乐处死动物各2只,切取标本行X线摄片及以Anti-BMP单抗免疫组化方法染色观察;另2只动物为实验对照组。结果:免疫组化结果显示,术后BMP广泛于牵开间隙的成骨细胞内表达, 至术后4~6周成骨活跃,骨连续性恢复。8周及12周组BMP表达渐趋减弱。X线影像亦显示新骨组织的钙化成熟是沿牵张方向由两侧向中央区域逐渐发展,二者具有时相相关性。实验对照组未见修复影像。结论:牵张成骨过程经历了一个由无到有,由弱变强至整复骨缺损,而后趋于减弱至相对静止的动态变化规律。X线影像学研究手段亦证明,牵张间隙有规律地为新骨组织完全修复,最终恢复骨连续性且结构正常。     

张应力诱导生长期山羊颅骨缝改建的实验研究

目的：研究处于生长发育期山羊颅骨冠状缝受张应力作用后的变化规律，探讨牙面矫形治疗的生物学原理。方法：选用处于生长期山羊12只，在颅骨冠状缝两侧安放自行研制的牵张器以每天0．4mm的速率进行骨缝牵张，连续加力8d后停止。在牵张结束后第0，2，4和8周分别处死3只动物，取骨缝标本进行X线检查和组织学观察。另选2只同龄山羊作为正常对照。结果：所有实验动物的冠状缝均被成功分离。在实验早期(0，2周)，扩大骨缝中可见大量胶原纤维沿牵张力方向有序排列，骨缝边缘有大量的成骨细胞并出现幼稚骨小梁。在实验后期(4，8周)，牵张骨缝新生骨组织改建活跃，骨缝组织结构最终基本恢复到正常状态。结论：骨缝组织受牵张力作用后将发生活跃的膜内成骨反应，主要集中于骨缝边缘，扩大的骨缝可以通过适应性改建恢复其正常结构。     

牵张成骨修复犬腭裂愈合过程的观察

目的:探索截骨牵张联合缝牵张修复犬腭裂中两侧骨岛在中线区愈合的机理。方法: 健康杂种幼犬6只,建立人工Ⅱ°腭裂模型3～4周后沿腭外侧缝内侧1mm纵行切开腭骨水平板,腭横缝区不截骨,立即以250～280g力持续向内侧和后方牵张至硬腭裂隙关闭,裂隙关闭1周后进入保持期。分别于牵张结束即刻、1、2、4、8、12周处死,采用直接观察、X线片和组织学方法评价中线区愈合情况。结果: 牵张5～7d后人工裂隙逐渐关闭,两侧骨岛后移,硬腭平均延长4.78mm。两侧骨岛后份在5～8mm长腭中线上呈叠瓦状重叠,表面粘膜受压凹陷,逐渐融合,4周时出现新生骨桥连结;其前方15～18mm的裂缘粘膜变薄,于正中相互接触,但并未发生组织融合。结论:截骨牵张联合缝牵张可使两侧腭裂裂缘在中线区后分发生骨性融合。     

牵张成骨矫治腭裂的激光共聚焦荧光定量分析

目的：利用激光共聚焦显微镜与计算机辅助荧光定量分析，研究牵张成骨术矫治腭裂新骨生成随时间间期不同的动态变化趋势，为临床矫治腭裂应用提供理论与实验依据。方法：以家猫20只为实验对象。其中18只动物建立人工腭裂实验模型。实验组（动物15只）：应用牵张成骨术，以0．4mm×2次／d的速率牵张整复封闭其腭部组织缺损。术后第2、4、6、8及12周前6d以四环素肌注标记（30mg／kg）后各取材3只动物，标本制片后激光共聚焦显微镜观察荧光沉积并进行计算机定量分析，结果与实验对照组（动物3只）及空白对照组（动物2只）对比。结果：实验组不同时间间期标本的荧光强度平均值及其总量，显示出明确的动态变化规律，自2周组起，成骨活动明显活跃，到4周组达到顶峰，至8、12周组逐渐减弱，但仍显著高出无明显荧光沉积的空白和试验对照组。结论：应用牵张成骨术移动骨运送盘封闭组织缺损，牵张间隙逐渐被膜内成骨新骨生成修复，恢复了骨连续性。随时间间期的延长，新骨逐渐改建成熟。成骨活动呈现短期达到高峰后，逐步减弱的动态变化规律。     

牙﹑微型种植体支抗联合支抗牵张成骨治疗齿槽突裂的动物实验研究

目的:建立牙、微型种植体支抗联合支抗牵张成骨治疗齿槽突裂的动物模型,评估其治疗效果。方法:成年杂种犬实验组6只,对照组2只。首先形成齿槽突裂外科模型,2周后手术截骨形成一含牙的骨运送盘,在骨运送盘上植入微型种植体支抗,一周后开始牵引。牵张完成后1,2,3月各处死动物2只,对照组术后1月处死。取标本作大体,放射学,及组织学检查。结果:齿槽突裂隙完全关闭,牵张区为丰富的新骨。结论:牙、微型种植体支抗联合支抗牵张成骨能够很好的关闭犬的齿槽突裂隙。     

硬腭两维牵张器的研制及体外实验研究

目的：探讨腭骨外固定两维牵张器在腭裂修复中关闭骨裂隙和后退腭骨的可行性。方法：设计并制作两维硬腭骨牵张器，在离体犬颅骨模型上制造人工腭裂模型，根据机械移动原理和牵张成骨原理，在硬腭后部设计2块可相对移动的转移盘，在一定范围内使骨块向内和向后移动，进行两维牵张成骨，并进行了手术模拟。结果：研制的两维缝牵张器可将转移盘前后方向移动16mm，近中方向左右各移动4mm，牵张器固定牢靠，转运盘稳定，牵张控制准确，在离体模型上可实现关闭裂隙、后退硬腭的设计要求。结论：设计的外固定两维牵张器可以向后、内牵张腭骨，从而达到关闭裂隙和硬腭后退的目的。     

Effects of hyperbaric oxygen treatment on healing of maxillary distraction osteogenesis in beagle dogs

Distraction osteogenesis has been widely used even in the craniofacial region. A long fixation time during the consolidation period, however, is a major clinical disadvantage. Hyperbaric oxygen (HBO) has been used to improve healing in ischemic wounds. We have recently started applying hyperbaric oxygen to cleft palate patients after maxillary distraction, but there is little basic evidence. We hypothesized that hyperbaric oxygen would enhance the healing of distraction osteogenesis in the cleft palate model in dogs. A bony segment including a canine was transported proximally into an artificial bone defect in the left palate. Three dogs were treated with hyperbaric oxygen for 20 days just after the distraction and three other dogs underwent only the distraction process (control group). Blood flow of the canine pulp in the bone segment was monitored using a laser Doppler flowmeter throughout the experiment. All the dogs were sacrificed on day 100, and radiological analysis using peripheral quantitative CT and histomorphometric evaluations were performed. Blood flow in the HBO-treated group recovered to the original level about 30 days faster than in the control group (p<0.05). Cortical bone mineral density was significantly higher at the distraction site in the HBO-treated group than in the control group (p<0.05). The histomorphometric analysis revealed that the newly formed bone area was also larger in the HBO-treated group than in the control group (p<0.05). These results suggest that hyperbaric oxygen treatment could be useful for early removal of the distraction device in distraction osteogenesis.     

Distraction osteogenesis after membranous bone onlay grafting in a dog model.

PURPOSE: The purpose of this experiment was to study the possibility of distraction osteogenesis in a membranous bone onlay graft to the mandible and to clarify the histology of the bone repair. MATERIALS AND METHODS: Four dogs, 5 months of age at the beginning of the experiment, were used for this study. The zygomatic arch was exposed in the subperiosteal plane, and a 3-cm long, full-thickness portion of the arch was harvested. The lateral surface of the mandibular body was exposed in the subperiosteal plane, and the bone was fixed to the lateral surface as a membranous onlay graft using screws. A vertical osteotomy through the graft and underlying mandibular body was done postoperatively at week 1 in dog 1, week 2 in dog 2, week 3 in dog 3, and week 4 in dog 4. An external distraction device was applied to the mandibular body, and distraction was started 7 days after the operation at a rate of 1 mm/d for 10 days. After completion of distraction, the device was left in place for 6 weeks to allow for bony consolidation. Radiographs were carried out at 2, 4, and 6 weeks postdistraction. All dogs were killed 6 weeks after distraction. RESULTS: New bone between the native underlying mandibular segments was generated in the distraction zone in all dogs. New bone was not generated between the segments of the membranous bone onlay graft in dog 1, but was generated in dog 2, dog 3, and dog 4. However, in dogs 2 and 3, the new bone between the segments was less firm, with more fibrous tissue, than the bone between the native underlying mandibular segments. Histologically, the distraction gap between the segments of the membranous bone onlay graft in dogs 2 and 3 was composed of considerable fibrous tissue in the central zone and activated osteoblastic cells forming new bone in the margins. In dog 4, there was much more osteoblastic activity in the distraction gap, and the new bone had the appearance of almost normal cortical bone. CONCLUSION: These findings show that distraction osteogenesis is possible in a membranous bone onlay graft and suggest that the distraction should be performed at least 4 weeks after the onlay grafting.     

骨缝牵引中联合应用骨形态发生蛋白-2和骨保护素的实验研究

目的探索上颌骨在骨缝牵引时加入缓释骨形态发生蛋白-2（BMP-2）和骨保护素（OPG）对新骨形成的影响。方法以24只杂种犬为研究对象,随机分为A、B、C组。通过手术在上颌骨腭横缝植入自制的新型牵引器。A、C组术后5 d在牵引区附近注射缓释重组人骨形态发生蛋白-2/聚乳酸-羟基乙酸共聚物/纤维蛋白胶（rhBMP-2/PLGA/FS）,B、C组在牵引3周后注射人骨保护素/纤维蛋白胶（rhOPG/FS）。牵引1、2、4、6周后处死动物,采集标本进行组织学染色,并通过组织计量学方法检测腭横缝的组织改建情况。结果A、C组骨缝区成骨细胞功能活跃,透射电镜显示细胞内有大量高尔基复合体、线粒体及粗面内质网。牵引6周时,A、B、C组成骨细胞指数分别为38.5±7.7、35.7±6.5、41.7±11.0,破骨细胞指数分别为5.9±1.0、1.2±0.3、2.8±0.4,骨小梁厚度分别为（38.36±13.28）、（66.20±9.16）、（51.85±9.92）μm;B、C组表现出骨密度增加及破骨细胞指数下降。结论本实验所用牵引器能促进新骨生成;BMP-2与OPG在骨缝牵引过程中有协同作用,可以促进新骨形成及骨改建。     

Distraction osteogenesis for bony repair of cleft palate by using persistent elastic force: experimental study in dogs.

OBJECTIVE: The purpose of this study was to investigate the possibility of closing a cleft and lengthening the hard palate by the technique of distraction osteogenesis with elastic forces and to evaluate the influence of the management on the facial structure. DESIGN: Thirty 6-month-old mongrel dogs were assigned randomly to two groups with five subgroups for different purpose.Interventions: An 8- x 25-mm cleft was surgically created in the posterior hard palate in experimental and sham control dogs. Bone markers were implanted in the hard palate. Osteotomies were carried out followed by the installation of a distractor made of NiTi-shape memory alloy. OUTCOME MEASURES: The results were evaluated clinically, radiographically, and histologically. Anthropometric data that represented the length, width, and height of the maxilla were taken on the dry skull of the control and experimental dogs and were analyzed statistically. RESULTS: The cleft was closed and the hard palate was lengthened after 2 to 3 weeks of distraction in all the experimental dogs. New bone formation was found at the site of osteotomy. The variables of facial length, height, and width showed no significant difference between the two groups (p > .05). The length of the hard palate in the experimental group was longer than that in the control group (p < .01). CONCLUSION: Distraction osteogenesis with the elastic device of NiTi-shape memory alloy is effective for closing the cleft and lengthening the hard palate in a canine cleft model. There is no interference on the growth of the maxillofacial structures with the technique.