曲酸诱导CHO-K1细胞凋亡的研究

目的研究曲酸诱导细胞凋亡的作用。方法采用0、500、1000、1500、2000、2500μg/ml的曲酸染毒CHO-K1细胞,每种浓度条件下分别培养细胞24、48、72、96h,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果流式细胞仪检测结果显示,细胞培养24、48h,未呈现明显的细胞凋亡现象;细胞培养72h,细胞凋亡也非常微弱,其剂量-效应关系不明显。但细胞培养96h,曲酸剂量与细胞凋亡比例呈现明显的剂量-效应关系,曲酸浓度为0、500、1500、2500μg/ml,凋亡早期的细胞比例分别为0.1%,7.3%,45.4%和62.2%。结论曲酸培养CHO-K1细胞96h呈现明显的诱导细胞凋亡效应,而在染毒早期几乎不呈现诱导效应。     

微囊藻毒素-LR对传代细胞的毒性

目的 从多种传代细胞株中，筛选对微囊藻毒素-LR敏感的细胞株，探讨建立经济、简便研究该毒素传代细胞模型的可能性。方法 不同宿主来源的8种细胞株(KB细胞，NIH／3T3细胞，H-4-Ⅱ-E细胞，Hela细胞，Vero细胞，HepG2细胞，Caco-2细胞，HL-60细胞)与不同浓度的微囊藻毒素-LR作用，细胞培养24，48，72。96h后观察其形态学变化，利用体外细胞法(MTT)测定其细胞毒性终点(判断细胞活性)及乳酸脱氢酶试验测定细胞膜受损情况。结果8种细胞株中，KB细胞和H-4-Ⅱ-E细胞在培养96h，毒素浓度大于18．8μg／ml时，呈现明显剂量-反应关系。KB细胞与毒素接触8h后就有显著的形态学改变，其实验结果的重现性和稳定性非常好；乳酸脱氢酶试验显示微囊藻毒素-LR可导致KB细胞膜损伤。结论 微囊藻毒素-LR对KB细胞和H-4-Ⅱ-E细胞有明显的细胞毒性作用。从形态学变化、试验结果的重现性、稳定性和敏感性考虑，KB细胞可用作研究该毒素的传代细胞模型。     

四氯乙烯对人原代角质形成细胞的细胞毒性作用

[目的]研究体外培养条件下有机溶剂四氯乙烯(perchloroethylene,PERC)对正常人表皮角质形成细胞(normalhumanepidermiskeratinocyte,NHEK)的细胞毒性作用。[方法]用0.25%的胰蛋白酶经冷温两步消化皮肤,分离得到NHEK,进行体外无血清培养;用中性红吸附试验(NRU)测定PERC对NHEK的中性红吸附减少50%的浓度(NR50值),并据此确定PERC细胞毒性试验的染毒剂量;测定乳酸脱氢酶(LDH)活力反映其对细胞膜的损害,测定丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力反映细胞脂质过氧化作用。[结果]PERC可引起NHEK细胞活力剂量依赖性降低,PERC对NHEK的NR50值为2.16mmol/L(95%可信区间为1.27~3.07);0.05、0.10、0.20、0.40、0.80mmol/LPERC处理NHEK1、2、3、4h后,LDH的释放呈明显剂量-反应和时间-反应关系;以上浓度的PERC处理NHEK4h,可引起MDA含量增加和SOD活力抑制,且均显示剂量-反应关系,与空白对照组、溶剂对照组相比,引起差异有显著性的最低浓度分别为0.20mmol/L(MDA升高)和0.10mmol/L(SOD降低),均为P<0.05。[结论]在体外培养条件下,PERC可能通过氧化应激和脂质过氧化作用对人角质形成细胞产生细胞毒性作用。     

叠氮酸吸入毒性研究

大鼠和小鼠急性吸入2小时LC_(50)各为248.2mg/m~3和155.2mg/m~3。一次吸入56mg/m~3·小时,血液过氧化氢酶活性明显抑制,但恢复较快。亚慢性毒性的明显毒作用浓度为25mg/m~3。无作用浓度为5mg/m~3。     

砂岩矿尘细胞毒性作用的实验研究

砂岩矿尘细胞毒性作用的实验研究张会斌１张文霞２罗陆军１僧清莲当前公认的二氧化矽（硅）在肺部首先被肺泡巨噬细胞吞噬并损伤巨噬细胞，导致溶酶体酶的释放和生物活性物质的分泌〔１．２〕。石夕肺发病主要与粉尘中游离二氧化矽的含量与接触剂量有直接关系〔３〕。本次...     

叠氮酸吸入毒性研究

大鼠和小鼠急性吸入2小时LC_(50)各为248.2mg/m~3和155.2mg/m~3。一次吸入56mg/m~3·小时,血液过氧化氢酶活性明显抑制,但恢复较快。亚慢性毒性的明显毒作用浓度为25mg/m~3。无作用浓度为5mg/m~3。     

石榴酸和α-酮酸对人恶性黑色素瘤A375细胞的细胞毒性作用

<正>石榴酸(punicic acid,PA,9c,11t,13c-18:3)和α-酮酸(α-eleostearic acid,α-ESA,9c,11t,13t-18:3)是两种最重要的共轭亚麻酸(conjugated linolenic acid,CLN)异构体CLN异构体[1]。体内和体外研究表明,共轭亚麻酸(conjugated linolenic acid,CLN)有较强体内和体外抗肿瘤作用[2-3],且CLN单体是抑制各种肿瘤细胞生长强效抑制剂[4]。石榴籽油是一种安全     

二氧化硫体内衍生物对人胚肺细胞的毒性作用

为了研究二氧化硫的毒作用机制 ,我们进行了以下实验。一、材料和方法取生长良好的人胚肺成纤维细胞 (HEL ,军事医学科学院 ) ,胰酶消化 ,用含 10 %的小牛血清的达克尔必需培养基(DMEM )调成细胞浓度为 5× 10 5/ml,接种于 2 4孔细胞培养板中 ,待细胞进入指数生长期后染毒。到预定接触时间后 ,用倒置显微镜观察细胞形态初步确定染毒剂量和用噻唑蓝(MTT)法检测二氧化硫体内衍生物 (亚硫酸钠与亚硫酸氢钠混合液pH值为 7,二者分子比为 3∶1)的细胞毒性作用。测定细胞内和细胞外乳酸脱氢酶 (LDH)。细胞内蛋白含量的测定采用考马亮蓝法。二…     

葡萄糖酸铬的急性毒性及遗传毒性研究

葡萄糖酸铬经口给小鼠做急性毒性试验，结果LD50为10000mg／kg，为实际无毒物质。遗传毒性试验（Ames试验等4种），结果均阴性，表明其无遗传毒性。     

四氯化碳的毒性作用及危害

随着现代科学技术的发展,四氯化碳作为一种工业原科或民用化学品被广泛地开发和利用,产量和用量逐年增加,职业与非职业接触的机会不断增多,给人群健康监护带来了一定的卫生问题。 为了人类的健康与安全,防止化学毒物污染环境,越来越多的国家制订了有毒有害物质的卫生法规和标准。联合国环境规划署潜在有毒化学品登记中的     

离子对高效液相色谱法分析米曲霉发酵液中的曲酸

为建立米曲霉培养液中曲酸的离子对高效液相色谱法 ,采用 0 0 1mol L磷酸氢二钠及 2mmol四丁基溴化胺做流动相 ,选择 2 2 6nm紫外吸收波长 ,测定米曲酶发酵液中的曲酸 ,曲酸在C1 8色谱柱上获得良好的分离。本方法检出限为 0 0 1 2 μg ml;麦芽汁 蛋白胨、麦芽汁 酵母膏、马铃薯 酵母膏 蔗糖三种培养液中回收率分别为 98 2 %、1 0 3 4%、97 2 % ;RSD分别为 0 51 %、0 45 %、0 43 %。     

米酵菌酸单克隆抗体细胞株的建立

继制备米酵菌酸（ＢＡ）多克隆抗体以后，作者成功地运用免疫杂交瘤技术，获得了能分泌抗米酵菌酸的单克隆抗体细胞株１Ｆ７和２Ｈ９，其腹水效价可达１０－６，对ＢＡ的５０％有效抑制浓度为１０－４，两株细胞分泌抗体的亚型均为ＩｇＧ１型，纯化后获得ＢＡ－ＭｃＡｂ的ＩｇＧ浓度为１１ｇ／Ｌ     

叶酸对体外人胃腺癌细胞SGC-7901生长的作用

目的 以体外培养的人胃癌细胞株SGC—7901为材料，观察叶酸的抑癌防癌作用。方法 采用生长曲线法、MTT法观察叶酸对细胞的增殖和功能的影响；采用FCM进行细胞周期分析，观察叶酸对细胞凋亡的影响。结果 在叶酸浓度为375，750和1875nmol／L时对人胃癌细胞株的增殖和功能有抑制作用，浓度为375nmol／L时引起的凋亡率可达33．1％。结论 叶酸对人胚肌腱细胞无抑制作用，表明叶酸对正常人体细胞无不良影响而对癌细胞有抑制作用。     

二十二碳六烯酸对人胰腺癌细胞增殖的抑制

目的探讨二十二碳六烯酸（DHA）对人胰腺癌细胞株Patu8988和SW1990生长的作用。方法采用MTT法检测DHA作用后Patu8988和SW1990细胞的增殖,流式细胞术检测DHA作用后Patu8988和SWl990细胞的凋亡、细胞周期和肿瘤相关蛋白环氧合酶2（COX-2）的表达量。结果DHA作用人胰腺癌细胞株24、48、72h后,细胞的增殖受到明显抑制（P〈0．01）,同时DHA能诱导细胞凋亡,随着作用时间延长和作用剂量增加,效果越明显。50μg／ml DHA作用24h后,胰腺癌细胞的COX-2表达量下降（P〈0．05）。结论DHA能有效地抑制胰腺癌细胞增殖,同时诱导细胞凋亡,可能与COX-2在胰腺癌细胞中的表达下调有关。     

共轭亚油酸抑制人胃腺癌细胞体外侵袭作用

目的 采用体外细胞培养技术，模拟体内肿瘤转移过程，研究c9，t11—共轭亚油酸(CLA)对肿瘤细胞侵袭及侵袭相关特性的影响。方法 用0，25，50，100和200μmol／LCLA处理SGC—7901人胃腺癌细胞24h后，分别进行重组基底膜侵袭试验、趋向性运动实验和粘附试验研究CLA对侵袭、运动和粘附能力的影响。结果 在200，100和50μmol／L浓度时，c9，t11—CLA对肿瘤细胞侵袭重组基底膜的抑制率分别为53．7％，40．9％和29．3％。同时，c9，t11—CLA处理后的肿瘤细胞与细胞外基质的粘附能力降低，但对肿瘤细胞趋化运动能力的影响不明显。结论 c9，t11—CLA可降低肿瘤细胞的体外侵袭能力，改变某些侵袭相关性质。     

共轭亚油酸对人胃腺癌细胞的抑制作用

采用体外细胞培养方法，研究共轭亚油酸（ＣＬＡ）对人胃腺癌细胞（ＳＧＣ－７９０１）生长的影响。ＣＬＡ的剂量分别为２５、５０、１００和２００μｍ ｏｌ／Ｌ，以乙醇为溶剂对照。结果表明：ＣＬＡ 能抑制ＳＧＣ－７９０１细胞的增殖、细胞核分裂、集落形成和细胞ＤＮＡ的合成，并诱导ＳＧＣ－７９０１细胞的分化     

Isolation of Candidatus Rickettsia vini from Belgian Ixodes arboricola ticks and propagation in tick cell lines

Candidatus Rickettsia vini was originally detected in Ixodes arboricola ticks from Spain, and subsequently reported from several other Western Palearctic countries including Belgium. Recently, the bacterium was isolated in mammalian (Vero) cell culture from macerated male I. arboricola from Czech Republic, but there have been no reports of propagation in tick cells. Here we report isolation in a tick cell line of three strains of Ca. R. vini from I. arboricola collected from nests of great tits (Parus major) in Belgium. Internal organs of one male and two engorged female ticks were dissected aseptically, added to cultures of the Rhipicephalus microplus cell line BME/CTVM23 and incubated at 28 °C. Rickettsia-like bacteria were first seen in Giemsa-stained cytocentrifuge smears between 2 and 15 weeks later. Two of the isolates grew rapidly, destroying the tick cells within 2–4 weeks of onward passage in BME/CTVM23 cells, while the third isolate grew much more slowly, only requiring subculture at 4−5-month intervals. PCR amplification of bacterial 16S rRNA and Rickettsia gltA, sca4, ompB, ompA and 17-kDa genes revealed that all three isolates were Ca. R. vini, with 100 % identity to each other and to published Ca. R. vini sequences from other geographical locations. Transmission electron microscopy revealed typical single Rickettsia bacteria in the cytoplasm of BME/CTVM23 cells. The Ca. R. vini strain isolated from the male I. arboricola tick, designated Boshoek1, was tested for ability to grow in a panel of Ixodes ricinus, Ixodes scapularis and R. microplus cell lines and in Vero cells. The Boshoek1 strain grew rapidly, causing severe cytopathic effect, in the R. microplus line BME26, the I. ricinus line IRE11 and Vero cells, more slowly in the I. ricinus line IRE/CTVM19, possibly established a low-level infection in the I. ricinus line IRE/CTVM20, and failed to infect cells of any of four I. scapularis lines over a 12-week observation period. This study confirmed the applicability of the simple tick organ-cell line co-cultivation technique for isolation of tick-borne Rickettsia spp. using BME/CTVM23 cells.     

甲基硒酸对乳腺癌细胞体外凋亡和细胞周期的影响

目的:观察甲基硒酸(MSA)对乳腺癌细胞系MCF-7凋亡和细胞周期的影响。方法:以不同浓度的MSA作用乳腺癌细胞系MCF-7,在不同时间内,观察不同浓度MSA对乳腺癌细胞凋亡率和细胞周期的影响。流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。结果:①MSA可诱导乳腺癌细胞体外凋亡,随着药物浓度及作用时间的增加,乳腺癌细胞凋亡率逐渐增加。②MSA可改变乳腺癌的细胞周期,将乳腺癌细胞周期阻断在G1期,并且减少S期细胞的比例。结论:MSA可诱导乳腺癌细胞体外凋亡、调控乳腺癌细胞周期。MSA有望成为预防和治疗乳腺癌的一种新方法。     

洛伐他汀对人粒系白血病细胞生长的影响

目的观察洛伐他汀(Lovastatin)对体外培养的人粒系白血病细胞株HL-60生长的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测、流式细胞仪分析等技术。结果洛伐他汀可显著抑制HL-60细胞的增殖．且呈剂量一效应关系。流式细胞仪分析结果显示：洛伐他汀不仅能影响该细胞周期进程而且可诱导该细胞凋亡。结论洛伐他汀可能通过影响细胞的生长周期和诱导细胞凋亡来抑制HL-60细胞的增殖。     

亚油酸/二十二碳六稀酸对胃癌细胞凋亡作用

目的 探讨不同比例亚油酸(LA)/二十二碳六稀酸(DHA)对人胃癌细胞株MKN-45的抑制作用.方法 采用均匀设计法初筛出LA/DHA抑制MKN-45增殖的较佳比例,采用随机区组法确定促进胃癌细胞凋亡的最佳比例;采用LA/DHA最佳比例混合脂肪酸干预MKN-45裸小鼠移植模型6周,观察裸鼠肿瘤重量、肿瘤体积变化及毒副反应情况;肿瘤组织HE染色观察肿瘤细胞形态学改变.结果 经均匀设计和随机区组筛选,LA/DHA比例为1:3时,浓度为40:120μmol/L时,对肿瘤细胞的抑制效果最佳(P<0.05);与对照组比较,1:3 LA/DHA混合脂肪酸高剂量组瘤体抑制率为21.97%,瘤重的抑制率为18.09%,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤组织病理切片显示,高剂量组和抗癌药物阳性对照组的肿瘤组织中出现不同程度坏死;高剂量组毒副反应不明显.结论 LA/DHA比例为1:3可诱导人胃癌MKN-45细胞凋亡;LA/DHA高剂量组有一定抑瘤作用,并且无明显毒副反应.