RP-HPLC测定熟地黄中4种核苷类含量

目的:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定熟地黄中尿苷、次黄嘌呤、腺苷、腺嘌呤4种核苷类含量.方法:制备尿苷、次黄嘌呤、腺苷、腺嘌呤对照品储备液和供试品溶液,XTerra C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.04mol·L磷酸二氢钾溶液,梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,柱温30℃,检测波长为254nm,进样量为20μL.考察线性关系、精密度试验、重复性试验、稳定性试验、加样回收率试验.结果:尿苷、次黄嘌呤、腺苷、腺嘌呤分离度良好,保留时间分别为18.2、13.0、61.7、22.9min.尿苷、次黄嘌呤、 腺苷、 腺嘌呤的回归方程分别为:Y=41770X+3984、Y=72980X+1382、Y=70880X+2873、Y=93720X-4092,相关系数r分别为:0.9991、0.9999、0.9993、0.9997.精密度试验RSD值分别为1.18％、0.83％、0.25％、1.35％.重复性试验RSD值分别为0.86％、1.22％、2.61％、1.73％.稳定性试验RSD值分别为0.45％、1.09％、2.04％、1.52％.平均回收率分别为99.9％、100.3％、97.8％,98.4％、100.5％、101.2％,99.3％、100.7％、97.5％,98.3％、100.8％、96.7％,RSD分别为1.92％、0.73％、0.89％,1.42％、1.05％、0.72％,1.33％、0.82％、1.25％,2.13％、0.81％、1.74％.结论:RP-HPLC可用于熟地黄中尿苷、次黄嘌呤、腺苷、腺嘌呤4种核苷类含量测定.     

RP-HPLC同时测定暗紫贝母中10个核苷及碱基类成分的含量

目的:建立RP-HPLC-DAD同时测定暗紫贝母药材中5个核苷类活性成分(尿苷、鸟苷、胸苷、腺苷、肌苷)及5个游离的碱基(腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤、尿嘧啶、胞嘧啶)含量的方法。方法:采用Agilent Zorbax Bonus-RP C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇和水,梯度洗脱,流速1 mL·min-1;检测波长260 nm;柱温30℃。结果:胞嘧啶、尿苷、鸟苷、胸苷、腺苷、腺嘌呤、肌苷、胸腺嘧啶、鸟嘌呤、尿嘧啶的质量浓度分别在1.78～56.80 mg·L-1、1.84～59.00 mg·L-1、1.58～50.60 mg·L-1、1.73～55.30 mg·L-1、1.78～57.10 mg·L-1、1.63～52.10 mg·L-1、1.79～57.20 mg·L-1、1.80～57.70 mg·L-1、1.63～52.30 mg·L-1、1.63～52.30 mg·L-1范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率为97.7%～103.2%,RSD≤2.2%。结论:建立了RP-HPLC-DAD同时测定暗紫贝母药材中10个核苷及碱基类成分含量的方法,该方法简单,重复性好,准确可靠;暗紫贝母药材中鸟苷、尿苷、胸苷、腺苷含量较高;青海久治、大通产暗紫贝母药材中核苷含量均高于四川松潘;青海2个产地比较,大通产暗紫贝母药材中核苷含量又明显高于久治。     

HPLC法测定冬虫夏草中核苷类成分的含量

目的建立用HPLC法测定不同方法(熏干、新鲜和阴干)处理冬虫夏草样品中核苷类成分(腺苷、尿苷、肌苷、鸟苷和胸苷)含量的方法。方法样品用纯化水超声提取,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,柱温:30℃,流速:1.0mL·min-1。结果虫草中含有的5种核苷标准曲线的相关系数均在0.999 0以上,精密度检测RSD值为0.31%~1.95%(n=5),重复性检测RSD值为0.50%~2.56%(n=5),回收率在99.46%~100.11%之间。结论该方法灵敏、简便、快速、准确、重复性好,能有效测定虫草中核苷类成分的含量,可为评价虫草的质量提供依据。     

HPLC法同时测定人工蛹虫草不同部位中5种核苷类成分的含量

目的:建立同时测定人工蛹虫草不同部位中5种核苷类成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为InertSustain C18,流动相为甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(梯度洗脱),流速为0.6 m L/min,检测波长为254 nm,柱温为30℃。结果:尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷和虫草素检测进样量线性范围分别为0.568~3.408μg(r=0.999 9)、0.284~1.704μg(r=0.999 9)、0.264~1.584μg(r=0.999 9)、0.232~1.392μg(r=0.999 9)、1.672~10.032μg(r=0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3.0%;加样回收率分别为98.2%~103.9%(RSD=1.97%,n=9)、96.2%~101.6%(RSD=1.76%,n=9)、96.7%~102.0%(RSD=1.94%,n=9)、95.1%~99.4%(RSD=1.43%,n=9)和95.6%~101.3%(RSD=1.82%,n=9)。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于人工蛹虫草中5种核苷类成分含量的同时测定,蛹虫草不同部位中所含核苷类成分含量不同。     

宁心宝胶囊中5种核苷类成分的RP-HPLC定量分析

目的:测定与分析宁心宝胶囊中5种核苷类成分的含量。方法:采用 RP-HPLC 法,色谱条件:Lichrospher C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-0.05 mol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液(8:92),流速为1.0 mL·min~(-1);检测波长为260 nm;柱温:25℃。结果:尿嘧啶、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷5个成分进样量分别在0.008～0.128μg,0.126～1.900μg,0.008～0.119μg,0.043～0.649μg,0.080～1.212μg范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9998～1.000,平均回收率(n=9)为95.0%～103.8%;RSD 均小于3.0%。结果:利用建立的 RP-HPLC 方法,测定26个企业生产的68批宁心宝胶囊中尿嘧啶、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷的含量分别为0.01～0.03,0.95～2.15,0.01～0.05,0.61～1.57,0.63～1.57 mg·粒~(-1)。结论:本法灵敏度高,重复性好,提取方法与色谱条件均较简单,能有效鉴别并测定宁心宝胶囊中5种主要核苷类成分的含量。     

HPLC同时测定半夏中的3种核苷

目的采用HPLC测定半夏中尿苷、鸟苷和腺苷的含量。方法采用Hypersil ODS(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,柱温30℃,流动相为甲醇-水,梯度洗脱0~17 min(3.5%~100%甲醇),检测波长254 nm,流速1 m L·min-1。结果尿苷、鸟苷、腺苷分别在6.19~43.33、5.09~35.63、1.37~9.60μg·m L-1与峰面积的线性关系良好,线性方程分别为:Y=40.8110X-1.0926(r=0.9999),Y=49.5173X+2.1714(r=0.9999),Y=49.5006X+0.1857(r=0.9999),尿苷、鸟苷、腺苷平均加样回收率分别为97.83%、97.15%、98.08%,RSD分别为0.89%、0.69%、1.36%。结论所用方法准确、快速、可靠,能有效地测定半夏中的尿苷、鸟苷、腺苷。     

UPLC同时测定复方守宫散中核苷类含量

目的 建立UPLC法同时测定复方守宫散中腺嘌呤、腺苷含量的方法。方法 用Acquity BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速0.25ml/min,柱温26℃,检测波长254nm。结果 腺嘌呤、腺苷的进样量分别在0.0409~0.5115μg(r=0.9999)、0.0578~0.7220μg(r=0.9996)范围内与其峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为92.83%、94.90%,RSD分别为1.11%、1.70%。结论 该方法快速、可靠、准确,可作为复方守宫散的质量控制方法。     

高效液相色谱法同时测定人工蛹虫草子实体中核苷类成分的含量

目的:建立高效液相测定人工培养蛹虫草子实体中核苷类成分含量的方法。方法:采用KNAUER Eurospher-100 C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-50mmol.L-1磷酸二氢钾(7∶93)为流动相,检测波长为260nm。结果:测定3批人工培育蛹虫草中核苷类成分的含量,腺苷、腺嘌呤、虫草素的平均含量分别为0.14%,0.0095%,0.42%。结论:本方法能同时测定人工蛹虫草中多种核苷类成分的含量,具有较高的灵敏度,操作简单,可用于人工蛹虫草的质量评价。     

RP-HPLC法同时测定皮尔康胶囊中3个成分的含量

目的:建立RP-HPLC同时测定皮尔康胶囊中龙胆苦苷、黄芩苷、花椒毒素含量的分析方法。方法:采用DIONEX Ac-claim C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(14∶86)为流动相,流速1 mL·min-1,检测波长270 nm,柱温30℃。结果:龙胆苦苷、黄芩苷、花椒毒素进样量分别在0.10～1.5μg、0.032～0.47μg、0.0032～0.048μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9996～0.9999,n=5),平均回收率(n=6)分别为99.8%(RSD=0.76%)、100.2%(RSD=1.8%)、99.8%(RSD=1.9%)。结论:本法适用于皮尔康胶囊中龙胆苦苷、黄芩苷、花椒毒素3个成分的同时测定。     

高效液相色谱法测定苦碟子注射液中腺嘌呤核苷的含量

苦碟子注射液系抱茎苦卖菜提取的灭菌水溶液。临床用于冠心病、脑血栓及心绞痛等，具有扩张冠状血管，改善心肌血氧供应．增加纤维蛋白溶解酶活性，抑制血栓形成的作用。其中腺嘌呤核苷和黄酮为两种主要的活性成分。在辽卫药字(1998)40号药政批件中质量标准中，苦碟子注射液的含量测定方法为薄层一紫外分光光度法测定腺嘌呤核苷的含量。因其操作复杂，检验周期长，且重现性较差，后改为紫外分光光度法测定另一主要     

RP-HPLC双波长法同时测定熟地黄中4种成分的含量

目的建立RP-HPLC双波长同时测定熟地黄中4种成分含量的方法。方法色谱柱为WatersSunfire C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-体积分数0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长为λ1=210 nm和λ2=330 nm;流速为1.0 mL.min-1;柱温为30℃。结果梓醇、麦角甾苷、吉奥诺苷B1和马替诺皂苷质量浓度分别在125.0～2 000.0 mg.L-1(r=0.999 9)、11.0～176.0mg.L-1(r=0.999 9)、15.0～240.0 mg.L-1(r=0.999 9)和7.5～120.0 mg.L-1(r=0.999 8)内与峰面积呈良好的线性关系。加样回收率在97.5%～101.3%内。结论该方法灵敏,操作简便,结果可靠,可用于熟地黄药材的质量控制。     

正交试验优选熟地黄提取工艺

目的：以5-羟甲基糠醛及熟地黄总糖含量为评价指标，优选熟地黄最佳提取工艺。方法：采用L9（3^4）正交试验设计进行优选，RPHPLC法测定5-羟甲基糠醛含量，苯酚-硫酸法测定总糖含量。结果：最佳提取工艺为浸泡4h，第1次加12倍量水，提取120min，第2次加10倍量水，提取90min。结论：优选出的工艺科学合理。     

RP-HPLC法测定地黄及其复方制剂中尿苷和腺苷的含量

目的分别建立HPLC外标法测定地黄药材及其制剂中尿苷和腺苷含量的方法。方法采用Thermo C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),尿苷以5 mmol·L-1醋酸铵(乙酸调节pH为6.0)为流动相,腺苷以20 mmol·L-1磷酸二氢钾∶甲醇(90∶10)为流动相,流速均为1 mL·min-1,检测波长均为254 nm。结果尿苷浓度在4.17～20.85 mg·L-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好,腺苷浓度在1.01～20.23 mg·L-1(r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=9)分别为100.8%和100.1%。测得6批地黄药材中尿苷的平均含量为(0.027 8±0.003 5)%,腺苷的平均含量为(0.008 4±0.003 1)%。制剂中尿苷含量为0.032 1%,腺苷含量为0.006 9%。结论建立的方法准确可靠,专属性好,可作为地黄及其制剂中核苷含量测定方法。地黄药材中尿苷是主要的核苷成分,其它核苷成分含量甚微。     

HPLC-ELSD法同时测定熟地黄中果糖、葡萄糖含量

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定熟地黄饮片中葡萄糖、果糖的含量。方法色谱柱:ZorbaxRX-SIL(4.6×200mm);流动相:乙腈-水(95∶5);流速:1.0mL.min-1;柱温:25℃;ELSD:漂移管温度105℃,载气流速2.5mL.min-1。结果果糖在1.00～11.00μg范围内(r=0.99996),葡萄糖在0.95～10.45μg范围内(r=0.99991)线性良好,平均回收率分别为97.93%、98.65%,RSD分别为2.07%、2.48%(n=5)。结论该方法操作简便,可用来控制熟地黄饮片的质量。     

RP-HPLC法同时测定龙胆中3种活性成分的含量

目的:建立RP-HPLC法同时测定龙胆中龙胆苦苷、獐芽菜苦苷和獐芽菜苷的含量。方法:采用Diamasil C18(2)柱(250mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0～22 min,10%～16%A;22～25 min,16%～10%A);流速为1.0 mL.min-1;检测波长为240 nm;柱温25℃。结果:龙胆苦苷、獐芽菜苦苷和獐芽菜苷进样量分别在1.0～20μg(r=0.9997)、1.0～20μg(r=0.9995)、0.12～2.4μg(r=0.9995)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=9)分别为99.1%,98.8%和98.6%。结论:该方法准确、简便、具有良好的重现性和稳定性,适合于龙胆的质量控制研究。     

高效液相色谱法同时测定葛根提取物中5种异黄酮的含量

目的:建立葛根提取物中5种异黄酮含量测定的HPLC方法。方法:采用Hypersil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.02 mol·L-1醋酸铵(醋酸调pH=4.6)为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,检测波长为260 nm,柱温为35℃。结果:葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆素、染料木素分别在0.204～510.4μg·mL-1(r=0.999 9),0.201～503.0μg·mL-1(r=0.999 9),0.233～581.8μg·mL-1(r=0.999 9),0.201～502.4μg·mL-1(r=0.999 9),0.195～487.6μg·mL-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好。平均回收率(n=6)分别为101.52%(RSD=0.69%),102.66%(RSD=0.30%),98.90%(RSD=0.26%),98.64%(RSD=0.29%),100.16%(RSD=0.20%)。结论:本方法快速、简便、精密度和重现性好、灵敏度高,可作为葛根提取物的含量控制方法。     

RP-HPLC法同时测定金铃子汤中的5个主要活性成分

目的:采用反相高效液相色谱法建立金铃子汤中原阿片碱、黄连碱、巴马汀、延胡索乙素、川楝素含量同时测定的方法。方法:采用Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.05%醋酸水溶液(氨水调pH 6.0),梯度洗脱,流速0.8mL·min-1,检测波长230 nm,柱温30℃。结果:原阿片碱、黄连碱、盐酸巴马汀、延胡索乙素、川楝素质量浓度分别在1.76～35.2,1.84～36.8,2.20～44.0,2.24～44.8,8.48～63.6μg·mL-1范围内线性良好(r=0.9998～0.9999);平均回收率(n=6)分别为103.5%,101.2%,102.7%,100.9%,97.1%。结论:本方法简单快捷,测定结果准确,适用于金铃子汤中原阿片碱、黄连碱、巴马汀、延胡索乙素、川楝素的含量测定,可为金铃子汤的质量控制或中药配伍等方面给与全面、客观的评价。     

熟地黄植物胶囊亚急性毒性实验研究

目的：了解熟地黄植物胶囊的亚急性毒性。方法将大鼠分为阴性对照组及1.688、3.375、6.750g· kg-1 BW 3个剂量组。连续喂养30天后,采血作血常规及生化指标测定,取出肝、肾、脾、睾丸称重,并对肝、肾、脾、胃肠、睾丸、卵巢作组织病理学检查。结果熟地黄植物胶囊各剂量组给予大鼠喂养30天,试验期间,各组动物生长活动正常。试验结束时,各剂量组大鼠体重、体重增重、进食量、食物利用率、脏体比与对照组比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。雄性3.375g· kg -1BW剂量组中性粒细胞,1.688、6.750g· kg-1 BW剂量组血糖,1.688g· kg-1 BW剂量组甘油三酯;雌性3.375、6.750g· kg-1 BW剂量组谷丙转氨酶与对照组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）,但均在本实验室正常值范围内,本实验室认为无生物学意义。其余各剂量组大鼠的血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酐、血糖、总胆固醇、甘油三酯、总蛋白、白蛋白测定值、血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数和白细胞分类与对照组相比差异均无统计学意义（ P＞0.05）。对受检脏器作组织病理学检查,未见特异性病变。结论大鼠服用熟地黄植物胶囊30天,对机体未见不良影响。     

RP-HPLC法同时测定细辛中甲基丁香酚、黄樟醚和细辛脂素的含量

目的:建立同时测定细辛中甲基丁香酚、黄樟醚、细辛脂素含量的HPLC方法。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5"m)色谱柱,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长285 nm,柱温35℃。结果:甲基丁香酚、黄樟醚和细辛脂素的进样量分别在0.10～2.07μg、0.11～2.20μg和0.054～1.07μg内线性关系良好(r=0.999 9)。平均回收率(n=6)分别为98.4%,97.7%,98.6%;RSD分别为0.78%,0.41%,1.5%。结论:该方法简便、可行,重现性好,为细辛的质量控制提供参考。