高氧预适应后大鼠抗氧化酶活性及肺组织的变化

背景：连续高浓度吸氧可以提高大鼠抗氧化酶，同时对肺产生损伤作用。目的：观察间断、高浓度吸氧对大鼠抗氧化酶活性及肺组织的影响。设计：完全随机设计，对照实验。单位：解放军总医院老年心内科和生化科。材料：实验于2002-01／2002-05在海军总医院高压氧科和解放军总医院生化科内完成。选用健康Wister大鼠10只，体质量200～250g，雌雄不拘。随机将大鼠分为2组，每组5只。方法：对照组大鼠在室内环境喂养7d。高氧预适应组动物放入高压氧仓内，每日吸80％～85％的氧气(101．325kPa)6h，连续7d。实验结束后取大鼠肺称肺湿重。并取肺组织0．4g，在冰浴上制成匀浆，取上清液采用化学发光法分别测定超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶活性。将肺组织采用30g/L戊二醛固定，制成切片后电镜下观察肺脏超微结构。主要观察指标：①两组大鼠肺湿重及肺组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶活性比较。②肺组织超微结构改变。结果：大鼠10只均进入结果分析。①肺组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶活性：高氧预适应组均明显高于对照组[(185．10&;#177;1．92)％/g(90．50&;#177;4．17)nkat/g，(4．38&;#177;0．18K/g；(95．15&;#177;1．43)％／g，(20．17&;#177;2．17)nkat／g，(1．10&;#177;0．19)K／g，τ=-84．016，-33．488，-28．023．P&;lt;0．01]。②大鼠肺湿重：高氧预适应组与对照组相近[(1．32&;#177;0．07)，(1．30&;#177;0．03)g，P&;gt;0．05]，说明高氧预适应组肺内液体没有增加。③肺组织超微结构：高氧预适应组肺组织基膜完整、厚度均匀一致，血管内皮细胞完整，Ⅰ型上皮细胞无破坏。结论：间断、高浓度吸氧能提高大鼠肺内抗氧化酶活性，对大鼠肺无明显的损伤作用。     

血浆及红细胞中抗氧化剂水平和抗氧化作用与癫痫的关系

背景细胞内过氧化物质增加产生的氧化损伤可以加速癫痫发作的频率,而通过氧化还原作用消耗过氧化物,可起到对中枢神经元的保护作用.目的分析癫痫患者血浆及红细胞中抗氧化剂水平的变化.设计非随机同期化的平行对照(相互对照、空白对照).单位一所大学医院的检验科、精神科、药剂科.对象2000-03/12中南大学湘雅二医院神经内科门诊确诊的癫痫患者(癫痫疾病组)32例,均符合国际抗癫痫联盟的诊断及分类标准,且未经过任何治疗.男17例,女15例,年龄27～59岁.同期选择本院神经内科住院癫痫患者(治疗组)26例,符合国际抗癫痫联盟的诊断及分类标准,接受了1年多的苯巴比妥类药物的治疗,在此期间无癫痫急性发作的症状;男16例,女10例,年龄24～58岁.正常对照组为随机选取本院门诊体检人员39例,体检各项提标均在正常参考范围内;男23例,女16例.上述均为知情同意者.方法3组对象于清晨800～900空腹采集静脉血2 mL.采用酶偶联连续监测法测定红细胞的内谷胱甘肽还原酶,谷胱甘肽过氧化物酶,过氧化氢酶活性的测定.采用邻苯三酚自氧化比色法测定红细胞中超氧化物歧化酶活性.采用改良TBA比色法测定红细胞中丙二醛的含量.同时测定血红蛋白浓度和红细胞孵育渗透脆性(以溶血百分率计算).采用高效液相色谱法测定血浆维生素A,C,E含量.采用免疫散射测定法测定血浆铜蓝蛋白含量,评估3组抗氧化剂水平的变化及差异.主要观察指标各组对象红细胞谷胱甘肽还原酶,谷胱甘肽过氧化物酶,超氧化物歧化酶,过氧化氢酶,丙二醛含量、红细胞溶血百分率以及血浆中铜蓝蛋白、维生素A,C,E含量.结果按实际处理分析,仅癫痫疾病组中有1例未坚持治疗,其余对象均进入结果分析.①癫痫疾病组和治疗组的红细胞丙二醛含量,溶血百分率,谷胱甘肽过氧化物酶活性,过氧化氢酶活性及血浆铜蓝蛋白含量显著高于对照组[(176.5±12.0)μmol/L,(3.32±0.95)%,(1 503.6±130.0)nkat/g,(75.3±14.6)K/g,(487.0±25.4)mg/L,(129.5±7.4)μmol/L,(1.52±0.20)%,(1 323.6±95.0)nkat/g,(64.2±10.1)K/g,(345.0±15.2)mg/L,t=2.46～3.89,P＜0.05].②癫痫疾病组红细胞谷胱甘肽还原酶活性,超氧化物歧化酶活性和血浆维生素A,E,C含量显著低于正常对照组[(101.7±13.3)nkat/g,(20.2±0.8)μkat/g,(1.18±0.83)μmol/L,(20.7±4.5)μmol/L,(20.6±3.6)μmol/L,(213.4±45.0)nkat/g,(28.5±0.9)μkat/g,(3.14±0.30)μmol/L,(40.5±6.6)μmol/L,(38.1±5.1)μmol/L,t=2.46～2.97,P＜0.05].③治疗组的红细胞谷胱甘肽还原酶活性,超氧化物歧化酶活性,血浆维生素A,C含量均显著高于癫痫疾病组[(161.7±25.0)nkat/g,(26.7±0.9)μkat/g,(2.09±0.35)μmol/L,(26.2±4.1)μmol/L,t=2.46～2.66,P＜0.05].结论红细胞内谷胱甘肽还原酶和超氧化物歧化酶以及血浆维生素A,C,E,铜蓝蛋白水平下降,反应了癫痫发作时的自由基活动状况.     

番茄红素对臭氧致大鼠肺氧化损伤的拮抗作用

背景臭氧是一种强氧化剂,在体内引发脂质过氧化反应,损伤机体抗氧化酶类,形成氧化损伤.肺是人体与外界进行气体交换的主要器官,直接与外界相通,最早受到臭氧的攻击而形成氧化损伤.番茄红素是一种重要的类胡罗卜素,具有多种生物学作用,如抗氧化,抗肿瘤,诱导细胞间隙连接通讯等.目的探讨臭氧对大鼠造成的氧化损伤和番茄红素的保护作用.设计随机对照的实验研究.单位哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生检验中心,黑龙江省疾病控制中心,哈尔滨医科大学附属第一医院检验科.材料实验地点为哈尔滨医科大学公共卫生学院动物室.选用纯种雄性SD大鼠40只,由哈尔滨医科大学附属第二医院实验动物中心提供.干预分为正常对照组、臭氧损伤模型组、番茄红素低剂量组(10 mg/kg)和番茄红素高剂量组(20 mg/kg).除对照组外,其余各组大鼠吸入臭氧染毒,番茄红素组给予番茄红素,模型组和对照组不给番茄红素,3周后处死,取血清和肺组织并制备匀浆.主要观察指标血清和肺匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxiduse,GSH-Px)活力及丙二醛含量.结果臭氧能够明显影响大鼠抗氧化酶活性,降低SOD活性血清[(4 645.60±891.85)μkat/L,肺(566.28±164.70)nkat/g],GSH-Px活力[血清(1 921.38±336.23)μkat/L,肺(399.25±157.86)nkat/g],升高丙二醛含量[血清(10.21±2.86)μmol/L,肺(3.88±0.79)nmol/g].给予番茄红素后可使大鼠SOD活性升高[血清(6 014.20±1 152.40)μkat/L,(6 489.96±1 107.72)nkat/g,肺(814.66±208.88)nkat/g,(934.19±236.38)nkat/g],GSH-Px活力上升[血清(2 853.07±493.77)μkat/L,(2 898.41±397.58)μkat/L,肺(560.28±110.52)nkat/g,(583.95±116.86)nkat/g,丙二醛含量降低[血清(6.48±2.24)μmol/L,(6.29±1.68)μmol/L,肺(2.03±0.51)nmol/g,(1.87 ±0.48)nmol/g,与模型组相比,差异有显著性意义(P＜0 05).结论吸入臭氧能够造成机体氧化损伤,番茄红素可以拮抗臭氧造成的氧化损伤.     

银杏叶制剂对正常脑温脑缺血大鼠的脑保护作用

背景在银杏叶提取物治疗脑缺血的实验研究中,由于使用全身麻醉药物,有可能诱导脑温改变,影响实验结果准确性.目的研究常温状态下,国产银杏叶提取物对脑缺血再灌注组织抗氧化酶、脂质过氧化物及脑缺血组织含水量的影响.设计随机对照的实验研究.地点和材料实验在华中科技大学同济医学院完成.取24只Wistar大鼠,体质量为250～300 g,将实验大鼠随机分为假手术组(n=8)、脑缺血对照组(n=8)、脑缺血银杏叶提取物治疗组(n=8),对照组及治疗组参考Nagasawa方法,制备正常脑温大鼠左侧大脑中动脉缺血2 h再灌注2 h动物模型,进行对照研究.干预实验大鼠的脑温用颞肌温度反映,将测温探头包埋入大鼠左侧颞肌深部贴近骨外膜,用半导体氧化物温度传感器连续监测.用60 W白炽灯头部加温和自动双控颅脑降温仪调节脑温,使脑温维持在常温(36.5～37℃)水平.按设计方案制备正常脑温大鼠脑缺血再灌注损伤模型,脑缺血银杏叶提取物治疗组大鼠在手术前12,8,4 h和脑缺血及再灌注即刻,分别腹腔内注射银杏叶提取物注射液,每次3 mL,共5次.脑缺血对照组及假手术组大鼠腹腔内注射相同次数和剂量的生理盐水.主要观察指标脑缺血组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、还原型谷胱甘肽、丙二醛含量及脑缺血组织含水量.结果脑缺血对照组超氧化物歧化酶,谷胱甘肽过氧化物酶,还原型谷胱甘肽水平分别为(73.35±12.86)NU/mg,(167.37±54.34)μkat/g,(196.84±22.75)μg/g,明显低于假手术组的(96.02±16.83)NU/mg,(338.57±84.02)μkat/g,(337.51±34.89)μg/g(P＜0.01或P＜0.05);脑缺血银杏叶提取物治疗组超氧化物歧化酶,谷胱甘肽过氧化物酶,还原型谷胱甘肽水平分别为(87.24±15.03)NU/mg,(316.56±93.52)μkat/g,(263.16±28.54)μg/g,明显高于脑缺血对照组(P＜0.01或P＜0.05).脑缺血对照组丙二醛水平为(308.34±26.81)nmol/g,明显高于假手术组的(101.46±10.97)nmol/g(P＜0.01);脑缺血银杏叶提取物治疗组丙二醛水平为(125.86±13.90)nmol/g,明显低于脑缺血对照组(P＜0.01).脑缺血对照组脑缺血组织含水量为(80.45±0.44)%,明显高于假手术组的(78.20±0.25)%(P＜0.01);脑缺血银杏叶提取物治疗组脑缺血组织含水量为(79.63±0.46)%,明显低于脑缺血对照组(P＜0.05).结论正常脑温状态下,国产银杏叶提取物能抑制脑缺血时自由基的过多产生和脂质过氧化反应,减轻脑水肿和血脑屏障破坏,保护脑缺血组织.     

白藜芦醇甙对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

背景脑缺血时大量的自由基生成,使脑内脂质过氧化作用加强,导致细胞及细胞屏障损害,神经元坏死或凋亡,引起和加重缺血脑组织水肿.目的通过观察白藜芦醇甙对大鼠局灶性脑缺血后脑组织自由基、脂质过氧化物含量、脑含水量及病理形态学的影响,探讨其对脑缺血的保护作用.设计随机对照实验.单位重庆医科大学附属第二医院ICU和重庆医科大学附属儿童医院儿科医学研究所.材料实验于2001-10/2002-07在重庆医科大学儿科医学研究所完成.将48只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为3组,每组16只.缺血前白藜芦醇甙处理组缺血前30 min,经颈外静脉注射6 g/L白藜芦醇甙(12 mg/kg)溶液.假手术组大鼠仅在麻醉状态下分离右侧颈总动脉,不予阻断血流.缺血模型组建立大鼠右侧大脑中动脉梗死模型.假手术组、缺血模型组与缺血前白藜芦醇甙处理组以同样方式、剂量静脉给予生理盐水.大鼠大脑中动脉阻塞后2 h在麻醉状态下快速断头取脑.每组随机选取8只大鼠测定脑组织含水量,其余8只大鼠测定脑组织自由基及脂质过氧化物含量.方法应用干-湿重法测脑组织含水量,以硫代巴比妥酸法检测丙二醛水平、黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活性、化学比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶活性、化学比色法检测一氧化氮合酶活性,以比色法测定过氧化氢酶活性,并按Folin-酚试剂法标定蛋白含量,所有操作均严格按说明书进行.主要观察指标①各组大鼠脑组织含水量.②各组大鼠脑组织中丙二醛含量,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶及一氧化氮合酶活性.③各组大鼠脑组织病理学观察.结果48只大鼠均进入结果分析.①缺血前白藜芦醇甙处理组脑组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活性明显高于缺血模型组[(226.43±8.69),(193.37 ±11.14)NU/mg;(244.38±12.34),(211.71±16.50)μkat/g;(59.85±9.67),(35.51±7.67)μkat/g,(q=4.38～10.45,P＜0.01)].②缺血前白藜芦醇甙处理组脑组织中丙二醛含量、脑含水量明显低于缺血模型组[(6.38±0.54),(8.63±0.78)μmol/g;(78.72±0.43),(80.41±0.64),%,P＜0.01].③白藜芦醇甙有降低缺血脑组织中一氧化氮合酶活性的趋势,但与缺血模型组非常接近[(12.00±1.00),(12.84±1.17)μkat/g,P＞0.05].④病理学组织检查显示,白藜芦醇甙能减轻缺血所导致的脑水肿.结论白藜芦醇甙能减轻脂质过氧化反应,降低缺血脑组织中丙二醛含量,提高体内超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活性,抑制或减轻脑水肿形成,保护细胞膜功能,减轻缺血神经元功能损害,对局灶脑缺血性脑损伤具有明显的保护作用.     

老年大鼠血脂、载脂蛋白-胆固醇、过氧化脂质含量及单胺氧化酶活性与还少丹的干预作用

目的:探讨由何首乌、熟地、肉苁蓉等中药组成的还少丹对大鼠血脂、载脂蛋白-胆固醇、过氧化脂质含量和单胺氧化酶活性的影响。方法:实验于2005-04在湖南中医学院分子生物学实验室完成。24只健康SD老年大鼠,随机分为对照组和药物组,每组12只。药物组用还少丹水煎液(由何首乌、熟地、肉苁蓉等中药组成)灌胃2mL(含生药7g)/(kg.d),对照组用等量生理盐水灌胃,5d/周,另2d自由饮水,给药80d。大鼠禁食12h后取血,检测血脂和载脂蛋白-胆固醇的含量,测定血清谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量,并取脑组织测定单胺氧化酶活性。结果:21只老年大鼠进入结果分析。①三酰甘油含量:药物组明显低于对照组[(0.97±0.11,1.50±0.93)mmol/L,(t=11.98,P<0.01)]。②低密度脂蛋白-胆固醇:药物组明显低于对照组[(1.99±0.11,2.94±0.12)mmol/L,(t=18.68,P<0.01)]。③谷胱甘肽过氧化物酶活性:药物组明显高于对照组[(37.34±2.00,31.51±2.33)nkat/L,(t=6.25,P<0.01)]。④丙二醛含量:药物组明显低于对照组[(13.79±1.01,17.70±1.41)nmol/mL,(t=5.12,P<0.01)]。⑤单胺氧化酶活性:药物组明显低于对照组[(0.07±0.01,0.24±0.02)nkat/g,(t=13.27,P<0.01)]。结论:①还少丹能降低大鼠血清中三酰甘油、总胆固醇的含量,提高高密度脂蛋白胆固醇/低密度脂蛋白胆固醇的比值,起到抗动脉粥样硬化的效应。②有效地提高大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶活性,抑制大鼠脑内的单胺过氧化物酶活性,产生抗衰老的作用。     

铅中毒大鼠抗氧化酶活性的改变及核酸的干预效应

目的:观察染铅大鼠抗氧化系统的改变及核酸对其的影响。方法:实验于2003-03/05在哈尔滨医科大学公共卫生学院完成。选择Wistar大鼠32只,随机分为4组,即空白组、模型组、200mg/kg和700mg/kg核酸组,每组8只。空白组大鼠正常饮水,其余3组饮(8g/L)醋酸铅水溶液。另外空白组、模型组大鼠灌蒸馏水,200mg/kg和700mg/kg核酸组大鼠分别灌胃核酸200,700mg/kg,5周后麻醉处死动物,测定大鼠血清中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活性、丙二醛、谷胱甘肽含量及总抗氧化能力水平。结果:纳入32只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①各组大鼠血清超氧化物歧化酶、谷胱苷肽过氧化物酶活性及丙二醛含量比较:模型组血清超氧化物歧化酶、谷胱苷肽过氧化物酶活性显著低于空白组犤(5374.57±819.00,3516.37±597.62;7088.75±668.63,4677.10±856.84)μkat/L(q=4.02,6.03,P<0.05～0.01)犦,而丙二醛含量则显著高于空白组犤(8.63±1.47,6.64±1.06)μmol/L(q=4.52,P<0.05)犦。200,700mg/kg核酸组血清超氧化物歧化酶、谷胱苷肽过氧化物酶活性显著高于模型组,而丙二醛含量显著低于模型组(q=4.01～4.91,P<0.01)。②各组大鼠血清中谷胱甘肽含量、过氧化氢酶活性、总抗氧化能力水平比较:模型组血清谷胱甘肽含量、总抗氧化能力、过氧化氢酶活性均显著低于空白组(q=3.64～7.53,P<0.05～0.01)。200,700mg/kg核酸组血清总抗氧化能力、过氧化氢酶活性显著高于模型组(q=3.49～5.74,P<0.05～0.01)。结论:铅染毒能够造成实验大鼠机体氧化损伤,核酸能够提高机体抗氧化酶的活性,减轻铅中毒引起的过氧化损伤。     

车前子调整脂代谢及其抗氧化作用

背景抗氧化效能的营养素对脂质过氧化反应的抑制作用和对心血管疾病预防作用正日益受到人们的关注.目的探讨具有清除氧自由基、抗氧化作用的车前子对大鼠脂代谢及抗氧化作用的影响.设计随机对照实验.单位河北省新药药理毒理实验室.对象实验于2004-01/12在河北省新药药理毒理研究实验室完成.40只SD大鼠由河北省实验动物中心提供,健康一级,体质量(210±22)g,雌雄兼用.随机分为5组,空白对照组、阳性对照组、低剂量实验组、中剂量实验组和高剂量实验组,每组8只.方法空白对照组每天以基础饲料喂养,符合AoAc动物营养标准,自由饮水;阳性对照组每天以高脂饲料喂养,自由饮水;车前子低、中、高剂量组在高脂饲料的基础上分别加入2.5 g/kg,5 g/kg和15 g/kg的车前子,自由饮水.每周称重,记进食量,每隔两周采空腹血测定血清总胆固醇,12周后实验结束,麻醉下腹主动脉采血检测血清血脂水平和超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活性.取血后,立即取出心、肝进行处理,检测其心肌组织中超氧化物歧化酶的活性和脂质过氧化物的含量及肝组织中过氧化氢酶和谷光甘肽过氧化物酶的活性.主要观察指标大鼠血脂水平和超氧化物歧化酶及过氧化氢酶的活性.结果纳入40只大鼠均进入结果分析.[1]血清总胆固醇车前子高剂量组显著低于阳性对照组[(1.40±0.13,1.83±0.13)mmol/L,(P＜0.05)].[2]血清超氧化物歧化酶活性阳性对照组明显低于空白对照组[(174.29±10.33,193.19±.7813)NU/mg,(P＜0.05)].[3]心肌组织中脂质过氧化物含量阳性对照组显著高于空白对照组[(3.64±0.26,2.91±0.50)mmol/mg,(P＜0.05)];车前子中剂量组显著低于阳性对照组[(3.13±0.26,3.64±0.26)mmoL/mg,(P＜0.05)].[4]肝组织中过氧化氢酶活性阳性对照组明显低于正常对照组[(34.64±3.26,44.72±2.67)NU/mg,(P＜0.05)];车前子中剂量组明显高于阳性对照组[(44.84±3.79,34.96±3.64)Nu/mg,(P＜0.05)].结论车前子可降低大鼠血清总胆固醇、三酰甘油和脂质过氧化物水平并提高超氧化物歧化酶活性,在浓度为15g/kg时车前子清除氧自由基、抗氧化的作用最明显,可减轻脂质代谢紊乱.     

慢性苯染毒小鼠DNA损伤及体内抗氧化酶的变化

背景苯是重要的工业溶剂,长期接触可导致苯可导致 DNA损伤 ,染色体畸变 ,DNA加合物的形成,基因突变等. 目的了解苯对体内 DNA的损伤作用、机制以及抗氧化酶体系的变化情况. 设计随机对照的实验研究. 单位哈尔滨医科大学附属第一医院检验科,哈尔滨医科大学公共卫生学院. 材料实验在哈尔滨医科大学公共卫生学院动物室完成.选用健康雄性昆明种小鼠 24只 ,体质量 18- 22 g,由哈尔滨医科大学附属第二医院实验动物中心提供. 干预分为正常对照组、低剂量苯损伤组和高剂量苯损伤组.除对照组外,其余各组小鼠进行静式吸入苯蒸气染毒, 4 h/d, 2个月后处死,分离骨髓细胞及外周血淋巴细胞,取肝、脾、脑组织并制备匀浆.主要观察指标用单细胞凝胶电泳技术对骨髓细胞及外周血淋巴细胞 DNA损伤进行检测;同时检测肝、脾、脑组织中超氧化物歧化酶( superoxide dismulase, SOD )、谷胱肝肽过氧化物酶( glutathione peroxidase, GSH-Px)的活性及丙二醛( malondialdehyde, MDA )含量. 结果染毒组小鼠骨髓细胞及外周血淋巴细胞彗星百分率分别为骨髓细胞( 83.56± 10.28)% ,( 92.54± 15.93)%,外周血淋巴细胞 (41.27± 6.03)% ,( 65.79± 11.62)%,显著高于对照组( 4.13± 0.52)%, (2.21± 0.31)%( P< 0.01),并呈剂量-反应关系.高、低浓度组小鼠肝匀浆 SOD活力分别为( 11 573.31± 1938.72) ,( 12 574.68 ± 1938.72) nkat/g, GSH- Px活力分别为( 309.40± 82.85),( 375.41± 55.18) nkat/g,均显著低于对照组 [分别为 (16 668.67 ± 3 137.96),(588.62± 110.52) nkat/g](P< 0.05),但不同剂量组间差异无显著性意义;高、低浓度组小鼠脾匀浆 GSH-Px活性分别为( 421.75± 124.02)、( 523.10± 45.18) nkat/g,均显著低于对照组( 618.42± 57.01) nkat/g (P< 0.05),且不同剂量组间差异有显著性意义( P< 0.05);高、低浓度组小鼠脑匀浆 GSH-Px活性分别为( 87.35± 19.84) ,( 95.02± 14.00 nkat/g,均显著低于对照组( 118.36± 7.67) nkat/g(P< 0.05), 但不同剂量组间无显著性差异;高浓度组小鼠脑匀浆 MDA含量为( 3.99± 1.15) μ mol/g ,显著高于对照组( 2.58± 0.53) μ mol/g( P< 0.05). 结论慢性苯染毒可致小鼠骨髓细胞及外周血淋巴细胞 DNA损伤,体内抗氧化酶活性降低.     

复力康合剂影响成年雄性大鼠的运动能力

目的:观察复力康合剂提高雄性大鼠运动能力与延缓运动性疲劳的作用。方法:实验于2002-10/2003-02在成都体育学院动物实验室完成。将成年雄性SD大鼠60只随机分为4组,每组15只。空白对照组组仅以蒸馏水灌喂干预;单纯运动组灌喂蒸馏水和负重游泳;低剂量运动及高剂量运动组分别灌喂1.08g/mL,3.13g/mL复力康合剂和负重游泳。游泳训练1次/d,6次/周,4周后处死动物,测定血清睾丸酮、皮质醇、心肌肌浆和线粒体超氧化物歧化酶、谷胱甘肽还原酶活性、丙二醛含量。结果:实验过程中空白对照组,单纯运动组,低剂量运动组,高剂量运动组由于游泳力竭分别死亡6,6,3,8只,最终进入结果分析大鼠37只。①血清睾酮和皮质醇含量:单纯运动组血睾酮显著低于空白对照组犤(418±614)ng/L,(1138±1206)ng/L,(t=2.317,P<0.05)犦,低剂量运动组和高剂量运动组血睾酮显著高于单纯运动组犤(596±456)ng/L,(2565±1307)ng/L,(418±614)ng/L,t=2.296,P<0.05;t=4.672,P<0.01犦;单纯运动组、低剂量运动组、高剂量运动组皮质醇显著高于空白对照组犤(31.4±9.5)μg/L,(31.2±10.1)μg/L,(35.0±7.6)μg/L,(12.2±3.9)μg/L,t=2.612～3.721,P<0.01犦,3组间皮质醇含量基本一致(P>0.05)。②肌浆和线粒体内超氧化物歧化酶、谷胱甘肽还原酶活性和丙二醛含量:单纯运动组和低剂量运动组肌浆和线粒体超氧化物歧化酶活性均显著低于空白对照组犤肌浆:(132.3±15.0)NU/mL,(111.6±11.7)NU/mL,(162.2±17.9)NU/mL;线粒体:(118.1±9.5)NU/mL,(117.8±11.0)NU/mL,(178.3±7.9)NU/mL,t=2.634～3.896,P<0.01犦;单纯运动组和低剂量运动组超氧化物歧化酶活性基本一致。低剂量运动组的线粒体谷胱甘肽还原酶活性显著高于空白对照组犤(1.074±0.243)μkat/L,(0.810±0.242)μkat/L,t=2.447,P<0.05犦,其他各组谷胱甘肽还原酶活性基本一致;低剂量运动组线粒体丙二醛含量显著低于单纯运动组犤(2.92±0.28)μmol/L,(5.14±1.11)μmol/L,t=4.010,P<0.01犦。结论:复力康合剂能有效地改善雄性大鼠的运动性低血睾现象,且高剂量运动组效果更为明显。复力康合剂能降低雄性大鼠心肌线粒体丙二醛含量,提示具有抗脂质过氧化作用。复力康合剂对雄性大鼠超氧化物歧化酶、谷胱甘肽还原酶活性无明显影响。复力康合剂对增强机体运动能力有良性作用。     

中药注射液血必净联合激素防治鼠百草枯中毒后的肺损伤

目的 探讨中药注射液血必净联合激素对大鼠百草枯中毒急性慢性肺损伤的防治作用及可能机制.方法 雄性Wistar大鼠120只平均随机分六组,每组20只:正常组(A),中毒组(B),治疗组(C,D,E,F).除A组予等量生理盐水外,其余各组予20%百草枯(PQ)100 mg/kg腹腔汴射(ip)染毒2 h后,C,D,E,F组分别予血必净(1.25 g/kg)、血必净(2.5 g/kg)、地塞米松(25 mg/kg)、血必净(2.5g/kg)+地塞米松(25 me/kg),ip,A,B组予等量生理盐水治疗,1次/d,至处死,而28 d处死者治疗7 d.观察各组大鼠反应,丁染毒后2,3,4 d每组每大各处死5只,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及3 d动脉血气、肺系数;于28 d处死剩余鼠,测定肺匀浆羟脯氨酸(HYP)、血清TCF-β1.A,B,F组行3 d,28 d肺病理检查.结果 治疗组巾毒症状较B组轻,F绀最轻;各治疗组不同时间点SOD,MDA及血气,TGF-β1,HYP较B组佳,治疗组巾F组最佳,其中B,F组的3 d时的SOD,MDA及28 d时的HYP,TGF-β1分别为(37.47±13.00)nmol/mL,(91.86±21.35)nmol/mL;(11.34±3.07)nmol/mL,(5.63±1.58)nmol/mL;(2.54±0.63,1.32±0.07)mg/g;(484.13±63.79,202.22±49.83)pg/mL,差异均具有统计学意义(P＜0.05).肺病理显示F组急性期肺出血、肺实变及慢性期肺纤维均较B组轻.结论 血必净联合激素于中毒早期有较强清除氧自由基、抑制脂质过氧化反应的能力,可以减轻急性肺出血、肺水肿;晚期通过抑制TGF-β1分泌和HYP的合成,减轻慢性肺纤维化.     

内皮祖细胞移植对百草枯中毒所致急性肺损伤MAPK通路蛋白表达的影响

目的观察百草枯(PQ)中毒导致的急性肺损伤后内皮祖细胞(EPCs)移植治疗对大鼠肺组织丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路蛋白表达的影响。方法36只SD雄性大鼠按随机数字表法平均分成三组:正常对照组、PQ损伤组和EPCs治疗组,每组12只。EPCs移植后24 h处死大鼠并收集大鼠肺组织和血清。分别采用比色法测定肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中细胞炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,血气分析仪检测大鼠动脉血氧分压(PaO₂),肺组织切片后通过HE染色对肺损伤程度进行评估,Western blot方法测定肺组织中MAPK信号通路蛋白表达。结果与对照组比较,PQ损伤组大鼠血清IL-1β(μg/L:25.16±1.71 vs.34.94±1.68)和TNF-α(μg/L:51.17±2.33 vs.78.46±5.16)含量明显增加(P<0.05),PQ损伤组大鼠肺组织中MDA(nmol/m L:3.08±0.19 vs.6.89±0.44)含量明显增加(P<0.05),但是SOD(U/m L:249.11±4.71 vs.191.15±3.21)活性降低,且PaO₂(mm Hg:92.19±3.31 vs.40.18±5.54)下降(P<0.05);与PQ损伤组比较,EPCs治疗组大鼠SOD(U/m L:191.15±3.21 vs.216.64±2.39)活性升高(P<0.05),MDA(nmol/m L:6.89±0.44 vs.5.13±0.40)、IL-1β(μg/L:34.94±1.68 vs.26.11±1.43)和TNF-α(μg/L:78.46±5.16 vs.60.18±4.31)含量降低(P<0.05),PaO₂(mm Hg:40.18±5.54 vs.56.81±5.16)升高(P<0.05)。MAPK通路蛋白的磷酸化水平在对照组中仅有少量表达,而给予百草枯后表达量显著升高(P<0.05),使用EPCs治疗后各蛋白表达量又显著降低(P<0.05)。结论百草枯中毒可激活包含p38MAPK、C-JUN氨基末端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)在内的MAPK通路。EPCs可以改善PQ中毒大鼠症状,减少肺部损伤,改善供氧,其机制可能与抑制MAPK通路各蛋白磷酸化有关。     

丹菟注射液对创伤性关节炎大鼠血清氧自由基的影响

背景创伤性关节炎的治疗目前仍是临床上一个棘手的问题,传统中医药治疗对创伤性关节炎有独到的优势,但其机制有待探究.目的探讨丹菟注射液对创伤性关节炎动物模型血液中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛水平的影响.地点和对象实验在暨南大学医学院第六附属医院内完成,对象为Wistar大鼠36只,雌雄各半,体质量(250±49)g,由湖南中医学院动物实验中心提供.设计随机对照实验.干预将36只大鼠随机分为3组丹菟注射液组、生理盐水组及正常对照组.丹菟注射液组及生理盐水组建立创伤性关节炎模型.3组动物分别予丹菟注射液和生理盐水皮下注射及不做任何处理.于第8周处死动物,采集标本.主要观察指标大鼠血一氧化氮,SOD,丙二醛水平.结果骨关节炎大鼠血中一氧化氮,SOD,丙二醛的变化结果生理盐水组分别为(63.11±20.01)mmol/L,(2023±321)nkat,(5.19±0.85)mmol/L,丹菟注射液组分别为(48.79±16.89)mmol/L,(2315±248)nkat,(4.02±1.38)mmol/L.与生理盐水组比较,丹菟注射液能降低动物血清中一氧化氮(t=2.118,P＜0.05)和丙二醛(t=2.782,P＜O.05)的水平、提升SOD(t=2.796,P＜0.05)的含量.结论丹菟注射液可通过抑制一氧化氮的表达,激活SOD,清除氧自由基,降低脂质过氧化程度,从而达到保护关节软骨,防治骨关节炎的目的.     

罗格利酮对伴高脂血症大鼠重症急性胰腺炎肺损伤的作用研究

目的 探讨罗格列酮(ROSI)对伴高脂血症大鼠重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤的保护作用及其可能机制.方法 雄性SD大鼠120只,脂肪乳剂灌胃两周.随机(随机数字法)分为6组:高脂血症组(HL)、伴高脂血症SAP组(HP)、罗格列酮干预组(HRP)、罗格列酮拮抗组(HRGP)、罗格列酮对照组(HR)、拮抗剂对照组(HG),每组各20只.HP组、HRP组及HRGP组逆行胰胆管注射5％牛磺胆酸钠(1 mL/kg)建立SAP模型.HL组、HR组和HG组操作同HP组、HRP组及HRGP组,但胰胆管内仅注入等容量生理盐水;HRP组和HR组于造模前经股静脉注射ROSI (10 mg/kg);HRGP组于注射ROSI前30 min经股静脉注射GW9662(0.3 mg/kg),其余操作同HRP组,HG组仅于造模前30 min经股静脉注射GW9662 (0.3 mg/kg).于12h观察大鼠胰腺、肺脏病理学变化;计算肺湿干比(W/D);测定血清淀粉酶(AMY)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的含量;免疫组织化学法检测各组肺组织NF-κB p65蛋白的表达;Western-Blot法检测各组肺组织肿瘤坏死因子(TNF-α)及细胞间黏附分子(ICAM-1)的蛋白表达水平.结果 HL组和HP组的TG、TC的血清水平均明显高于HR组和HRP组(1.24±0.28,1.14±0.08vs.0.41±0.17,0.58 ±0.12;14.86±1.47,12.42 ±0.96 vs.6.52±2.04,7.36±0.95;均P＜0.05);HP组、HRGP组大鼠血清AMY、肺湿干比(W/D)、胰腺、肺组织病理学评分、肺组织NF-κB p65蛋白表达及TNF-α、ICAM-1蛋白表达水平均较HL组、HR组及HG组的各项指标有显著升高(6 501.9±3 770.0,5 922.2±925.9 vs.1 139.3 ±35.6,1 070.8 ±67.0,1 012.4 ±94.7;3.14 ±0.16,3.06±0.12 vs.1.81 ±0.13,1.76±0.23,1.83 ±0.18;均P＜0.05);HRP组的大鼠肺脏病理学评分、肺湿干比(W/D)、肺组织NF-κB p65蛋白表达及TNF-α、ICAM-1蛋白表达水平均较HP组和HRGP组有所降低(均P ＜0.05),HRGP组各项指标均与HP组差异无统计学意义(均P＞0.05).HL、HR及HG三组的各项指标进行相互比较,差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 PPAR-γ激动剂罗格列酮可以降低伴高脂血症SAP大鼠肺水肿程度,并可以通过降低血脂水平和抑制肺组织NF-κB的表达,减少其下游炎性因子TNF-α和ICAM-1的表达,对伴高脂血症SAP大鼠肺损伤产生保护作用.     

Protective effect of lipophilic antioxidants on phorbol-induced acute lung injury in rats

OBJECTIVE: To determine whether the lipophilic antioxidant U-74389G can ameliorate the acute lung injury induced by phorbol myristate acetate (PMA) in our isolated lung model in rats, and to compare its activity with the intracellular enzymes superoxide dismutase (SOD) or catalase. DESIGN: Randomized, controlled study. SETTING: Animal-care facility procedure room. SUBJECTS: Forty-two adult male Sprague-Dawley rats each weighing 250-350 g. INTERVENTIONS: Typical acute lung injury was induced successfully by PMA during 60 mins of observation. PMA (2 microg/kg) elicited a significant increase in microvascular permeability (measured by using the capillary filtration coefficient Kfc), lung weight gain, the lung weight/body weight ratio, pulmonary arterial pressure, and the protein concentration of the bronchoalveolar lavage fluid. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: Pretreatment with 1 mg of U-74389G significantly attenuated the acute lung injury induced by PMA, all parameters having decreased significantly (p <.001). The protective effect of U-74389G was dose dependent, but SOD (6,000 U/kg) or catalase (50,000 U/kg) exhibited no protective effect. CONCLUSIONS: U-74389G significantly ameliorates acute lung injury induced by PMA in rats.     

氨基胍对烟雾吸入性肺损伤的影响

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂氨基胍(aminoguanidine,AG)对大鼠烟雾吸入性肺损伤的影响。方法40只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(n=8)、烟雾吸入组(n=16)和AG治疗组(n=16)。建立烟雾吸入性肺损伤模型,AG治疗组于致伤后立即腹腔注射AG50mg/kg。正常对照组及烟雾吸入组腹腔注射等容量生理盐水。分别于2、6、12、24h时相点进行动脉血气分析,并分批处死大鼠,取肺组织测肺含水量,制备肺组织匀浆检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、各型一氧化氮合酶(NOS)活性及一氧化氮(NO)含量。制作肺组织病理切片,光镜下观察病理变化。结果与烟雾吸入组相比,AG治疗组动脉血氧分压显著升高(P<0.05),肺组织含水量降低(P<0.05),肺组织中SOD活性及CAT活性升高(P<0.05),iNOS活性及NO含量降低(P<0.05)。结论AG能够升高动脉血氧分压,提高烟雾吸入性肺损伤肺组织抗氧化能力,减轻肺组织氧化性损伤,减轻肺水肿,并减轻组织炎性浸润,对烟雾吸入性肺损伤有较好的保护作用。