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结直肠癌在全球癌谱中的地位逐渐上升。据联合国欧洲消化病联合会统计,2000年结直肠癌在欧洲癌谱中高居第三位;而我国2000年结直肠癌发病率也仅次于肺癌位居第二。研究已表明,结直肠癌是结直肠上皮细胞受遗传和环境等多种因素作用导致基因畸变的结果。迄今,结直肠癌的确切发病机制仍不十分清楚,但随着分子生物学技术的发展和广泛应用,结直肠癌的分子遗传学特征已逐渐被人们所了解。 相似文献
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目的新型阳离子核酸载体LW13-2进行研究,分析其细胞毒性和基因转染效率,探讨其作为核酸载体的可能性。方法使用MTT比色法分析LW13-2与DNA在不同比例下的细胞毒性。选用绿色荧光蛋白表达质粒EGFP为报告基因,以人胚胎肾HEK293细胞为工具细胞,在荧光显微镜下观察计数,计算转染效率。结果当LW13-2与DNA的质量比为(1~3)∶1时,细胞毒性最低。LW13-2与DNA的质量比为3∶1时,转染作用4 h,在无血清培养基中继续培养48 h,得到LW13-2的最大转染效率为87.6%。结论通过与市售成熟转染试剂Lipofectamine 2000的对比,新型阳离子核酸载体在大幅提高基因转染效率的同时并没有增加其细胞毒性,有望成为核酸转移的有效载体,为相关研究及基因的靶向治疗研究提供基础。 相似文献
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聚乙二醇修饰的阳离子脂质体作为siRNA传递系统的处方优化 总被引:1,自引:1,他引:0
研究摩尔分数为0%~5%的聚乙二醇(PEG)修饰的阳离子脂质体作为siRNA传递系统的优劣。制备了两组高低电荷的空白阳离子脂质体,分别含有摩尔分数为40%和20%的1,2-二油酰基-3-三甲氨基丙烷(DOTAP),以人胰腺癌细胞株Hs-766T作为细胞模型,比较了细胞膜表面结合量及内吞量分别随时间和细胞外给药浓度变化的动力学曲线;结果显示4 h时细胞表面结合达到稳态,高电荷脂质体组与细胞的结合量明显高于低电荷脂质体组,PEG的加入使脂质体与细胞表面的不饱和型结合转变为可饱和型。采用共聚焦显微镜定性观察载siRNA的阳离子脂质体在6 h的细胞内分布情况,结果表明摩尔分数为40%DOTAP与0%~2%PEG组合有效地将siRNA转运至细胞质,而40%DATAP与5% PEG组合对转运无效。 相似文献
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近年来,肝癌的癌基因研究有所深入,致癌因素对癌基因的影响是当前研究癌基因的一个新动向。肝癌是多基因共同作用的结果,人体内存在癌基因亦存在抗癌基因。晚近发现P53基因在肝细胞转化中可能起重要作用。基因治疗为癌基因研究开辟了一个广阔的前景。 相似文献
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非病毒基因载体的研究进展 总被引:1,自引:1,他引:0
理想的转基因载体应具有安全性高、生物相容性好、靶向特异性强及体内外转染效率高的特性.非病毒基因载体具有低免疫原性和易制备等特点,是一类较为理想的基因载体. 相似文献
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前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤之一,也是男性重要的癌症致死原因,其发病与基因表达异常有关。本综述了前列腺癌的形成抑制基因和转移抑制基因的结构特点、抑制机理及基因表达异常对肿瘤的发生发展、癌细胞的生长、浸润和转移的研究进展情况,并对抑癌基因的研究前景进行了展望。 相似文献
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阳离子聚合物纳米基因载体的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
由于阳离子聚合物等非病毒纳米基因导入载体安全、低毒、装载容量大、制备容易等优点已引起越来越多的关注,对提高其转导效率的研究也较多。该文作者对PLL和PEI等阳离子聚合物纳米基因载体的研究进展进行了综述。 相似文献
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通过氧化、席夫碱反应及与氮丙啶的接枝反应,对地黄多糖(RGP)进行阳离子化改性,得到新型载体阳离子化地黄多糖(C-RGP)。利用红外光谱、核磁共振氢谱、热重分析对C-RGP进行结构表征。粒径、电位分析以及琼脂糖凝胶电泳结果显示,C-RGP可以通过静电作用负载质粒脱氧核糖核酸(DNA)。噻唑蓝实验表明该载体没有细胞毒性。当构建载体与绿色荧光蛋白表达载体(pEGFP)质量比为18/1时,转染效率高达(90±0.25)%。载体负载核糖核酸(RNA)干扰(RNAi)表达载体pshEGFR转染肝癌细胞SMMC-7721,靶基因hEGFR mRNA表达下调(67±1.61)%。 相似文献
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多价阳离子脂质体介导重组基因pCKM-mPTH治疗甲状旁腺功能低下症的实验研究 总被引:4,自引:1,他引:4
目的探讨多价阳离子脂质体介导的pCKM-mPTH质粒治疗甲状旁腺功能低下症(HPT)的最佳方案。方法用DNaseⅠ敏感性试验测定脂质体对质粒的保护作用,用不同比例的脂质复合物及裸质粒进行体内外转染,收集细胞培养液和血清,采用放射免疫法测定其甲状旁腺激素(PTH)含量。结果脂质复合物比例为2∶1时,即对DNA有明显的保护作用;在体外转染实验中,复合物比例在3∶1时PTH表达量最高,为每24小时(16.4±4.8)pg/10 000细胞,而在此比例下pCKM-mPTH质粒达20μg/100μl时,模型体内PTH的血清浓度最高,为35.9 pg/m l±2.2 pg/m l。结论与裸质粒相比,多价阳离子脂质体更适宜于作为HPT基因治疗的非病毒载体,而其介导重组质粒pCKM-mPTH直接转染肌肉的良好效能取决于脂质复合物的构成比例和剂量。 相似文献
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针对CRISPR/Cas9系统在DNA、RNA和蛋白3种水平的递送形式,本文着重介绍了CRISPR/Cas9系统的病毒载体和非病毒载体的研究现状和CRISPR/Cas9系统递送的新策略,及其在生物医学领域和基因相关疾病治疗的应用进展。通过对CRISPR/Cas9系统递送和基因治疗策略进行总结与阐述,为创新药物的发现和基因治疗的开发提供新思路。 相似文献
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不同阳离子脂质体介导基因转染效率的比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的评估不同脂质体介导基因转染条件及效率。方法以大肠杆菌β-gal基因为报告基因,比较三种阳离子脂质体(lipen、lipotecfamine和Dosper)在不同的脂质体:DNA比例、不同细胞汇合度、不同转染时间及血清存在条件下转染情况。通过x-gal染色法观察不同脂质体的转染效率。结果三种阳离子脂质作的最优条件不同。Dosper转染效率最高,蓝染细胞达18%。结论通过条件优化可使脂质体转染效率提高。有望成为一种有效的非病毒基因转移方法应用于基因治疗。 相似文献
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在治疗前列腺癌的各种传统方法中,普遍存在着杀伤癌细胞的同时对正常组织器官造成损伤的现象。近年来兴起的靶向治疗在一定程度上能很好地解决这一问题。但作为靶向治疗的载体,病毒类载体存在免疫原性大、毒性大等缺点,而非病毒类载体靶向治疗前列腺癌往往能克服这些缺点。本文综述了以阳离子聚合物、脂质体和壳聚糖聚合物为主的非病毒类载体包裹基因药物靶向治疗前列腺癌的研究进展。 相似文献
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目的 提高阳离子脂质体介导的肺癌细胞基因转染效率。方法 采用表达E.coliβ-半乳糖苷酶的pCMVβ报告基因质粒及组化染色评价阳离子脂质体的转染效率。优化脂质体介导肺癌细胞基因转染效率的条件包括:脂质体:DNA电荷比率,DNA转染剂量,阳离子脂质体的类型。结果 当阳离子脂质体:DNA电荷比率(+/-)为3:1时,pCMVβ的剂量为4ug/孔(24孔板)时,阳离子脂质体DOSPER介导肺癌细胞株S 相似文献
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目的 探讨抑癌基因 p5 3和 Rb对膀胱癌细胞的生长抑制作用。方法 利用逆转录病毒和电穿孔法将 p5 3、Rb单独或联合导入膀胱癌细胞株 T2 4中 ,Northern杂交等证实外源目的基因的表达后 ,观测并比较不同转染后细胞的生长、增殖水平和成瘤性等。结果 获得 p5 3、Rb单独和联合转染的 T2 4细胞 ,Northern杂交等证实 T2 4细胞中 p5 3失活而 Rb正常 ,转入的外源野生型 p5 3基因和 Rb基因均被表达。与未转染的对照组 T2 4细胞相比 ,转入 p5 3的细胞其生长速率明显降低 ,细胞增殖受抑制 ,软琼脂克隆形成能力丧失 ;而只转染 Rb的细胞除软琼脂克隆形成能力有所降低外 ,细胞生长和增殖未受明显抑制。结论 外源野生型 p5 3能抑制 T2 4生长并降低其成瘤性 ,增加 Rb的表达对细胞生长无明显抑制作用。p5 3对 T2 4细胞的生长抑制作用与外源 Rb基因导入与否无明显关系 ,Rb表达水平正常的膀胱癌细胞其异常增殖可能与 Rb蛋白磷酸化状态的关系更为密切。 相似文献
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纳米基因载体的研究进展 总被引:8,自引:0,他引:8
近年来,基因治疗迅速发展。基因治疗的主要过程是目的基因的获取和高效的基因转染。基因治疗成败的关键是基因治疗的载体系统。高效、安全是载体应具备的最基本条件。目前基因转染常用的载体有病毒型载体和非病毒型载体。病毒型载体在当前批准进入临床试验的基因治疗中占75%,转染效率通常在90%以上,但病毒蛋白有诱发机体产生免疫反应、体内潜在的病毒复制、生产成本高、不能反复应用、无靶向性等缺点。特别是在1999年的基因治疗临床试验中出现腺病毒载体致人死亡事件后,人们把注意力与希望逐步转向非病毒载体。非病毒型载体虽然制备简单、无免疫原性和比较安全,但是转染效率低是其致命缺点,尤其是在血清蛋白存在的情况下。所以寻找一种既高效又安全的基因载体是基因治疗领域面临的最紧要课题。 相似文献
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Kirsten大鼠肉瘤病毒癌(KRAS)基因突变是非小细胞肺癌中最常见的变异之一,尤其是KRAS-甘氨酸12-半胱氨酸(KRAS-G12C)突变最为常见。目前针对这种突变的传统化疗效果不佳,亟需寻找新的靶向治疗策略。但由于KRAS突变型非小细胞肺癌具有复杂的信号通路和高度生物学异质性,研发相应的靶向药物颇具挑战。索托拉西布是FDA批准的首个针对KRAS-G12C突变的靶向药物,治疗效果显著且安全性良好,但面临获得性耐药问题。最新研究表明,KRAS-G12C靶向抑制剂与其他疗法联合治疗具有良好的抗肿瘤活性,合理的治疗组合有望提高疗效。本文旨在对KRAS突变型非小细胞肺癌靶向治疗的早期研究困境、目前治疗突破和KRAS-G12C的最新研究进展作一综述,并对未来研究方向进行展望,以期为相关专业人员提供参考。 相似文献