内毒素休克小鼠肝脏细胞质膜差异蛋白质组的二维液相色谱分析

目的:建立和优化肝脏细胞质膜蛋白质研究的方法系统,并对正常组小鼠和内毒素休克小鼠组肝脏细胞质膜蛋白质进行二维液相色谱分离,分析两者之间的差异表达谱.方法:BALB/c 小鼠20只随机分为正常组和内毒素休克小鼠组(10只,LPS刺激3 h,LPS剂量为35 mg/kg),n=10.采用差速离心结合蔗糖密度梯度离心法分离和富集两组肝脏细胞质膜蛋白,分别将两组样品按蛋白质PI进行一维的色谱聚焦分离,然后每个PT组分再按蛋白质的疏水性经二维HPLC分离,利用Proteo Vue软件将UV光吸收图谱转换成PI对疏水性的胶样图谱,再利用DeltaVue软件分析两组肝脏质膜蛋白质组的表达差异.结果:图像分析显示两组比值在≥2.0及≤0.5的差异蛋白点共有24个,与正常组比较,在内毒素休克小鼠的肝脏质膜蛋白中有16个蛋白点表达上调,8个蛋白点表达下调.结论:正常组和内毒素休克小鼠组的肝脏质膜蛋白质组有明显差异.     

Kupffer细胞在内毒素诱导肝损伤发病机制中的作用

内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肝损伤参与了多种肝脏疾病发生发展的进程,肝脏巨噬细胞(即Kupffer细胞)在LPS诱导肝损伤的过程中发挥着重要作用.一方面,Kupffer细胞通过LPS4信号转导系统被激活而释放促炎因子,并在肝脏内其他细胞的相互作用下介导肝脏损害:另一方面,Kupffer细胞的活性又被LPS耐受和其他生理调控机制所抑制,避免Kupffer细胞活化而诱导肝脏损害.因此,Kupffer细胞同时受到激活和抑制性因素的共同作用并维持在相对平衡状态,一旦这种平衡机制被病理因素打破,就可能招致肝脏损伤;而Kupffer细胞活性的抑制性干预就成为保护内毒素诱导肝损伤的重要策略.     

肝血窦在内毒素致肝损伤中的作用

内毒素是革兰阴性菌细胞壁中的特有成分,又称脂多糖(LPS)。肝脏既是清除细菌和内毒素的场所,又是最易受损的器官。肝损伤最初发生在肝血窦。主要介绍了LPS对Kupffer细胞、肝窦内皮细胞、肝血窦中氧化/抗氧化平衡及肝脏血流的影响。认为肝血窦在LPS所造成的肝损伤中的作用不容忽视,研究其对防治LPS致肝损伤有重要意义。     

磷脂转运蛋白和内毒素的研究进展

<正>磷脂转运蛋白(PLTP)主要参与磷脂在脂蛋白之间的转移,与动脉粥样硬化的形成有密切关系〔1,2〕。近有研究指出PLTP和脂多糖(LPS)的代谢密切相关,可以促进LPS和高密度脂蛋白(HDL)的结合,然后以类似胆固醇逆转运(RCT)的形式运回肝脏,通过胆汁排出体外,从而使血浆中游离LPS浓度下降,减少脓毒血症的发生〔3〕。研究表明肝脏的X受体(LXR)和组成性雄甾烷受体(CAR)对LPS诱导的肝脏和肺损伤具有保     

肝硬化患者的内毒素血症与肝性脑病和死亡率

内毒素[脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)]是革兰氏阴性杆菌细胞壁的组成成份。正常情况下,肠道细菌产生的 LPS 被吸收进入门脉,并由肝脏网状内皮系统清除。胃肠道出血、低血压、肠道水肿均可增加 LPS 的吸收。在急、慢性肝病患者,由于对LPS 的吸收增加和肝脏损害,可导致全身性内毒素血症。作者采用最新的鲎吞噬细胞溶解定量测定(limulus amebocytelysate,LAL),研究肝硬化患     

谷氨酰胺和地塞米松对脓毒症幼年大鼠肝脏肿瘤坏死因子-α与基质金属蛋白酶3的影响

目的:通探讨谷氨酰胺(Gln)和地塞米松(Dex)对脓毒症肝损伤的保护作用方法:ip大肠杆菌脂多糖(LPS)制备幼年大鼠脓毒症模型,按照ip药物不同分为对照组(C,n =8,ip生理盐水1 mL/kg);内毒素组(L,n=40,ip LPS 4 mg/kg),治疗组(T,n=40,ip LPS 4 mg/kg后1 h ip Dex 5 mg/kg Gln 1 mL/kg),在注射内毒素后0 h(只限对照组),2,4,6,24和72 h取肝右叶,采用免疫组化的方法测定肝组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)和基质金属蛋白酶3(MMP3)蛋白质合成水平。结果:与C相比,L组TNF-α蛋白质表达明显高于对照组(P<0.01),24 h达高峰,72 h虽然有所降低但仍明显高于对照组(P<0.05).T组各时点TNF-α蛋白质表达均高于对照组,但增高幅度明显低于L组(P<0.01),与对照组相比,L组MMP3蛋白质表达明显升高,24 h达高峰,72 h有所降低,但仍高于对照组(P<0.01);T组较L组明显减低(P<0.01)。L和T组肝脏组织中TNF-α与MMP3改变均呈明显正相关(r= 0.928,r=0.939)。结论:联合应用谷氨酰胺与地塞米松可以抑制TNF-α和MMP3的合成,从而减轻脓毒症幼年大鼠的肝脏损伤和重塑。     

重型肝炎的临床诊治和研究进展——第三讲 内毒素血症在重型肝炎发病中的地位

一个世纪前，Pfeiffer首先提出“内毒素”一词，是指革兰阴性细菌培养滤液中具有生物活性的稳定物质。广义地讲，内毒素是指革兰阴性细菌细胞壁的外部结构而言，其化学成分是磷脂-多糖-蛋白质复合物。进一步研究表明，内毒毒的主要成份是脂多糖(LPS)，所以现认为LPS即为革兰阴性细菌的内毒素。LPS是一个复杂的大分子，含有与多糖共价结合的脂类，即类脂A(LPS的“毒力中心”)。     

核因子-кB与内毒素介导的肝损伤

严重感染导致的内毒素血症是引起全身炎症反应和死亡的主要原因之一，革兰氏阴性细菌细胞壁成分脂多糖（1ippolysaeeharide，LPS）是其主要致病因素。LPS直接介导大量炎症介质释放，从而导致组织器官损伤，肝脏是其中重要受累器官之一。而炎症介质的合成和释放主要是由核因子-KB（nuclearfactor-KB，NF-KB）调控的。     

内毒素调节肝脏β-葡萄糖苷酸酶mRNA的表达

目的:研究内毒素对小鼠肝脏细胞β-葡萄糖苷酸酶(GUSB)mRNA表达及其血清活性的影响.方法:选择23只BALB/c小鼠分为2组,对照组5只,腹腔注射不含内毒素的生理盐水;其余小鼠为实验组,腹腔注射LPS,并于注射后的1/2、2、4、24 h采用酶促动力学方法检测内源性β-葡萄糖苷酸酶(β-GD)活性;取肝脏,采用半定量RT-PCR方法检测GUSB mRNA的表达.结果:小鼠腹腔注射内毒素1/2、2和4h后,血清β-GD活性(3.96±0.88,4.40±0.55,5.65±0.58)显著高于对照组(2.14±1.46,P<0.05),而LPS 24 h组与对照组无显著性差异;内毒素刺激BALB/c小鼠2 h和LPS 4 h,其肝脏细胞GUSB mRNA表达(1.10±0.23,1.81±0.04)显著高于对照组(0.57±0.36,P<0.05),LPS 1/2 h和LPS 24 h的GUSB mRNA表达与对照组相比无显著性差异.结论:BALB/c小鼠经过腹腔注射LPS后,其血清中β-GD的酶活性具有显著性增加.LPS还可以增加小鼠肝脏细胞GUSB mRNA的表达.LPS可能通过增加组织β-GD活性的途径,参与了胆色素结石的发病.     

热休克蛋白70对内毒素诱导的肝脏NF-κB信号转导通路的影响

目的探讨热休克蛋白70对内毒素（LPS）诱导的肝脏NF-κB信号转导通路的影响。方法雄性昆明种小鼠70只随机分为3组,对照组（n=10）、LPS诱导组（n=30）、亚砷酸钠（SA）预处理组（n=30）,分别于处理后0.5 h、1.5 h和6 h在麻醉下开腹取肝脏,Western blot方法检测肝脏NF-κB P65、NF-κB P50和IκB的表达。结果 SA预处理可抑制NF-κB P65和NF-κB P50蛋白的表达,增强肝脏IκB蛋白的表达。结论亚砷酸钠（SA）刺激机体产生HSP70,可通过影响肝脏信号转导,从而抑制相关炎症通路,减轻LPS所致的急性肝损伤。     

内毒素调节肝脏β-葡萄糖苷酸酶mRNA的表达

目的研究内毒素对小鼠肝脏细胞β-葡萄糖苷酸酶(GUSB)mRNA表达及其血清活性的影响.方法选择23只BALB/c小鼠分为2组,对照组5只,腹腔注射不含内毒素的生理盐水;其余小鼠为实验组,腹腔注射LPS,并于注射后的1/2、2、4、24 h采用酶促动力学方法检测内源性β-葡萄糖苷酸酶(β-GD)活性;取肝脏,采用半定量RT-PCR方法检测GUSB mRNA的表达.结果小鼠腹腔注射内毒素1/2、2和4 h后,血清β-GD活性(3.96±0.88,4.40±0.55,5.65±0.58)显著高于对照组(2.14±1.46,P＜0.05),而LPS 24 h组与对照组无显著性差异;内毒素刺激BALB/c小鼠2 h和LPS 4 h,其肝脏细胞GUSB mRNA表达(1.10±0.23,1.81±0.04)显著高于对照组(0.57±0.36,P＜0.05),LPS 1/2 h和LPS 24 h的GUSB mRNA表达与对照组相比无显著性差异.结论BALB/c小鼠经过腹腔注射LPS后,其血清中β-GD的酶活性具有显著性增加.LPS还可以增加小鼠肝脏细胞GUSB mRNA的表达.LPS可能通过增加组织β-GD活性的途径,参与了胆色素结石的发病.     

脂多糖通过上调SSAO活性抑制泡沫细胞ABCA1表达和促进细胞内脂质蓄积

目的探讨脂多糖(LPS)是否通过调节氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性改变血管平滑肌细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白质的表达和脂质蓄积。方法氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育小鼠主动脉平滑肌原代细胞使其泡沫化,不同浓度LPS和SSAO抑制剂氨基脲(SEM)处理细胞6 h后,高效液相色谱分析细胞SSAO活性、总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法检测培养基葡萄糖含量,荧光分光光度计检测过氧化氢(H2O2)含量,液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,Western blot检测ABCA1蛋白质表达的变化。结果 LPS增加泡沫细胞SSAO活性,促进葡萄糖消耗,增加H2O2生成,SEM作用后完全抑制此作用;LPS抑制细胞ABCA1蛋白质的表达,细胞内胆固醇流出减少,细胞总胆固醇、游胆固醇与胆固醇酯增加;SEM作用后部分抑制LPS的这种作用。结论 LPS下调ABCA1蛋白质表达而促进细胞内脂质蓄积与SSAO活性增加相关。     

内毒素、网状内皮功能与肝脏损伤

内毒素系革兰氏阴性菌壁含脂多糖(LPS)的有毒成份,当肠道内有细菌死亡及生长活跃时,LPS大量产生。经常有小量的LPS被吸收,但被肝脏很快解毒。多年来很多学者研究这种正常解毒功能的丧失,有可能激起或加重肝损伤或引起全身性影响。本文综述了肝脏的网状内皮细胞、肠源性内毒素与肝脏损伤有关的一些实验与临床研究的证据。下图是要审议的一个假说:(a)门静脉血中有内毒素系正常的生理状态;(b)肝脏的血窦细胞,尤其是固定的巨噬细胞对内毒素的正常解毒极重要;(c)很多肝损伤开始时是肝血     

暴发性急性胰腺炎动物模型的建立

目的建立暴发性急性胰腺炎模型,为研究其发病机制提供实验模型。方法30只SD大鼠随机分为假手术组、ANP组、LPS加重组、LPS BPDL(胆胰管结扎)组和LPS GdCl3组,各6只。于制模术后6h观察各组最大采血量、腹水量及血清谷丙转氨酶、肌酐、淀粉酶、TNF-α的含量和腹水淀粉酶、TNF-α的含量,并对胰腺、肺脏、肝脏和肾脏做病理检查。结果LPS加重组、LPS BPDL组的腹水量、谷丙转氨酶、肌酐、淀粉酶、TNF-α均较ANP组、假手术组明显升高;而最大采血量明显减少;肺脏和肝脏病理分值显著升高(均P<0.05或0.01)。LPS BPDL组较LPS加重组的病情严重程度更重。LPS GdCl3组较LPS加重组的有效循环血量和肝肾功能明显改善,肺脏组织病理学改变明显减轻。结论在ANP基础上从胆胰管内加注内毒素可产生较ANP更为严重的病理损伤,可以作为一种暴发性急性胰腺炎的模型。     

暴发性急性胰腺炎动物模型的建立

目的 建立暴发性急性胰腺炎模型,为研究其发病机制提供实验模型.方法 30只SD大鼠随机分为假手术组、ANP组、LPS加重组、LPS+BPDL(胆胰管结扎)组和LPS+GdCl3组,各6只.于制模术后6 h观察各组最大采血量、腹水量及血清谷丙转氨酶、肌酐、淀粉酶、TNF-α的含量和腹水淀粉酶、TNF-α的含量,并对胰腺、肺脏、肝脏和肾脏做病理检查.结果 LPS加重组、LPS+BPDL组的腹水量、谷丙转氨酶、肌酐、淀粉酶、TNF-α均较ANP组、假手术组明显升高;而最大采血量明显减少;肺脏和肝脏病理分值显著升高(均P＜0.05或0.01).LPS+BPDL组较LPS加重组的病情严重程度更重.LPS+GdCl3组较LPS加重组的有效循环血量和肝肾功能明显改善,肺脏组织病理学改变明显减轻.结论 在ANP基础上从胆胰管内加注内毒素可产生较ANP更为严重的病理损伤,可以作为一种暴发性急性胰腺炎的模型.     

肝硬化患者的内毒素血症与肝性脑病和死亡率

内毒素脂多糖(LPS)是革兰氏阴性杆菌细胞壁的组成成份。正常情况下,肠道细菌产生的LPS被吸收进入门脉,并由肝脏网状内皮系统(RES)清除。胃肠道出血、低血压,肠道水肿均可增加LPS的吸收。在急、慢性肝病患者,由于对LPS吸收增加以及肝脏RES活性受损,对LPS不能清除而导致全身性内毒素血症。作者采用最新介绍的鲎吞噬细胞溶解试验(limulus amebocyte lysateLAL)作定量测定,研究肝硬化患者内毒素血症与临床严重程度之间的关系。病例及方法:39例(男33例,女6例,年龄27～70岁)经皮穿刺、手术中或死后肝活检证实为肝硬化(酒精     

重型肝炎时蛋白质和糖代谢紊乱及处理

重型肝炎时蛋白质和糖代谢紊乱及处理上海第二医科大学附属瑞金医院（２０００２５）周霞秋１重型肝炎时蛋白质代谢的紊乱及处理［１１，１２］肝脏是蛋白质代谢的重要器官，是合成血浆白蛋白的主要场所。目前已知血浆全部的白蛋白及部分α、β球蛋白都是在肝脏内合成的［...     

天然蒙脱石对急性肝衰竭大鼠的肠道干预实验

目的建立大鼠急性肝衰竭模型,并给予天然蒙脱石进行肠道干预研究。方法随机将40只大鼠分为正常对照组、模型组、思密达预防组和思密达治疗组,采用腹腔注射半乳糖胺法建立大鼠急性肝衰竭模型,观察大鼠肝功能、内毒素（LPS）及肝脏和回肠组织的病理学变化。结果与正常对照组比,模型组、思密达预防组和治疗组大鼠血ALT、AST、TBiL和LPS升高,Alb下降（P〈0．05）;与模型组比,思密达预防组和治疗组大鼠血ATJT、AST、TBiL和LPS下降,Alb升高（P〈0．05）;思密达预防组比治疗组大鼠血ALT、AST、TBiL和LPS更低（P〈0．01）;模型组大鼠肝脏形态学发生严重的病变,而预防组和治疗组病变较轻。结论应用天然蒙脱石进行肠道干预急性肝衰竭大鼠可明显减轻肝脏病理学改变,改善肝功能,降低LPS水平。     

低血糖也有“另类”（下）——浅谈非糖尿病相关性低血糖

肝脏对调节血糖水平具有重要作用，血糖高时葡萄糖转化为糖原贮存于肝脏，血糖低时肝糖原分解为葡萄糖。不仅如此，肝脏还可通过糖异生作用使其他物质（如蛋白质、脂肪）转变为葡萄糖。     

T－2毒素对雏鸡软骨肝脏蛋白质DNA合成的抑制

雏鸡出壳次日起按１００μｇ／日剂量经口投与Ｔ－２毒素，为期８周，发现，Ｔ－２毒素对雏鸡的软骨和肝脏组织蛋白质、ＤＮＡ合成有明显抑制作用。实验组与对照组相比，肝脏组织蛋白质含量比值为０．６０∶１．００，ＤＮＡ含量比值为０．４９∶１．００；软骨组织中，蛋白质含量比值为０．６４∶１．００，ＤＮＡ含量比值为０．３９∶１．００。经琼脂糖凝胶电泳观察，未见实验组软骨和肝脏组织ＤＮＡ有断裂现象发生。