重楼皂苷Ⅰ通过调节细胞自噬抑制胃癌细胞侵袭能力

目的探讨重楼皂苷Ⅰ对胃癌HGC-27细胞侵袭能力及自噬水平的影响。方法选择胃癌HGC-27细胞作为研究对象,用不同浓度的重楼皂苷Ⅰ(0、5、10、20μmol/L)在体外处理HGC-27细胞,Transwell小室法检测细胞侵袭能力的改变;蛋白质印迹法检测细胞上皮细胞间叶样表型转化(EMT)标志物如E-钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维连接蛋白(Fibronectin)、自噬相关基因Atg5、LC3-Ⅱ和Beclin1蛋白、MMP-9蛋白表达情况。结果 Transwell侵袭实验结果显示,重楼皂苷Ⅰ处理后,随着药物浓度的升高,穿过Transwell小室基底膜的HGC-27细胞数逐渐减少;蛋白质印迹结果显示,重楼皂苷Ⅰ可促进HGC-27细胞EMT标志物蛋白E-cadherin的表达,同时抑制Vimentin、Fibronectin蛋白的表达,且抑制MMP-9蛋白表达;重楼皂苷Ⅰ也可促进自噬相关基因Atg5、LC3-Ⅱ和Beclin1蛋白的表达。结论重楼皂苷Ⅰ可抑制胃癌HGC-27细胞侵袭能力,其机制可能通过诱导HGC-27细胞自噬并抑制EMT。     

二氢青蒿素体外抑制胃癌细胞的黏附、迁移和侵袭

目的 探讨二氢青蒿素(DHA)对人胃癌SGC7901细胞体外黏附、迁移和侵袭的影响及其可能机制.方法 1.25、2.5、5、10、20 μmoL/LDHA作用体外培养的人胃癌SGC7901细胞24 h后,MTT法检测细胞活力;1.25、2.5、5 μmol/L DHA作用人胃癌SGC7901细胞24 h后,细胞黏附分析检测细胞黏附率;细胞划痕实验观察其对细胞迁移能力的影响;Transwell小室侵袭实验观察其对细胞侵袭能力的影响;RT-PCR和Western印迹分别检测ICAM-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-2 mRNA和蛋白的表达水平.结果 与对照组相比,1.25、2.5、5μmoL/L DHA对SGC7901细胞增殖没有影响,但显著抑制SGC7901细胞黏附、迁移和侵袭能力,且抑制作用具有剂量依赖性.RT-PCR和Western印迹结果显示,与对照组相比,5 μmol/L DHA作用人胃癌SGC7901细胞24 h,细胞内ICAM-1、MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达显著降低(P＜0.05),TIMP-2 mRNA和蛋白表达显著增加(P＜0.05).结论 DHA可体外抑制胃癌SGC7901细胞的黏附、迁移和侵袭能力,其机制可能与上调TIMP-2的表达,下调ICAM-1、MMP-2、MMP-9的表达有关.     

异丙酚对胃癌HGC-27细胞侵袭能力的影响

目的观察异丙酚对人胃癌HGC-27细胞侵袭能力的影响,并探讨可能的作用机制。方法体外培养HGC-27细胞,分为对照组和实验组,实验组用不同浓度(5、10、20μg/m L)异丙酚处理HGC-27细胞24 h,对照组加入等体积的培养基,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;Western blotting检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Akt、p-Akt及p-GSK-3β的表达。结果与对照组比较,异丙酚可显著降低HGC-27细胞侵袭能力;异丙酚处理后,MMP-9表达下调;异丙酚可抑制p-Akt及其下游蛋白p-GSK-3β的表达。结论异丙酚可降低人胃癌HGC-27细胞侵袭能力,其机制可能与抑制Akt通路、下调MMP-9表达有关。     

熊果酸通过下调COX-2表达降低人胃癌HGC-27细胞侵袭能力研究

目的观察熊果酸对人胃癌HGC-27细胞侵袭能力的影响,并探讨可能的作用机制。方法体外培养HGC-27细胞,分为对照组和实验组,实验组用不同浓度(15、30、60μmol/L)熊果酸处理HGC-27细胞24 h,对照组加入等体积的培养基,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;Western blotting检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、环氧化酶-2(COX-2)及p-NF-κB的表达。结果与对照组比较,熊果酸可显著降低HGC-27细胞侵袭能力;经熊果酸处理后,MMP-9表达下调;熊果酸可抑制COX-2及其上游调控基因pNF-κB的表达。结论熊果酸可降低人胃癌HGC-27细胞侵袭能力,其机制可能与抑制p-NF-κB、下调COX-2表达、降低MMP-9表达有关。     

丹酚酸C通过上调转录因子-E2相关因子信号通路抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞炎症及促进凋亡

目的探讨丹酚酸C(SalC)对RA成纤维样滑膜细胞(FLSs)的作用, 及转录因子-E2相关因子(Nrf2)信号通路在其中所扮演的角色。方法用丹酚酸C 0.1、1、5、10、20 μmol/L分别处理RA-FLSs 24～72 h, 之后用CCK8检测细胞活性。根据半抑制浓度(IC50)值, 选取实验所需的时间和剂量处理RA-FLSs。用伤口划痕实验和Transwell小室技术检测细胞迁移及侵袭能力。ELISA检测TNF-α, IL-1β及IL-6水平, 蛋白质印迹实验检测MMP-9和MMP-13的表达及细胞凋亡相关蛋白及Nrf2及介导的相关基因的表达。用ML385干扰Nrf2, 实验分成3组RA-FLSs、RA-FLSs+丹酚酸C(10 μmol/L)、RA-FLSs+丹酚酸C(10 μmol/L)+ ML385(2 μmol/L), 测量迁移及侵袭能力, 并检测凋亡、炎性及Nrf2信号通路相关蛋白的表达。统计学分析采用方差分析, 两两比较采用Turkey检验。结果与对照组相比, 丹酚酸C处理后RA-FLS的细胞迁移水平(丹酚酸C 0.1 μmol/L, 0.75±0.05;丹酚酸C...     

木犀草素对人胃癌细胞DNA双链断裂及同源重组修复的影响

目的 探讨木犀草素对人胃癌细胞DNA双链断裂(DNA double-strand breaks, DSBs)及同源重组(homologous recombination, HR)修复的影响。方法 采用流式细胞仪检测作用木犀草素后各组细胞内ROS水平变化及GFP阳性率；彗星实验检测木犀草素对DSBs的影响；Western blotting检测DNA损伤标志性蛋白γH2AX和HR修复蛋白Rad51的表达；免疫荧光检测DNA损伤修复相关蛋白表达的募集情况。结果 木犀草素以剂量依赖性方式增加胃癌细胞内ROS含量；用I-Scel质粒转染DR-GFP后木犀草素处理组GFP阳性细胞比例明显少于未加木犀草素组；但彗星实验表明，木犀草素处理后人胃癌AGS细胞后增加彗星尾炬；经木犀草素处理后，胃癌细胞中DNA的γH2AX上调，修复关键蛋白Rad51的表达下调；免疫荧光结果表明，在木犀草素处理人胃癌AGS细胞后HR修复蛋白Rad51在DNA损伤位点的募集减少。结论 木犀草素能够促进人胃癌细胞DSBs,并抑制其HR修复。     

木犀草素通过调控PI3K/Akt通路对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的 基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路探讨木犀草素对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及凋亡的影响。方法 将0、10、20、40μmol/ml木犀草素作用于宫颈癌Hela细胞中后培养24 h。将生长状况良好的Hela细胞分为对照(L-O)组、水犀草素20(L-10)、30(L-20)、40(L-40)μmol/L组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,Transwell检测细胞迁移能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关蛋白(Bax)、Bcl-2、PI3K、Akt、人磷酸化(p)-PI3K、p-Akt蛋白表达水平及实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测细胞PI3K、p-PI3K、Akt mRNA相对表达量。结果 与L-0组相比,L-10组、L-20组和L-40组Hela细胞增殖抑制率、细胞凋亡率显著升高,细胞活力、迁移能力显著降低(P<0.05,P<0.01)。与L-0组相比,L-10组、L-20组和L-40组HeLa细胞Cas...     

木犀草素抑制肝星状细胞增殖及其胶原合成

目的 研究木犀草素对体外培养的肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)增殖及其胶原表达、合成的影响。方法 从Wistar大鼠肝脏分离培养HSC,并用~3H-TdR和~3H-pro同位素掺入实验,基因探针原位杂交等技术研究了木犀草素对HSC增殖、胶原基因表达合成的影响。结果 当木犀草素的浓度分别达到10 μmol/L和20 μmol/L 时抑制HSC增殖(t=2.542,P＜0.05)和胶原合成(t=3.650,P＜0.01),其作用具有剂量依赖关系;25 μmol/L木犀草素使Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达降低,其中Ⅰ型前胶原基因表达降低具有统计学差异(x~2=6.850,P＜0.01)。结论 木犀草素在体外抑制HSC增殖和胶原表达合成,在体内可能会具有预防或冶疗肝纤维化的作用。     

溪黄草黄酮对肝癌细胞增殖,迁移和侵袭的影响及相关机制

目的探讨溪黄草黄酮[Flavonoids from Rabdosia serra(Maxim.)Hara]对人肝癌细胞株Hep G2的增殖、迁移与侵袭能力的影响,并研究初步机制.方法 CCK-8法检测不同浓度溪黄草黄酮(0、1、5、10、20和40μmol/L)对Hep G2细胞活性的影响;划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blot检测Notch-1,Cyclin D1,MMP-2和MMP-9蛋白表达水平变化.结果 CCK-8法检测结果显示溪黄草黄酮呈浓度依赖性抑制Hep G2细胞的生长,当浓度到达20μmol/L时,抑制作用达到最大;经溪黄草黄酮干预后,Hep G2细胞迁移和侵袭能力显著下降,Notch-1,Cyclin D1,MMP-2和MMP-9蛋白表达水平显著下降.结论溪黄草黄酮具有抑制肝癌细胞株Hep G2增殖、迁移和侵袭的作用,其作用机制可能与溪黄草黄酮抑制Notch-1-MMP-2/-9和Notch-1-Cyclin D1信号通路相关.     

三氧化二砷对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其分子机制.方法 利用MTS/PMS法检测As2O3对SMMC-7721细胞增殖的影响;划痕愈合和侵袭实验检测As2O3对SMMC-7721细胞迁移与侵袭能力的影响;实时定量PCR、Western印迹检测As2O3作用SMMC-7721细胞后MMP-9的表达.结果 2.0 μmol/L的As2O3对肿瘤细胞增殖有抑制作用;划痕实验结果显示,2.0μmol/LAs2O3处理SMMC-7721细胞12和24 h后,较未处理组划痕距离明显增加(P＜0.05),表明As2O3可抑制SMMC-7721细胞迁移.Transwell实验结果显示,2.0μmol/LAs2O3处理SMMC-7721细胞12h和24 h后,穿膜细胞数较未处理组明显减少(P＜0.05),表明As2O3可抑制SMMC-7721细胞侵袭能力.实时定量PCR和Western印迹结果显示,以2.0μmol/L As2O3处理SMMC-7721细胞后,MMP-9 mRNA和蛋白表达均明显下调(P＜0.05).结论 As2O3可通过抑制肿瘤细胞增殖、迁移及侵袭,抑制肿瘤的转移.     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.