阿米洛利抑制载脂蛋白A1诱导小鼠巨噬细胞ABCA1的降解

目的探讨钠氢交换体1抑制剂阿米洛利对载脂蛋白A1(Apo A1)诱导小鼠三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)降解的影响。方法给小鼠静脉注射Apo A1后不同时间点收集腹腔巨噬细胞,定量实时聚合酶链反应及Western blot检测巨噬细胞ABCA1 mRNA及蛋白水平变化。进而,Apo A1干预8 h小鼠给予腹腔注射阿米洛利或钙蛋白酶抑制剂ALLN,实验分为4组:对照组、阿米洛利组、ALLN组及阿米洛利+ALLN组,Western blot检测巨噬细胞ABCA1蛋白水平,荧光法检测钙蛋白酶活性。结果 Apo A1干预小鼠后ABCA1 mRNA无明显改变,而ABCA1蛋白水平迅速升高,8 h达高峰后逐渐降低。阿米洛利组、ALLN组及阿米洛利+ALLN组ABCA1蛋白水平均比对照组高;在0、4、8 h时间点,阿米洛利组、ALLN组及阿米洛利+ALLN组间ABCA1蛋白水平差异无统计学意义;而在12、16 h时间点,阿米洛利+ALLN组ABCA1蛋白水平较阿米洛利组、ALLN组升高。与对照组比较,阿米洛利组、ALLN组及阿米洛利+ALLN组钙蛋白酶活性均降低;阿米洛利组、ALLN组、阿米洛利+ALLN组3组组间比较,钙蛋白酶活性各时间点均无明显差异。结论阿米洛利在活体内抑制Apo A1诱导ABCA1蛋白降解及钙蛋白酶活性,提示钠氢交换体1可能至少部分通过改变钙蛋白酶活性参与ABCA1的降解。     

肺泡液体主动转运及肺水通道的实验研究

目的 研究肺水通道蛋白1,4（AQP1,4）对肺泡毛细血管间不通透性和压力性肺水肿的影响,肺泡液体主动转运对肺泡液体清除（AFC）的影响,以及不同pH条件下大鼠AFFC的变化。方法采用表面荧光技术和重力方法研究小鼠肺泡毛细血管间水通透性及水通道蛋白与压力性肺水肿的关系;测定大鼠肺泡灌注液中同位素标记白蛋白浓度推测AFC变化。应用低pH溶液灌注在鼠肺透发肺损伤,并测定不同pH条件下AFC变化。结果 AQP1敲除可减轻小鼠肺泡毛细血管间水通透性和压力性肺不肿的程度。沙丁胺醇可促进AFC,合用心得安可抑制其作用。当大鼠肺泡灌注液pH＞2．5时,间羟叔丁肾上腺素、异丙肾上腺腺、沙美特罗均可促进AFC,Na通道抑制剂Benzamil可抑制AFC。结论 AQP1敲除明显降低小鼠肺泡毛细血管间水通透性,轻度减压力性肺水肿。β肾上腺能激动促进机械通气大鼠AFC。AFC的前提是完整肺泡上皮的存在,当pH低于2．5时,促进AFC的作用被肺损伤作用掩盖。     

丁酸钠通过组蛋白丁酰化修饰改善糖尿病肾脏病炎症和纤维化

目的探讨丁酸钠(NaB)是否通过组蛋白丁酰化修饰改善糖尿病肾脏病(DKD)炎症和纤维化。方法无特定病原体(SPF)级C57BL/6雄性小鼠24只, 8周龄、16～17 g。采用随机数字表法将其分为正常对照组(NC组)、高脂饮食联合链脲佐菌素(50 mg/kg)复制的DKD模型组(DKD组)、NaB溶液(每48小时40 mg/kg)腹腔注射干预组(DKD+NaB组), 每组8只。体外培养肾系膜细胞, 分为正常葡萄糖(NG)组(5.56 mmol/L葡萄糖)、高糖(HG)组(30 mmol/L葡萄糖)、HG+NaB组(30 mmol/L葡萄糖和1 mmol/L NaB)、HG+NaB+乙酰转移酶活性转录共激活因子(P300)抑制剂(A485)组(30 mmol/L葡萄糖、1 mmol/L NaB和10 μmol/L A485)。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠血清炎症因子[单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-6(IL-6)]水平, 及尿微量白蛋白和尿肌酐, 并计算尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR), 采用Western blotting法检测各组小鼠肾脏组织和肾...     

水通道与钠通道在小鼠胸腔液体转运中的作用

目的：探讨水通道和钠通道在小鼠胸腔液体转运中的作用。方法：小鼠吸入麻醉后，胸膜腔内分别注入0．25ml高渗和等渗液体，分别予以特布他林、阿米洛利、地塞米松和氯化汞，在不同时间点回收胸腔液体，测量其渗透压、容积和示踪剂^125I－白蛋白计数。根据有腔液体滤出率和吸收率变化，研究钠通道和水通道在胸腔液体转运中的作用。结果：阿米洛利抑制高渗液体引起的胸腔液体滤出和等渗液体吸收（P＜0．05）；特布他林增加胸腔液体的滤出和吸收（P＜0．05）；地塞米松增加高渗液体引起的胸腔液体的滤出（P＜0．05），氯化汞则起抑制作用（P＜0．05），地塞米松和氯化汞对胸腔液体的吸收无影响（P＞0．05）。结论：水通道影响渗透压梯度引起的胸腔液体转运，对等渗液体的胸膜腔转运无明显影响。钠通道可影响渗透压梯度引起的胸腔液体转运和等渗液体吸收。     

布比卡因增强小鼠成肌细胞溶酶体的活性

目的探讨局部麻醉药布比卡因对小鼠成肌细胞溶酶体的影响。方法将体外培养的小鼠成肌细胞C2C12分为2组。对照组:不加任何药物;布比卡因组:以600μmol/L布比卡因刺激细胞6 h。实验结束后,用Lyso Sensor探针评价溶酶体腔p H,用Lyso Trackor探针检测溶酶体含量,用蛋白免疫印迹法检测溶酶体相关膜蛋白-1(LAMP-1)和溶酶体蛋白水解酶Cathepsin B的表达水平,并以Magic Red染色法测定Cathepsin B的活性。结果布比卡因对溶酶体腔p H没有影响。但是,与对照组相比,布比卡因组溶酶体含量增加15.15%(P0.01),LAMP-1与Cathepsin B表达量分别增加36.41%、35.29%(P0.01),Cathepsin B活性增加23.74%(P0.01)。结论布比卡因能增加小鼠成肌细胞溶酶体含量,增强溶酶体活性。     

β肾上腺素能受体激动剂对离体大鼠肺泡液体清除率的作用

目的探讨β1肾上腺素能受体激动剂地诺帕明、β2肾上腺素能受体激动剂特布他林、β3肾上腺素能受体激动剂BRL37344对离体大鼠肺泡液体清除率(AFC)的作用及机制。方法5%白蛋白等渗生理盐水溶液和不同药物混合后灌注到离体大鼠的肺泡腔内,根据灌注前及其孵育1h后白蛋白浓度的变化来计算大鼠AFC。结果基础AFC为6.9%±2.2%,地诺帕明、特布他林、BRL37344可显著提高AFC(分别为17.1%±2.4%、19.5%±1.2%、19.9%±2.5%)。β1肾上腺素能受体阻滞剂Atenolol可完全抑制地诺帕明提高AFC(6.1%±0.9%)的作用,但不能阻滞特布他林和BRL37344的作用。β2肾上腺素能受体阻滞剂ICI118551完全抑制了特布他林和BRL37344提高AFC(分别为5.7%±0.6%和7.8%±2.6%)的作用,部分抑制了地诺帕明的作用(AFC为12.7%±1.8%)。β3肾上腺素能受体阻滞剂SR59230A部分抑制了BRL37344和特布他林的作用(AFC分别为13.8%±3.1%和14.5%±3.4%),但不能阻滞地诺帕明的作用。结论地诺帕明、特布他林、BRL37344可以显著提高大鼠的AFC。但地诺帕明和特布他林是分别通过β1、β2肾上腺素能受体起作用;而BRL37344可能是通过β2肾上腺素能受体调节的。ICI118551和SR59230A可能分别具有抑制β1或β2肾上腺素能受体的作用。     

上皮钠离子通道阻滞剂阿米洛利对雌性大鼠骨代谢的影响

目的探讨上皮钠离子通道阻滞剂阿米洛利对雌性大鼠骨代谢的作用。方法 40只SD雌性大鼠随机分成5组,每组8只,分别为基础对照组、假手术组、假手术组+阿米洛利组、去卵巢组、去卵巢+阿米洛利组,连续灌胃给药55 d,测定血碱性磷酸酶、血清雌二醇、N端骨钙素、股骨下段骨量变化。结果生长期大鼠去卵巢2个月,可成功建立大鼠骨质疏松模型。阿米洛利促进去卵巢大鼠骨丢失,对假手术大鼠骨量无明显影响。结论 10 mg·kg~(-1)·d~(-1)阿米洛利加剧去卵巢大鼠骨高转换下的骨丢失。     

苯肾上腺素对低氧肺损伤大鼠肺泡液体清除的作用

目的探讨α肾上腺素能受体激动剂苯肾上腺素对低氧肺损伤大鼠肺泡液体清除率(AFC)的作用及机制。方法低氧大鼠暴露于10%的氧浓度,分别于24 h和48 h测定AFC、总肺水量(TLW)。苯肾上腺素分别与α1受体阻滞剂哌唑嗪、α2受体阻滞剂育亨宾、β1受体阻滞剂阿替洛尔、β2受体阻滞剂ICI-118551、钠通道阻断剂氨氯吡咪及Na+-K+-ATP酶阻断剂哇巴因混合后灌注到低氧48 h大鼠的肺泡腔内,测定AFC的变化。结果大鼠暴露于10%的氧浓度24 h后AFC(17.09±2.36)%/h与正常大鼠AFC(16.85±2.87)%/h比较没有明显变化;48 h时AFC(8.41±2.67)%/h明显降低。苯肾上腺素能明显增加低氧大鼠AFC。苯肾上腺素增加低氧大鼠AFC的作用能够被哌唑嗪、阿替洛尔、ICI-118551、氨氯吡咪和哇巴因抑制。结论α肾上腺素能受体激动剂苯肾上腺素通过调节Na+-K+-ATP酶及钠通道的活性增加低氧肺损伤大鼠肺泡液体清除能力,促进肺水肿液的吸收。     

Cl-通道在小牛血清引起的血管平滑肌细胞增殖中的作用

为探讨Cl-通道在小牛血清引起的血管平滑肌细胞增殖中的作用 ,采用细胞计数和氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入实验 ,并结合fura 2荧光测定细胞浆Ca2 + 浓度等技术 ,研究了Cl-通道阻断剂对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响。结果发现 ,Cl-通道阻断剂 4,4-二异硫氰酸二丙乙烯 2 ,2 -二磺酸 (DIDS ,0 .0 1μmol/L～ 0 .1mmol/L)可抑制 5 %小牛血清引起的血管平滑肌细胞增殖 ,其作用具有时效性和量效性 ,其它Cl-通道阻断剂如茚满羟基丙酸 (IAA 94,0 .1μmol/L～ 1mmol/L)、5 硝基 2 (3 苯丙氨基 )苯甲酸 (NPPB ,0 .1μmol/L～ 1mmol/L)、4 乙酰氨基 4 异硫氰酸 2 ,2 二磺酸 (SITS ,0 .1μmol/L～ 1mmol/L)、二苯丙氨基 2 ,2 二羧酸 (DPC ,0 .1μmol/L～ 1mmol/L)和速尿 (10 μmol/L～ 1mmol/L)等均无此作用 ,且DIDS对电压依赖性钙通道没有直接的影响。结果提示小牛血清可以开放DIDS敏感的Cl-通道 ,且该通道可能在小牛血清引起的血管平滑肌细胞增殖的调控上起着一定的作用。     

Th17细胞及其细胞因子白细胞介素-17在粉尘螨致敏哮喘小鼠中的变化

目的探讨Th17细胞及其细胞因子白细胞介素-17(IL-17)在粉尘螨致敏哮喘小鼠中的变化及其意义。方法 20只BALB/c小鼠随机均分为哮喘组和健康对照组。哮喘组小鼠于第0、7和14天每鼠腹腔注射200μl致敏液[含粉尘螨粗浸液提取物50μg,Al(OH)32 mg]致敏。末次免疫后1周采用粉尘螨粗浸液提取物连续进行滴鼻激发,每天1次,每次50μg,激发7次,健康对照组给予等体积的PBS[含Al(OH)32 mg]处理。末次激发后24 h内处死小鼠,取血清和肺泡灌洗液,无菌取脾脏。ELISA检测血清中Ig G1、Ig E和肺泡灌洗液中IL-17的含量;流式细胞仪检测脾脏中Th17细胞百分率。结果哮喘组小鼠血清中Ig G1和Ig E水平分别为(0.10±0.01)pg/ml和(1.15±0.10)pg/ml,高于健康对照组的(0.06±0.01)pg/ml和(0.04±0.01)pg/ml(P0.05);哮喘组小鼠肺泡灌洗液IL-17水平(85.13±2.36)pg/ml高于健康对照组(48.27±4.14)pg/ml(P0.01);哮喘组小鼠脾脏Th17细胞百分率(5.19±0.68)%高于健康对照组(0.95±0.19)%(P0.01),且脾脏Th17细胞百分率与肺泡灌洗液中IL-17水平呈正相关(r=0.851,P0.01)。结论粉尘螨致敏哮喘小鼠较健康小鼠肺泡灌洗液IL-17水平和脾脏Th17细胞数量均升高。     

多重耐药铜绿假单胞菌耐药状况分析

目的 了解医院铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药谱动态变化,为临床合理选用抗菌药物提供依据.方法 应用回顾性调查方法,对本院从2005年1月至2009年6月间临床样本分离的铜绿假单胞菌的药敏试验进行对比统计分析.结果 所分离出的1125株铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药率总体呈上升趋势.耐药率最低的是美罗培南（33%）.铜绿假单胞菌对常见抗菌药物的耐药性均有显著性变化.结论 本地区铜绿假单胞菌耐药率有显著性变化,多重耐药现象严重,动态监测其耐药谱变化是防止铜绿假单胞菌的感染率攀升的重要措施.     

冠心病运动处方的最新研究进展

冠心病是目前中国成人心脏病住院和死亡第一位原因,其发病率和病死率呈逐年上升趋势。随着医疗条件的发展,心脏康复知识的普及,冠心病患者康复意识逐渐提高,人们也越来越重视运动锻炼。     

重视对认知功能障碍的临床研究

随着社会经济的发展和医学的进步,人口寿命明显延长。按照世界卫生组织的统计,我国65岁以上人口在1997年约为8000万,预计2020年将达到2亿。人口老龄化使得老年疾病成为重要的社会和医学问题,其中认知功能障碍尤为突出,表现为发病和患病率高、社会家庭负担重和患者生命质量差。欧洲2000年的流行病学统计表明认知功能障碍的发病率是脑卒中的1．5-3．0倍,患病率分别是脑卒中和帕金森病的2-4倍及4-6倍。我国最新的流行病学调查结果显示我国痴呆的患病率与欧美发达国家相当,65岁以上人群的痴呆患病率为7．5％,     

Impact on physical fitness on cognitive aging

Cognitive vitality is one of the determining factors of autonomy in the elderly. Aging is often accompanied by important changes in the central nervous system, which may lead to cognitive decline. Several factors seem however to modulate the effect of aging on cognition. For instance, older adults who engage in regular physical activity have better performances in tests implying decision-making process, memory and problems solving. This article draws up a portrait of normal aging while being interested in the impact of the physical fitness on cognition in the elderly. Although further researches are needed to elucidate the mechanisms by which physical fitness enhance cognition in old age, recent studies have shown that improving physical fitness leads to better performances in tasks assessing a diversity of cognitive domains. Moreover, the impact of physical fitness appears to be heterogeneous, being of greater amplitude in tasks that tap executive functions. It thus seems that physical training could serve to enhance and maintain cognitive vitality in older adults.