谷氨酰胺对缺血再灌注肝脏热休克蛋白70基因表达的影响

目的探讨谷氨酰胺（Gln）对缺血再灌注肝脏热休克蛋白70（HSP70）基因表达的影响及其对肝脏的保护作用。方法雄性Wistar大鼠120只,随机分为3组（n=40）：假手术组（1组）、生理盐水组（2组）和谷氨酰胺组（3组）。术前3组大鼠连续5天腹腔注射Gln,2组仅给予等量的生理盐水。2、3组采用Pringle＇s法阻断入肝血流,35分钟后开放复流,1组仅行麻醉、开腹。分别于阻断前及再灌注后2、4、24小时,取血及肝组织,测定血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及肝组织丙二醛（MDA）的含量,采用RT-PCR法检测肝组织HSP70mRNA的表达。结果再灌注后2、4、24小时,3组MDA、ALT、AST、LDH及TNF-α水平与2组相比均显著降低（P〈0．05）,而3组肝组织HSP70mRNA表达显著高于2组和1组（P〈0．05）。结论Gln能够促进肝组织HSP70基因的表达,减轻肝缺血再灌注损伤,抑制炎症因子释放。     

热休克预处理对大鼠肝脏缺血再灌注时线粒体的保护作用

目的 研究热休克预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时线粒体功能的影响。方法 大鼠分为热休克组（HS组）和对照组（C组），HS组大鼠缺血再灌注前48小时先行热休克预处理。随后两组均采用钳夹肝十二指韧带，造成肝脏缺血再灌注损伤，检测缺血前（n=5)、缺血后（n=10)和再灌注后（n=10)肝脏线粒体膜电位（MPM）和呼吸功能的变化。同时比较两组再灌注后三磷酸腺苷（ATP）的恢复情况。结果 缺血30分钟后，C组MPM明显降低，再灌注后仍未恢复。HS组MPM在缺血和再灌注后均保持在较高水平。C组线粒体呼吸控制率（RCR）在缺血30分钟后降至4.89 0.35)，而HS组维持在接近正常的水平。再灌注后，HS组ATP水平的恢复明显早于C组。结论 热休克预处理可防止肝脏缺血时线粒体膜完整性的破坏，并有助于线粒体在再灌注时产生高能磷酸化合物。     

中性粒细胞激活在心肌缺血再灌注损伤中的作用

由于心肌缺血再灌注损伤（ischemic／reperfusioninjury,I／R）机制的复杂性,使其成为临床上经常面临和较难防治的问题。在其发生发展的众多机制中,中性粒细胞（PMN）活化、心肌浸润及脱颗粒可能是最终的环节或途径。大量研究表明中性粒细胞能通过释放细胞毒性物质如蛋白水解酶、氧自由基、脂类介质、各种炎性介质及阻塞毛细血管等引起缺血再灌注时的心肌损伤。认识这一细胞机制无疑有助于研究并找到防治心肌缺血再灌注损伤的方法。本文就近年来中性粒细胞激活在心肌缺血再灌注损伤中作用机制的及其防治的相关研究综述如下。     

热休克蛋白在脑缺血性损伤中的作用研究进展

脑缺血后虽然总蛋白的合成下降 ,但某些蛋白质合成增加 ,如热休克蛋白 (ＨＳＰ) [1] 。这是脑缺血早期引起一系列应激反应 ,诱导有关基因表达 ,合成相关的应激蛋白。ＨＳＰ被认为是脑缺血性损伤时敏感且可靠的标志之一 ,并认为对神经有保护作用。目前对脑缺血引起脑内ＨＳＰ基因表达 ,合成ＨＳＰ与脑细胞功能状态 ,损伤时程以及保护机制之间关系的研究日益受到重视。1　ＨＳＰ的命名、分类和功能1 1　ＨＳＰ的命名　 196 2年Ｒｉｔｏｓｓａ在观察果蝇幼虫唾液腺细胞多丝线粒体在过热环境中形态变化时首先发现热休克(Ｈｅａｔｓｈｏｃｋ ,Ｈ…     

热休克蛋白70在创伤愈合中的作用

目的 探讨热休克蛋白70（heat shock protein70,HSP70）在创伤愈合过程中的变化及其意义。方法 取大鼠伤后1天伤口液作为创伤修复启动微环境,刺激真皮多能干细胞,24小时后检测细胞表达HSP70含量的变化。同时制作单纯创伤和难愈创伤动物模型,通过免疫组化和图像分析方法观察伤后不同时相点伤口组织HSPT0含量变化。结果 创伤早期伤口液作用真皮多能干细胞后,HSP70表达显著增加。单纯创伤组大鼠伤后各时相点伤口局部HSP70表达均显著增加,尤以真皮组织增加明显,其峰值为伤后3天。难愈创伤组大鼠伤口局部HSP70含量在伤后各时相点亦显著增加,但与单纯创伤组相比,其含量在伤后各时相点均显著减少,尤以真皮组织表达减少更为明显,并且HSP70表达峰值显著延迟,为伤后7天。结论 HSP70不仅是一种应激保护分子,而且还是参与调节创伤愈合的一种重要分子。     

心肌细胞凋亡与心肌缺血再灌注损伤

1概述 持续的心肌缺血必然导致大量的心肌细胞死亡，虽然在早期进行再灌注治疗尽快恢复缺血区心肌的血供是拯救濒临死亡的心肌细胞的较好方法，但是有充足的实验证据证实再灌注过程可以对心肌细胞造成损害，导致心肌细胞的非缺血性功能障碍甚或死亡，有研究者证实在再灌注的起始阶段采取一些干预措施可以削弱这种再灌注损伤。     

解偶联蛋白与肝缺血再灌注损伤

解偶联蛋白（uncoupling proteins,UCP）位于线粒体内膜上,是线粒体阴离子载体蛋白大家族（mitochondrial anion carrier proteins,MACP）的成员,目前已知有5种。在缺血再灌注损伤（ischemia—reperfusion injury,IRI）中,线粒体解偶联蛋白通过解偶联作用减少细胞内ROS（reactive oxygen specie,活性氧簇）的产生,在一定程度上减轻了脂质过氧化反应,     

核因子NF-KB与心肌缺血再灌注损伤

核因子-kB(Nuclear factor,NF-kB)是一类能与许多种基因启动子部位的kB位点发生特异结合,并促进转录的蛋白质总称。在许多参与炎症和免疫反应的细胞因子、黏附分子基因的启动部位含有kB位点,而且体内外实验显示,NF-kB活化与上述因子的过度表达有关。心肌缺血再灌注损伤是一个包括中性粒细胞活化,多种因子及黏附分子过度表达,伴有多种炎性介质及信号传导分子参加的复杂操作过程。由于NF-kB调控多种炎性因子基因表达,推测其在心肌缺血再灌注损伤中起重要作用。     

烧伤休克再灌注损伤的治疗探讨

本文对70例严重烧伤休克及再灌注损伤的治疗进行探讨。将1989年至1991年采用单纯液体复苏的40例为对照组。1992年至1994于采用抗氧自由基等综合治疗的30例为治疗组。两组治疗结果表明，对照组再灌注损伤的发生率为57.5％（23／40），严重并发症发生率为47.5％（19／40），治愈率77．5％（29／40），治疗组三率分别为26．7％（8／30）、23．3％（7／30）和90．0％（27／30），P＜0.05，统计学差异显著。作者强调对于大面积烧伤合并严重休克的病人尤其是延迟复苏者不能单纯以恢复组织灌注为唯一复苏措施，而应采用积极的拮抗氧自由基以及细胞保护和器官功能支持防止各种内脏并发症等综合治疗以提高烧伤休克的救治水平。     

一氧化氮在心肌缺血再灌注损伤中的作用研究

一氧化氮（NO）是调节心血管系统功能重要的细胞信使分子。本文回顾了近年来一氧化氮、一氧化氮合酶及其同功酶在心肌缺血再灌注中的变化和作用的研究进展，并对其进行综述。     

腺苷预处理对心肌缺血/再灌注损伤的延迟保护作用及机制

目的 探讨ATP敏感性K 通道(KATP )开放和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达上调在腺苷(ADO))预处理对心肌缺血/再灌注损伤延迟保护中的作用.方法 48只家兔随机分成4组,每组12只.对照组:心肌缺血前24h静注生理盐水0.5ml;CC-PA组:心肌缺血前24h静注OSPA(ADOA1受体激动剂)0.1mg/kg进行药物预处理;Gli组:心肌缺血前30rain静注格列苯脲(Gfi)0.3mg/kg,CCPA/Gli组:在CCPA组处理的基础上,心肌缺血前30min静注Gli.采用家兔离体工作心脏模型,各组动物心肌均缺血30min,复灌30min.观察缺血/再灌注前后血流动力学和心功能的变化.测定再灌注结束后冠脉流出液中乳酸脱氢酸(LDH)、肌酸激酶(CK)、一氧化氮(NO)和心肌组织ATP含量.氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法判断心肌梗死范围.RT-PCR测定iNOS mRNA表达水平.结果 与对照组比较,CCPA组心肌缺血/再灌注后心功能明显改善,冠脉流出液LDH水平降低(30.11±3.32U/Lvs89.43±5.76U/L,P＜0.01),CK含量减少(42.77±5.48U/L vs 143.76±11.20U/L,P＜0.01),心肌梗死范围明显缩小(13.4%±2.3% vs 32.1%±4.5%,P＜0.01),心肌组织ATP浓度明显增加(1.52±0.23μmol/L vs 0.44±0.08μmol/L,P＜0.01),Gli可拮抗这种保护作用.CCPA组心肌组织NO浓度较对照组升高(31.4±5.3μmol/L vs 24.6±3.3μmol/L.P＜0.01),且iNOS表达上调(1.68±0.22 vs 0.96±0.17,P＜0.01),此效应不受Gfi拮抗.结论 CCPA可以模拟缺血预处理的延迟保护效应;iNOS合成的NO可能激活KATP ,并使iNOS表达上调,在ADO预处理的延迟保护中具有重要作用.     

热休克蛋白70对中暑大鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究

目的 观察热休克蛋白70(HSP70)对急性肺损伤的保护作用.方法 64只SD大鼠按随机数字表法分为假加热正常对照组(Sham组)、中暑组(HS组)、中暑加谷氨酰胺处理组(HS+GLN组)和中暑加槲皮素处理组(HS+QU组),每组16只.Sham组大鼠置于温度23℃,湿度55％ ± 5％环境中,其余3组大鼠置于模拟热气候动物舱(舱内温度39℃,相对湿度65％)内.监测大鼠直肠温度、收缩压和脉率,比较各组大鼠热应激反应的差异.以收缩压从峰值开始下降作为中暑的开始,之后将大鼠移至常温复温.分别在中暑恢复期0h和6h处死大鼠,每个时间点8只,留取支气管肺泡灌洗液(BALF)后分离肺脏组织行组织学观察.采用酶联免疫法检测BALF中的IL-1β、TNF-α和IL-6浓度,以及肺组织匀浆中的HSP70浓度.结果 与HS组和HS+QU大鼠比较,HS+GLN组大鼠承受更多的热负荷后才发生HS(P＜0.001),起病后的中位生存时间明显延长(P＜0.001).与Sham组比较,HS组大鼠肺组织匀浆HSP70浓度呈时间依赖性升高(P＜0.001);HS+GLN组HSP70浓度在各个时点与HS组比较均明显升高(P＜0.001),而HS+QU组的HSP70表达则受到明显抑制时点与Sham组比较差异无统计学意义(P＞0.05),但明显低于HS组和HS+GLN组(P＜0.001).与HS组和HS+QU组比较,HS+GLN组大鼠BALF中的IL-1β、TNF-α和IL-6浓度明显降低(P＜0.001),病理结果显示其肺损伤更轻(P＜0.001),而HS+QU组则相反.结论 HSP70具有保护HS大鼠急性肺损伤的作用,其机制可能与增强大鼠热耐受能力和抑制HS大鼠肺部炎症相关.     

Effects of acute and adaptive hypoxia on heat shock protein expression in hepatic tissue

This experimental study was designed to analyze the expression of heat shock protein (HSP) in hepatic tissue induced by acute and adaptive hypoxic hypoxia. Rabbits were exposed to 5000 m simulated altitude at 11% O(2) in a chamber. Total antioxidant status (TAS) plasma content showed a significant decrease in the acute and adaptive hypoxia groups compared with the control group. Regarding TAS, there was no statistically significant difference between the acute and adaptive hypoxia groups. Histopathological evidence of liver injury was observed in study groups. Immunohistochemical analysis showed diffuse HSP70 staining in the hepatocytes in acute hypoxia group. Staining was focal and prominent in pericentral hepatocytes in the adaptive hypoxia group. As HSP expression appeared increased, total injury score increased as well. There was an inverse correlation between HSP and TAS, but it did not reach statistical value. Our results confirmed the expression of HSP in hepatic tissue related to defense against cellular injury in a hypoxia model. It is an early response in acute hypoxia and may decrease in adaptive hypoxia. It seems that HSP is induced, rather than protectively, as an early marker of liver injury. HSP70 induction and overexpression seem to be, at least in part, explained by impaired antioxidant defense mechanisms.     

绞股蓝总皂苷对全脑缺血再灌注大鼠海马区c-jun蛋白表达的抑制作用

 目的 探讨绞股蓝总皂苷(GP)对全脑缺血再灌注大鼠海马区c-jun蛋白表达的影响.方法 用改良的Pulsinelli 4-血管阻断(4-VO)法制做大鼠急性全脑缺血再灌注损伤模型,分别按照再灌注6 h、24 h、72 h取材,应用免疫组织化学法标记各实验组大鼠脑组织海马区c-jun蛋白表达数量.结果 与对照组比较,模型组Jun蛋白表达最高.各组海马区的Jun蛋白表达随着缺血再灌注时间的延长呈递减趋势(再灌注6 h＞再灌注24 h＞再灌注72 h).再灌注6 h各实验组的Jun蛋白表达结果是:模型组＞GP低剂量给药组＞GP高剂量给药组.与模型组相比,绞股蓝总皂苷2个剂量组在不同灌注时间(6 h、24 h、72 h)均具有显著的抑制JUN蛋白表达的作用.结论 绞股蓝总皂苷可明显下调JUN蛋白的表达,具有抑制全脑脑缺血再灌注时神经细胞凋亡作用,从而改善受损的神经功能.GP对急性全脑缺血模型大鼠的脑损伤的预防保护有一定的剂量相关趋势.     

腺苷后适应对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的初步探讨腺苷后适应对大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用及机制。方法48只健康雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血后处理组(IPTC组)及腺苷后适应组(ADOP组),每组12只,建立大鼠在体心肌缺血再灌注损伤模型。实验终点测定心肌梗死面积(TTC染色),心肌核因子-κB(NF-κB)mRNA的表达水平(RT-PCR),同时观察心肌组织中白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)的含量变化,并行心肌组织病理学检查。结果Sham组心肌组织形态改变不明显,IR组心肌损伤较重,IPTC组及ADOP组中心肌组织病理学损伤较IR组明显减轻。与IR组比较,ADOP组的心肌梗死面积、NF-κBmRNA的表达水平及IL-6、MDA含量明显降低(P<0.01),而SOD含量则显著升高(P<0.01);而ADOP组与IPTC组相比,除NF-κBmRNA的表达及IL-6的分泌稍许降低(P<0.05)外,其他均无统计学差异(P>0.05)。结论腺苷后适应可通过抑制再灌注后氧自由基的过量生成及NF-κB活化所诱导的早期炎症反应,增强心肌抗氧化能力,从而发挥保护效应。     

呼吸机所致肺损伤家兔HSP70和NF-κB表达的意义

目的研究呼吸机所致肺损伤（VILI）炎症反应中热休克蛋白70（HSP70）和核因子-kB（NF-kB）表达的意义，以及加用呼气末正压（PEEP）的影响。方法健康成年新西兰白兔30只，实施麻醉和气管切开术后分别接受不同潮气量（VT）的通气（通气时间均为4h）。随机分为以下三组：PEEP组（VT=40ml/kg，PEEP=3cmH2O,n=12）；ZEEP组（VT=40ml／kg，PEEP=0cmH2O,n=12）；对照组（VT=10ml／kg，n=6），始终以正常条件通气。机械通气开始后4h经颈动脉放血处死动物。在光镜下观察肺组织的病理学改变，Western blot检测家兔肺组织HSP70及NF-kB的表达。结果家兔在致伤机械通气4h后，光镜下可见肺组织有不同程度的损伤；各组肺组织HSP70、NF-kB表达均显著增加，且ZEEP组二者呈负相关。与ZEEP组比较，PEEP组肺组织的病理损伤明显减轻，NF-kB表达明显减少。结论HSP70可通过抑制NF-kB的活性，保护肺组织避免VILI；在机械通气过程中加用PEEP也可通过减少NF-kB的表达减轻肺组织损伤。     

热休克蛋白70与脑损伤的关系

热休克蛋白(HSP)70作为一种重要的应激蛋白,与脑损伤密切相关,对神经损伤具有保护作用.本文就HSP70的生物学特性及其与脑损伤的关系作一综述.     

呼吸机所致肺损伤家兔HSP70和NF-κB表达的意义

目的研究呼吸机所致肺损伤(VILI)炎症反应中热休克蛋白70(HSP70)和核因子-κB(NF-κB)表达的意义,以及加用呼气末正压(PEEP)的影响。方法健康成年新西兰白兔30只,实施麻醉和气管切开术后分别接受不同潮气量(VT)的通气(通气时间均为4h)。随机分为以下三组PEEP组(VT=40ml/kg,PEEP=3cmH2O,n=12);ZEEP组(VT=40ml/kg,PEEP=0cmH2O,n=12);对照组(VT=10ml/kg,n=6),始终以正常条件通气。机械通气开始后4h经颈动脉放血处死动物。在光镜下观察肺组织的病理学改变,Westernblot检测家兔肺组织HSP70及NF-κB的表达。结果家兔在致伤机械通气4h后,光镜下可见肺组织有不同程度的损伤;各组肺组织HSP70、NF-κB表达均显著增加,且ZEEP组二者呈负相关。与ZEEP组比较,PEEP组肺组织的病理损伤明显减轻,NF-κB表达明显减少。结论HSP70可通过抑制NF-κB的活性,保护肺组织避免VILI;在机械通气过程中加用PEEP也可通过减少NF-κB的表达减轻肺组织损伤。