柔肝抑纤饮对实验性肝纤维化大鼠肝组织超微结构的影响

目的:观察柔肝抑纤饮抗肝纤维化的疗效,分析并探讨其抗肝纤维化的机制。方法:建立Wistar大鼠CCl4损伤性肝纤维化模型,HE染色半定量、Masson三色胶原染色半定量,电镜进行肝组织病理学观察。同时检测血清肝功能指标(ALT、TP、ALB、GLB、A/G)。结果:经柔肝抑纤饮治疗后,实验性肝纤维化大鼠肝功能指标明显改善。治疗组降低GLB水平好于预防组(P<0.05),可明显降低血清中异常升高的ALT水平,提高A/G比值;电镜观察发现,治疗组肝细胞变性程度明显减轻,综合积分与模型组比较差异具有显著性意义;胶原半定量积分优于模型组;治疗组肝细胞变性程度、形态、功能均优于模型组,肝窦基底膜部分保持完整性、连续性,毛细血管化程度轻于模型组。结论:柔肝抑纤饮具有保护肝细胞、拮抗肝星状细胞的活化增殖、增加胶原降解、增加纤维化逆转因素、维持肝窦的完整性及通透性等作用,从而发挥抗肝纤维化作用。     

肝细胞增殖、凋亡与肝纤维化关系的实验研究

目的 动态观察实验性肝纤维化大鼠肝细胞增殖、凋亡情况,探讨肝细胞增殖、凋亡与肝纤维化进展的关系.方法 Wistar大鼠分为正常、对照组和肝纤维化模型组,HE染色观察肝组织形态学变化,赖氏法检测ALT、AST,竞争性放射免疫分析法测定透明质酸、Ⅳ型胶原,免疫组化方法检测PCNA(增殖细胞核抗原)的表达,TUNEL标记法检测肝细胞凋亡百分率.结果 (1)病理形态学分析和血清检测结果:造模5周末模型组可见肝小叶结构紊乱,汇管区扩大,纤维组织增生,8周末有明显完整的纤维间隔包绕肝结节形成假小叶;造模5周及8周末,模型组血清ALT、AST、透明质酸、Ⅳ型胶原较正常组明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)肝细胞增殖率测定(PCNA):造模5周及8周末,模型组大鼠肝细胞增殖明显多于正常组(P＜0.01),模型组造模5周与8周相比,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)肝细胞凋亡率测定(TUNEL法):造模5周及8周末,模型组大鼠肝细胞凋亡明显多于正常组(P＜0.01).结论 肝纤维化时肝细胞凋亡较正常对照组增加,提示肝细胞凋亡是肝细胞增生不良、肝纤维化进展的重要促动因素.     

柔肝抑纤饮治疗早期肝硬化60例疗效观察

观察柔肝抑纤饮抗肝纤维化的临床疗效。通过观察 6 0例早期肝硬化患者治疗前后的肝脏功能、血清纤维化指标 (HA、PCⅢ、LN、Ⅳ C)、肝脾B超变化等发现 ,柔肝抑纤饮具有改善临床症状体征、恢复肝脏功能、降低血清纤维化指标、改善影像学表现的作用 ,经统计学处理差异具有显著性 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,临床总有效率达73.33% ,说明该方具有良好的减轻肝细胞炎症、抗肝纤维化、降低门静脉压的作用     

川芎嗪抗肝纤维化作用的实验研究

目的：研究川芎嗪抗实验性肝纤维化作用。方法：用四氯化碳（ＣＣｌ４）诱导大鼠肝纤维化，分正常对照组、模型组和川芎嗪组进行对比观察。结果：川芎嗪能显著降低ＣＣｌ４损伤的大鼠血清谷丙转氨酶、丙二醛、透明质酸、Ⅲ型前胶原及肝组织中丙二醛水平，提高肝组织中超氧化物歧化酶活性，减轻肝组织胶原纤维增生程度。结论：川芎嗪具有保护肝细胞、抗脂质过氧化及抗肝纤维化作用。     

抗肝纤方对大鼠肝纤维化防治作用的实验研究

目的：通过大鼠肝纤维化动物模型，研究抗肝纤方预防肝纤维化的作用，并探讨其作用机制。方法：采用二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠制备肝纤维化模型，以秋水仙碱为阳性对照，采用光镜观察组织学改变并测定血清谷丙氨酸转移酶(ALT)、谷草氨酸转移酶(AST)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、和Ⅳ型胶原(Ⅳ—C)，以反映肝细胞损伤及肝纤维化的程度。结果：抗肝纤方能显著降低大鼠血清中ALT、AST、HA、LN、PCⅢ、Ⅳ—C的水平，升高ALB。病理组织学检查亦表明，抗肝纤方能明显减轻实验大鼠肝脏纤维化程度。结论：抗肝纤方对实验性肝纤维化有预防作用。     

养阴抗纤复方抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的：研究养阴抗纤复方抗肝纤维化的作用。方法：CCL4制备大鼠肝纤维化模型,以秋水仙碱为对照,观察养阴抗纤复方对大鼠肝纤维化各项指标的影响。结果：养阴抗纤复方能保护大鼠肝功能,降低肝组织透明质酸(HA)、Ⅲ前胶原(PCⅢ)、Ⅳ胶原(Ⅳ—C)和肝组织中羟脯氨酸(HyP)的水平,该方药物血清可以抑制纤维化肝细胞合成胶原,能显著减轻肝脏胶原纤维增生程度。结论：养阴抗纤复方具有抗纤化作用。     

肝纤维化过程中血清及肝组织纤维指标变化的实验研究

目的 探讨实验性肝纤维化过程中血清及肝组织纤维化指标变化的意义。方法 32只雄性Wistar大鼠尾静脉注射白蛋白建立实验性免疫性肝纤维化模型，检测血清HA、ALT、AST、ALB、肝匀浆Hyp、α－SMA免疫组化、肝组织病理、组织化学染色、Ⅳ胶原免疫组化、流式细胞仪α-SMA阳性细胞定量分析。结果 肝细胞坏死明显时胶原沉积量增加，纤维化程度与炎症活动度有关；血清HA、ALT、AST、肝组织匀浆Hyp和α-SMA阳性细胞定量随着纤维化程度的增加而增加。结论 实验性 肝纤维化过程中血清及肝组织纤维指标的变化一致，肝匀浆Hyp和血清HA能够敏感反应肝组织纤维化程度。     

氧化苦参碱对大鼠肝纤维化的影响

目的：探讨氧化苦参碱对实验性肝损伤肝胶原合成度及纤维化的影响。方法：采用CCl4造成大鼠慢性肝损伤肝纤维化模型,同时用氧化苦参碱防治,并动态观察血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、透明质酸（HA）、肿瘤坏死因子-α（TNFα）的水平及肝组织病理变化,通过计算机图像分析系统分析肝内纤维组织增生情况。结果：氧化苦参碱治疗组血清ALT,Ⅳ-C,HA,TNFα水平及肝组织内炎症活动度、纤维组织增生程度均低于模型组,且大剂量治疗组又低于小剂量治疗组。结论：氧化苦参碱有减轻肝脏炎症活动度、抑制肝内胶原合成度及抗肝纤维化作用。     

清肝抑纤饮及其拆方对CCl_4致肝纤维化大鼠HSC的影响

目的:研究清肝抑纤饮及其拆方对四氯化碳(CCl4)致肝纤维化大鼠肝星状细胞(HSC)活化及凋亡的影响,探讨清肝抑纤饮抗肝纤维化的机制。方法:110只大鼠随机分为9组,空白对照组给予普通饲料喂养,自由饮水,其余各组均于四肢及背部皮下注射40%CCl4-花生油溶液,每周注射两次,同时给予中药煎剂灌胃,共8周。8周后处死大鼠,免疫组织化学法观察α-平滑肌收缩蛋白(α-SMA)表达,TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)法检测HSC凋亡。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠肝窦周围α-SMA阳性表达细胞明显增多,且表达增强;清肝抑纤饮组、清热解毒+凉血活血组的肝窦周、中央静脉及汇管区周围见棕黄色颗粒,着色较淡,体积较小,两组灰度值均大于模型组,分别与模型组比较有显著性差异(P<0.01,P<0.05);各治疗组HSC凋亡率均高于模型组,以清肝抑纤饮全方组凋亡率最高,但与模型组比较均无显著性差异(P>0.05)。结论:清肝抑纤饮在肝纤维化的早期阶段用药对HSC的影响主要以抑制其活化为主,有促进活化的HSC凋亡的趋势,清热解毒与凉血活血药物的配伍在抑制HSC活化过程中起主要作用。     

柔肝冲剂抗肝纤维化的动物实验

为研究柔肝冲剂（主药：黄芪、丹参、郁金）抗肝纤维化的作用，以Wistar雄性大鼠腹腔注射二甲基硝胺制作肝纤维化模型。观察柔肝冲剂对模型鼠纤维化相关指标的影响。结果：柔肝冲剂能抑制模型鼠肝脏胶原蛋白的合成；病理切片显示，柔肝冲剂有减轻肝脏炎症反应，保护肝细胞作用；Northem印迹分子杂交结果显示，柔肝冲剂能降低模型鼠纤维肝α1（Ⅰ）、α1（Ⅲ）和α1（Ⅳ）前胶原mRNA的表达。提示：柔肝冲剂能同时影响肝脏间质细胞和实质细胞胶原基因的表达，减少胶原的生成，从而抑制肝纤维化的发展。     

补肾柔肝方对二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化的预防作用及其机制研究

目的：探讨补肾柔肝方对二甲基亚硝胺（dimethylnitrosamine，DMN）诱导大鼠肝纤维化的预防作用及初步机制。方法：雄性Wistar大鼠40只，随机分为正常对照组（n=10）、模型组（n=15）及补肾柔肝方预防组（n=15）。模型组和补肾柔肝方预防组以10mg／kgDMN腹腔注射，1次／d，每周连续3d，共4周。模型组在造模同时给予生理盐水灌胃，补肾柔肝方预防组在造模同时给予补肾柔肝方灌胃，共4周；第4周末处死全部大鼠，留取血清及肝组织标本。采用全自动生化分析仪检测血清总胆红素（total bilirubin．Tbil）、丙氨酸氧基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、白蛋白等；应用逆转录聚合酶链式反应法检测肝组织结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）和Ⅰ型胶原mRNA的表达。结果：补肾柔肝方预防组大鼠一般状态明显好于模型组；模型组大鼠死亡率为13．33％（2／15），补肾柔肝方预防组死亡率为6．67％（1／15）；模型组大鼠腹水发生率为46．67％（7／15），补肾柔肝方预防组大鼠腹水发生率为20％（3/15）·雨组比较差异有统计学意义（P〈0．01）；补肾柔肝方组肝功能较模型组有显著改善（P〈0.01）。模型组肝组织CTGF和Ⅰ型胶啄mRNA表达明显增强，补肾柔肝方预防组与模型组相比明显减弱（P〈0．01）。结论：补肾柔肝方可通过抑制大鼠盱组织CTGF和Ⅰ型胶原mRNA的表达．达到抗肝纤维化的作用。     

柔肝合剂与鳖甲煎丸抗肝纤维化疗效比较

目的　观察柔肝合剂抗慢性乙型肝炎肝纤维化的作用 ,寻找抗肝纤维化的简单、价廉的有效方剂。方法　选择慢性乙型肝炎肝纤维化患者 12 0例 ,随机分为柔肝合剂治疗组 6 4例和鳖甲煎丸对照组 5 6例 ,进行疗程相同的对照治疗。观察项目为血清透明质酸 (HA)、Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )、层黏蛋白 (LN)、Ⅳ型胶原 (Ⅳ -C)。结果　治疗组与对照组治疗后HA、PCⅢ、LN、Ⅳ -C均有明显下降 ,而 2组间比较则无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论　柔肝合剂的抗肝纤维化作用与鳖甲煎丸疗效相近 ,是一种抗肝纤维化的简单、价廉的有效方剂     

细胞外信号调节激酶对肝纤维化逆转的影响及其机制

目的:探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinase, ERK)活化对肝纤维化自发逆转的影响及其作用机制.方法:CCl4注射SD大鼠8周,随后停药6周,建立肝纤维化自发逆转的动物模型.采用Northern杂交、免疫组化染色等检测ERK在纤维化消退过程中的活化状况、表达时序及在肝组织中的定位,并以cDNA微阵列杂交、RT-PCR等检测多种ERK底物在RNA、蛋白质水平的表达变化.结果:肝纤维化自发逆转过程中ERK表达水平显著提高,且由肝星状细胞( HSC)核表达为主转变为肝细胞胞质表达为主,多定位于小叶内、窦周间隙及纤维条索周围.核糖体S6蛋白激酶(RSK1)、c-fos、磷脂酶A2(PLA2)、离子通道及水通道、胃肠激素受体等ERK的下游基因转录也明显上调.结论:ERK与肝纤维化的自发逆转密切相关,可能通过多途径发挥保护肝细胞功能、促进肝细胞增殖、加速HSC凋亡等作用.     

肝纤维化大鼠肝脏血管紧张素Ⅱ受体1型的表达及其与α-平滑肌肌动蛋白表达相关性研究

目的 了解血管紧张素Ⅱ受体1型(angiotensinⅡ type 1 receptor,AT1R)在肝纤维化大鼠肝脏的表达及其与胶原纤维含量和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的关系.方法 将30只SD大鼠随机分成正常组(n=10)和肝纤维化组(n=20).正常组正常饲养,肝纤维化组给予40% 四氯化碳(CCL4)橄榄油0.4 mL/100 g体质量背部皮下注射,每3 d注射1次,第5 w末处死两组大鼠,肝组织制备成石蜡切片后进行Masson三色染色、AT1R和α-SMA免疫组织化学染色,采集图片后用image pro plus 6.0软件对阳性表达进行累计光密度测定.对所得数据进行相关和回归分析.结果 AT1R在正常组大鼠肝脏不表达或血管周围弱表达,在肝纤维化组肝脏汇管区周围和纤维间隔周围大量表达,其主要在肝细胞浆和(或)膜表达,肝星状细胞未见表达;半定量测定及相关分析结果 显示,α-SMA与胶原纤维、AT1R与胶原纤维、AT1R与α-SMA的相关系数分别为0.958、0.971、0.990(P＜0.01).结论 AT1R在肝纤维化大鼠肝细胞大量表达,在肝星状细胞不表达,AT1R的含量与胶原纤维含量、α-SMA表达量存在正相关性.     

红景天甙对肝纤维化大鼠Samds基因表达的影响

目的: 观察红景天甙对肝纤维化大鼠TGFβ-Smad通路的影响.方法: CCl4诱导大鼠肝纤维化,以红景天甙水溶液干预性治疗,Masson染色观察肝组织胶原沉积;ELISA法检测大鼠血清TGFβ1水平;原位杂交(in situ hybridization,ISH)和免疫组化(immunohistochemistry,IH)检测大鼠肝组织Smads表达情况.结果: 红景天甙干预性治疗使肝纤维化大鼠血清TGFβ1水平明显下降[(53.4±19.5) vs (88.7±22.8) mg/L, P<0.05],肝脏胶原占肝组织面积比例减少为(0.041±0.011)[模型组(0.167±0.052),P<0.05];治疗组肝脏Smad 4蛋白表达阳性率降低为(0.023±0.008)[模型组(0.137±0.090),P<0.01],Smad 4 mRNA阳性率降低为(0.233±0.018)[模型组(0.741±0.091),P<0.01];Smad 7蛋白阳性率增加为(0.067±0.010)[模型组(0.019±0.002),P<0.05],Smad 7 mRNA阳性率增加为(0.198±0.011)[模型组(0.074±0.012),P<0.01];肝组织Smads蛋白表达与Smads mRNA水平变化一致.结论: 红景天甙防治可显著降低肝纤维化大鼠血清TGFβ1水平,减少肝脏胶原沉积,抑制肝脏Smad 4表达及促进Smad 7 mRNA表达,从而减弱了由TGFβ1介导的肝纤维化信号,可能是其发挥抗肝纤维化作用的分子机制之一.     

疏肝软坚汤对肝纤维化大鼠NAG的动态影响

目的:探讨疏肝软坚汤对肝纤维化大鼠的防治作用。方法:观察血清N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)的动态变化。结果:疏肝软坚汤可有效地防治大鼠肝纤维化,显著降低模型大鼠血清含量,与对照组比较差异显著。结论:疏肝软坚汤可保护细胞,促进损伤肝细胞的修复;调节胶原代谢,抑制胶原的合成,促进胶原的降解。     

Determination of serum fibrosis indexes in patients with chronic hepatitis and its significance

Objectives To study the relationship between serum levels of hyaluronic acid (HA), type Ⅲ procollagen (PCⅢ), laminin (LN), type Ⅳ collagen (Ⅳ-C) and hepatic fibrosis and to determine their value in clinical practice. Methods 2600 serum samples from chronic hepatitis patients were assayed for fibrosis indexes including HA, PCⅢ, LN and Ⅳ-C with RIA. Liver biopsy was performed in 280 of those patients and the biopsy material was examined histopathologically. The inflammation grade of the liver, stage of fibrosis and degree of chronic hepatitis were recorded and were compared with fibrotic indexes. Results Among 2600 chronic hepatitis patients, every fibrotic index had a significant correlation with the inflammation grade, fibrosis staging and the degree of chronic hepatitis (P&lt;0.01). The coefficient correlation of the results of histopathological examinations to HA was 0.544, 0.548 and 0.468 respectively, that to PCⅢ, 0.495, 0.424 and 0.335, that to LN, 0.214, 0.204 and 0.184, and that to Ⅳ-C, 0.406, 0.404 and 0.412, respectively. Conclusions Serum fibrosis indexes are fairly well correlated with the inflammation grade of the liver, fibrosis staging and the degree of chronic hepatitis. However, as diagnostic markers, they should be considered in combination with liver function tests, ultrasonography and clinical manifestations.&lt;     

健脾软肝方及拆方对CCl4肝纤维化大鼠脂质过氧化的影响

目的:观察福尔肝健脾软肝方及拆方对CCl4肝纤维化大鼠脂质过氧化的影响。方法:复制CCl4肝纤维化大鼠模型,以等效剂量健脾软肝方及拆方灌胃,并以鳖甲软肝片为对照,观察模型大鼠肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝组织Hyp含量显著增加,SOD活性明显下降,MDA含量显著升高,表现为显著的脂质过氧化损伤和肝损伤。经药物治疗后,各药物组SOD活性(除理气活血软肝方组、活血软肝方组外)均有不同程度升高,以健脾软肝方组和健脾活血软肝方组在升高SOD活性方面优于其它治疗组;各药物组MDA含量(除活血软肝组外)均有不同程度降低,以健脾软肝方组MDA含量降低较为明显,显示良好的抗肝脂质过氧化作用。结论:福尔肝健脾软肝方及拆方具有良好的抗肝纤维化作用,尤以健脾软肝方全方组作用为好。抗脂质过氧化可能是健脾软肝方及拆方抗肝损伤和抗肝纤维化作用的重要靶点之一。     

Clinical Study on Reversing Hepatic Fibrosis with Handan Ganle (汉丹肝乐) Capsule

Ｉｔｈａｓｂｅｅｎ ｐｒｏｖｅｎｔｈａｔＣｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂｓｈａｖｅｅｘｃｅｌｌｅｎｔｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｅｆｆｅｃｔｏｎｈｅｐａｔｉｃｆｉ ｂｒｏｓｉｓ（1）．ＣｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂａｌｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎＨａｎｄａｎＧａｎｌｅｃａｐｓｕｌｅ（汉丹肝乐胶囊,ＨＤＧＬＣ）,ｈａｓｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆａｎｔｉ ｆｉｂｒｏｓｉｓ．Ｔｈｅｐｕｒｐｏｓｅｏｆｔｈｉｓｓｔｕｄｙｉｓｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｅｆ ｆｅｃｔｏｆＨＤＧＬＣｏｎｈｅｐａｔｉｃｆｉｂｒｏｓｉｓ…