副肿瘤性脑脊髓炎/感觉神经元病鞘内抗核抗体的合成

目的 探讨副肿瘤性脑脊髓炎／感觉神经元病（ＰＥＭ／ＰＳＮ）的发病机制。方法 采用亲和免疫细胞组织化学（ＡＢＣ）法测定１６例ＰＥＭ及１４例ＰＳＮ患者血清及脑脊液（ＣＳＦ）中的抗核抗体的滴度,将所得的血清及ＣＳＦ抗Ｈｕ抗体滴度按照Ｓｃｈｕｌｌｅｒ数学模拟公式计算出鞘内抗Ｈｕ抗体的合成及抗Ｈｕ抗体的特异活性（ＡＳＡ）,采用免疫印迹分析,测定抗Ｈｕ抗体所识别的大脑神经元胞核提取物中蛋白抗原;采用火箭免疫电     

儿童急性白血病G-CSF自身抗体及其对G-CSF血清浓度的影响

目的 研究急性白血病患儿应用ｒｈＧ－ＣＳＦ后自身抗体的产生及对Ｇ－ＣＳＦ血清浓度的影响。方法 应用ＥＬＩＳＡ技术检测４６例急性白血病患儿和１０４例正常儿童。结果１１例应用ｒｈＧ－ＣＳＦ的急性白血症患儿检测到自身抗体。结论 Ｇ－ＣＳＦ自身抗体的产生与ｒｈＧ－ＣＳＦ剂量和疗程无关,且不显著地降低Ｇ－ＣＳＦ血清浓度。ｒｈＧ－ＣＳＦ临床应用具有安全性。     

老年患者非小细胞肺癌化疗前后血清CYFRA 21—1水平的测定

目的：了解血清ＣＹＦＲＡ２１－１在非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中的诊断价值以及化疗后其水平的变化。方法：采用放射免疫法测定非小细胞肺癌患者化疗前后血清ＣＹＦＲＡ２１－１水平。结果：非小细胞肺癌患者血清ＣＹＦＲＡ ２１－１水平远高于非肿瘤组;而化疗前后ＣＹＦＲＡ２１－１水平的变化无显著性差异。结论：血清ＣＹＦＲＡ２１－１是诊断非小细胞肺癌一种敏感,可靠的指标,且不受化疗因素的影响。     

脑囊虫病患者血清及脑脊液肿瘤坏死因子检测

目的：对不同疗程脑囊虫病患者的血清及脑脊液（ＣＳＦ）中肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）水平进行检测。方法：正常人血清及ＣＳＦ各２０份，治疗前１４例，１疗程后１１例，全疗程后７例，用夹以ＥＬＩＳＡ方法测ＴＮＦ－α含量。结果：驱虫１疗程后脑囊虫病患者血清及ＣＳＦ中ＴＮＦ－α水平最高，与治疗前相比差异有显著性（Ｐ〈０．０１）。结论：ＴＮＦ－α与脑囊虫病患者病情进展有关。     

粒细胞集落刺激因子与新生儿感染性疾病的关系

目的：了解新生儿在感染状态下血清粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）的变化,方法：采用酶标双抗体夹心法（ＥＬＩＳＡ法）,测定５０例感染新生儿和２０例非感染新生儿血清Ｇ－ＣＳＦ水平。结果：感染组新生儿血清Ｇ－ＣＳＦ阳性率达７４％,其血清浓度和ＯＤ值均显著高于非感染组新生儿（Ｐ〈０．０１）。结论：新生儿在感染状态下血清Ｇ－ＣＳＦ明显升高,测定体液中Ｇ－ＣＳＦ水平对于新生儿在感染性疾病的诊断,鉴别诊断以及指     

血清肿瘤标志物CYFRA21—1,β2—MG,CEA,NSE对肺癌诊断的前瞻性？…

秋了对肺癌应用两种特异性单抗（ＫＳ１９０１和ＢＭ１９０２１）所识别的肺癌新的相关标志ＣＹＦＲＡ２１－１、β２－ＭＧ、ＣＥＡ和ＮＳＥ进行前瞻性规范的诊断试验对照研究、评价ＣＹＦＲＡ２１－１及其联合检测诊断肺癌的价值,用免疫放射分析法测定６２例肺癌（ＬＣ）、６３例肺部良性疾病患者及６３例正常健康人血清ＣＹＦＲＡ２１－１、ＣＥＡ和ＮＳＥ水平,采用ＲＯＣ曲线选择ＣＹＦＲＡ２１－１界值为３．３Ｕ／ｍｌ。结果     

血清和脑脊液中肿瘤坏死因子α水平与急性白血病相关性研究

目的：观察急性白血病（ＡＬ）与中枢神经系统白血病（ＣＮＳ－Ｌ）患者血清与脑脊液（ＣＳＦ）中肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）水平变化，并探讨其临床意义。方法：用酶联免疫检测盒，采用双抗体夹心方法（ＥＬＩＳＡ），同时检测３６例ＡＬ患者与１３例正常对照组血清与ＣＳＦ中ＴＮＦα水平。结果：各型急性白血病患者血清与ＣＳＦ中ＴＮＦα均明显升高，并发ＣＮＳ－Ｌ后ＣＳＦ中ＴＮＦα进一步升高；急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）     

可溶性肿瘤坏死因子受体与心力衰竭关系的研究

目的：探讨心力衰竭患者可溶性肿瘤坏死因子受体１（ＳＴＮＦ－ＲＩ）血清水平的变化及ＡＣＥＩ对ＳＴＮＦ－ＲＩ的影响。方法：采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ,测定了ＣＨＦ患者６２例和正常对照组３０例的血清ＳＴＮＦ－ＲＩ水平。并观察心功能Ⅲ级以上ＣＨＦ患者用苯那普利治疗１个月后的ＳＴＮＦ－ＲＩ血清水平。结果：ＳＴＮＦ－ＲＩ在心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级患者,均较正常对照组明显升高（Ｐ〈０．０１）;而且随着心功能的恶化、血液     

小鼠骨髓基质细胞系QXMSC1促进骨髓移植后的造血重建

目的：观察骨髓基质细胞系ＱＸＭＳＣ１在骨髓移植后早期能否加速造血重建。方法：用脾克隆形成单位测定ＱＸＭＳＣ１对造血干细胞的影响。计数每根股骨有核细胞数，用半固体琼脂克隆形成法测定粒单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ），微量甲基纤维素法测定红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ）。结果：ＱＸＭＳＣ１细胞可明显增加ＣＦＵ－Ｓ克隆数。在骨髓移植后第１０天，ＱＸＭＳＣ１可增加骨髓有核细胞数，增加ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ     

骨髓增生异常综合征患者血清造血抑制活性的研究

目的：通过研究骨髓增生异常综合征患者血清造血抑制活性,探讨致ＭＤＳ无效造血的可溶性因素。方法：以甲基纤维素半固体细胞培养法,观察患者血清对正常骨髓ＢＦＵ－Ｅ,ＣＦＵ－ＧＭ的抑制作用,及对单个核细胞素集落生成的刺激作用;以ＤＮＡ末端标记技术,检测１例ＭＤＳ患者血清与正常骨髓单个核细胞共育后的凋亡细胞。     

正常和肿瘤组织中ZNF165 mRNA的表达及其自发性抗体检测

目的:分析正常和肿瘤组织中ZNF165的表达及其在肝癌患者体内诱导产生的自发性体液免疫反应.方法:采用RT-PCR和定量PCR方法检测16种正常和4种肿瘤(肝癌、胃癌、结肠癌、肺癌)组织中ZNF165 mRNA及表达丰度;将ZNF165基因在原核细胞中进行蛋白表达,亲和层析法纯化重组ZNF165蛋白.Western blot方法对ZNF165在82例肝癌患者体内诱导的自发性抗体进行检测.结果:正常组织中ZNF165 mRNA只在睾丸组织表达,肝癌、胃癌、结肠癌和肺癌组织中ZNF165 mRNA阳性率分别为52.4%、 42.8%、 42.8%和21.4%.定量 PCR结果显示ZNF165 mRNA以高水平在肝癌组织与睾丸组织中表达,而在配对的癌旁组织与其他正常组织中仅存在很低水平的表达(P均＜0.01).82例肝癌患者血清中4例与ZNF165蛋白出现免疫反应,阳性率4.9%;36例正常人血清均为阴性.结论:ZNF165是一个新的肿瘤-睾丸抗原基因,它在机体内可诱导体液免疫反应,有可能作为肿瘤免疫治疗的候选抗原.     

系统性红斑狼疮脑脊液抗核抗体测定的临床意义

目的　探讨系统性红斑狼疮 (SLE)患者脑脊液 (CSF)中抗核抗体 (ANA)的定量测定对神经精神性狼疮(NPLE)的诊断价值。方法　对 2 8例SLE患者采用间接免疫荧光法检测CSF及血清中ANA滴度 ,同时进行CSF的常规、生化检测。对NPLE及非NPLE狼疮患者进行统计学分析与比较。结果　两组患者CSF糖、细胞数、氯化物无显著差异 ,NPLE患者CSF的ANA滴度≥ 1:10 0 ,阳性率高于非NPLE组 ;另外NPLE组血中ANA滴度显著高于非NPLE组 ,经治疗后NPLE组CSF中ANA滴度 1:10 0阳性率下降。结论　SLE患者CSF中ANA的定量检测 ,有助于NPLE的早期诊断 ,并为治疗及预后提供参考。     

肺鳞癌患者胸水免疫复合物抗原及抗体组份的免疫学特异性分析

本文利用Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析法纯化肺鳞癌患者胸水免疫复合物(IC);并在解离的条件下(8mol/L尿素),用QAE-Sephadex A-50离子交换柱层析法分离胸水免疫复合物中的抗原、抗体组份。IC抗体组份经间接免疫荧光法鉴定具有相对肺癌的反应特异性;用IC抗原组份制备的特异性抗血清经正常人组织、血浆等免疫吸附剂充分吸附后,仍保留与原胸水IC中分离所得抗体组份相似的抗肿瘤相关抗原反应特异性。该法为研究肿瘤宿主体内免疫调节反应提供了较直接的途径。分离所得抗原组份制备的抗血清可作为研究、检测宿主体内肿瘤相关抗原的特异探针。     

分泌抗体的杂交瘤细胞株的制备

目的应用杂交瘤技术制备出分泌抗肺癌抗体杂交瘤细胞株,为肺癌的早期诊断和免疫治疗提供可能靶点．方法用肺癌细胞株作免疫原免疫健康BALB／C小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,获得分泌高滴度抗肺癌抗体的杂交瘤细胞株,用间接ELISA和检测单抗体的特异性,双抗体夹心法测定免疫球蛋白同种型．结果通过细胞融合,筛选出2株持续分泌抗肺癌抗体的杂交瘤细胞株C5、B8,其分泌的抗体为IgM亚类,κ亚型,并和肺癌细胞发生特异性反应．结论成功完成细胞融合,制备了分泌抗体的杂交瘤细胞株．     

HPV6b VLPs检测尖锐湿疣病人血清和宫颈分泌物抗体的意义

目的 :探讨人乳头瘤病毒 (HPV)感染后尖锐湿疣 (CA)病人机体产生的免疫反应及特异性抗体用于HPV感染的诊断价值。方法 :采用重组杆状病毒 昆虫细胞系统制备HPV 6bL1VLPs抗原 ,以酶联免疫吸附试验 (ELISA)分别检测 4 9例CA病人和 4 5例正常对照的血清抗体、4 6例CA病人和 36例正常对照的宫颈分泌物抗体 ,并用血凝抑制试验检测抗体的中和活性。结果 :CA组HPV6bL1VLPs特异性的血清IgG抗体和分泌物IgA抗体的OD值和阳性率均显著高于正常对照组 (P <0 .0 0 1)。HPV 6型与HPV 11型DNA阳性者的血清IgG和分泌物IgA抗体的阳性率差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。血清IgG和分泌物IgA抗体血凝抑制试验平均效价较正常对照组为高。结论 :生殖道HPV感染后可产生全身和局部生殖道粘膜抗体反应 ,两类抗体均具中和活性。HPV6型与HPV11型感染者的血清和分泌物抗体均存在交叉反应。血清抗体和局部分泌物抗体可能具有用于诊断HPV感染的价值     

抗人膀胱癌双功能抗体的制备与鉴定

目的:制备抗人膀胱癌双功能抗体(BfAb)并进行体外实验与鉴定.方法:提取膀胱癌抗原,应用膀胱癌抗原通过杂交瘤技术制备抗人膀胱癌单克隆抗体,后者经胃蛋白酶水解后制备抗人膀胱癌单克隆抗体的F(ab′)2片段.然后将该片段通过二次杂交制备杂交瘤,用其免疫新西兰白兔,血清经凝胶纯化后获抗人膀胱癌BfAb,应用ELISA和免疫组化方法进行鉴别.结果:抗人膀胱癌BfAb与抗人膀胱癌单克隆抗体呈阳性反应,与BALB/C小鼠γ球蛋白呈阴性反应;BfAb可以同时结合靶细胞的肿瘤抗原和效应细胞表面的触发分子,引发正常细胞对肿瘤细胞的防御机制.结论:BfAb既能竞争性地与膀胱移行细胞癌抗原结合,又具有激活淋巴细胞的功能,从而特异性的直接杀伤癌细胞并诱发一系列的免疫应答反应.     

血清MMP-2、MMP-9水平与非小细胞肺癌转移关系的研究

目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清MMP-2、MMP-9水平与肿瘤转移的关系。方法：采用抗人MMP-2、MMP-9单克隆抗体，用ELISA法检测72例非小细胞肺癌患者及20例健康志愿者血清MMP-2和MMP-9水平。结果：NSCLC患者血清MMP-2和MMP-9含量显著高于正常对照组。NSCLC有转移组血清MMP-2和MMP-9水平显著高于NSCLC无转移组。结论：血清MMP-2和MMP-9浓度可作为预测非小细胞肺癌转移的指标。     

Simultaneous serum and CSF antibodies in herpes simplex virus encephalitis.

Serial concomitant paired sera (S) and CSF were taken from eight patients with biopsy-proved herpes simplex virus encephalitis (HSVE). These specimen pairs were compared with 28 others from patients with various neurologic conditions. Before and after reduction with 2-mercaptoethanol, a ratio of S/CSF antibody titers of less than or equal to 20 with either the passive hemagglutinating (PHA) or immune adherence hemagglutinating (IAHA) antibody tests occurred in every patient with HSVE. Diagnostic S/CSF ratios were noted in three patients before biopsy of the brain and in four patients by the tenth day of neurologic disease. Among control subjects, a ratio of S/CSF titers greater than 20 was observed in all but four patients. Each of the latter patients had neurologic diagnoses easily distinguishable from HSVE. The PHA or IAHA S/CSF ratio offers a rapid, reliable method for the diagnosis of HSVE (P less than .001).     

人源肺腺癌噬菌体抗体库的构建及筛选

目的:构建人源噬菌体单链抗体ScFv基因文库,并从中筛选出抗肺癌抗体。方法:提取肺癌患者癌旁淋巴结组织,通过RT-PCR扩增出重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),再经剪切-重叠-延伸PCR(SOE-PCR)将VH 和VL连接得到单链抗体ScFv。将双酶切后的ScFv基因片段克隆入噬菌体表达载体pCANTAB5E,得到初级噬菌体抗体库。以肺腺癌细胞株A549为抗原对抗体库进行“吸附-洗脱-扩增”筛选富集,共进行4轮筛选,鉴定抗体库性能。结果:成功构建噬菌体单链抗体库。在亲和筛选过程中,肺癌单链抗体得到富集,收获率逐轮提高,第4轮为第1轮的115倍。随机选取10个克隆,通过ELISA法检测到其中7个与肺癌细胞呈阳性反应,阳性率为70%。结论:通过噬菌体展示技术得到肺癌相关人源单链抗体,筛选后的单链抗体能与肺腺癌细胞A549特异性结合。     

人基质金属蛋白酶-1融合蛋白的纯化及其多克隆抗体的制备与初步应用

目的 :获得兔抗人基质金属蛋白酶 1 (MMP 1 )多克隆抗体 ,并将其初步应用于临床检测。方法 :将人MMP 1融合蛋白经亲和层析法纯化 ,并将其作为抗原免疫家兔 ,获得兔抗血清 ,经饱和硫酸铵纯化 ,获得初步纯化的兔抗人MMP 1多克隆抗体。用双抗夹心间接酶联免疫吸附实验 (ELISA)测定正常对照、慢性肝病、肝硬化患者血清MMP 1的OD值。结果 :获得初步纯化的兔抗人MMP 1特异性多克隆抗体 ,该抗体能与人MMP 1起反应。结论:制备的MMP 1多克隆抗体可初步用于临床检测