黄芪注射液对人胚肺成纤维细胞增殖及细胞外基质合成的干预作用

目的观察黄芪注射液对体外培养人胚肺成纤维细胞增生以及细胞外基质合成的影响。方法用0⁴00 mg/mL浓度的黄芪注射液作用于体外培养的人胚肺成纤维细胞,24400 mg/mL浓度的黄芪注射液作用于体外培养的人胚肺成纤维细胞,24⁷2 h后观察不同浓度的黄芪注射液对成纤维细胞增殖活性及其功能的影响。MTT法观察成纤维细胞的生长活性,天狼猩红染色观察胶原生成情况。结果与对照组相比,在2572 h后观察不同浓度的黄芪注射液对成纤维细胞增殖活性及其功能的影响。MTT法观察成纤维细胞的生长活性,天狼猩红染色观察胶原生成情况。结果与对照组相比,在25²00 mg/mL浓度作用下,黄芪注射液对成纤维细胞的生长具有促进作用;在400 mg/mL浓度作用下,黄芪注射液能够明显抑制人胚肺成纤维细胞的增殖。结论黄芪注射液在高浓度条件下抑制人胚肺成纤维细胞的生长,中低浓度下促进成纤维细胞的生长,呈现剂量依赖性。     

黄芪注射液诱导皮肤真皮成纤维细胞凋亡研究

目的 研究黄芪注射液诱导真皮成纤维细胞调亡的作用,探讨其治疗银屑病的作用机制.方法 采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测不同浓度黄芪注射液对真皮成纤维细胞增殖的抑制作用,采用Annexin V-FITC细胞凋亡检测法检测黄芪注射液对真皮成纤维细胞凋亡指数的影响,以免疫组织化学法考察黄芪注射液对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL表达的影响.结果 不同浓度的黄芪注射液对真皮成纤维细胞的增殖均有抑制作用(P＜0.01),并呈明显的剂量依赖性.真皮成纤维细胞的凋亡指数随着黄芪注射液浓度的增加而增加.免疫组织化学结果表明,在黄芪注射液的作用下,TRAIL在人真皮成纤维细胞的胞膜和胞浆成强阳性表达.结论 黄芪注射液可抑制真皮成纤维细胞的增殖,诱导其凋亡,该效应可能与黄芪注射液促进TRAIL的表达有关,从而可用于银屑病的治疗.     

丹参注射液对体外培养成纤维细胞的增殖和形态的影响

目的研究丹参注射液对体外培养成纤维细胞的增殖和形态的影响。方法用含有浓度为0～200mg/mL丹参注射液的培养液作用于成纤维细胞,培养72h后,MTT检测细胞活性,显微镜下观察细胞形态变化。结果与对照组相比,丹参注射液在体外培养条件下对成纤维细胞的生长具有明显的抑制作用,并且随着药物浓度的增加,抑制作用也逐渐增强。结论丹参注射液对成纤维细胞有抑制作用并且呈剂量依赖性。提示其可能有预防或延缓肺纤维化疾病进程的作用。     

芥子气诱导人真皮成纤维细胞凋亡的研究

目的：研究芥子气诱导真皮成纤维细胞凋亡的作用,探讨其治疗银屑病的作用机制。方法：采用MTT法检测不同浓度芥子气对真皮成纤维细胞增殖的抑制作用,采用AnnexinV—FITC法检测芥子气对真皮成纤维细胞凋亡指数的影响,以免疫组化法考察芥子气对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1（TRAILR1）表达的影响。结果：不同浓度的芥子气对真皮成纤维细胞的增殖均有抑制作用（P〈0．01）,并呈明显的剂量依赖性。真皮成纤维细胞的凋亡指数随着芥子气浓度的增加而增加。免疫组化考察结果表明,在芥子气的作用下,TRAILR1在人真皮成纤维细胞的胞膜和胞浆成强阳性表达。结论：芥子气可抑制真皮成纤维细胞的增殖,诱导其凋亡,该效应可能与芥子气促进TRAILR1的表达有关,从而可用于银屑病的治疗。     

姜黄素对人眼Tenon囊成纤维细胞抑制作用的研究

目的研究姜黄素对体外培养人眼Tenon囊成纤维细胞增殖的抑制作用,探索防治青光眼手术区滤过泡纤维瘢痕化的新途径。方法用0～80μg／l姜黄素作用体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞,观察24—96h后不同浓度姜黄素对人眼Tenon囊成纤维细胞的影响。CCK-8法检测细胞生长活性。结果在0～80μ/ml浓度作用24～96h范围内,姜黄素可以抑制人眼Tenon囊成纤维细胞的增长,且呈剂量和时间依赖性。结论姜黄素可抑制体外培养人眼Tenon囊成纤维细胞增殖。     

无花果叶补骨脂素对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞的影响

目的:研究无花果叶补骨脂素(FLP)对瘢痕疙瘩成纤维细胞的生长抑制作用。方法:用FLP处理体外培养的成纤维细胞后进行细胞形态学检测,通过细胞增殖试验(MTT法)和流式细胞仪检测FLP对成纤维细胞增殖和凋亡的影响;氯胺T法检测FLP对成纤维细胞胶原蛋白合成的抑制作用;Western-bloting检测凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。结果:经FLP处理后,成纤维细胞增殖活性降低,凋亡指数升高(P<0.01),凋亡相关蛋白Bcl-2表达被抑制,同时胶原蛋白的合成受到抑制。结论:FLP对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的抑制和诱导其凋亡作用可能是通过抑制凋亡相关蛋白Bcl-2的作用来实现的。     

青蒿琥酯抑制人成纤维细胞增殖的实验研究

目的探讨青蒿琥酯(Art)抑制人成纤维细胞(Fb)增殖的作用及机制。方法取人瘢痕组织,经体外培养及鉴定Fb后,将不同浓度的青蒿琥酯溶液作用于体外培养的成纤维细胞。于倒置显微镜及电镜观察其形态学变化,采用四氮唑盐比色分析法(MTT法)及流式细胞仪观察细胞凋亡,计算增殖抑制率和凋亡指数。结果青蒿琥酯对人瘢痕成纤维有明显抑制作用,且呈浓度依赖性。浓度为240、120 mg/L的青蒿琥酯的凋亡率和坏死率较对照组高(P<0.01)。组织学观察试验组见成纤维细胞呈椭圆性,胞质颗粒增多,甚至可见细胞核浓缩、核碎裂等现象。结论青蒿琥酯可抑制人成纤维细胞的增殖,具体机制需进一步探讨。     

芒柄花黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的作用

目的探讨芒柄花黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的作用。方法获取手术切除的人增生性瘢痕组织以及局部皮瓣转移修复后剩余的正常皮肤,提取成纤维细胞。通过MTT试验检测不同浓度的芒柄花黄素对成纤维细胞增殖的作用,应用流式细胞术对芒柄花黄素处理后的成纤维细胞周期进行分析。通过Annexin V-FITC/PI双染色法和Hoechest 33258染色观察成纤维细胞的凋亡情况。通过Western blot与RT-PCR试验,检测芒柄花黄素对细胞周期蛋白Cyclin D1和凋亡调节蛋白Bcl-2的作用。结果与对照组比较,芒柄花黄素对正常皮肤成纤维细胞的增殖影响较小,对增生性瘢痕成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用,且药物浓度越高、作用时间越长,抑制作用越强。成纤维细胞大部分阻滞于G_1期,S期的细胞减少,细胞周期的进程受到阻断。芒柄花黄素能够通过抑制细胞周期蛋白Cyclin D1来影响细胞周期的进程,将细胞周期阻滞于G_1期;通过抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达诱导成纤维细胞的凋亡,从而实现对细胞生长的抑制作用。结论芒柄花黄素能够抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖并诱导其凋亡,可考虑用于增生性瘢痕的预防与临床治疗。     

芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞的增殖作用及其机制研究

目的研究芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞增殖的影响及其作用机制。方法体外培养人皮肤成纤维细胞,MTT法测定芦荟凝胶作用后人皮肤成纤维细胞的增殖能力,用实时荧光定量PCR法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA水平,用免疫蛋白印迹法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果 MTT检测结果表明,芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞具有促增殖作用,且呈现时间依赖性和剂量依赖性。芦荟凝胶作用于人皮肤成纤维细胞72h后,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白的表达显著增加(P<0.05,P<0.01)。结论芦荟凝胶可通过促进人皮肤成纤维细胞增殖以及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白的表达加速创面愈合。     

氧化苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及凋亡的作用

目的探讨氧化苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法从人的增生性瘢痕组织中提取成纤维细胞进行培养,通过MTT实验观察不同浓度的氧化苦参碱对成纤维细胞增殖的影响。应用流式细胞术检测经氧化苦参碱处理后成纤维细胞的周期变化,并通过Annexin V-FITC/PI双染色法和Hoechst 33258染色观察细胞的凋亡情况。通过Western Blot和RT-PCR检测氧化苦参碱对细胞周期蛋白CDK4、CDK6,以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的作用。结果与对照组相比,氧化苦参碱的浓度为10μmol·L~(-1)时,24 h细胞增殖的抑制率为(18.92±3.77)%,成纤维细胞的早期和晚期凋亡率分别为(3.28±2.56)%和(2.98±1.78)%;氧化苦参碱的浓度为20μmol·L~(-1)时,24 h细胞增殖的抑制率为(32.93±2.68)%,成纤维细胞的早期和晚期凋亡率分别为(6.89±0.76)%和(1.47±2.57)%。氧化苦参碱能够通过抑制细胞周期蛋白CDK4、CDK6和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,诱导促凋亡蛋白Bax的表达来影响细胞周期进程,将细胞周期阻滞于G1期,使细胞增殖受到抑制,凋亡率增加。结论氧化苦参碱能够抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖并诱导其凋亡,可作为预防和治疗增生性瘢痕的潜在药物。     

复方当归粉针剂对垂体后叶素诱导大鼠心肌缺血的保护作用

摘要目的：观察复方当归粉针剂对垂体后叶素诱导的大鼠缺血心肌的保护作用。方法：将60只大鼠分为空白对照组、模型对照组、复方当归粉针剂低、中、高剂量组,阳性对照组,大鼠腹腔注射垂体后叶素建立急性心肌缺血模型,观察复方当归粉针剂对各组大鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）以及心肌梗死面积的影响。结果：复方当归粉针剂可对抗垂体后叶素所致的大鼠急性心肌缺血,增加血清中SOD活力,减少MDA生成,缩小心梗面积。结论：复方当归粉针剂对大鼠心肌缺血有保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化有关。     

化纤灵方药物血清对肝星状细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨化纤灵方药物血清对肝星状细胞(HSC)增殖及凋亡的影响.方法:传代培养的大鼠HSC系HSC-T6与中药复方化纤灵方药物血清(5%、10%、20%)共同培养48 h后,应用MTT法检测HSC-T6细胞增殖,琼脂糖凝胶电泳法及流式细胞仪测定细胞凋亡.结果:复方化纤灵方药物血清能显著抑制体外培养的HSC-T6增殖,中、高剂量组凋亡率分别为(20.37±0.78)%、(21.69±2.35)%、显著高于正常对照组(P<0.01);化纤灵方药物血清均可诱导HSC凋亡.结论:复方化纤灵方能抑制HSC增殖并促进其凋亡,可能是抗肝纤维化作用的主要机制.     

金刚藤正丁醇提取物对胃腺癌SGC-7901细胞增殖和迁移的影响

目的探讨金刚藤正丁醇提取物对人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖及迁移的影响。方法体外培养人胃腺癌SGC-7901细胞,给予不同浓度(25、50、100μg·mL-1)金刚藤正丁醇提取物处理,并以环孢素A处理的SGC-7901细胞作为阳性对照,采用细胞增殖抑制试验(MTT法)检测胃腺癌细胞的增殖情况;采用划痕实验检测胃腺癌细胞的迁移情况。结果不同浓度(25、50、100μg·mL-1)的金刚藤正丁醇提取物对人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖均有明显的抑制作用(P<0.05),且呈时间、剂量依赖性;金刚藤正丁醇提取物可降低人胃腺癌SGC-7901细胞的迁移能力,且呈时间、剂量依赖性(P<0.05)。随着金刚藤正丁醇提取物浓度的增加及培养时间的延长,人胃腺癌SGC-7901细胞迁移率由78.1%下降至58.4%(P<0.05)。结论金刚藤正丁醇提取物可以浓度和时间依赖性的方式抑制体外培养的人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖和迁移。     

复方苦参注射液对PC-3细胞凋亡及cyclinE蛋白表达的影响

目的：研究复方苦参注射液对人前列腺癌PC-3细胞凋亡及cyclinE蛋白表达的影响。方法：用复方苦参注射液对体外培养的人前列腺癌PC-3细胞进行药物处理，采用MTY比色分析法测定复方苦参注射液不同剂量组对PC-3细胞生长的调控作用；采用流式细胞仪分析复方苦参注射液对PC-3细胞周期分布的影响，免疫细胞化学方法观察复方苦参注射液对PC-3细胞周期调控蛋白evelinE的影响。结果：复方苦参注射液可抑制PC一3细胞的增殖，诱导其凋亡，改变细胞周期分布，使G0／G1期PC-3细胞比例增高，同时还可使cyclinE蛋白表达下降。上述作用具有时间和剂量的依赖性。结论：复方苦参注射液可诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡，改变细胞周期分布，影响细胞周期调控蛋白cvclinE的表达，从而抑制细胞增殖。     

染料木黄酮对高浓度同型半胱氨酸环境下大隐静脉平滑肌细胞生长的影响

目的观察染料木黄酮(Gen)对高同型半胱氨酸(HHcy)环境下大隐静脉平滑肌细胞(GSVSMC)增殖和凋亡的影响。方法建立HHcy环境下GSVSMC增殖模型,不同浓度及时间点Gen干预GSVSMC,检测其增殖及凋亡率。结果四甲基偶氮唑蓝(MTT)结果显示,在作用时间相同的条件下,随着Gen作用浓度的增加,GSVSMC的增殖抑制率增高;在Gen浓度相同的条件下,随着作用时间的延长,GSVSMC的增殖抑制率增高,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪结果显示,在作用时间相同的条件下,GSVSMC的凋亡率随Gen浓度增加而增加;在作用浓度相同的条件下,GSVSMC的凋亡率随Gen的作用时间延长而增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Gen可以抑制HHcy环境下GSVSMC的增殖,增加HHcy环境下GSVSMC的凋亡率,且在一定范围内呈现时间及浓度依赖性。     

地塞米松对卵巢癌SKOV-3细胞的影响

目的研究地塞米松对体外培养条件下的卵巢癌细胞SKOV-3细胞增殖的影响及诱导其凋亡的情况。方法取对数生长期的SKOV-3细胞（细胞数为5×10^4／mL）分别接种于不同细胞培养板上,试验组每孔加入200μL不同浓度的地塞米松,空白对照组加入等体积PRMI-1640培养液孵育,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测吸光度（A490值）并计算SKOV-3细胞增殖抑制率;PI染色细胞后上流式细胞仪检测各个时间点的细胞凋亡率。结果MTT法检测结果显示,SKOV-3细胞增殖抑制率随着地塞米松浓度和作用时间的增加均明显增大,以40μmol／L浓度的试验组培养48h的抑制率最高,达（45．25±3．12）％。流式细胞仪检测显示。地塞米松处理后可引起G0／G1期细胞明显增加（P〈0．05）,且SKOV-3细胞凋亡率随着地塞米松浓度增加有升高趋势。结论地塞米松能诱导卵巢癌SKOV-3细胞凋亡。     

银杏叶提取物对结肠癌SW480细胞增殖的影响

目的研究银杏叶提取物（EGB）对SW480结肠癌细胞生长增殖的影响。方法体外培养人结肠癌SW480细胞后,给予不同浓度（100,200,300,400,500 mg·L^-1）银杏叶提取物干预后,采用CCK-8检测人结肠癌SW480细胞的增殖抑制率,选择最佳作用浓度;随后,在此作用浓度下观察EGB作用不同时间对人结肠癌SW480细胞增殖抑制率的影响,并通过Western blot检测人结肠癌SW480细胞内Ki67和PCNA的表达情况。结果银杏叶提取物可抑制结肠癌SW480细胞的增殖,且随着作用浓度增加和作用时间的延长其抑制作用逐渐增强;300 mg·L^-1银杏叶提取物对结肠癌SW480细胞增殖的抑制效果最明显。银杏叶提取物干预的结肠癌SW480细胞内Ki67和PCNA的表达均明显下调。结论银杏叶提取物可呈浓度和时间依赖性地抑制结肠癌SW480细胞的增殖。     

L-氨基酸氧化酶对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的影响研究

目的:探讨L-氨基酸氧化酶(LAAO)对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的影响,为临床上寻找新的肺癌治疗方法提供参考。方法:将A549细胞制成浓度为5×104个/mL的细胞悬液,根据LAAO干预浓度的不同,将其分为4组:2.41、4.82、9.64、19.28mg·mL-1干预组,各组均干预24、48、72h。镜下观察各组细胞形态学改变,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,原位末端标记法检测细胞凋亡指数,另设立阴性对照组进行比较。结果:LAAO对A549细胞增殖的抑制率随时间延长和浓度增加而增加(P<0.05),凋亡指数随时间延长和浓度增加而增加(P<0.05)。结论:LAAO可抑制A549细胞增殖,诱导其凋亡,且呈时间、剂量依赖性。     

银杏叶提取物对AGEs诱导的大鼠HSC增殖的抑制作用

目的：探讨不同浓度晚期糖基化终产物（AGEs）对体外培养的大鼠肝星状细胞（HSC）增殖的影响,并观察不同浓度银杏叶提取物（EGb）对其增殖有无抑制作用。方法体外合成AGEs,MTT法观察不同浓度的AGEs对HSC增殖的影响及不同浓度EGb对AGEs促HSC增殖的抑制作用。结果当培养液中AGEs浓度≥50mg/L时,12～48h内检测发现HSC较正常对照组增殖明显并呈时间及剂量依赖性（P＜0.05）,而6h内及低浓度AGEs组未观察到其对HSC增殖有明显影响。EGb在培养48h时对AGEs刺激的HSC的增殖有显著抑制作用（P＜0.05）,且呈明显的剂量依赖性。结论 AGEs可以促进HSC增殖,呈时间、剂量依赖性;在作用时间充分的前提下,EGb可抑制AGEs诱导的HSC增殖,呈剂量依赖性。     

青蒿琥酯联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎滑膜细胞增殖和凋亡的影响

目的观察不同浓度的青蒿琥酯（ART）和甲氨蝶呤（MTX）对类风湿关节炎（RA）滑膜细胞增殖和凋亡的影响。方法收集RA关节液标本25例,体外分离培养滑膜细胞,以生长良好的3～5代滑膜细胞进行试验,调整细胞浓度,分为对照组和不同质量浓度ART组、MTX组。用四甲基偶氮唑盐比色法测定不同质量浓度的MTX和ART单独或联合作用于滑膜细胞对滑膜细胞增殖的影响;用流式细胞术检测不同质量浓度的MTX和ART单独或联合作用于滑膜细胞对滑膜细胞凋亡的影响。结果ART对滑膜细胞的增殖具有显著的抑制作用。ART质量浓度在3.125～50μg/mL范围内均可抑制RA滑膜细胞生长,且抑制作用随质量浓度增大而增强,具有剂量依赖性;ART12.5μg/mL＋MTX20μg/mL组的抑制作用最强,与其他药物组比较,P〈0.05。各药物作用于滑膜细胞24h后,早期凋亡细胞率与对照组比较,有显著差异（P〈0.05）;ART质量浓度在3.125～25μg/mL范围内作用于滑膜细胞24h后,早期凋亡细胞率与未用ART处理的对照组比较,有显著差异（P〈0.05）,并呈剂量依赖性;当ART的质量浓度达到50μg/mL时,早期凋亡细胞率降低,坏死细胞率却升高（P〈0.05）;ART12.5μg/mL＋MTX5μg/mL组的早期凋亡细胞率较其他药物组显著升高（P〈0.05）,而坏死细胞率却较低（P〈0.05）。结论ART和MTX单独或联合作用均可显著抑制RA滑膜细胞的增殖,诱导其凋亡。