矽尘染毒大鼠体内脂质过氧化与抗氧化的水平

目的探讨脂质过氧化与矽肺形成的关系。方法采用非暴露气管注入染尘法复制大鼠矽肺模型,检测SOD,GSH-Px,MDA,LDH和BALF等指标,同时做肺组织病理切片。结果染尘组大鼠红细胞SOD活力和全血GSH-Px活力与对照组比较,差异均有显著性(P<0.05);BALF中ACP、LDH的含量和肺组织中MDA的含量与对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01),染尘组大鼠肺组织病理切片可见Ⅱ级和Ⅲ级细胞纤维性矽结节病变存在,而对照组未发现有上述病理改变。结论SiO2粉尘诱发了肺组织的脂质过氧化反应,促进了矽肺的形成。     

矽尘对大鼠肺表面活性蛋白影响的研究

目的 探讨不同矽尘暴露时间对于大鼠肺表面活性蛋白(SP)A、B、C、D的影响,为矽肺的早期诊断和临床治疗提供理论依据.方法 将60只大鼠随机分为染尘组和相应对照组,每组30只.染尘组大鼠经气管灌注50 mg/ml的粉尘1 ml,左右两肺各0.5 ml;对照组灌注等量的生理盐水.在染尘后第3、7、14、21、28天分别获取血清和支气管肺泡灌洗液(BALF),应用酶联免疫法(ELISA)检测大鼠血 清和BALF中SP-A、SP-B、SP-C、SP-D的含量.同时检测肺组织中总抗氧化能力(T-AOC)和羟脯氨酸(HYP)的含量,对肺组织进行HE染色观察病理变化.结果 与对照组比较,3、14、21、28 d染尘组大鼠BALF中SP-A含量及各时点染尘组大鼠BALF中SP-D含量均明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,7、14、21、28 d染尘组大鼠BALF中SP-B含量及14、21、28 d染尘组大鼠BALF中SP-C含量明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,14、21、28 d染尘组大鼠血清中SP-A含量及7、14、21d染尘组大鼠血清中SP-B含量及7、14、21、28 d染尘组大鼠血清中SP-C含量明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.05),且随染矽尘时间的延长,血清中SP-C含量呈增加趋势,有时间-效应关系(r=0.618,P=0.042).与对照组比较,7、14、21、28 d染尘组大鼠血清中SP-D含量降低,差异有统计学意义(P＜0.05);随着染尘时间的增加,血清中SP-D含量呈下降的趋势,有时间-效应关系(r=-0.731,P=0.016).与对照组比较,3、7、14、21、28 d染尘组大鼠肺组织中HYP含量升高,7、14、21、28 d染尘组大鼠肺组织中T-AOC含量下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).染尘大鼠BALF中SP-C的含量与肺组织中HYP呈正相关(r=0.803,P=0.045);BALL中SP-D的含量与肺组织中HYP呈负相关(r=-0.867,P=0.033).BALF中SP-A、SP-B含量与肺组织中HYP无相关(r=0.416,P=0.28;r=0.592,P=0.071).BALF与血清中SP-D含量的均呈下降趋势,呈正相关(r=0.870,P=0.034).BALF与血清中SP-C含量均增加呈正相关(r=0.539,P=0.046).染尘组大鼠肺组织病理观察可见,肺泡间隔逐渐增厚,尘细胞浸润,有少量胶原纤维分布,至28 d时,出现尘细胞结节.结论 矽尘导致大鼠BALF中SP含量改变,血清中SP-C、SP-D的水平可作为矽肺早期效应标志物.     

RNA干扰CD36表达对潜在转化生长因子-β1活化和矽肺纤维化的抑制

目的 观察大鼠矽肺模型中RNA干扰CD36基因表达对潜在转化生长因子-β1(L-TGF-β1)的活化及矽肺纤维化的抑制作用.方法 将Wistar大鼠分为生理盐水组、SiO2模型组(10 mg SiO2)、CD36 shRNA表达的重组慢病毒(SiO2+Lv-shCD36)组和对照慢病毒(SiO2+Lv-shCD36-NC)组,每组24只.染尘后7、21、28 d处死动物,貂肺上皮细胞增殖抑制实验检测肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子-β1(TGF-β1)的活性;HE和VG染色观察肺组织病理变化;碱裂解法测定肺羟脯氨酸含量.结果 染尘7d时,SiO2+Lv-shCD36组大鼠肺泡巨噬细胞CD36 mRNA的表达明显低于生理盐水组、SiO2模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组,差异有统计学意义(P＜0.05).SiO2+Lv-shCD36组大鼠BALF中TGF-β1活化量和活化率均明显低于模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组,差异有统计学意义(P＜0.05).染尘28 d时,SiO2+Lv-shCD36组大鼠肺组织可见细胞性矽结节,而模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组大鼠肺组织可见纤维细胞性矽结节.染尘21d和28 d时,SiO2+Lv-shCD36组大鼠肺羟脯氨酸含量明显低于SiO2模型组和SiO2+Lv-shCD36-NC组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 大鼠矽肺模型中通过RNA干扰CD36基因表达能够对L-TGF-β1的活化和矽肺纤维化具有一定的抑制作用.     

中波紫外线对实验性矽肺大鼠氧化损伤影响

目的 探讨中波紫外线照射对实验性矽肺大鼠氧化损伤的影响.方法 健康成年SD雄性大鼠32只.随机分为4组,通过一次性非暴露式气管注入二氧化硅粉尘混悬液及施加中波紫外线照射后,采用比色法测定大鼠组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(HYP)和血清中铜兰蛋白(CP);测量大鼠体重增长量、脏器湿重.结果 (1)注入二氧化硅粉尘后大鼠肺组织匀浆中SOD活性明显降低(P<0.01),肺匀浆中MDA含量显著升高(P<0.01);肺组织匀浆中HYP含量和血清中CP活性显著升高(P<0.05).(2)照射中波紫外线后大鼠肺组织匀浆中SOD活性降低(P<0.01);MDA、HYP和CP在照射中波紫外线后均无变化(P>0.05).(3)中波紫外线和二氧化硅粉尘对大鼠肺组织匀浆中SOD、HYP和血清中CP存在交互作用(P<0.01);中波紫外线和二氧化硅粉尘对大鼠肺组织匀浆中MDA存在交互作用(P<0.05).结论 二氧化硅粉尘可致大鼠肺组织氧化损伤,导致肺组织纤维化;而中波紫外线的照射可以降低矽肺模型大鼠肺组织的氧化损伤程度,减轻模型鼠肺组织纤维化程度.     

NAC对染尘大鼠模型血清及肺组织中丙二醛的影响

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对二氧化硅所致大鼠肺纤维化血清及肺组织中丙二醛(MDA)的影响。方法取健康、雄性Wistar大鼠90只,随机分为3组:染尘组:采用经非暴露气管注入法,气管内注入无菌SiO2粉尘悬液(50 mg/ml)1 ml建立矽肺模型;4周后再次予以染尘1次。NAC预防治疗组:模型制备同染尘组,于染尘前1周及此后每日予以NAC[500 mg/(kg.d)]灌胃;对照组:同样条件下向气管内注入等量生理盐水。3组动物于实验第8周处死,取肺组织标本行病理学观察、测定肺组织及血清中MDA水平。结果染尘组及预防治疗组MDA含量明显高于对照组;预防治疗组MDA的含量明显低于染尘组,差异有统计学意义(P0.01)。结论 NAC可降低SiO2所致肺纤维化大鼠MDA的产生,抑制肺纤维化的发展,减轻对肺组织的损伤。     

吡非尼酮对大鼠矽肺纤维化的抑制作用

目的 探讨吡非尼酮(PFD)对大鼠矽肺纤维化的抑制作用.方法 75只SD雄性大鼠,随机分成未处理对照组、生理盐水组、生理盐水+PFD组、SiO2组、SiO2+PFD组,每组15只,采用非暴露式气管内染尘法,SiO2组和SiO2+PFD组注入SiO2粉尘悬液(25 mg/ml),生理盐水组和生理盐水+PFD组注入等量生理盐水,染尘后第2天灌胃给予PFD(50 mg/kg),分别观察7、21、42 d后处死.HE、VG和Foot染色观察肺组织的病理形态学改变并进行病理分级,测定肺组织中羟脯氨酸(HYP)的含量.结果 大鼠肺组织病理观察显示,SiO2+PFD组肺组织纤维化程度比同期SiO2组明显减轻,胶原纤维形成缓慢,矽结节分级评分降低.第42天时,SiO2+PFD组大鼠肺组织HYP含量[(0.75±0.12)mg/g肺组织]比SiO2组[(1.19±0.17)mg/g肺组织]明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PFD能降低大鼠矽肺纤维化程度并减少肺组织中HYP的含量,对实验性大鼠矽肺纤维化具有抑制作用.     

染矽尘大鼠BALF中炎性细胞改变研究

[目的]探讨不同染尘剂量大鼠矽肺模型支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞的变化规律,为矽肺的发病机制提供可靠依据。[方法]2009年5～8月采用一次性气管内灌注二氧化硅(SiO2)粉尘的方法制作大鼠矽肺模型。大鼠随机分为对照组和模型组(15、30、60mg/ml),分别在1、3、7、14、21、28d将大鼠处死,采用在体全肺灌洗法收集BALF,光学显微镜下计数白细胞总数,瑞士吉姆萨染色法进行白细胞分类计数。[结果]模型组大鼠BALF中白细胞总数在大鼠染尘1、3、21、28d较对照组均增高,其中高剂量组和中剂量组较对照组差异有统计学意义(P<0.05);在7、14d仅高剂量组较对照组差异有统计学意义(P<0.05)。各剂量组在大鼠染尘1、3、7、14、21、28d,巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细胞均较对照组增高,巨噬细胞在染尘1、3、7、21、28d均增高;中性粒细胞在1～14d显著增高(P<0.05),淋巴细胞在7～28d明显增高(P<0.05);各剂量组在染尘1、3、7、14、21、28d尘细胞数均增高。[结论]染尘大鼠早期主要表现为炎症反应,炎症细胞(巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和尘细胞)呈规律变化,且尘细胞具有较好的剂量-反应关系,对矽肺的预防和早期诊断具有很大的意义。     

用HOPE-MED8050动式染尘控制系统建立大鼠矽肺模型

[目的]采用动式染尘控制系统建立大鼠矽肺模型.[方法]40只SD大鼠随机分为1d、3d、7d、2周、4周、8周、12周及对照组,每组5只;大鼠暴露的染尘浓度为170～ 190 mg/m3,每天染尘2h,至各组相应的染尘时间段处死动物(对照组于12周末处死),称量体重与肺脏重量,计算肺脏器系数,检测肺组织羟脯氨酸(Hyp)含量并对肺组织进行病理组织学观察.[结果]染尘室浓度稳定持久.肺脏器系数随染尘时间延长而逐渐增加;1d组肺组织轻度充血、水肿;7d组血管周围可见较多炎细胞围绕,以单核细胞和淋巴细胞为主;2周组可见肺泡内有红染物及泡沫细胞;4周组巨噬细胞呈结节状,肺泡上皮细胞部分脱落,少量纤维组织增生;8周组纤维性增生更甚,同时可见肺泡Ⅱ型上皮细胞腺营样增生;12周组出现纤维性结节,而对照组的大鼠肺部无明显异常.肺组织内Hyp含量随染尘时间延长而增加.[结论]采用动式染尘控制系统可建立大鼠矽肺模型.     

丹参对实验性大鼠矽肺肺泡巨噬细胞氧化和抗氧化损伤的动态影响

本实验动态观察了丹参对肺泡巨噬细胞氧化和抗氧化系统在实验性大鼠矽肺发生发展过程中的影响。结果表明,在染尘后7、15天丹参组肺泡巨噬细胞MDA的含量和共轭二烯的含量均低于石英尘组,以后二者逐渐接近,和正常对照组无差异。而GSH-Px的活性在染尘后30、60天丹参组高于石英尘组,说明丹参具有保护该酶的作用。作者认为丹参阻抑肺纤维化和其抑制肺泡巨噬细胞脂质过氧化反应有关。     

矽肺大鼠血清和支气管灌洗液CC16及SP-D的变化

目的探讨不同剂量的矽尘和不同染尘时间对大鼠血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中克拉拉细胞蛋白(Clara cell protein,CC16)和肺泡表面活性蛋白D(surfactant protein D,SP-D)表达水平的影响,探讨矽肺的早期诊断新指标。方法制作矽尘致大鼠肺纤维化模型,矽尘剂量和染尘时间各组不同,测定大鼠BALF中羟脯氨酸(HYP)含量、BALF和血清中CC16及SP-D含量以及肺组织中CC16表达的免疫组化染色分析。结果 BALF中CC16的含量在染尘后第3天(49.65 ng/mg)、第7天(47.10 ng/mg)、第14天(46.15 ng/mg)、第21天(41.63 ng/mg)、第28天(38.02 ng/mg),均较对照组(分别为61.27 ng/mg,60.67 ng/mg,61.20 ng/mg,60.61 ng/mg,56.76 ng/mg)显著降低(P<0.05),并出现下降趋势;血清中CC16的含量在第7天(9.8 ng/ml)、第14天(9.36 ng/ml)、第21天(9.0 ng/ml)、第28天(8.78 ng/ml)也较对照组(11.04 ng/ml,10.84 ng/ml,10.88 ng/ml,10.96 ng/ml)显著降低(P<0.05)。大鼠血清中SP-D的含量较对照组显著下降(P<0.05),BALF中SP-D含量随染尘时间变化出现抛物线趋势。肺组织CC16免疫组化显示Clara细胞损伤严重,CC16表达降低。只有50 mg/ml染尘组BALF的HYP高于对照组(P<0.05)。结论在矽尘引起肺组织病变过程中CC16和SP-D具有肺组织特异性,可能作为矽肺的一个早期标志物。     

纳米SiO2与常规SiO2粉尘对大鼠肺脏器系数和羟脯氨酸含量影响的比较研究

目的比较纳米SiO2与常规SiO2粉尘对大鼠的肺脏脏器系数和羟脯氨酸含量的影响.方法分别用粒径为(10±5)nm的纳米级SiO2和粒径为0.5～10 μm的常规SiO2粉尘对雌性Wistar大鼠肺脏染尘,每鼠20 mg,于染尘后第30天和第60天测定动物肺脏脏器系数和羟脯氨酸含量.结果染尘后第30天、第60天纳米SiO2组大鼠肺脏脏器系数[(8.36±2.44),(7.22±0.92)]和羟脯氨酸含量[(2.45±0.39),(2.70±0.48)mg/g]均低于常规SiO2组,差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01), 而与对照组相比差异未见显著性(P＞0.05).染尘后第60天纳米SiO2组大鼠全肺湿重[(2.00±0.23)g]低于常规SiO2组[(2.47±0.63)g], 差异有显著性(P＜0.05).结论纳米SiO2较常规SiO2粉尘致肺脏脏器系数和羟脯氨酸含量增加的程度轻.     

γ-干扰素对染石英尘大鼠肺纤维化的影响

目的　观察γ -干扰素 (IFN -γ)对染石英尘大鼠肺脏器系数及羟脯氨酸含量的影响 ,探讨γ -干扰素对实验性早期矽肺的防治作用。方法　一次性经气管给予雌性Wistar大鼠石英粉尘 2 0mg/只 ,染尘后第 2d开始每天给予γ -干扰素 (1× 10 5 IU/只 ) ,分别在 1个月和 2个月时处死动物。观察大鼠肺脏器系数、肺羟脯氨酸含量变化。结果　给予γ -干扰素 1个月及 2个月时 ,治疗组大鼠肺脏器系数与同期染尘对照组比较有所降低 ,但无显著性差异 ;而治疗组大鼠的肺羟脯氨酸含量均显著低于同期染尘对照组 (P <0 0 5)。结论　γ -干扰素可降低染石英尘大鼠肺羟脯氨酸含量 ,提示对矽肺纤维化具有一定的防治作用     

汉防己甲素和乙酰半胱氨酸联合用药对实验性矽肺的疗效观察

目的 比较汉防已甲素(TD)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)单独和联合给药对大鼠矽肺的治疗效果.方法 40只大鼠分为盐水对照组、矽肺模型组、TD治疗组(50 mg/kg) 、NAC治疗组(500 mg/kg)、联合治疗组(TD 50 mg/kg +NAC 500 mg/kg),非暴露法气管内灌注石英粉尘.染尘后第2天起给药,1次/d,6次/周,第30天处死大鼠.计算各脏器系数,观察肺组织病理变化,测定肺组织羟脯氨酸(HYP),丙二醛(MDA),肿瘤坏死[大子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量.结果 各治疗组淋巴结系数、联合治疗组肺系数明显低于矽肺模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).病理观察:盐水对照组肺组织结构完好,肺间质无异常;矽肺模型组见多数矽结节,以Ⅱ～Ⅲ级细胞纤维性结节为主;TD治疗组以I级尘细胞性结节为主,NAC治疗组以I～Ⅱ级矽结节为主,联合治疗组仅见极少数细胞性结节,未出现胶原纤维和肺间质纤维组织增生.TD治疗组和联合治疗组HYP含量明显低于矽肺模型组,而NAC治疗组无明显变化.TD、NA及联合治疗组肺组织中MDA含量分别为(18.80±2.94),(20.13±4.01),(17.05±3.52)nmol/m],均低于矽肺模型组[(23.99±3.26) nmol/ml].矽肺模型组肺组织中IL-6含量为[9.57±8.78] pg/ml,TD和NAC单独治疗后IL-6下降至[(9.22-9.65)、(81.63±5.72)]pg/ml;而联合用药组用药后,IL-6下降到(74.37±3.17) pg/ml.矽肺模型组肺组织中TNF-α含量为(59.05±4.48) pg/ml,TD和NAC单独治疗后TNF-α含量下降至(50.48±2.76)和(54.28±4.30) g/ml;联合用药组用药后,TNF-α含量下降至(49.10±4.98) g/ml.与TD、NAC单纯治疗组比较,联合治疗组HYP、MDA、IL-6、TNF-α含量下降更为明显.结论TD及NAC能减轻染尘大鼠肺组织纤维化程度,降低肺组织中MDA、TNF-α和]L-6含量,抑制和延缓肺纤维化的发生,两者联合用药疗效优于单一用药.     

纳米SiO2与标准SiO2致大鼠急性肺损伤的作用

目的观察并比较纳米SiO2与标准SiO2对大鼠的急性肺损伤作用.方法 42只SD大鼠按体重随机分成7组,用气管注入法一次性染尘,6组分别注入0.1、0.2、0.4 mg/ml的标准SiO2或纳米SiO2颗粒悬液1 ml,对照组注入等体积生理盐水.于染尘后第3天进行肺泡灌洗,测定2种粉尘染尘大鼠肺泡灌洗液(BALF)中的白细胞总数、总蛋白含量、乳酸脱氢酶(LDH)活力、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力等,比较2种粉尘的肺损伤作用.结果 0.4 mg纳米SiO2组白细胞总数(16.00×106)、LDH(914.29 U/L)均高于对照组(7.24×106,85.71 U/L),差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).染尘组的总蛋白含量与对照组比较无统计学意义.两种SiO2同一剂量组间比较,0.4mg纳米SiO2的白细胞总数(16.00×106)、LDH(914.29 U/L)均高于标准SiO2(9.09×106,476.19 U/L),差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).其他两剂量组间的差异无统计学意义.各染尘组MDA仅0.2 mg组标准SiO2(2.500 nmol/L)增高,与对照组(0.633 nmol/L)比较,差异有统计学意义(P＜0.05).两种SiO2各剂量组间MDA差异无统计学意义.0.2、0.4 mg纳米SiO2组以及0.2 mg标准SiO2组SOD分别为4.133、4.011、3.929 U/ml,明显低于对照组(6.088 U/ml),0.4 mg纳米SiO2组的SOD(4.011 U/ml)低于标准SiO2组(4.972 U/ml),差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).结论纳米SiO2致急性肺损伤作用比标准SiO2强.     

金属研磨尘染毒大鼠支气管肺泡灌洗液的变化

目的　观察金属研磨的混合粉尘对大鼠呼吸系统的损伤作用。方法　大鼠经支气管注入磨工粉尘染尘后饲养 2周 ,采用大鼠支气管肺灌洗技术 ,分析灌洗液中细胞含量、分类、存活率及乳酸脱氢酶 (LDH)、碱性磷酸酶 (ALP)活力的变化。结果　染尘大鼠肺泡灌洗液中细胞含量随磨工粉尘染尘剂量的加大而增大 ,且均高于SiO2 尘组。大鼠支气管肺泡灌洗液中性粒细胞比例 [SiO2 粉尘组为 (33 .83± 4 .54) % ,1 0、2 5、50mg/ml磨工粉尘组分别为 (2 6 .50± 3 .99) %、(36 .0 0± 3 .58) %和 (38.0 0±2 .1 0 ) % ]均较对照组 [(2 .83± 0 .75) % ]明显增加 ;巨噬细胞比例 [SiO2 粉尘组为 (62 .1 7± 4 .54) % ,1 0、2 5、50mg/ml磨工粉尘组分别为 (70 .83± 3 .66) %、(60 .83± 2 .1 4 ) %和 (58.1 7± 2 .48) % ]比对照组[(95 .67± 1 .2 1 ) % ]相应降低 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1 )。对照组大鼠肺泡灌洗液细胞存活率达80 %以上 ,与磨工粉尘组、TiO2 组的差异有显著性 (P <0 .0 1 )。各染尘组大鼠肺灌洗上清液中LDH、ALP活力明显增加 ,与对照组的差异有显著性 (P <0 .0 1或P <0 .0 5) ,随磨工粉尘染尘剂量加大 ,LDH、ALP活力逐渐升高。结论　磨工粉尘对大鼠肺细胞有损害作用 ,进一步证实磨工粉尘可能对肺脏有致纤     

谷氨酸钠对大鼠实验性矽肺肺冲洗液中巨噬细胞及酶影响的观察

本文对大鼠实验性矽肺肺冲洗液中的肺泡巨噬细胞数、乳酸脱氢酶(LDH)和酸性磷酸酶(ACP)活性进行了动态观察.结果表明,染尘大鼠肺冲洗液中肺泡巨噬细胞数及 LDH、ACP活性比未染尘大鼠明显增加,并随染尘时间延长而递增。经用谷氨酸钠治疗一段时间的大鼠,其肺泡巨噬细胞数、LDH、ACP 活性的增加程度,远不及同期染尘对照组明显。该3项指标,若持续增高,标志矽肺病变进展.似可作为判断矽肺病变程度与疗效的参考指标。     

阿斯匹林预防性治疗实验性矽肺疗效研究

目的　探讨阿斯匹林预防性给药对实验性矽肺的疗效。方法　观察组大鼠染尘 [5 0mg/ (ml·只 ) ]后每次 2 0mg/ml的阿斯匹林溶液 1ml灌胃 ,每周 3次 ,给药 4周后测BALF中细胞总数、巨噬细胞数、中性粒细胞数、淋巴细胞数、细胞内羟脯氨酸含量、血清铜蓝蛋白活性、全肺干重及胶原蛋白含量 ,取肺脏作组织切片 ,观察病理变化。结果　治疗组大鼠所有指标的测定值均显著低于染尘组。结论　阿斯匹林有抑制尘源性炎症和实验性矽肺的纤维化的作用。     

坎地沙坦对染尘大鼠肺纤维化的影响

目的 观察坎地沙坦对染尘大鼠矽肺形成过程中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、肺纤维化及细胞因子的影响.方法 将Wistar大鼠随机分为模型组、干预组、对照组,每组32只.干预组每天灌胃坎地沙坦10 mg/kg,模型组和对照组同法给予等量生理盐水;灌胃1周后,模型组和干预组水合氯醛腹腔注射麻醉,将0.5 ml矽尘混悬液(浓度为50 mg/ml)缓慢注入气管,对照组大鼠气管内注入0.5 ml灭菌生理盐水.染尘后第2天,各组大鼠恢复先前的处理后第3、7、14、28天各处死大鼠8只.计算肺脏系数并进行肺组织HE及Masson染色观察;用免疫组化方法测定肺组织血管紧张素转化酶(ACE)表达水平;用ELISA测定肺泡灌洗液中转化生长因子β1(TGF-β1)及AngⅡ含量.结果 干预组大鼠第3、7、14、28天肺泡炎症和纤维化程度均较模型组明显减轻,干预组大鼠肺脏系数明显低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.01).与对照组比较,模型组和干预组肺泡灌洗液中TGF-β1和Ang Ⅱ含量均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01);与模型组比较,干预组肺泡灌洗液中TGF-β1和Ang Ⅱ含量均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).模型组和干预组肺组织ACE表达明显高于对照组,干预组肺组织ACE表达明显低于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 早期使用坎地沙坦干预能够明显减轻染尘大鼠的肺组织炎症和肺纤维化程度,降低肺泡灌洗液中的TGF-β1和AngⅡ含量,下调肺组织中ACE表达.     

实验性矽肺大鼠肺组织中Th1/Th2型细胞因子动态变化

目的检测Th1/Th2型细胞因子在实验性矽肺大鼠肺组织中的动态表达水平。方法将SPF级成年雄性SD大鼠随机分为染尘组和对照组,每组42只。模型组采用非气管暴露法一次性注入1 m L二氧化硅悬液(100 mg/m L)建立大鼠矽肺模型,对照组气管内注入等量灭菌生理盐水。分别在染尘第1天、1周、2周、3周、6周、9周和12周各处死6只大鼠,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素18(IL-18)、白介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)及IFN-γ/IL-4的表达水平。结果染尘组TNF-α表达量均高于对照组(P0.05);染尘组IFN-γ在染尘第1天~2周表达量高于对照组(P0.05);染尘组IL-18表达量均高于对照组,差异无统计学意义;染尘组IL-4在染尘第1周表达量低于对照组(P0.05),第9周及12周高于对照组(P0.05);染尘组IL-10在染尘第6~9周表达量高于对照组(P0.05);染尘组Th1/Th2比值随染尘时间增长而降低,染尘组Th1/Th2在染尘第1天~2周比值高于对照组(P0.05)。结论在矽肺的发生发展过程中细胞因子发生变化:Th1型细胞因子持续高表达,Th2型细胞因子表达量先降低后升高。     

稀土氧化钕粉尘染毒大鼠不同时间点Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量及IL-12表达的研究

目的 探讨稀土氧化钕粉尘暴露对大鼠不同时间点肺组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白介素-12(IL-12)表达的变化。方法 选用125只SPF级成年SD雄性大鼠,体重(200±16)g,随机分为染尘组和对照组,采用气管非暴露插管灌注法建立模型,分别用稀土氧化钕粉尘悬液0.8 m L(50 mg/m L)和0.9%生理盐水0.8 m L进行一次性染尘。分别于染尘后第3、7、14、21和28 d各处死15只染尘组和10只对照组大鼠,收集BALF;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别测定染尘组和对照组大鼠BALF上清液中IL-12含量,肺组织分别进行HE染色、天狼猩红染色,运用Image-Pro Plus Version 4.5for Windows TM图象分析系统对肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维含量进行定量分析。结果 稀土氧化钕粉尘致实验大鼠肺组织纤维化过程中可见Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的大量增生,染尘后早期主要以Ⅰ型胶原纤维增生为主。其中Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的表达量明显增加,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。肺组织病理学观察证实,染尘大鼠早期肺组织以炎症反应为主,且随染尘时间的延长炎症反应程度呈现加重的趋势。染尘后不同时间点大鼠BALF上清液中IL-12出现先减少后增加,在第7 d达到最低值后又呈现增加趋势,但均高于对照组(P<0.05)。结论 稀土氧化钕粉尘诱导大鼠肺纤维化过程中Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量增多,且分布范围扩大。同时BALF上清液中IL-12出现高表达,表明IL-12的含量变化与稀土氧化钕粉尘致大鼠肺纤维化发生发展密切相关。