血脑屏障与脑缺血再灌注损伤

血脑屏障(b1ood-brain barrier，BBB)是存在于脑组织和血液之间的一个复杂的细胞系统。它能控制血循环中的某些物质向中枢神经组织转运，从而保证中枢神经组织内环境的稳定。血脑屏障破坏是脑缺血再灌注损伤的重要病理生理基础。     

增强MRI评价脑缺血再灌注后大鼠血脑屏障的通透性

目的：通过增强MRI来研究脑缺血再灌注后大鼠血脑屏障（BBB）通透性 的改变。方法：采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。脑缺血4h后再灌注。用1．5T超导型MR机进行大鼠脑冠状位扫描，随后经股静脉注入Gd-DTPA,迅速行同层间歇扫描（每隔10min扫描1次），持续100min。双双侧对称的脑实质为兴趣区，测得兴趣区信号强度（SI），求其增强率。结果：脑缺血4h,再灌注50min时，缺血侧纹状体增强度与对侧相比差别具有非常显著性意义（P＜0．01）。再灌注70min时，缺血侧大脑皮层增强率较对侧增高（P＜0．05）。缺血侧侧脑室在再灌注10min时可见明显强化。结论：纹状体区BBB双大脑皮层更易受到再灌注损伤，血脑屏障较早受到破坏。增强MRI是一种敏感的在活体条件下检测BBB损伤的理想方法。     

老龄大鼠脑缺血/再灌注微血管生成的变化意义

目的探讨老年脑缺血/再灌注(I/R)脑微血管生成的意义。方法SD雄性青年和老龄大鼠,随机分为青年假手术组、青年模型组、老龄假手术组、老龄模型组;模型组分为脑缺血3h、I/R1d、3d、6d、12d时间点。采用线栓法制备局灶性脑I/R模型,测定脑微血管密度(MVD)、血管场面积、神经细胞凋亡数以及脑组织病理改变等。结果老龄模型组I/R6d、12d MVD较老龄假手术组降低(P<0.05,P<0.01),I/R 1d血管场面积较老龄假手术组增高(P<0.05);与青年组同时间点分别比较,老龄假手术组MVD增高(P<0.01),老龄模型组I/R 1d、3d、6d、12d大鼠MVD、血管场面积均降低(P<0.05,P<0.01)。老龄模型组MVD自脑缺血3h持续下降至I/R 12d;血管场面积于I/R 1d达峰值,后逐步下降。老龄模型组I/R 1d、3d、6d、12d大鼠神经细胞凋亡数较其假手术组增多(P<0.05,P<0.01);与青年组同时间点分别比较,老龄假手术组及模型组I/R3d、6d神经细胞凋亡数增多(P<0.01)。老龄模型组神经细胞凋亡数I/R 3d达峰值,I/R 3~12d逐渐减少。脑组织病理改变方面...     

大鼠脑缺血/再灌注后血脑屏障通透性的改变及转移生长因子β1的表达

目的：探讨大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障（BBB）通透性的改变以及转移生长因子β1（TGF－β1）在脑组织中的表达。方法：采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，通过测定脑组织中伊文氏蓝（EB）含量及免疫组化法来观察TGF－β1的表达。结果：缺血2h再灌注3h,BBB 通透性开始增加，24h达高峰，72h后明显减弱。同时，TGF－β1在缺血再灌注3h开始表达，24h达高峰，持续至72h,72h后逐渐减弱。结论：脑缺血后BBB的破坏与TGF－β1的表达密切相关，提示TGF－β1参与了BBB内皮细胞破坏的修复过程。     

脑缺血再灌注心肌损伤老龄大鼠神经肽的变化

目的 从内皮素（ET）,降钙素基因相关肽（CGRP）,神经肽Y（NPY）,神经降压素（NT（的变化方面研究老龄大鼠脑缺血再灌注心肌损伤的机制。方法 青年（5月龄）和老龄（20月龄以上（大鼠均为分为模型组和正常对照组,观察大鼠全脑缺血30min 再灌注60 min后心肌组织病理形态和血浆,脑组织中ET,CGRP,NPY含量。结果 脑缺血再灌注心肌组织出现明显的病理改变,老龄大鼠较青年大鼠严重,青年对照组和青年模型组,老龄对照组脑组织中NPY低于青年对照组和老龄西药组,结论 脑缺血再灌注心肌损伤与以ET占优势的CGRP与ET的平衡失调有关,由于老龄大鼠ET与CGRP间平衡失调和NPY的增龄变化使脑缺血再灌注后这些病理改变较青年大鼠更为明显。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注血脑屏障超微结构及紧密连接蛋白Occludin变化的研究

目的研究大鼠局灶性脑缺血再灌注模型血脑屏障(BBB)超微结构和Occludin的变化,探讨BBB的结构改变及Occludin的表达异常在再灌注损伤中的作用。方法雄性Wistar大鼠,随机分成假手术组、缺血2h再灌注3h、12h、24h、72h组,应用透射电镜、RT-PCR、免疫组化和Western Blot等方法观察再灌注后不同时相缺血区皮质BBB的超微结构,Occludin mRNA和蛋白水平的变化。结果局灶性脑缺血再灌注后,缺血区皮质BBB的超微结构受损,Occludin mRNA和蛋白表达水平下调。上述变化开始于再灌注后3h,再灌注24h达到高峰,72h开始减弱。结论脑缺血再灌注过程中,BBB的超微结构损伤及Occludin的表达下降加重了缺血再灌注损伤。     

缝隙连接对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响

目的 探讨缝隙连接(GJ)在脑缺血再灌注血脑屏障通透性变化中的作用及其可能机制.方法 ①应用激光共聚焦显微镜技术观察GJ蛋白Cx43在缺血再灌注半暗带区脑毛细血管周终足上含量及分布情况的变化.②将Wistar大鼠随机分成假手术组,手术组.线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型.通过荧光分光光度定量的方法测定不同时间点脑组织中的伊文蓝含量来观察血脑屏障的通透性的改变.③取伊文蓝漏出最多的时间点,增设辛醇干预组和DMSO溶剂对照组,与相同时间点手术对照组比较,观察辛醇对血脑屏障通透性的影响.结果 缺血2 h再灌注3 h脑组织伊文蓝含量开始增加,再灌注24 h达高峰.激光共聚焦显微镜发现GJ蛋白Cx43在脑内毛细血管周围的星形胶质细胞终足上分布密集.在缺血2 h再灌注24 h半暗带内,终足上的Cx43分布发生变化,聚集成较大斑块.在缺血2 h再灌注24 h组术前给予辛醇干预,脑组织伊文蓝含量[(4.924±0.296)μg/g]低于手术对照组[(5.543±0.506)μg/g],二者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 GJ在脑缺血再灌注后半暗带终足上分布变化明显,可能加重了血脑屏障通透性的增加;辛醇阻断GJ可以降低脑缺血再灌注血脑屏障的通透性,从而起到减轻脑水肿的作用.     

高血压大鼠脑缺血再灌注损伤时的病理学变化

目的 研究高血压大鼠在脑缺血损伤时的病理改变.方法 用线拴法将肾性高血压大鼠制作成脑缺血再灌注模型,在光镜和透射电镜下观察脑组织的病理和超微结构改变.结果 高血压组大鼠与正常大鼠相比,在局灶性缺血再灌注损伤时有明显的组织学改变.结论 高血压可经过多种机制加剧脑缺血性损伤.     

脑血疏口服液对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的影响

目的 探讨脑血疏口服液对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的影响。方法 将120只SD大鼠随机分为3组:假手术组、对照组,脑血疏组; 采用线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉闭塞再灌注模型,缺血2 h后拔出线栓,恢复灌注24 h; 采用Longa FZ 5级评分法进行大鼠神经功能缺损评分; TTC染色计算脑梗死体积百分比; 运用干-湿重法测脑含水率; 通过伊文思蓝( EB)含量反映血脑屏障的损伤程度; 免疫组化检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平。结果(1)假手术组大鼠在神经功能缺损评分、脑梗死体积、脑含水率均低于对照组(P<0.01); 脑组织中EB含量和MMP-9表达水平较对照组低(P<0.01);(2)脑血疏组大鼠的神经功能缺损评分较低、脑梗死体积较小,脑水肿程度较轻; EB含量和MMP-9表达水平均较对照组明显减少(P<0.01)。结论 脑血疏口服液对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障具有保护作用,其机制可能是通过抑制MMP-9的表达。     

阿托伐他汀对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响

目的 评估阿托伐他汀对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响。方法 采用常规尼龙线栓法制备SD大鼠脑缺血再灌注模型,并将大鼠随机分为假手术组、大脑中动脉阻断再灌注(Middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)(对照)组和MCAO/R阿托伐他汀(治疗)组; 对照组和治疗组分别于脑缺血2 h再灌注24 h处死; 标准湿干法测定脑组织含水量; 实时聚合酶链反应(Real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinases-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinases-9,MMP-9)的mRNA表达水平; 应用免疫组化法测定Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ type collagen,CoⅣ)水平; 电镜观察显示血脑屏障超微结构的改变。结果 治疗组与对照组比较,脑组织含水量减少(P<0.01); 阿托伐他汀治疗显著降低了MMP-2和MMP-9的mRNA表达水平; 治疗组脑组织CoⅣ水平高于对照组(P<0.01); 电镜观察显示治疗组血脑屏障超微结构的改变明显好于对照组。结论 阿托伐他汀可以降低脑缺血再灌注大鼠血脑屏障的通透性,从而减轻脑水肿。     

钙拮抗剂对大鼠脑缺血后血脑屏障通透性的影响

目的 研究钙离子拮抗剂对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障(BBB)通透性和脑梗死灶体积的影响. 方法 插线法制作大鼠脑缺血再灌注模型.缺血2 h后再灌注.将150只大鼠按随机数字表法分尼莫地平组和对照组,每组分再灌注6h、12h、24 h、48h、72 h五个时间段,再灌注后尼莫地平组和对照组立即分别腹腔注射尼莫地平和生理盐水2 mg/kg.每12小时注射一次,用甲酰胺荧光法及透射电镜观察不同时段BBB通透性破坏的情况,TTC染色后计算梗死灶体积百分比.结果 大鼠脑缺血再灌注后BBB通透性和梗死灶体积百分比随时间延长逐渐增加.且BBB通透性的增加呈现两个高峰,第一个高峰在再灌注后12 h,第二个高峰在再灌注后48 h.尼莫地平组BBB通透性及脑梗死灶体积百分比的增加均较对照组明显,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 脑缺血再灌注增加BBB的通透性和脑梗死灶体积百分比.再灌注后给予尼莫地平可加重这些病理变化.     

孕酮对局灶脑缺血再灌注大鼠血—脑脊液屏障变化的影响

目的探讨孕酮（PROG）减轻缺血/再灌注（I/R）时脑水肿的机制。方法采用大鼠局灶性脑I/R模型,分光光度计定量测定大脑中动脉阻塞(MCAO)2h再灌注22h后脑皮层伊文思蓝（EB）含量的变化及PROG的影响。结果MCAO侧EB含量I/R组为5.89±1.37μg/g湿重,溶剂（DMSO)组为5.03±2.70μg/g湿重,PROG组为2.07±0.96μg/g湿重;PROG组显著低于I/R组和DMSO组（P<0.05）。结论PROG显著降低缺血2h再灌注22h时血-脑脊液屏障（BBB）的通透性,这可能是其减轻I/R时脑水肿的机制之一。     

Time- and pressure-dependent changes in blood-brain barrier permeability after temporary middle cerebral artery occlusion in rats

Summary After 180 min of temporary middle cerebral artery occlusion in rats, the affect of phenylephrine-induced hypertension on blood-brain barrier permeability was assessed. One of the following blood-pressure regimens was maintained during either a 30- or 120-min period of reperfusion: (a) 30/Norm, 30 min of normotensive reperfusion was allowed; (b) 30/HTN, mean arterial blood pressure was increased by 35 mm Hg during 30 min of reperfusion; (c) 120/Norm, 120 min of normotensive reperfusion was allowed; or (d) 120/HTN, mean arterial blood pressure was increased by 35 mm Hg during 120 min of reperfusion. Evans blue (30 mg/kg) was given, and brains were analyzed for Evans blue by spectrophotometry. Evans blue (g/g brain tissue, mean ± SD) was greater (P<0.05) in both hypertensive groups versus their time matched normotensive groups (30/HTN: 80±16 versus 18±6 in the 30/Norm group; 120/HTN: 17±6 versus 8±3 in the 120/Norm group). In addition, Evans blue was greater (P<0.05) in both 30-min groups versus their pressure matched 120-min groups (30/Norm: 18±6 versus 8±3 in the 120/Norm group; 30/HTN: 80±16 versus 17±6 in the 120/HTN group). The data are consistent with previous studies which have demonstrated an opening of the blood-brain barrier at the onset of reperfusion. In addition, the data support a hypothesis that changes in blood-brain barrier permeability are more sensitive to hypertension in the early period of reperfusion.     

缺血再灌注大鼠脑内MMP-2、MMP-9与血脑屏障的关系

目的明确脑缺血再灌注后MMP-2、MMP-9与血脑屏障的关系。方法健康雄性SD大鼠54只,线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。应用含明胶的定量酶谱技术检测再灌注3h到7d内MMP-2、MMP-9的表达,用甲酰胺浸泡法检测大鼠脑内EB含量。结果 (1)缺血再灌注24h后,大鼠缺血侧脑内MMP-9表达明显升高,48h到达顶峰,4d后显著下降,7d后水平更低。24h组和48h组与其它各组相比,有显著性差异(P<0．05)。 0MMP-2缺血再灌注48h后明显升高,7d到达高峰,7d组大鼠缺血侧脑内MMP-2水平与3h组和24h组相比,有显著性差别(P<0．01)。(2)再灌注24h大鼠缺血侧脑内EB含量最高,显著高于3h及7d组(P<0．05),但与48h无显著差别(P>0．05)。结论缺血再灌注后出现了MMP-2、MMP-9和血脑屏障的动态变化,血脑屏障损伤与MMP-9 的升高相关,而与MMP-2关系不大。     

尼膜同对大鼠脑缺血再灌注后血-脑屏障通透性和脑梗死体积的影响

目的　研究尼膜同对大鼠脑缺血再灌注后血 脑屏障 (BBB)通透性和脑梗死体积的影响。方法采用插线法制作脑缺血再灌注的大鼠模型 ,缺血 2h后再灌注。实验分尼膜同组和生理盐水对照组 ,每组分再灌注 6h、12h、2 4h、4 8h、72h 5个时段 ,再灌注后立即分别腹腔注射尼膜同 2mg/kg或等量的生理盐水 ,每12h注射 1次。用荧光法及透射电镜观察不同时段BBB通透性破坏的情况 ,TTC染色后计算梗死体积百分比。结果　脑缺血再灌注后随时间延长 ,BBB通透性和梗死体积百分比逐渐增加 ,且BBB通透性的增加呈现两个高峰 ,分别为再灌注后 12h和 4 8h ;尼膜同组BBB通透性及脑梗死体积百分比明显高于生理盐水对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　脑缺血再灌注增加BBB的通透性和脑梗死体积百分比 ,再灌注后给予尼膜同可加重这些病理变化。     

Influence of blood pressure on blood-brain barrier function in brain ischemia

The influence of systemic blood pressure on blood-brain barrier leakage and hemorrhage in brain ischemia was evaluated in Sprague-Dawley rats with blood pressures at the lower and upper limit normally found in these animals when anesthetized on 70% N2O:30% O2. 24 h after unilateral cerebral microembolization - when significant increases in water content and barrier permeability and decrease in blood flow is present - the extravasation of Evans Blue-albumin and inulin as well as hemorrhage in the infarcted brain area was considerably more prominent in animals with the higher blood pressure. The findings imply that attempts to elevate pressure, as well as subacute surgical circulatory reconstruction to increase perfusion of an ischemic area, may be potentially harmful.     

米诺环素对脑缺血再灌注后明胶酶活性及血脑屏障影响的研究

目的 探讨米诺环素对大鼠局部脑缺血再灌后血脑屏障损伤的影响及其作用机制.方法 28只Wistar大鼠分为假手术组、缺血再灌注组、米诺环素组和生理盐水组.运用磁共振成像监测缺血再灌后血脑屏障损伤及梗死体积的变化,再灌注24h后进行神经功能缺陷评分和脑组织明胶酶活性测定.结果 缺血再灌后3.5h及24h,米诺环素组DWI、T2WI上异常高信号体积,T1WI增强扫描的信号强化范围、信号强度均明显低于缺血再灌注组和生理盐水组（P＜0.05）;与后两组相比,米诺环素组神经功能缺陷评分及脑组织明胶酶活性亦显著降低（P＜0.05）.结论 米诺环素能显著减轻缺血再灌注早期血脑屏障损伤,缩小梗死体积,促进神经功能恢复,其保护机制可能与米诺环素抑制脑组织明胶酶活性有关.