Survivin反义核酸对拓扑替康诱导SKOV3细胞凋亡的影响

目的 :探讨Survivin反义核酸对拓扑替康 (TPT)诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡的影响。方法 :在光镜下观察Survivin反义核酸与TPT联合应用后SKOV3凋亡的形态学改变 ,通过DNA电泳检测SKOV3细胞凋亡的情况 ;应用MTT法检测SKOV3细胞对TPT的敏感性。结果 :Survivin反义核酸可明显促进TPT诱导的SKOV3凋亡 ,呈现出特征性的DNA梯状带 ;TPT对SKOV3、SKOV3/neo、SKOV3/SVVas细胞的IC50 值分别为 (1 6 0 .0 0± 6 .36 ) μg/L、(1 5 8.0 0±6 .32 ) μg/L、(4 2 .0 0± 2 .31 ) μg/L ,其差异具有统计学意义 (P <0 .0 1 )。 结论 :Survivin反义核酸可明显促进TPT诱导的卵巢癌细胞SKOV3凋亡 ,提高卵巢癌细胞对TPT的敏感性     

丹参酮ⅡA抑制人肝癌细胞的生长及诱导其凋亡的实验研究

目的　研究丹参酮ⅡA对人肝癌细胞系BEL 740 2的生长抑制及凋亡诱导作用。方法　 0～ 10 μg/ml丹参酮ⅡA作用人肝癌细胞 72h后 ,用MTT比色法观察其细胞毒性 ,荧光显微镜、透射电镜检测细胞凋亡 ;流式细胞术 (Flowcy tometry ,FCM )定量检测 5 μg/ml丹参酮作用不同时间后的细胞凋亡率。 结果　丹参酮ⅡA以剂量依赖的方式抑制肝癌细胞的生长 ,其IC50 值为 6.2 8μg/ml。 1～ 10 μg/ml丹参酮ⅡA作用 72h后 ,肝癌细胞表现为细胞皱缩、核染色质浓缩、核碎裂、细胞出芽以及凋亡小体形成等凋亡特征性的形态学改变。流式细胞仪直方图上可见亚二倍体峰 ,5 μg/ml浓度作用12、2 4、3 6、48、72h后的细胞凋亡率分别为 ( 2 .3 2± 0 .16) %、( 3 .0 1± 0 .3 5 ) %、( 3 .87± 0 .43 ) %、( 6.73± 0 .5 8) %和 ( 2 0 .85±1 74) % ,与对照组 ( 1.0 7± 0 .13 ) %比较均有显著性差异。结论　在体外丹参酮ⅡA能诱导人肝癌细胞系BEL 740 2凋亡 ,这可能为丹参酮ⅡA抑制其生长的机制     

EGCG对肾缺血再灌注时细胞凋亡的影响

目的 :探讨没食子儿茶素没食子酸脂 (EGCG)对肾缺血再灌注时细胞凋亡的抑制作用。方法 :建立大鼠肾缺血再灌注损伤的动物模型 ,对 Cr、BU N、一氧化氮 (NO)、Ca2 + - ATP酶活性进行测定并对肾细胞凋亡及组织病理进行观察。结果 :EGCG高剂量 (40 m g/ kg) Cr(17.89± 8.4 8) μm ol/ L、BUN (4.91± 2 .71) μmol/ L、NO (0 .38± 0 .17) μm ol/ g prot比空白对照组明显降低 (均 P <0 .0 1) ,Ca2 + - ATP酶 (0 .6 2± 0 .13) mm ol/ g prot· h- 1 比空白对照组明显升高 (P <0 .0 1) ,并且能有效抑制细胞凋亡的产生 ,且较维生素 C组作用更明显。结论 :EGCG能减轻肾缺血再灌注损伤 ,减少细胞凋亡的发生 ,其作用机制可能与降低细胞内的 Ca2 + 和 NO浓度有关。     

人工肝支持系统在重症肝炎救治中的应用

应用人工肝支持系统 (血浆置换 +胆红素吸附 +血液透析 ) ,对 7例慢性重症肝炎患者进行治疗。经人工肝支持系统治疗后 ,患者症状好转 ,肝功能有所好转 [丙氨酸转移酶由 (15 9.49± 96 .6 9) U/ L 降至 (82 .42± 10 8.71) U/L,P<0 .0 5 ;血白蛋白由 (33.2 6± 2 .14) g/ L 升至 (37.0 6± 4.0 6 ) g/ L,P<0 .0 1;总胆红素由 (5 2 6 .0 4± 2 5 7.46 ) μm ol/L 降至 (389.19± 185 .2 6 ) μmol/ L,P<0 .0 0 1],尿素氮及血肌酐水平分别由 (2 4.41± 6 .5 1) mmol/ L 和 (334 .75±113.11) μm ol/ L 降至 (14.40± 5 .5 2 ) m mol/ L 和 (2 11.5 6± 6 4.0 8) μmol/ L,P<0 .0 0 1和 P<0 .0 1。 3例患者分别在治疗 1、 3、 6次后行肝移植存活 ,其中 1例在肝移植前停止人工肝支持系统治疗而肝功能稳定达 12 d。另 4例死亡。结果提示 ,人工肝支持系统是重症肝炎有益的治疗方法之一 ,并可作为肝移植前的准备     

格列吡嗪片人体相对生物利用度

目的 :研究格列吡嗪片在人体的药代动力学过程及其相对生物利用度。　方法 :格列吡嗪血药浓度用高效液相色谱法 (HPLC UV)检测 ,色谱柱 :LichrospherC 1 8(5 μm ,1 5 0mm× 4 .6mm) ;流动相 :甲醇∶0 .0 1mol/L醋酸盐缓冲液 (pH =4 .8) =(5 9∶4 1v/v) ;流速 :1ml/min ;检测波长 :2 2 5nm。 2 0名健康志愿者口服 1 0mg试验制剂或参比制剂。　结果 :血浆标准曲线在 2 5～ 1 0 0 0 μg/L范围内线性良好 (r =0 .9994 ) ,血样最低定量限为 2 5 μg/L ,平均绝对回收率为 89.84 % ,日内、日间变异 (RSD) <5 %。试验制剂和参比制剂的主要药动学参数为 :达峰时间Tmax分别为 (3.85± 1 .4 4 )h和 (3.76± 1 .1 3)h ;峰浓度Cmax分别为 (5 5 0 .80± 1 1 0 .1 9) μg/L和 (5 31 .1 5± 1 4 8.4 2 ) μg/L ;消除半衰期t1 /2 分别为 (3.5 7± 1 .1 1 )h和 (3.80± 1 .0 6 )h ;药时曲线下面积AUC0～ 1 5分别为 (35 0 2 .78± 6 35 .82 ) μg/ (L·h)和 (32 1 4 .2 3± 5 90 .4 6 ) μg/ (L·h) ;AUC0～∞ 分别为 (386 8.2 2± 6 99.93) μg/ (L·h)和 (35 93.94±6 38.6 0 ) μg/ (L·h)。试验制剂与参比制剂的相对生物利用度F0～ 1 5、F0～∞ 分别为 (1 1 0 .6± 1 9.8) %和 (1 0 8.8± 1 7.9) %。　结论 :试验制剂     

冠心病患者血浆同型半胱氨酸与氧化低密度脂蛋白水平及其关系

目的 :探讨冠心病患者血浆同型半胱氨酸 (Hcy)水平及氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)水平及相关关系。方法 :选择冠心病患者 85例 ,正常对照组 32例。以全自动荧光偏振免疫分析法测定Hcy ,用ELISA方法测定ox LDL。结果 :85例冠心病患者与正常对照组血浆Hcy分别为 (14 .73± 5 .32 ) μmol/L和 (9.32± 4 .72 ) μmol/L ,差异显著(P <0 .0 1)。冠心病患者与正常对照组血ox LDL分别为 (712 .83± 2 13.92 ) μg/L和 (40 2 .13± 187.6 1) μg/L ,差异显著 (P <0 .0 1)。冠心病患者中Hcy与ox LDL呈显著正相关 (Y =0 .76 ,X =1.9,r =0 .72 5 ,P <0 0 1)。结论 :Hcy及Ox LDL参与冠心病的发生发展过程冠状动脉粥样硬化的形成 ,可能与冠心病的严重程度关系不大。     

血清MMP-2、CRP水平对不稳定性心绞痛的诊断及预后判断价值

目的 :探讨血清基质金属蛋白酶 - 2 (MMP- 2 )及 C-反应蛋白 (CRP)定量测定对不稳定性心绞痛 (U A)的诊断及预后判断价值。　方法 :对 46例 UA患者、2 5例稳定性心绞痛 (SA )患者及 2 2例健康志愿者分别进行血清MMP- 2及 CRP酶联免疫测定。　结果 :U A组入院时血清 MMP- 2水平明显高于 SA组及对照组 ,分别为 (4 70 .8±5 1.4) ng/ ml、(32 9.6± 5 4.0 ) ng/ ml及 (2 46 .5± 2 6 .8) ng/ m l(P<0 .0 1)。 UA组入院时血清 CRP水平明显高于 SA组及对照组 ,分别为 (3.6± 0 .4) μg/ m l、(0 .9± 0 .1) μg/ m l及 (0 .7± 0 .1) μg/ m l(P<0 .0 1)。UA组病情稳定后血清MMP- 2及 CRP水平明显降低 ,分别为 (35 0 .4± 41.8) ng/ m l、(0 .9± 0 .3) μg/ ml(P<0 .0 1)。 U A组有 7例发生急性冠状动脉事件 (ACE) ,SA组未发现 ,且 ACE组入院时血清 MMP- 2、CRP水平分别为 (5 0 3.7± 30 .3) ng/ ml、(4 .1± 0 .3) μg/ ml,明显高于 U A组入院时平均 MMP- 2、CRP水平 (P<0 .0 5 )。　结论 :血清 MMP- 2、CRP水平可能对 UA具有一定的诊断及预后判断价值     

杭白菊对小牛血管平滑肌细胞凋亡及其抗氧化性研究

目的 :探讨杭白菊提取液对小牛主动脉血管平滑肌细胞 (VSMC)凋亡的影响及可能的作用机制。方法 :取小牛主动脉进行体外 VSMC培养 ,加入杭白菊提取液干预 ,用膜联蛋白 Annexin检测法 ,在流式细胞仪下观察VSMC的凋亡现象 ,同时取上清液在分光光度仪下测定超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)。结果 :1在流式细胞仪下观察到加入杭白菊提取液后 VSMC凋亡数量减少 ,随着杭白菊提取液浓度的加大 ,细胞凋亡从 (4.4 2 5±0 .6 2 4 ) %降至 (2 .875± 0 .6 4 0 ) % ;2随着杭白菊提取液浓度的增加 ,SOD值由 (1.6 83± 0 .149)× 10 4 U/ L升高到(2 .2 97± 0 .2 30 )× 10 4 U/ L、MDA值由 (16 6 .4 5 4± 5 6 .80 5 ) μmol/ L下降至 (73.0 6 8± 2 7.2 0 3) μmol/ L。结论 :杭白菊提取液具有抑制小牛 VSMC凋亡及抗氧化作用 ,并呈浓度依赖性。     

血脂康对老年陈旧性心肌梗死患者氧化修饰低密度脂蛋白及血管内皮功能的影响

目的 :探讨血脂康对老年陈旧性心肌梗死 (OMI)患者血氧化修饰低密度脂蛋白 (OX LDL)水平和血管内皮功能的影响。方法 :老年OMI患者及健康老年人 (对照组 )各 32例 ,空腹 12h后查血清脂质总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)、OX LDL、内皮素 (ET 1)和一氧化氮 (NO)水平 ,老年OMI患者给予血脂康 0 .6 g ,每日 2次 ,8周后复查OX LDL、ET 1和NO水平。 结果 :与对照组相比 ,老年OMI患者治疗前血清中脂质水平差异无显著性 ,血清中OX LDL和ET 1水平升高 [(1171.1± 5 0 4.2 )对 (4 14.9± 10 7.8) μg/L和 (10 4.48± 32 .30 )对 (6 4.40±18.0 4) pg/ml) ],NO水平低于对照组 [(4 4.78± 15 .40 )对 (77.78± 2 5 .79) μmol/L],差异有显著性 (P <0 .0 1) ;经血脂康治疗后 ,老年OMI患者OX LDL和ET 1水平较治疗前下降 [(874.2± 30 5 .0 )对 (1171.1± 5 0 4.2 ) μg/L和 (89.15± 2 0 .78)对(10 4.48± 32 .30 ) pg/ml],NO水平升高 [(5 6 .6 0± 13.6 2 )对 (4 4.78± 15 .40 ) μmol/L],差异有显著性 (P <0 .0 5 )。 结论 :血脂康具有抑制脂质过氧化反应 ,减低OX LDL水平 ,保护老年OMI患者血管内皮功能的作用。     

氧化低密度脂蛋白、低氧和5-HT对血管平滑肌细胞5-HT2A受体及胞内游离钙的影响

目的　为探讨粥样硬化病变动脉对 5 - HT收缩反应增加的机制 ,观察与粥样硬化有关因子氧化低密度脂蛋白 (ox L DL)、低氧、5 - HT对血管平滑肌细胞 5 - HT2 A受体及其基因表达 ,以及细胞 [Ca2 ]i的效应。方法　分别将大鼠主动脉平滑肌细胞单独以 5 0 μg/ m l ox L DL 培养 8h,2 %低氧处理 2 4和 48h,10 μm ol/ L 5 - HT处理30 min,放射配基结合分析测定 5 - HT2 A受体 ;RT- PCR和 Southern杂交检测受体基因的 m RNA;激光共聚焦扫描显微镜测单个细胞 [Ca2 ]i。结果　经 ox L DL、低氧、 5 - HT处理 ,血管平滑肌细胞 5 - HT2 A受体显著上调 (P<0 .0 1) ;ox L DL及低氧处理的受体基因的 m RNA表达增加 ;ox L DL、低氧处理后 ,5 - HT刺激的血管平滑肌细胞[Ca2 ]i升高幅度显著加大 (P<0 .0 5及 P<0 .0 1)。结论　 ox L DL、低氧、5 - HT引起血管平滑肌细胞 5 - HT2 A受体上调及细胞 [Ca2 ]i增加 ,可能是粥样硬化动脉对 5 - HT收缩反应增强的部分原因。     

硒对Ox—LDL诱导牛内皮细胞Caspase-3酶的作用

目的 探讨硒对氧化型低密度脂蛋白（Ox—LDL）诱导体外培养牛主动脉内皮细胞Caspase-3酶的影响。方法 Ox—LDL与硒处理牛主动脉内皮细胞后，通过流式细胞仪、DNA电泳检测凋亡细胞，测定Caspase-3酶活性。结果 Ox—LDL作用内皮细胞后，细胞凋亡DNA电泳呈梯度务带；加入硒干预后，内皮细胞平均凋亡率及Caspase-3酶活性吸光度比值较Ox—LDL组明显降低（P〈0．05）。结论 硒能减少Ox—LDL诱导体外培养的牛主动脉内皮细胞凋亡，部分通过抑制Caspase-3酶活性而发挥抗凋亡的细胞保护效应。     

植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体介导氧化型低密度脂蛋白对内皮祖细胞存活和功能的影响

目的 研究植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体（LOX—1）是否介导氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）对内皮祖细胞（EPC）的存活及功能产生影响。方法 分选脐血CD34^＋细胞,培养于内皮细胞生长培养基（EGM-2）中。培养14d后,部分EPC与10、25、50μg/ml的oxLDL孵育48h;部分EPC先与LOX-1单克隆抗体（LOX—1mAb）预处理24h,再与50μg／ml oxLDL孵育48h;对照组不作处理。检测EPC存活率及EPC迁移、黏附和管状结构形成能力,并检测LOX-1的蛋白及mRNA表达。结果oxLDL浓度为25和50μg／ml时,凋亡率分别为（15．8±1．0）％和（18．8±2．0）％,显著高于对照组的（9．0±1．2）％（P〈0．05）;迁移率分别为（5．7±1．0）％和（5．1±0．8）％,显著低于对照组的（9．5±0．8）％,（P〈0．05）;黏附细胞数分别为（33±2）和（30±3）个,显著少于对照组的（37±5）个（P〈0．05）;形成的管状结构分别为（2．9±0．5）和（1．8±0．5）mm,显著短于对照组的（5．0±0．6）mm（P〈0．05）。OxLDL可增加LOX—1mRNA及蛋白的表达,oxLDL浓度为50μg／ml时,LOX—1mRNA表达由100％增加为（174±39）％,蛋白表达由100％增加为（172±8）％。OxLDL的上述作用能被LOX1mAb所阻断。结论OxLDL可降低EPC存活,抑制EPC功能,其作用是由LOX—1介导的。     

二甲双胍对慢性暴露于高糖及高游离脂肪酸的HIT-T15细胞胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶活性的影响

目的 观察二甲双胍(MF)对慢性高糖和高脂处理后的HIT-T15细胞(β细胞系)胰岛素受体(IRc)酪氨酸蛋白激酶(TPK)活性的影响,探讨MF对β细胞糖脂毒性,即β细胞胰岛素抵抗的改善作用机制.方法 实验分为对照组、对照 MF组、高糖组、高糖 MF组、高脂组、高脂 MF组.将HIT-T15细胞分别接种于含有5.5 mmol/L、16.7 mmol/L葡萄糖(G)及0.5 mmol/L软脂酸的培养液中,培养48 h后,加入2.5 μg/mL MF干预24 h.用放射性酶分析法测定β细胞IRc TPK活性.结果 高糖[(52.5±18.6) pmol/(min·μg), P＜0.01],且与对照组相比差异无统计学意义.MF对对照组HIT-T15细胞IRc TPK活性无明显影响.结论 高糖和高脂可抑制β细胞IRc TPK活性.MF能明显改善受高糖及高脂所抑制的HIT-T15细胞IRc TPK活性,且恢复到接近正常水平.提示MF对糖脂毒性所致β细胞胰岛素抵抗的改善作用可能与增加IRc TPK活性有关.     

化疗药物剂量依赖性下调化疗敏感膀胱癌细胞中X染色体连锁的凋亡抑制蛋白的水平

目的探讨化疗药物诱导膀胱癌细胞凋亡及其对X染色体连锁的凋亡抑制蛋白（XIAP）表达和caspase-3剪切的影响。方法培养4种膀胱癌细胞系RT4、MGH-U1、EJ及T24,用低剂量阿霉素和丝裂霉素诱导凋亡启动,用细胞增殖分析试剂盒CCK-8分光法测定不同浓度化疗药物对膀胱癌细胞的杀伤力,确定化疗敏感细胞和耐药细胞,流式细胞术检测化疗药物诱导的细胞凋亡变化;用Western印迹检测阿霉素和丝裂霉素对膀胱癌细胞XIAP蛋白水平及caspase-3剪切的影响。结果4种膀胱癌细胞系中XIAP的表达水平差异无统计学意义。随着阿霉素和丝裂霉素的浓度增高,CCK-8检测到化疗药物对膀胱癌细胞的抑制率相应增加,流式细胞术检测到化疗药物诱导的细胞凋亡率相应增加。在化疗敏感的RT4细胞中可见caspase-3的剪切随着化疗药物浓度的增高而加强,而XIAP的蛋白水平却相应下降。这种效应在耐药的T24细胞中却不明显。结论阿霉素和丝裂霉素能剂量依赖性地杀伤膀胱癌细胞,而且这种杀伤力是通过诱导膀胱癌细胞凋亡实现的,XIAP和caspase-3与膀胱癌细胞的化疗耐药有一定相关性。     

人oxLDL自身免疫复合物的体外致动脉粥样硬化作用

目的：观察oxLDL自身免疫复合物对U937巨噬样细胞泡沫化和活化的影响,以探讨oxLDL免疫学反应致动脉粥样硬化的机制。方法：采用密度离心法从健康人血浆中提取低密度脂蛋白（LDL）,用铜离子氧化成oxLDL;用亲和层析法从136例住院患者血清中提取oxLDL自身抗体。在体外制成2种形式不同的免疫复合物：聚乙二醇沉淀的不溶性免疫复合物（PEG-IC）和RBC吸附的可溶性免疫复合物（RBC-IC）,把这2种免疫复合物加至U937巨噬样细胞的培养基中,以oxLDL作阳性对照,并用热聚合人γ球蛋白（HAGG）封闭Fcγ受体作阻断对照,检测干预后的各组U937巨噬样细胞内胆固醇和胆固醇酯及培养基中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）的水平。结果：RBC-IC干预组与RBC吸附oxLDL（RBC-oxLDL）干预组比较,U937巨噬样细胞培养基中MMP-1蛋白表达［（0.769±0.030) ng/ml vs (0.513±0.034) ng/ml,P＜0.01］和细胞内胆固醇酯蓄积［（20.271±1.668) μg/mg vs (17.226±1.298) μg/mg,P＜0.05］明显升高;而在PEG-IC组这种作用则更为明显,且呈剂量依赖性。用10mg/ml的HAGG封闭Fcγ受体后,MMP-1的水平下降约71%,其对巨噬样细胞泡沫化和活化的作用都受到明显的抑制。结论：oxLDL自身免疫复合物能够促进巨噬细胞泡沫化和活化, 其参与动脉粥样硬化的过程可能是通过Fcγ受体途径来实现的。     

Her-2/neu小分子干扰RNA对肺腺癌细胞周期和凋亡机制的影响

目的研究人类表皮生长因子受体2(Her2/neu)小分子干扰RNA(siRNA)对Her2/neu过表达的肺腺癌细胞的细胞周期和凋亡机制的影响。方法用化学合成的靶向Her2/neusiRNA转染肺腺癌calu3细胞,转染前后通过逆转录聚合酶链反应(RTPCR)测定细胞中Her2/neu、细胞周期蛋白(Cyclin)D1mRNA水平;流式细胞术检测Her2/neu蛋白水平和细胞周期的变化;AnnexinⅤ异硫氢酸荧光素(FITC)试剂盒检测肺癌细胞的凋亡情况;荧光分光光度法测定Caspase3活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测培养液上清中血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果Her2/neusiRNA能在mRNA和蛋白水平下调肺癌细胞株calu3中Her2/neu基因的表达。calu3细胞转染Her2/neusiRNA48h后处于G0/G1期的细胞增多,同时S期的细胞比例减少,与未转染对照组、空载体组和非特异性siRNA组比较差异有统计学意义(F=6.1,P<0.01)。转染Her2/neusiRNA后CyclinD1mRNA水平下降,同时培养上清液中的VEGF含量为176pg/ml±6pg/ml(F=24.7,P<0.01),Caspase3活性为135%±4%(F=8.9,P<0.01),细胞凋亡率为25.1%±1.2%(F=10.3,P<0.01)。结论化学合成的靶向Her2/neusiRNA能够下调Her2/neu基因表达,继而降低CyclinD1和VEGF水平,激活Caspase3途径,从而阻滞细胞周期于G0/G1期和诱导凋亡。     

己糖激酶-Ⅱ基因在人结肠癌细胞中的表达及其治疗意义

目的检测己糖激酶-Ⅱ基因（HK-Ⅱ）在人结肠癌细胞中的表达,探讨抑制HK-Ⅱ对结肠癌的治疗效应及机制。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western印迹检测4种人结肠癌细胞HK-Ⅱ基因的表达情况。在HK-Ⅱ抑制剂（3-BrPA）诱导下,通过MTT法观察结肠癌细胞增殖和化疗敏感性变化;用琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡DNA片段;底物比色法测定半胱氨酸蛋白水解酶（caspase-3）活性;流式细胞术和紫外分光光度仪分别检测线粒体膜电位（△Ψm）、线粒体膜通透转换孔（PFP）开放的变化。结果HK-Ⅱ基因在4种人结肠癌细胞中明显表达。抑制HK-Ⅱ（3-BrPA）能明显控制结肠癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。300μmol／L 3-BrPA刺激LOVO、HCT-116、HT-29、SW480细胞48h后,细胞增殖抑制率分别为83．7％±2．0％、83．4％±4．1％、89．7％±3．7％和80．6％±0．9％。与小剂量3-BrPA（25μmol／L）联合作用LOVO细胞48h,低剂量表阿霉素（0．05、0．1μg/ml）的细胞增殖抑制率由5．1％±1．3％和10．5％±2．0％分别增至46．5％±3．2％和57．9％±3．3％（P〈0．01）;而低剂量L—OHP（0．5、1．0μg/ml）的细胞增殖抑制率则由19．2％±6．1％和32．2％±2．2％分别提高到48．4％±3．2％和60．5％±4．6％（P〈0．01）。50、100、150μmol／L 3-BrPA诱导LOVO细胞24h后,caspase-3活性分别为1．13±0．11、1．60±0．20和3．03±0．11（P=0．000）。3-BrPA作用LOVO细胞线粒体20min后,PTP开放程度为40．0％±3．5％,而对照组（CaCl2）为37．4％±2．3％,两者相比,差异无统计学意义（P=0．348）。100μmol／L 3-BrPA刺激LOVO细胞1、3、5h后,△Ψm下降率分别为12．7％、15．4％、26．8％。结论HK-Ⅱ基因可望成为结肠癌的有效治疗靶点。     

金钱鱼凋亡相关基因SaAR对NIH-3T3细胞凋亡的影响

OBJECTIVE: To observe the effects of Scatophagus argus apoptosis-related (SaAR) gene transfer on the apoptosis of NIH-3T3 cells. METHODS: A controlled observation of SaAR gene transfer (at different concentrations) into cultured NIH-3T3 cells via lipofectin was performed, and the rate of cell apoptosis was analyzed by flow cytometry. RESULTS: The rate of cell apoptosis was (6.37+/-0.0.56)% in the control group, and was (11.89+/-1.13) %, (18.25+/-1.86) % and (22.34+/-1.08) % respectively in pcDNA3-SaAR gene groups corresponding to pcDNA3-SaAR gene concentrations of 2, 3 and 4 microg/ml respectively. It was shown that SaAR gene significantly induced fibroblast apoptosis when the concentration was above 2 microg/ml (P<0.05), in a dose-dependent manner as compared with the control group (P<0.05). CONCLUSION: Transient transfection of SaAR gene can significantly induce apoptosis in NIH-3T3 cells.     

高游离脂肪酸血症对SD大鼠主动脉内皮细胞一氧化氮合酶活性及mRNA表达的影响

目的研究高游离脂肪酸(FFA)血症对大鼠血管内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)活性及表达的影响并探讨其可能的机制。方法雄性SD大鼠随机分成对照组和FFA组。对照组及FFA组大鼠分别经颈静脉插管输入生理盐水或20%脂肪乳 肝素6 h。输液结束后采集血清标本测定血中FFA、活性氧(ROS)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)以及NO水平。处死动物后取出主动脉,测定主动脉内皮细胞匀浆液中eNOS活性及eNOS mRNA水平。结果FFA组血FFA水平较对照组升高2~4倍,血清NOx水平明显降低,内皮细胞eNOS活性及mRNA水平明显低于对照组。FFA组血清ROS、MDA以及hsCRP水平明显升高,GSH水平降低。结论高FFA血症可抑制内皮细胞eNOS活性及表达,其机制可能涉及FFA所诱导的炎症反应和氧化应激。     

Arsenic trioxide-induced apoptosis of human malignant lymphoma cell lines and its mechanisms.

OBJECTIVE: To investigate the responses of human Burkitt lymphoma cells to arsenic trioxide (As2O3) and the possible mechanisms. METHODS: Epstein-Barr virus (EBV)-positive human B-lymphoma Raji cell line and EBV-negative human B-lymphoma BJAB cell line were used as in vitro models to assess the cell apoptosis by morphology and DNA agarose gel electrophoresis. Protein expression was analyzed using Western blotting. RESULTS: After 24-hour treatment with the 2, 5 and 10 micromol/L As2O3, the concentrations of As2O3 achievable in vivo, cell apoptosis was induced in human Burkitt lymphoma BJAB cells at the rates of 47.6%+/-4.8% (Mean+/-SD, n=3), 66.4%+/-5.1%, 87.0%+/-7.3% and at 35.5%+/-3.8%, 51.5%+/-6.2%, 62.2%+/-7.9% respectively in Raji cells, corresponding to the concentration of As2O3. EBV-infected Raji cell line was less sensitive to As2O3 than EBV-negative BJAB cell line (P<0.05). As2O3-induced apoptosis was accompanied by down-regulation of Bcl-xL protein expression and activation of apoptosis protein caspase-3, as identified by Western blotting. CONCLUSION: As2O3 exerts apoptosis-inducing effects on human Burkitt lymphoma cells through down-regulation of Bcl-xL protein expression and activation of apoptosis protein caspase-3, and may serve as a candidate therapeutic agent against malignant lymphoma for both systemic and local therapies.