肾移植病人群体反应性抗体的检测

以３６名健康成人外周血淋巴细胞作为群体淋巴细胞来源。采用补体依赖微量淋巴细胞毒方法，进行了５５例肾移植病人的群体反应性抗体（ｐａｎｅｌ ｒｅａｃｔｉｖｅ ａｎｔｉｂｏｄｙ，ＰＲＡ）和随机淋巴细胞毒试验（ｒａｎｄｏｍ ｐａｎｅｌ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｔｅｓｔ，ＲＰＬＴ）的检测，结果显示，５５例病人进行血清淋巴细胞毒交叉配合实验（ＣＤＣ）检测，只有１例阳性（１．８２％），而ＰＲＡ及Ｒ     

群体反应性抗体特殊检测结果的探讨

目的：通过对群体反应性抗体(panel reaction antibodies,PRA)特殊结果的探讨,了解PRA抗体产生及移植排斥反应的免疫学基础理论。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA),监测肾移植受者外周血人类白细胞抗原(HLA)-IgG 抗体的水平及其特异性变化。结果无传统致敏因素受者156例中3例产生PRA抗体,百分比为1.92%;产生PRA抗体再次复查者68例中15例PRA抗体特异性发生改变,百分比为22.06%;再次移植受者15例中3例未产生PRA抗体,百分比为20%。结论(1)除妊娠、输血、移植外,感染也可导致机体产生PRA抗体;(2)PRA抗体的产生是一个复杂的机体免疫反应;(3)除PRA抗体外,其它因素(如MICA抗体、次要组织相容性抗体等)也可导致排斥反应的发生。     

肾移植前群体反应性抗体的检测

美国器官共享联合网(UNOS)的统计,影响移植肾长期存活的因素按程度排序依次为:PRA、HLA-B及DR的错配、移植次数、移植前输血、供者年龄和种族差异。群体反应性抗体(PRA)检测是近几年应用于临床肾移植的组织配型的方法,可指导供体的选择、预测预后和指导免疫抑制药物的应用,对提高肾移植的成功率和存活率方面有着明显的优点,因而越来越受到临床的重视与关注。我中心自2003年开始采用PRA方法为肾移植患者进行检测,现将结果报道如下。1材料和方法1.1标本来源2003年6月至2004年6月,尿毒症患者血清标本112例,其中男76例,女36例,年龄15～6…     

肾移植受者术前群体反应性抗体筛查探讨

目的 探讨肾移植受者术前群体反应性抗体(PRA)监测对移植肾存活及急性排斥反应发生率的影响.方法 回顾性分析2003年4月至2009年12月于该院行肾移植术的患者共计1 430例次,根据术前PRA检测结果分为阴性组(PRA<10%)和致敏组(PRA≥10%),分析两组间术后一年急性排斥反应发生率和肾存活率的差异;结合临...     

群体反应性抗体检测对肾移植患者的临床意义

目的:了解肾移植受者的HLA体液致敏状态,筛选合适供者及通过PRA变化早期诊断急性排斥。方法:通过微量补体依赖淋巴细胞毒试验检测269例患者的群体反应性抗体(PRA)。结果:肾移植受者中PRA阳性受者移植后排斥反应发生率明显高于非致敏受者(P<0.001),移植后PRA水平升高组的排斥发生率显著高于PRA无变化组(P<0.001)。结论:PRA是预测受者致敏状态的一个敏感指标,对临床筛选合适供者,减少排斥反应,提高移植物存活率及早期诊断排斥具有重要意义。     

肾移植患者术前输血与群体反应性抗体产生的关系

目的探讨肾移植患者术前输血与群体反应性抗体产生的关系。方法选择2003年1月～2006年4月肾移植前1034例患者,其中输血患者374例。采用美国Onelanmbda公司和美国GTI公司抗原板检测群体反应性抗体。结果374例肾移植前输血的患者中,男性136例,女性238例。男性和女性PRA阳性率分别为11．76％（16／136）和20．59％（49／238）。结论输血是导致群体反应性抗体生成的重要因素之一,女性患者抗体产生的概率高于男性。     

群体反应性抗体与供者特异性抗体在肾移植患者中的比较研究

目的研究供者特异性抗体(DSA)与群体反应性抗体(PRA)检测在肾移植患者中的应用价值。方法选择了2007年10月至2009年12月间接受肾移植的128例患者。PRA检测采用美国One lambda公司和美国GTI公司提供的ELISA筛选HLA-I类I、I类混合抗原板。DSA检测使用Micro-AMS HLA-I&II DSA检测试剂盒。结果 128例肾移植患者有13例在术前、术后排斥及恢复期的3个时间点的PRA和DSA呈现不同程度的阳性结果。在128例肾移植患者有10例为再次肾移植患者,其中有9例在术前、术后排斥及恢复期的3个时间点中呈现不同程度的PRA和DSA阳性结果。而初次肾移植患者为118例,仅有4例在术前、术后排斥及恢复3个时间点的PRA和DSA呈现不同程度的阳性结果。结论DSA和PRA检测在肾移植抗体检测中具有同等重要意义。     

尿毒症患者群体反应性抗体的种类与频率

目的研究尿毒症患者群体反应性抗体（PRA）的种类与频率。方法分析2008-2013年本院门诊及住院的2727例尿毒症患者PRA检测结果,血清样本以ELISA方法检测HLA I类、Ⅱ类混合抗原板。将检测结果分为阴性组（PRA〈10%）和阳性组（PRA≥10%）,采用SPSS21.0软件分析不同性别、年龄组患者PRA阳性率的差异。结果2727例患者中,PRA阳性组366例,PRA阴性组2361例,阳性率13.4%。其中,男性1840例,阳性率为10.1%（186/1840）,女性887例,阳性率为20.3%（180/887）,男女阳性率差异有统计学意义（χ^2=53.42,P〈0.01）;各年龄组阳性率比较,结果显示少年组为4.8%（4/83）,青年组为10.0%（85/854）,中年组为16.1%（268/1660）,老年组为6.9%（9/130）,各年龄组的阳性率差异有统计学意义（χ^2=29.44,P〈0.01）。ELISA方法能检出HLA-A、B、CW、DR、DQ位点特异性抗体20种、27种、5种、13种和7种。各位点出现频率较高的抗体种类分别是A2、A25、A23、A24、A66;B7、B13、B57、B44、B60;CW4、CW 6、CW 10、CW 7、CW8;DR11、DR1、DR7、DR9、DR12;DQ6、DQ5、DQ7、DQ8、DQ2,频率分布与中国人群HLA抗原频率分布不尽一致。结论尿毒症患者PRA阳性率女性显著高于男性,不同年龄组阳性率也有显著差异,以少年组最低,中年组最高。针对不同等位基因的HLA抗体产生频率不同。     

移植肾失功患者群体反应性抗体分析

目的 观察和分析移植肾失功患者的群体反应性抗体（PRA）的变化.方法 采用ELISA法对23例移植肾失功患者的PRA进行检测.观察抗HLA-Ⅰ类和抗HLA-Ⅱ类抗体产生的情况,比较两类抗体在轻中度致敏组（PRA 10％～50％）和高度致敏组（PRA 51％～1oo％）中的差别,并对抗供者特异性抗体（DSA）阳性率与PRA水平变化的关系进行统计学分析.结果 23例患者中,PRA阴性10例,阳性13例.抗HLA-Ⅰ类抗体阳性2例（15％）,抗HLA-Ⅱ类抗体阳性7例（5 4％）,抗H,A-Ⅰ＋Ⅱ类抗体阳性4例（31％）.分别检出抗HLA-A、B、Cw,DR、DQ特异性抗体8、6、1、7、5种.检出DSA以抗A11、抗DR7、抗-DR9居多,且DSA阳性率随着PRA水平的升高而增加（x2=4.790,P＜0.05）.结论 肾移植可导致患者血清中抗HLA-Ⅰ类、抗HLA-Ⅱ类抗体水平及DSA阳性率升高.抗HLA-Ⅱ类抗体与移植肾的成功率及远期存活率关系尤为密切.     

肾移植中群体反应性抗体与性别的关联研究

目的：探讨性别在产生群体反应性抗体（penal reactive antibody,PRA)时的差异以及对肾移植的影响。方法：参照肖露露建立的PRA检测方法,对自1991年起10年间的4242例初次或再次等待肾移植的男女患者检查PRA。结果：女性患者每年的PRA阳性率与男性患者每年的PRA阳性率之间存在着明显的差异（P＜0．05）。其中9例肾移植术由于高PRA介导超急性排斥反应的患者,8／9例由于HLA配合程度低造成预后非常差。结论：有妊娠史女性患者比男性患者更易致敏淋巴细胞免疫抗体,因此女性患者应该避免输血和特别重视初次移植。     

两种免疫法联合肾功能指标测定他克莫司血药浓度的比较

背景：不同免疫法测定的他克莫司血药浓度,对免疫抑制作用及毒性反应的预测能力是否有差异,在肾功能异常时是否能够更加敏感的反映患者血药浓度,是值得研究的问题。目的：联合肾功能指标,分析酶联免疫吸附技术和酶增强免疫技术测定他克莫司血药浓度的相关性。方法：收集133例应用他克莫司治疗的肾移植患者血样,分别用酶联免疫吸附技术、酶增强免疫技术测定血药浓度。分析两种方法测定的相同浓度范围内肾功能异常的发生率;分析不同浓度范围内,两种方法测定结果的相关性。结果与结论：在肾功能异常时,比较两种方法测定的浓度,酶联免疫吸附法测定结果均值较高,且波动较大。酶联免疫吸附法测定他克莫司血药浓度5-20μg/L范围内,肾功能异常发生率较酶增强免疫法少,分析显示两种方法测定结果总体差异无显著性意义（r=0.9045,P＞0.05）。以酶联免疫吸附法为标准,在他克莫司血药浓度＜2.0μg/L时,酶增强免疫法测定结果明显较高（P＜0.01）。在血药浓度为≥2.0μg/L时,两种方法测定结果差异无显著性意义（P＞0.05）。说明酶增强免疫法与酶联免疫吸附法相关性较好,均适合于临床常规测定他克莫司的血药浓度,建议结合肾功能指标,细化区分两种测定方法的参考范围。同时,在患者血药浓度极低（＜2.0μg/L）时,不建议采用酶增强免疫法。     

鼠疫耶尔森菌感染动物血清标本中10种抗体检测与分析

目的 分析鼠疫耶尔森菌(Y.pestis)感染动物血清标本中鼠疫抗体的分布规律,寻找新的鼠疫血清学辅助诊断靶标.方法 采用自制的酶联免疫吸附试验板条检测不同种属的Y.pestis感染动物血清标本(狗血清5例、羊血清5例及黄鼠血清14例)中的10种靶标抗体.结果 各靶标抗体在3种不同种属动物血清标本中具有不同的阳性率;抗FI抗体阳性率最高(100.0%),抗YopD抗体的阳性率较高(狗、羊和黄鼠血清标本的阳性率分别为80.0%、100.0%和78.6%),针对LcrV、YPO1089、YPO1613、YPO2131、YPO2118、YPO1435这6个蛋白的抗体在3种血清标本中的阳性率差异较大,抗YPO3827抗体和抗YPO1303抗体在3种血清标本中的阳性率均较低.结论 除抗FI抗体外,针对其他抗原的抗体的分布均存在种属差异,抗YopD抗体有可能成为新的Y.pestis感染辅助诊断靶标.     

血清白喉和破伤风抗体检测方法的建立及应用

目的建立定量检测抗白喉抗体、抗破伤风抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。方法分别用纯化的白喉类毒素、破伤风类毒素作为包被抗原,白喉、破伤风人源血清抗体标准品作为标准品,对供试品和标准品的剂量反应曲线进行拟合,以平行线法建立定量检测抗白喉抗体(Anti-DT)、抗破伤风抗体(Anti-TT)的ELISA方法。并进行方法学验证和应用研究。结果两种定量检测ELISA方法的验证结果均符合规定。定量检测Anti-DT的ELISA方法的定量限为0.084 mU/mL,回收率为97.6%,批内变异系数(CV)≤3.40%,批间CV≤5.05%;检测Anti-TT方法的定量限为0.175mU/mL,回收率为97.5%,批内CV≤2.42%,批间CV≤5.58%。应用上述两种ELISA方法,对白喉破伤风疫苗用于婴儿基础免疫后的免疫原性进行了检测分析和评价。结论所建立的白喉、破伤风血清抗体ELISA检测方法,准确度高,重复性好,适合于一般实验室开展工作,可用于白喉破伤风疫苗免疫接种后的血清学效果评价和白喉破伤风疾病的流行病学研究。     

82例肝细胞癌患者高尔基体蛋白73的检出与分析

目的：通过定量检测肝细胞癌、慢性肝炎肝硬化患者及健康者血清中高尔基体蛋白73（GP73）和甲胎蛋白（AFP）水平,对比分析GP73与AFP的检出率,探讨GP73用于诊断肝细胞癌的临床意义。方法收集健康者、慢性肝炎肝硬化及肝细胞癌患者血清样本,分别采用酶联免疫吸附测定法和化学发光法检测GP73和 AFP。结果在肝细胞癌患者血清中,GP73检出率为75．61％,AFP检出率为40．24％,GP73明显高于AFP ,差异有统计学意义（P＜0．01）;慢性肝炎肝硬化患者GP73检出率为12．58％,AFP检出率为41．67％,GP73检出率明显低于 AFP ,差异有统计学意义（P＜0．01）;健康者GP73检出率为1．67％, AFP检出率为6．67％,两者比较差异无统计学意义（P＞0．05）。在健康者和慢性肝炎肝硬化患者中GP73特异度为93．42％, AFP特异度为77．78％;ROC曲线分析显示GP73和AFP的曲线下面积分别为0．9341和0．8066,GP73与AFP两者联合检测对肝细胞癌的检出率为87．80％。结论 G P73在健康者中检出率和水平极低,慢性肝炎肝硬化患者为12．58％,肝细胞癌患者高达75．61％。ROC曲线分析与检出率基本一致。GP73在肝细胞癌患者中检出率高,特异度强,是早期诊断肝细胞癌的首选标志物。联合GP73和AFP检测可以提高对肝细胞癌的早期诊断率。     

三种梅毒螺旋体抗体检测方法的比较分析

目的比较化学发光法（TP-CLIA）、酶联免疫吸附试验（TP-ELlSA）和梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验（TPPA）对梅毒螺旋体特异性抗体（TP-Ab）检测的意义。方法分别用CLIA、ELISA和TPPA检测患者的1797份血清样本,收集CLIA／ELISA／TPPA／法检测均阳性但临床未明确诊断的标本及结果不一致标本以重组免疫印迹法（RIBA）最终确认。结果三种方法共筛选69例阳性及可疑血清标本。CIIA／EIISA／TPPA法均阳性标本63例,其中52例有临床明确诊断。另11例3种方法检测均阳性但未明确诊断标本和6例检测结果不一致标本用RIBA确证。CLIA法确认阳性66例,阳性率3．67;ELISA法确认阳性65例,阳性率3．62;TPPA法法确认阳性61例,阳性率3．39;CLIA、ELISA及TPPA法敏感性分别为98．51％、97．02％和91．05％;特异性均为99．88;诊断效率分别99．83％、99．78和99．66％。结论CLIA法和ELISA法敏感性均高于TPPA法,不管用何种方法检测对于临床诊断不符的标本均应慎重,必要时用RIBA法补充确认,以排除假阳性。     

ELISA测定血清可溶性HLA—Ⅰ类抗原

目的　建立定量测定可溶性HLA I类抗原的ELISA方法。方法　测定上海地区汉族正常人群血清可溶性HLA I类抗原的含量 ,并进一步研究可能影响这一含量的因素。结果　测得 116例上海地区汉族正常个体血清可溶性HLA I类抗原的含量为 5 2 9 3 2±2 82 88ng/ml。结论　性别和常见HLA A位点抗原型别对血清可溶性HLA I类抗原的含量未造成显著影响。     

ELISA检测血清抗磷脂酶A_2受体抗体在膜性肾病中的应用探讨

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗磷脂酶A2受体抗体(抗PLA2R抗体)滴度在膜性肾病中的应用价值为疾病诊断及病情判断提供更特异的血清学指标。方法选取该院肾内科就诊行肾组织活检并确诊的膜性肾病患者34例,该院住院自身免疫性疾病及肾病综合征、肾功能不全患者32例,健康体检者12例,收集血清检测抗PLA2R抗体并结合血清总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、IgG、IgA、IgM、C3、C4指标,分析其对膜性肾病的诊断性能。结果抗PLA2R抗体滴度在膜性肾病组、疾病对照组、健康对照组中位数依次为22.1、2.0、2.0RU/mL,膜性肾病组与其他两组间比较差异有统计学意义(P0.05)。抗PLA2R抗体在膜性肾病组阳性17例(阳性率50%),阴性17例,疾病对照组及健康对照组均为阴性,其特异度与阳性预测值为100%。膜性肾病组TP、ALB、IgG与疾病对照组、健康对照组比较差异有统计学意义(P0.05);抗PLA2R抗体与血清TP、ALB、IgG、IgA、IgM、C3、C4的相关系数依次为-0.382、-0.344、-0.502、-0.295、0.062、0.005、0.241,与TP、ALB、IgG、IgA呈负相关(P0.01),与C4呈正相关(P0.05),与IgM、C3无相关性(P0.05)。结论抗PLA2R抗体在膜性肾病诊断中具有较高的特异性,可作为无法行肾活检患者的必要和特异性血清学检测指标,定量检测有助于病情判断。     

丙型肝炎病毒不同编码区重组抗原在抗体检测中的应用

目的　探讨丙型肝炎病毒 (HCV)不同编码区重组蛋白片段的免疫反应性及其在抗体检测中的应用。方法　分别以 4种HCV单片段抗原 (C、NS3、NS4或NS5 )检测抗 HCV抗体阳性血清 ;以 4种单片段抗原的混合物 (MIX)检测抗 HCV抗体阳性血清、大学生体检血清和抗 HCV抗体阴性质控血清。结果　 90份抗 HCV抗体阳性血清中共有 75份可与一种或多种单片段抗原反应 ,阳性率分别为 70 .0 % (C)、6 1.1% (NS3)、5 2 .2 % (NS4 )、4 4 .4 % (NS5 ) ,其中仅与C、NS3、NS4和NS5一种抗原发生反应的分别有 8份、1份、2份和 3份血清标本 ;90份抗 HCV阳性血清经MIX抗原检测 ,阳性率为 83.3% (75 / 90 ) ;10 0份大学生血清和39份阴性质控血清经混合抗原检测均阴性。结论　HCV不同编码区重组蛋白片段有不同的免疫反应性 ,在发展抗 HCV抗体诊断试剂时 ,应采用各种不同编码区的混合抗原。     

1801例抗核抗体检测结果及其临床分析

目的 探讨抗核抗体(ANA)的流行病学特征及其与临床的相关性.方法 回顾性分析1 801例ANA检测结果及其临床资料.结果 (1)ANA阳性604例,总阳性率为33.5%,其中82.5%为女性患者.60岁以下各年龄组女性患者阳性率均高于男性(P<0.05),而以36～45岁组阳性率最高.(2)ANA荧光模型以细胞核型荧光(67.4%)最常见,以核颗粒型(43.7%)为主.(3)ANA阳性患者特异性抗体总阳性率为47.8%.混合型特异性抗体阳性率最高(57.8%),细胞浆型(12.7%)最低(P<0.01).抗核点型、抗核膜型、抗着丝点型及抗中心粒抗体阳性患者均未检出特异性抗体.(4)ANA阳性者66.2%诊断为自身免疫性疾病(AID),显著高于ANA阴性者(17.0%),差异有统计学意义(P<0.01).混合型ANA组73.6%诊断为AID,其次为细胞核型ANA组(70.2%),最低为细胞浆型ANA组(36.9%),后者与前两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).系统性红斑狼疮(SLE)组ANA阳性率最高.SLE、类风湿关节炎(RA)、混合结缔组织病(MCTD)、系统性硬皮病(SS)、多发性肌炎(PM)/皮肌炎(DM)、重叠组织病患者ANA阳性率与非AID患者比较,差异有统计学意义(P<0.05),而强直性脊柱炎(AS)、成人斯蒂尔病(STILL)患者与非AID患者比较,差异无统计学意义.SLE、RA、MCTD患者ANA模型均以核颗粒型为主.滴度达1∶3 200者89.1%诊断为AID,其次为滴度达1∶1 000者(72.2%)与滴度达1∶320者(44.7%),3组间比较,差异均有统计学意义(P=0.000).结论 不同性别和年龄患者ANA阳性率存在差异;ANA存在多种荧光模型,不同荧光模型ANA阳性患者特异性抗体检出率存在差异,部分ANA阳性患者不能检测出特异性抗体;高滴度ANA对于AID诊断有重要意义,但ANA荧光模型对不同AID疾病的诊断无特异性.     

Screening and characterization of specific anti-lipopolysaccharide antibodies in Belgian blood donors by enzyme-linked immunosorbent assays

The goal of this project was to find and collect high concentrations of endotoxin-specific antibodies for therapeutic IgG- or IgM-enriched preparations. Various enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs) were developed to perform longitudinal studies of the serological response to a large panel of smooth and rough purified lipopolysaccharide (LPS) extracts in a population of healthy blood donors. To accomplish this, 1612 human serum samples from volunteer blood donors collected by seven different blood banks in Belgium were screened and specific IgM and IgG activities were measured. Approximately 17% of the donors had anti-LPS concentrations higher than 40 mg L⁻¹. Of these, 10.9% had anti-smooth LPS antibodies, 3.7% had anti-rough LPS antibodies and 2.8% were found to be positive towards both types of LPS. The mean anti-LPS antibody concentration was 8 mg L⁻¹ for rough LPS and 14 mg L⁻¹ for smooth LPS. Age- and sex-related distributions of the activities indicated that the greatest prevalence of high anti-LPS concentration was in women aged 40–49 years and in men older than 60 years. Differential absorption experiments showed that the pooled serum of selected blood donors contained a mixture of specific and cross-reacting antibodies. We detected predominantly anti-LPS activities due to the IgG₁ and IgG₂ subclasses. The range of specificities to different LPS was increased by the pooling of selected sera. It was concluded that pools of naturally occurring specific anti-LPS immunoglobulin antibodies may be obtained in Belgium by screening blood donors using ELISAs that we have developed.