肠出血大肠埃希菌O157:H7与食品安全

肠出血性大肠埃希菌（Enterohemorrhagic Escherichia coli，EHEC）主要包括O157：H7和O26：H11，其中O157：H7是出血性肠炎的主要致病菌，自1982年由美国首次报道了肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O157：H7引起的出血性肠炎的爆发以来，EHEC的感染已经成为世界性问题。世界卫生组织已将O157：H7列为新的食源性疾病病原菌。尽管EHEC已被研究了近20年，但对由该菌引起的致命的溶血性尿毒综合症（HUS）和血小板减少性紫癜（TTP）仍没有有效的治疗方案。     

大肠埃希菌O157:H7分离鉴定过程中赫尔曼埃希菌的鉴别

目的：鉴别大肠埃希菌O157：H7和赫尔曼埃希菌。方法：观察菌株在山梨醇麦康凯，营养琼脂及Chromagar O157培养基上菌落形态。生化试验检测菌株的生化特性，血清凝集试验检测菌株的O157和H7抗原，聚合酶链反应法检测O157和H7特异性基因。结果：在营养琼脂培养基上，5株赫尔曼埃希菌均产黄色色素，2株O157：H7菌不产色素；在Chromagar O157培养基上，2株O157：H7菌株呈紫红色，2株赫尔曼埃希菌株呈蓝色，其余3株赫尔曼埃希菌株呈黄绿色。O157：H7菌株KCN试验均为阴性，而赫尔曼埃希菌阳性。O157和H7抗血清坡片凝集试验，7析均为强凝集。O157：H7菌株与O157单克隆抗血清玻片凝集试验均为强凝集，而赫尔曼埃希菌均不凝集。O157：H7菌株O157和H7特异性基因均为阳性，赫尔曼埃希菌均为阴性。结论：赫尔曼埃希菌与O157多克隆抗血清有交叉反应，但单克隆抗血清能区分O157：H7和赫尔曼埃希菌。KCN试验和特异性基因检测亦能鉴别这两种菌。在营养琼脂和Chromagar O157培养基上的菌落形成也有助于两菌的区分。     

浙江省首株产志贺毒素大肠埃希菌0157：H7的分子生物学特性研究

目的：了解自浙江省杭州市腹泻婴儿中分离的1株大肠埃希菌O157：H7（HZI-11株）的分子生物学特性。方法：应用ATB1525细菌半动化生化鉴定系统鉴定菌种。应用0157特异性抗血清玻片凝集试验、H7特异性抗血清试管凝集试验、以及PCR检测O抗原特异性rfbE基因和H7特异性fliC基因，进行菌株血清型的鉴定。应用多重Real-time PCR和常规PCR检测stx1、stx2、hly和eae毒力基因。对菌株进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型，并与国内代表菌株进行比较。ATB1525药敏检测仪和纸片法检测菌株的抗药性。结果：细菌生化鉴定为大肠埃希菌，山梨醇阴性。血清型为O157：H7。毒力基因stx2、hly和eae均阳性，stx1阴性。PFGE谱带同江苏分离O157：H7菌株几乎完全相同，带型的相似度为97％。结论：该菌株为浙江省首株产志贺毒素大肠埃希菌（STEC）O157：H7。与国内近年在江苏等地流行的STEC O157：H7菌株密切相关。STEC O157：H7已开始对浙江地区的人民健康构成了威胁。     

湖北省首次分离出肠出血性大肠埃希菌O157：H7

目的：为了解肠出血性大肠埃希菌O157:H7（EHEC O157:H7）在我省的动物宿主种类和菌型特征，制定相应流行病防治对策。方法：采用传统方法，在6～10月份肠道传染病高发季节，对武汉市3大养殖场、屠宰场的肉猪、奶牛及武汉7大城区的农贸商场的水产品进行调查采样，共采集811份样品，进行EHEC O157:H7检测。结果：341份猪粪样品中检出1株EHEC O157:H7，阳性率为0.29%；255份奶牛粪便样品中检出7株EHEC O157:H7，阳性率为2.75%；其他类标本中未检出。分离的这8株阳性菌株与传统的EHEC O157:H7存在许多不同之处，他们均发酵山梨醇，大部分菌株不分解棉子糖，也存在不分解卫茅醇的菌株，而β-葡萄糖醛酸酶试验为阳性，在致病因子上，检测现有的几种毒力基因均为阴性。结论：在我省首次检出8株EHEC O157:H7，说明其普遍存在于动物体内，对环境、食品构成较大威胁。     

河南省6类食品中肠出血性大肠埃希菌O157：H7污染状况调查

目的：调查肠出血性大肠埃杀菌O157：H7在河南省6类食品中的分布特征、污染状况及季节分布。方法：依据河南省自然地理概况分5个采样区域，按夏冬季在销售环节随机取样。选择性增菌培养后，用O157胶体金试剂筛查，免疫磁珠富集后分离病原菌，应用全自动生化鉴定系统和血清学的方法进行鉴定。结果：1463份食品中共检出肠出血性大肠埃希菌O157：H7共28株，检出率1．9％，其中鲜肉和生食蔬菜检出率较高，分别为3．3％和3．2％。夏季检出率（2．5％）明显高于冬季检出率（1．1％）。结论：肠出血性大肠埃希氏菌O157：H7在食品中污染较为严重，其检出率的高低与O157：H7感染性腹泻的流行强度呈正相关。应加强畜禽屠宰、蔬菜生产和销售环节的监督监测，预防O157食源性暴发。     

肠道出血性大肠埃希菌O157:H7的研究进展

新发现的病原微生物和重新抬头的病原微生物 ,是当前世界医学界面临的一个新的课题。O157:H7大肠埃希菌就是其中之一。自 1982年O157:H7;大肠杆菌在美国首次被分离并确认为食物中毒新型致病菌以来 ,此菌在世界范围内发生过多次爆发 ,造成严重危害。 1999年 8月 2 9日 ,美国华盛顿县发生了一起由肠道出血性大肠埃希菌 (EHEC)O157:H7引起的 116人的食物中毒 ,其中 65人住院治疗 ,11名儿童出现溶血性尿毒综合征 (HUS) ;2人死亡 ,1名 3岁女孩死于HUS ;1名 79岁男性死于HUS及血栓形成后的血小板减少性紫癜。这一食物中毒引起了美国纽约州…     

大肠埃希菌O157：H7特异基因检测与毒力基因分析

目的：对江苏省2000和2001年分离的经血清玻片凝集试验初筛为大肠埃希菌O157：H7（E.coliO157:H7)的菌株进行O157O抗原及H7抗原特异性基因检测，了解2000年监测点宿主动物分离O157菌株毒力基因携带率及毒力基因图谱。方法：用聚合酶链反应法检测O157特异基因，H7特异基因，多重引物聚合酶链反应法检测VT1，VT2，eaeA,hly等毒力基因并进行分析。结果：134株血清玻片凝集试验初筛为E.coliO157:H7的菌株经特异基因检测确定为E.coliO157的占72.4%(97/134),E.coliO157:H7的仅为29.1%(39/134)；非O157菌株占26.9%(36/134)，有44.3%(58/134)的O157菌株鞭毛抗原不是H7。2000年宿主动物分离菌株，经特异基因检测为非O157的不携带毒力基因（0/18）；为E.coliO157:H?的菌株，毒力基因携带率为10.7%(3/28)；确定为E.coliO157:H7的菌株，毒力基因携带率高达93.1%(27/29)。且毒力基因型以VT2 eaeA hly为主。结论：特异性基因检测鉴定E.coliO157:H7，可大大减少血清玻片凝集试验的误判，结合毒力基因检测，可分析E.coliO157:H7菌株毒力基因型的变化，对制定切实有效的防制对策控制E.coliO157:H7流行具有重要意义。     

2000～2005年海盐县肠出血性O157:H7大肠埃希菌监测

目的：了解海盐县肠出血性O157：H7大肠埃希菌的分布及流行情况。方法：采取肠道门诊病人肛拭样和动物宿主粪便，采用免疫磁珠分离和大肠杆菌O157特异性单克隆抗体胶体金快速诊断技术以及特定培养基分离鉴定技术检测O157：H7大肠埃希菌。结果：从1例腹泻患者的大便中检了了1株O157：H7大肠埃希菌，不产生类志贺毒素；从动物粪便中检出7株O157大肠埃希菌。结论：海盐地区人群中感染率较低，且为非产毒株；猪、鸡是我地区O157：H7大肠埃希菌的主要贮存宿主动物。     

大肠埃希菌O157∶H7携带stx2::IS1203v基因研究

目的了解中国部分地区大肠埃希菌O157：H7菌株携带志贺毒素基因变异状况。方法采用聚合酶链反应扩增志贺毒素基因，使用核苷酸序列测定判断是否存在志贺毒素的新变种，用HeLa细胞毒性实验研究其细胞毒性的变化。结果1992—2002年中国部分地区分离到的289株产志贺毒素的大肠埃希菌O157：H7中有3株菌携带的志贺毒素2（stx2）基因有1．3kb的插入序列（IS）插入，且这段IS和IS1203变种（IS1203 variant，IS1203v）有100％的核苷酸序列同源性。IS1203v插入到3株大肠埃希菌O157：H7 stx2基因的位置及开放性读码框（ORF）方向有所不同。除此之外，3株菌原有的stx2基因序列完全一致且为Stx2原型毒素。和Stx2原型毒素相比，这3株携带stx2：：IS1203v基因的菌株对HeLa细胞的毒性明显降低。结论分离到IS1203v插入stx2基因的大肠埃希菌O157：H7菌株；IS1203v的插入可导致对HeLa细胞的细胞毒性降低。     

2004-2007年云南省肠出血性大肠埃希菌O157：H7监测分析

肠出血性大肠埃希菌O157：H7（O157：H7）是近年来新发现的危害严重的肠道致病菌。自1982年美国首次暴发O157：H7感染性腹泻以来,世界各地陆续有疫情出现。1999年我国许多地区发生O157：H7感染性腹泻暴发,O157：H7感染性腹泻已成为威胁人群健康的重要公共卫生问题.2002年以前云南省虽未发现O157：H7肠出血性大肠埃希菌病例,但从市售蔬菜、猪、鸡、鱼内脏及牛粪中都曾经分离到OO157：H7,为了解云南省人、动物O157：H7带菌状况,动态观察O157：H7,大肠埃希菌的分布特征及流行趋势,为制定有效的防制对策提供依据,于每年8～10月份开展O157：H7监测,现将2004—2007年监测结果报告如下。     

食品中肠出血性大肠埃希菌O157:H7的PCR检测

目的建立快速准确检测食品中肠出血性大肠埃希菌O157：H7的方法。方法采用多重聚合酶链式反应技术（MPCR）特异性扩增肠出血性大肠埃希菌O157：H7的STX、rfbE、fliC基因。结果分别在228，378，709bp处扩增出3个目的基因片段，且只有肠出血性大肠埃希菌O157：H7获得扩增，其他菌种扩增均呈阴性。结论PCR方法比传统细菌检测方法更特异、快速、灵敏和简便，为食品中肠出血性大肠埃希菌O157：H7的快速检测提供了新的手段。     

宝鸡市食品中O157：H7大肠埃希菌调查

目的对宝鸡市食品中O157：H7大肠埃希菌的污染状况进行监测并分析。方法按照《食源性致病菌监测工作手册》的要求,用改良EC肉汤增菌,接种改良CHROMagar O157显色琼脂平板,血清和生化系列证实。结果在十二类689份食品中分离到O157：H7大肠埃希菌2株,分别为采自超市的鸡翅和农贸市场的羊肉,检出率为0．29％。结论宝鸡市食品中存在O157：H7大肠埃希菌的污染,虽然检出率较低,这可能与宝鸡市不是O157：H7大肠埃希菌的流行地区有关,但监测是一项长期的工作,应引起有关部门的高度重视,防患于未然。     

大肠埃希菌O157:H7国内流行株新K抗原的发现

大肠埃希菌抗原主要有O抗原和H抗原,相当部分菌株还存在K抗原。K抗原与大肠埃希菌的致病力存在一定关系。我们研究发现,国内一些O157:H7临床标本分离株存在“O”不凝集现象,有K抗原存在的可能性。经实验证实,在分离自腹泻患者粪便标本的3株O157:H7菌株中发现一种新的K抗原(L型)。 1.材料与方法:①试验菌株共3株,编号分别为1304、M45、2364,分离自江苏省腹泻患者粪便标本,经生化鉴定、血清分型及基因检测证实为大肠埃希菌O157:H7。L型K抗原标准菌株33株,由中国药品生物制品检定所提供。②     

武汉市大肠埃希菌O157:H7监测分析

肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157：H7是一种新型的致病性菌，能引起人类出血性腹泻和溶血性尿毒综合征。为了掌握武汉市肠出血性大肠埃希菌O157：H7在宿主动物、腹泻病人及食品中的带菌和菌株毒力基因情况，本文于2003年进行了肠出血性大肠埃希菌O157：H7宿主动物带菌情况调查。并在腹泻及肾衰患者中进行病原检索和食品监测。现将调查结果报道如下。     

EHEC 0157：H7粘附Caco-2细胞缺陷突变株的构建

目的：构建对肠上皮细胞粘附缺陷的肠出血性大肠埃希菌O157：H7（EHEC O157）突变株，为体内、体外研究其粘附机制提供可用工具。方法：将pSC101和mini—Tn5Km2分别通过转化和结合导入O157Sakai菌株中，筛选粘附力缺陷的转化子感染Caco-2细胞株，观察Caco-2单层细胞中的微菌落数量和mini-Tn5Km2插入位点。结果：经诱变，共分离到3组粘附缺陷突变株，1组完全丧失了粘附力，2组粘附力减弱，3组的粘附力更弱。1组和3组拥有LEE岛上多基因的转座子插入，而2组mini-Tn5Km2的插入位点在LEE岛之外。结论：O157Sakai的肠道粘附能力可能与LEE岛的Ⅲ型分泌系统有关。     

市售牛肉中检出不产毒肠出血性大肠埃希菌O157:H7

肠出血性大肠埃希菌(EHEC)因其引起出血性肠炎而得名，O157：H7是最主要的血清型之一。O157：H7是一种较新的致病菌，除出血性肠炎外还能引起溶血性尿毒综合征(HUs)、血栓性血小板减少性紫癜(TTP)，甚至死亡。该菌主要通过食物传播，动物是其主要的宿主。自1982年首次在美国爆发的出血性肠炎(HC)中分离到病原菌以来，在北欧、日本、加拿大、美     

我国部分产生志贺毒素肠出血性大肠埃希菌O157：H7脉冲电场凝胶电泳分型

目的 探讨我国部分地区产生志贺毒素的肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O157：H7菌株的分布，流行以及分型情况。方法 用脉冲电场凝胶电泳（PFGE）方法进行分型，辅以药物敏感性试验对51株产生志贺毒素的EHECO157：H7菌株进行研究。结果 根据细菌染色体DNA的XbaI酶切图谱，可将从江苏省徐州市等地分离的51株产生志贺毒素的EHECO157：H7菌株分成8个PFGE型别（PFGE1-PFGE8），宁夏菌株为PFGE1型和2型，徐州菌株有6个PFGE型，1986-1988年的分离菌株属于PFGE7型，1999、2000年病人分离株的优势型别分别是PFGE5型与3型，1999年爆发性流行期间从患者分离的5株菌属于PFGE5型，从家畜家禽的粪便，食品，蔬菜等标本分离的19株菌，可以分为PFGE3-6等4个型别，其中，PFGE5型占优势（10株菌）。结论 爆发性流行的发生与携带病原菌的家畜家禽粪便污染的食品，蔬菜等有关，从我国部分地区分离的EHECO157：H7菌株的PFGE型别有地区性差异。     

从海产品中检出大肠埃希菌O157:H7

目的：调查南京市饮食行业海鲜类食品受大肠埃希菌O157：H7污染的状况。方法：随机采取南京市各大宾馆的海水产品，进行大肠埃希菌O157：H7的检测，进行常规生化和血清学、毒力基因的PCR检测。结果：从一份文蛤样品中成功分离到了1株大肠埃希菌O157：H7。结论：提示我们该菌的宿主范围比较广，须引起高度重视，加强防范，遏止其流行势头。     

新疆检出肠出血性大肠埃希菌O157∶H7感染的人源株

根据卫生部关于监测方案的要求,开展了全新疆地区肠出血性大肠埃希菌(EHEC)0157: H7的监测.从1例住院患者中检出O157: H7菌株,现将结果报告如下.     

江苏省东台市大肠埃希菌O157:H7监测

为了解东台地区1999-2001年和2005-2006年间肠出血性大肠埃希菌(E.coli O157:H7)宿主动物和腹泻患者带菌情况,按照《江苏省大肠杆菌感染性腹泻监测工作实施计划》及《国家大肠杆菌感染性腹泻监测方案》在东台市开展E.coli O157:H7监测工作.