肝细胞肝癌组织中整合素α6及β1 mRNA的表达研究

原发性肝细胞肝癌（HCC）的预后远较其他癌症者，早期侵袭转移是重要因素之一，导致其5生存率极低。在肿瘤侵袭进程中，必须成功地完成3个过程：黏附细胞外基质（ECM）的蛋白质，     

人肝细胞性肝癌组织转移相关分子的比较蛋白质组学研究

目的 应用比较蛋白质组学方法研究肝细胞性肝癌(HCC)转移相关的关键蛋白分子。方法 用双向凝胶电泳(2DE)对有转移的HCC组织和未发生转移的HCC组织总蛋白进行分离，两组间差异蛋白点用质谱和数据库搜索鉴定，并在蛋白质和mRNA水平上进一步检测验证。结果 鉴定出l6个差异表达蛋白，包括S100钙结合蛋白(S100)、热休克蛋白27(HSP27)、细胞角蛋白18(CK18)等。对在转移性HCC组织中表达显著增高的HSP27，应用western blot分析在蛋白水平上验证了2DE结果，RT-PCR检测出两组问mRNA水平也存在差异，但不显著，免疫组织化学检测显示HSP27主要定位于肝细胞胞浆内。结论 HCC转移与多种蛋白表达相关，其中HSP27高表达可能在转移中发挥作用，可能为潜在的判断HCC转移的分子标记或控制转移的治疗靶点。     

DLC-1基因在肝细胞癌组织中表达的研究

目的 研究肝癌缺失基因-1（DLC-1）在人原发性肝癌组织中的表达及与肝细胞癌侵袭转移的关系。方法收集51例复旦大学附属中山医院外科手术切除的肝细胞癌及癌旁正常组织标本,用荧光定量RT-PCR方法分析组织中DLC-1基因的表达。结果在51对配对的肝细胞癌与癌旁无瘤肝组织中,前者DLC-1基因表达水平明显低于后者（P〈0．01）,且高侵袭性肝细胞癌组明显低于低侵袭性肝细胞癌组（P〈0．05）。结论DLC-1基因在HCC组织中呈低表达,其表达水平与其侵袭性高低相关。     

肝细胞癌的靶向治疗 通过α-胎蛋白RNA的特异性取代进行肝癌细胞的靶向治疗

尽管肝细胞癌（HCC）是世界上最常见的恶性肿瘤之一，发展更特异和更有效的治疗手段非常必要。在这项研究中，作者描述了一种基于反式剪接核酶介导的对HCC相关的特异性RNA进行取代的新治疗方法。通过对表达。α-胎蛋白（AFP）的肝癌细胞中具有治疗活性新转录子的选择，     

原发性肝细胞癌组织中P16蛋白表达的意义

目的研究原发性肝细胞癌中Ｐ１６蛋白的表达程度与转移及预后的关系．方法应用免疫组织化学ＬＳＡＢ法对４５例原发性肝细胞癌组织及癌旁组织进行Ｐ１６蛋白表达的检测，并结合临床资料进行分析．结果肝癌肿瘤区及癌旁区Ｐ１６蛋白阳性表达率分别为４００％和８４４％，两组比较，有显著性差异（Ｐ＜００５）．Ｐ１６蛋白阳性表达率在无转移的肝癌中为６０５％，有转移组为２００％；高、中和低分化的肝癌分别为５００％，２７８％和２２２％．故Ｐ１６蛋白阳性表达在肝癌患者高分化与中和低分化比较有显著性差异（Ｐ＜００５），转移与非转移组比较有极显著性差异（Ｐ＜００１）．结论Ｐ１６蛋白表达与肝细胞癌增殖、分化程度及预后有关     

hMLH1和hMSH2蛋白在肝细胞癌中的表达及意义

本研究采用免疫组织化学法 ,对ＤＮＡ错配修复 (ＭＭＲ)系统中 2个主要基因ｈＭＬＨ1和ｈＭＳＨ2在肝细胞癌 (ＨＣＣ)中的表达状况进行了检测和相关指标分析 ,以进一步了解ＭＭＲ路径在ＨＣＣ发生中的可能作用。一、对象与方法1 .研究对象 :随机选择第二军医大学东方肝胆外科医院病理科 2 0 0 0年 6月～ 7月期间连续手术切除的ＨＣＣ标本 50例 ,患者中男 40例 ,女 1 0例 ,年龄范围 35～ 76岁 ,所有患者术前均未做过放疗或化疗。于癌和癌旁肝组织交界处取材 ,1 0 %中性甲醛固定 ,常规石蜡包埋 ,4μｍ连续组织切片 ,分别行常规ＨＥ染色和ｈＭ…     

肝细胞癌组织CEA表达与肿瘤转移的关系

癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)是Gold等于1965年首先从结肠癌中分离出来的一组酸性糖蛋白,该蛋白在胚胎时期含量较高,而成人则含量较低。曾认为此抗体是消化道种瘤所特有,近年研究表明,CEA广泛存在于各种肿瘤,本拟通过免疫组织化学(LSAB)的方法,检测了56例HCC组织中CEA的表达,探讨它的表达与HCC肿瘤的大小、单／多发、肝硬化、组织分化、癌栓形成和转移等的关系。     

肝细胞癌组织中Ebp1蛋白的表达变化及意义

目的观察肝细胞癌(HCC)组织中ErbB-3结合蛋白Ebp1的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测36例HCC组织和癌旁组织中的Ebp1蛋白。结果 HCC组织中Ebp1蛋白阳性20例(55.6%),癌旁组织中3例(8.3%);两者比较,P<0.01。HbsAg阳性者Ebp1蛋白阳性表达显著高于HbsAg阴性者(P<0.01)。结论 HCC组织中Ebp1蛋白表达上调;Ebp1在HCC发生发展中发挥重要作用,且其表达与HBV感染有关。     

肝细胞癌中周期蛋白A表达与乙型肝炎病毒整合的相关性研究

目的探讨周期蛋白A与乙型肝炎病毒(HBV)整合的关系及其在肝细胞癌(HCC)中的表达和临床意义.方法分别采用聚合酶链反应(PCR)、逆转录(RT)-PCR和western印迹法检测35例HCC及其相邻非肿瘤组织中的周期蛋白A基因、mRNA和蛋白的表达;采用PCR和southern印迹法检测HCC标本中的HBx基因的整合.结果35例HCC中周期蛋白A蛋白过表达率为60.0%(2l/35),mRNA过表达率为42.9%(15/35),基因扩增率为2.8%(1/35).周期蛋白A蛋白过表达与肿瘤大小之间差异有显著性(P＜0.05).结论HBV DNA整合与周期蛋白A基因表达改变有相关性,周期蛋白A基因蛋白表达失控是肝细胞癌变中的早期事件,并且可能是HBV影响肝细胞正常细胞周期的重要因素之一.     

肝细胞癌变过程中TGF-β1及TNF-α的动态表达与改变

目的 探讨肝癌形成过程中转化生长因子（TGF）-β1及肿瘤坏死因子（TNF）．a的动态表达及其改变机制。方法 雄性SD大鼠以2-乙酰氨基芴（2-FAA）喂饲制备肝癌模型，经病理组织学（HE染色）分析肝细胞的形态学变化，采用酶联免疫吸附法（ELISA）在癌变不同时期定量观察肝细胞及血清中TGF-β1和TNF-α的动态变化。结果 大鼠在喂饲2-FAA后，肝细胞在诱癌早期发生颗粒样变性，中期出现不典型增生，后期可见大量癌巢结节，均为高分化肝细胞癌。在正常肝及血中仅见较低水平的TGF-β1和TNF-α表达。诱癌后，随肝细胞组织形态变化，肝组织及血清中TGF-β1和TNF-α表达水平逐渐增强，癌变组和癌前病变组均显著高于正常对照组，且血与肝TGF-β1和TNF-α表达显著正相关。结论 癌变早期TGF-β1和TNF-α呈过表达状态，具有相互调节、相互协同作用，与肝癌发生发展密切相关。     

p53蛋白在人肝细胞癌及其肝内转移灶和癌栓中的表达及意义

应用ＬＳＡＢ法测定了５２例人肝细胞癌（ＨＣＣ）及其肝内转移灶和癌栓中Ｐ５３的表达水平，并对Ｐ５３表达与ＨＣＣ浸润转移和预后关系进行了前瞻性研究。结果表明，在原发癌灶、肝内转移灶和癌栓中Ｐ５３表达无显著性差异；在分化较差和包膜浸润的ＨＣＣ Ｐ５３高表达；转移组原发癌癌栓较单发癌癌栓Ｐ５３高表达；Ｐ５３高表达的ＨＣＣ术后复发率较高，预后较差。提示Ｐ５３基因及其蛋白产物在ＨＣＣ浸润播散过程中起重要调控作     

Smad4和TGF-βRⅡ在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨转化生长因子β(TGF-β)通路中Smad4蛋白与转化生长因子βⅡ型受体(TGF-β RⅡ)蛋白的变化及其在肝细胞癌中可能的作用机制.方法用免疫组化SABC法检测45例石蜡包埋人肝细胞癌标本及36例癌旁组织中Smad4、TGF-β RⅡ蛋白表达情况.结果 45例肝癌组织中,Smad4、TGF-βRⅡ阳性表达率分别为51.5%和42.2%.肝细胞癌组织中Smad4、TGF-β RⅡ阳性表达与癌旁组织比较均明显降低(P＜0.05),且与包膜是否完整和有无癌栓有关(P＜0.05),TGF-βRⅡ与肝细胞癌组织分化程度有相关性(P＜0.05).结论肝细胞癌组织中Smad4、TGF-β RⅡ阳性表达均降低,Smad4及TGF-β RⅡ的丢失、功能失活对诱发肝细胞癌及肝细胞转移都起到一定作用.     

erb-B受体家族在肝细胞癌中的表达及其意义

erbB受体家族是细胞生长、分化和存活的重要调节因子。其成员有表皮生长因子受体(EGFR)、cerb-B2、cerb-B3及c-erbB4。在mRNA水平上研究erbB受体家族各基因与肝癌关系目前鲜见报道。本研究应用逆转录聚合酶链反应(RTPcR)方法检测肝癌患者癌组织及癌旁组织中erbB受体家族mRNA的表达情况，并探讨它们与肝癌发生发展、复发转移的意义。     

宫颈鳞癌整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶蛋白的表达及生物学行为

目的探讨宫颈鳞癌组织中整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶(HPA)蛋白的表达及临床意义。方法应用组织芯片技术结合免疫组化方法(SP法)检测68例宫颈鳞癌组织和20例宫颈正常组织整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶(HPA)蛋白表达情况,分析两者在宫颈鳞癌组织中的表达相关性及生物学行为。结果宫颈鳞癌组织整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶蛋白的阳性表达率分别为77.9%和72.1%,均高于正常宫颈组织(P0.05);整合素α5β1、HPA蛋白均与宫颈鳞癌的分化程度、临床分期、淋巴结转移和浸润深度显著相关;整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达呈现正相关性(r=0.594)。结论整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶蛋白高表达与宫颈鳞癌的发生、发展有关,具有正协同作用,并可作为判断宫颈鳞癌浸润、转移及预后的预测因素。     

原发性肝细胞癌组织中PDCD5、Caspase-3蛋白的表达变化及意义

目的 观察原发性肝细胞癌组织中程序化细胞死亡分子5（PDCD5）、Caspase-3蛋白的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化二步法检测70例原发性肝细胞癌组织及30例癌旁组织中的PDCD5、Caspase-3蛋白。结果PDCD5蛋白在肝细胞癌组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为35．7％（25／70）、63．3％（19／30）,两者相比,P〈0．05。Caspase-3蛋白在肝细胞癌组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为31．4％（22／70）、70．0％（21／30）,两者相比,P〈0．05。PDCD5、Caspase-3在肝细胞癌组织中的表达与组织分级有关（P〈0．05）,而且两者的表达呈正相关（r=0．587,P〈0．05）。结论PDCD5、Caspase-3蛋自在肝细胞癌组织中的表达均明显下降,并与肝癌生物学行为密切相关。     

原发性肝细胞癌组织中Cyclin D1的表达及意义

目的探讨Cyclin D1在原发性肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其在HCC发病中的作用。方法采用免疫组化法检测50例HCC、20例正常肝组织中的Cyclin D1。结果HCC中Cyclin D1阳性表达率为44.0％（22／50）,正常肝组织组均为阴性表达,两者相比P〈0.001;Cyclin D1的阳性表达率与HCC的肝内转移和肝癌的分化程度有关（P均〈0.05）,与患者术后3a生存期相关（P〈0.05）。结论Cyclin D1在HCC的发生发展过程发挥作用,检测Cyclin D1有助于HCC的预后判断。     

细胞凋亡与细胞增殖在人肝细胞癌中的表达和意义

目的：为了解人肝细胞癌中细胞凋的形态与分布规律，探索细胞凋亡标记率和增殖标记率与肝细胞癌组织学分级的关系。方法：对21例人肝细胞癌和17例慢性肝病分别作TUNEL标记和PCNA免疫组化检测，采用图像细胞仪作阳性细胞计数。结果：(1)细胞核染色质浓缩、边聚、胞浆嗜酸性变及核周空晕与TUNEL标记有极好的相关性：(2)凋亡细胞多呈弥散分布，以癌坏死区周围多见，包膜浸润处少见；(3)增殖细胞和凋亡细胞率与肝癌组织学分级呈正相关，Ⅲ级组肝细胞癌中增殖细胞率为278±6．4高于Ⅱ级组141±35(P<0．01)，又高于Ⅰ级组7．4±0．8(P<0.001)，Ⅲ级组肝细胞癌中凋亡细胞率为21±0．97高于Ⅱ级组0.92±O.26(P<0.05)，又高于Ⅰ级组0．45±0.08(P<0．001)(4)包膜浸润和门脉癌栓组凋亡细胞率和增殖细胞率均高于无包膜浸润和门脉癌检组结论：本研究提示细胞凋亡和细胞增殖与肝细胞癌组织学分级、包膜浸润和门脉癌检密切相关。     

转录因子Sp1在肝细胞癌中的表达

目的通过研究转录因子Sp1在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及转化生长因子（TGF）B1对肝癌细胞中Sp1mRNA转录表达的影响,探讨Sp1在HCC中表达的意义及其在细胞凋亡中的作用。方法免疫组织化学方法对51例HCC组织与10例良性病变而切除的正常肝组织中转录因子Sp1进行蛋白检测;体外培养肝癌细胞株HepG2,施加外源性TGFβ1,逆转录一聚合酶链反应方法检测HepG2细胞中Sp1mRNA的表达,并用流式细胞仪检测细胞受到干预后的凋亡情况。结果Sp1蛋白在HCC组织中的表达率明显高于正常肝组织（P〈0．01）;施加外源性TGFβ1与对照组相比HepG2细胞Sp1mRNA的表达显著降低（P〈0．01）,且HepG2细胞凋亡率随着TGF[31浓度的增高而上升。结论Sp1蛋白在HCC中的过表达在肿瘤发生发展中起一定作用;TGFβ1诱导肝癌细胞凋亡,而Sp1基因的抑制在TGFβ1诱导肝癌细胞凋亡中可能起一定作用。     

缺氧对人胰腺癌细胞整合素α5、β1表达的影响

目的 探讨缺氧环境对人胰腺癌细胞株PANC1诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)、整合素α5(integrinα,INFα5)和整合素β1(integrinβ1,INTβ1)表达及侵袭力的影响.方法 以5%氧条件下培养PANC1,采用RT-PCR和Western blot 检测 HIF-1α、INTα5、的mRNA 和蛋白表达;采用Matrigel胶观测人胰腺癌细胞黏附侵袭能力的变化.并加入HIF-1α抑制剂YC-1缺氧培养PANC1,观察上述各指标的变化.结果 HIF-1α蛋白表达从常规培养时0.497±0.011逐渐上升到缺氧培养24h的1.455±0.133(P＜0.05),应用YC-1后蛋白表达下降到0.465±0.073(P＜0.05),而HIF-1α mRNA 表达无明显变化;INTα5蛋白从常规培养时0.964±0.032逐渐下降到缺氧培养24h的0.465±0.073(P＜0.05),应用YC-1后蛋白表达又上升到0.883±0.013(P＜0.05),INTα5mRNA的表达从0.212±0.023下降到0.018±0.002(P＜0.05),应用YC-1后再上升到0.069±0.011(P＜0.05);INTβ1的蛋白和mRNA 表达于缺氧培养及YC-1处理后均无明显变化.细胞侵袭力从常规培养时69.9±30.5逐渐上升到缺氧培养24h的105.0±14.9(P＜0.05),应用YC-1后又不降到79.7±20.9(P＜0.05).结论缺氧微环境下HIF-1α过表达可能通过下调INTα5来调控胰腺癌细胞间和细胞与基质间的黏附能力,有利于进一步侵袭转移.