CD44v6在喉和下咽鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的 设计制作喉和下咽鳞状细胞癌组织芯片,应用组织芯片免疫组化技术探讨细胞黏附分子CD44v6的表达与喉和下咽鳞状细胞癌侵袭转移等生物学行为的相关性.方法 选取手术切除的喉和下咽鳞状细胞癌原发灶、癌旁正常黏膜和淋巴结转移癌组织共125例,甲醛固定、石蜡包埋,利用这些石蜡标本制作组织芯片;应用免疫组化技术在组织芯片上检测黏附分子CD44v6的表达,分析其表达率与喉癌和下咽癌临床和病理分期的相关性.结果 CD44v6在原发癌中的阳性表达率明显高于癌旁正常组织(P＜0.05),淋巴结转移癌中表达率明显高于癌旁正常组织(P＜0.001)和原发癌(P＜0.01);有淋巴结转移组CD44v6表达率明显高于无淋巴结转移组(P＜0.01),高分化组明显低于中分化组(P＜0.05),而CD44v6的表达率与肿瘤的原发部位、浸润范围、年龄、性别等因素无明显相关.结论 CD44v6在喉癌和下咽癌组织中高表达,其表达率与肿瘤的分化程度和淋巴结转移有关,可作为临床预测喉和下咽鳞状细胞癌颈淋巴结转移趋势和估计预后的主要参考指标之一.     

乙酰肝素酶mRNA在直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究乙酰肝素酶(Hpa)mRNA在直肠癌组织中的表达,探讨其与直肠癌分化、转移及预后的关系.方法 采用RT-PCR方法检测40例直肠癌组织、癌旁正常组织、转移淋巴结、正常肠黏膜组织及6例直肠绒毛状腺瘤组织中Hpa mRNA表达情况,并分析其与直肠癌临床各病理参数的关系.结果 40例正常肠黏膜组织及6例直肠绒毛状腺瘤组织中Hpa mRNA的表达均阴性.40例直肠癌标本中27例Hpa mRNA表达阳性阳性表达率67.5%明显高于正常肠黏膜组织、癌旁正常组织及直肠绒毛状腺瘤组织(均P＜0.01);直肠癌直径≥5 cm者Hpa mRNA阳性表达明显高于直径＜5 cm者(P＜0.05);有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者(P＜0.05);远处转移者高于无远处转移者(P＜0.05);Ⅲ/Ⅳ期者表达明显高于Ⅰ/Ⅱ期者(P＜0.05).Hpa mRNA与患者的性别、年龄、肿瘤细胞分化无明显关系(均P＞0.05).结论 Hpa mRNA参与了直肠癌的生长、进展,并可能对直肠癌的浸润、转移有促进作用,可以作为反映直肠癌生物学行为的有效指标之一.     

喉癌中 MTA1分布特点及其与 MMP-9、VEGF-C蛋白表达的相关性分析

目的：研究肿瘤转移相关基因1（MTA1）蛋白在喉癌组织中的表达特点,并分析其与基质金属蛋白酶9（MMP-9）、血管内皮生长因子C（VEGF-C）蛋白的相关性。方法采用Western blot法检测40例喉癌患者的正常喉黏膜组织、癌周围组织及肿瘤组织样本中MTA1、MMP-9、VEGF-C蛋白表达,并统计分析其临床病理特性。结果与喉癌无颈淋巴结转移组、癌周围及正常组织相比,喉癌颈淋巴结转移组中MTA1蛋白的表达水平明显升高（P＜0．05）。MTA1蛋白在喉癌组织中的表达与淋巴结转移、肿瘤分期及肿瘤分化程度呈正相关（P＜0．05）,并与VEGF-C、MMP-9表达正相关（P＜0．05）。结论 MTA1可能参与喉癌的发生、发展和转移,且可能与MMP-9、VEGF-C蛋白之间存在调控作用。     

喉和下咽鳞癌中CD44v6的表达及意义

目的：应用免疫组化技术检测与肿瘤转移相关的细胞因子CD44v6的表达,分析CD44v6表达与喉和下咽鳞癌侵袭、转移等生物学行为的相关性。方法：采用免疫组化方法检测75例原发癌组织、29例癌旁正常黏膜组织、20例淋巴结转移癌组织中黏附分子CD44v6的表达。结果：CD44v6在原发癌中的阳性表达率为58．67％（44／75）,癌旁正常组织的阳性表达率为34．48％（10／29）,差异具有显著性（P〈0．05）;淋巴结转移癌中CD44v6的阳性表达率明显高于癌旁正常组织（P〈0．001）和原发癌（P〈0．01）;有淋巴结转移组的CD44v6表达率明显高于无淋巴结转移组（P〈0．01）．高分化组的CD44v6表达率明显低于中分化组（P〈0．05）。结论：CD44v6在喉癌和下咽癌组织中高表达,其表达率与喉癌和下咽癌的分化程度和淋巴结转移有关,可作为临床预测喉癌和下咽癌颈淋巴结转移趋势和估计预后的主要参考指标之一。     

iNOS在喉癌中的表达及其临床意义

目的:探讨诱生型一氧化氮合酶（iNOS)在喉癌中的表达及其临床意义。方法：采用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术检测40例不同病理分化程度、临床分期的喉鳞癌组织、癌旁组织及10例喉乳头状瘤、7例正常喉黏膜中诱生型一氧化氮合酶（iNOS)mRNA的表达。结果：喉癌组织iNOS mRNA阳性表达率为85．00％,较对照组癌旁组织（20．00％）、良性肿瘤组（40．00％）、正常人组（0／7）明显增高（P＜0．0001,P＜0．005,P＜0．0001）,有淋巴结转移组（19／19）显著高于无 淋巴结转移组（71．42％）（P＜0．05）,iNOS mRNA阳性表达与肿瘤原发部位及T分级无关,与细胞分化程度呈负相关。结论：喉癌组织中存在iNOS,它可能通过合成一氧化氮（NO）在分子水平参与了喉癌的发生、发展。     

VEGF-C在喉癌组织中的表达及临床意义

目的：研究血管内皮生长因子C（VEGF-C）蛋白在喉癌和正常组织中的表达情况,探讨其与临床相关因素以及淋巴转移的关系,了解VEGF-C蛋白在喉癌颈淋巴结转移中的作用。方法：采用免疫组化法分别检测65例喉癌癌内组织、癌旁组织和15例正常组织中VEGF-C蛋白的表达,观察并分析其表达与年龄、肿瘤病理分化程度、T分期及颈淋巴结转移等临床病理因素之间的关系。结果：喉癌组织不同部位的VEGF-C蛋白表达明显不同。VEGF-C在癌内、癌旁及正常组织中均有表达,但癌内组织的表达阳性率明显高于癌旁组织和正常组织,其表达与TNM分期及颈淋巴结转移密切相关。结论：VEGF-C在喉癌组织中表达明显上调,并与肿瘤T分期、淋巴结转移等临床生物学行为有关,提示VEGF-C有可能在喉癌的发生和发展中起重要作用。     

PKM2在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 为了明确喉癌组织中是否有M2型丙酮酸激酶(PKM2) mRNA和蛋白表达,进一步探讨喉癌组织中PKM2表达的临床意义.方法 应用实时定量荧光PCR(Real-time PCR)和Western blot检测PKM2在93例喉癌组织和55例癌旁正常组织中的表达.分析PKM2蛋白是否和性别、年龄、细胞分化、肿瘤位置及T分期相关,以及喉癌组织中PKM2表达和临床病理参数的关系.结果 喉癌中PKM2的mRNA表达水平是喉癌旁正常黏膜的4.32倍,差异具有统计学意义(P＜0.05).喉癌组织中PKM2 mRNA表达水平是喉癌旁正常黏膜的1.74倍,差异有统计学意义(P＜0.05).不同的性别、年龄及肿瘤位置之间的PKM2 mRNA表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).T分期Ⅲ期和Ⅳ期及细胞分化为中低分化的病例PKM2蛋白水平分别显著高于T分期为Ⅱ期及细胞分化为高分化的病例(P＜0.05).结论 PKM2在喉癌的发生、发展中起到一定的促进作用,可能是治疗喉癌的新靶点.     

人胃腺癌组织中KLF4表达及临床意义

目的探讨KLF4基因与胃腺癌临床生物学行为的关系。方法免疫组织化学和逆转录一聚合酶链式反应分别检测50例人胃腺癌组织及其相应癌旁胃黏膜组织中KLF4蛋白和mRNA的表达。结果50例胃腺癌组织中，KLF4蛋白表达和mRA相对表达强度均明显低于癌旁胃黏膜组织（P〈0．01）。胃腺癌组织中，低、未分化癌KLF4蛋白表达和mRNA相对表达强度明显低于高、中分化癌，Ⅲ～Ⅳ期明显低于Ⅰ～Ⅱ期，伴淋巴结转移者明显低于无淋巴结转移者（P均〈0．05）。但KLF4蛋白表达和mRNA相对表达强度与患者年龄、性别、肿瘤病理类型及肿瘤大小和部位等临床参数无关（P〉0．05）。结论KLF4表达与胃腺癌分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关。检测KLF4基因可能对预测胃腺癌进展有一定价值。     

粘着斑激酶在喉及下咽鳞状细胞癌组织芯片中的表达及意义

目的应用组织芯片免疫组化技术探讨粘着斑激酶（FAK）表达与喉和下咽鳞状细胞癌生物学行为的相关性。方法设计制作喉及下咽鳞状细胞癌组织芯片,应用免疫组化技术在组织芯片上检测FAK的表达,分析FAK表达与喉及下咽鳞状细胞癌临床和病理分期的相关性。结果FAK在原发癌中的阳性表达率为96．00％（72／75）,明显高于癌旁正常组织（13／29,44．83％,P〈0．01）;淋巴结转移癌中FAK的阳性表达率为100．00％（20／20）,明显高于癌旁正常组织（P〈0．001）;有淋巴结转移组FAK表达率为95．35％（41／43）,明显高于无淋巴结转移组（12／32,37．50％,P〈0．01）;高分化组FAK表达率明显低于中、低分化组（P〈0．001）;而FAK的表达率与肿瘤的原发部位、浸润范围（T分期）、年龄和性别等因素均无明显相关性（P〉0．05）。结论FAK在喉癌和下咽癌组织中高表达,其表达率与喉癌和下咽癌的分化程度和淋巴结转移有关,可作为临床预测喉癌和下咽癌颈淋巴结转移趋势和估计预后的主要参考指标之一。     

喉鳞状细胞癌中PUMA、P53基因的表达及其临床意义

目的:研究PUMA、P53在喉鳞状细胞癌组织中表达,探讨PUMA在喉鳞癌发生发展中作用及与P53的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测40例喉癌组织以及16例癌旁组织中的PUMA和P53的表达情况。结果:PUMA在喉癌中的表达阳性率(62.5%)低于癌旁组织(87.5%),P<0.05,PUMA的表达与喉鳞癌患者的颈淋巴结转移及预后有关。P53在喉癌中的表达阳性率(65.0%)高于癌旁组织(0%),P<0.01,P53的表达与喉鳞癌患者的肿瘤分化程度、颈淋巴结转移及预后有关。PUMA与P53在喉鳞癌中的表达呈负相关关系。结论:PUMA可能是喉鳞癌的一个重要的预后标记物。P53的表达与肿瘤分化、淋巴结转移有关,可作为判断预后的一个有意义的指标。     

胃癌组织中基质金属蛋白酶-2和E-钙黏附素检测

目的:探讨胃癌组织中基质金属蛋白酶 -2(MMP- 2)和E 钙黏附素 (E- CD)的表达。方法:采用原位杂交法,检测 72例胃癌(其中复发 39例)组织中MMP- 2mRNA和E- CDmRNA的表达,并观察 2者与浸润深度和淋巴结转移之间的关系。结果:胃癌组织中MMP -2mRNA和E CDmRNA的阳性表达与浸润深度和淋巴结转移有关。复发患者的 2种胃癌组织 (复发前手术切除标本;本次胃镜活检标本)与非复发胃癌组织标本的MMP 2mRNA和E- CDmRNA的阳性表达率差异有统计学意义(MMP 2:P<0. 01;E CD:P<0. 05)。MMP- 2mRNA阳性表达的胃癌组织中E CDmRNA的阳性表达率低于MMP 2mRNA阴性表达的胃癌组织, 2者呈负相关 (r=-0. 273,P<0. 05)。结论:MMP- 2mRNA和E- CDmRNA的表达与胃癌的浸润、转移及复发有关。检测MMP- 2mRNA和E- CDmRNA在胃癌患者胃镜活检组织中的表达可能有助于判断预后及胃癌转移复发潜能。     

E-钙黏附素、自分泌运动因子受体在乳腺癌中的表达

目的了解E-钙黏附素（E-CD）、自分泌运动因子受体（AMFR）在乳腺癌组织中的表达状况及临床病理意义。方法应用免疫组化SABC方法研究101例乳腺浸润性导管癌组织E—CD、AMFR的表达。结果乳腺浸润性导管癌E-CD表达明显下调,组织学Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级组相比,差异有显著性（P〈0．05）,E-CD表达随级别增高而减弱。E-CD表达水平与淋巴结是否转移相关（P〈0．05）。与正常乳腺组织相比,浸润性导管癌AMFR明显高表达,表达水平与乳腺癌组织学分化差、TNM分期有关（P〈0．05）。E-CD与AMFR表达强度呈负相关（P〈0．05）。结论乳腺浸润性导管癌同时存在E-CD表达下调和AMFR表达上调,联合运用这两项标记对于估计乳腺癌的生物学特性具有重要价值。     

喉癌组织中HPV16及其早期区基因E6、E7蛋白的表达及意义

目的:观察喉癌组织中HPV16及其早期区基因E6、E7蛋白的表达,并初步分析其与喉癌组织临床分期、病理分级的相关性.方法:147例喉组织标本,其中喉鳞状细胞癌组织82例,非癌组织39例(声带息肉27例,距肿瘤＞1.0 cm的癌周正常组织12例),癌前病变(声带白斑)26例.免疫组织化学检测各组标本中HPV16及其早期区基因E6、E7蛋白的表达.分析喉鳞癌组织中3种蛋白表达情况与临床分期、病理分级的相关性.结果:喉鳞癌组织中HPV16蛋白及E6、E7蛋白的阳性率明显高于癌前病变组织(P＜0.05或0.01),后者高于非癌组织 (P＜0.05或0.01).非癌组织中HPV16蛋白阳性率明显高于E6、E7蛋白的表达(P＜0.05或0.01),而喉癌组织及癌前组织中三者间无显著差异.不同临床分期(Ⅰ～Ⅳ期)及不同病理分级(Ⅰ～Ⅲ级)喉癌组织中HPV16的阳性率间有显著差异(P＜0.05);而不同临床分期及病理分级间HPV16 E6、E7蛋白表达率无显著差异.结论:HPV16感染后其早期区基因E6、E7的表达可能是诱发喉癌的因素之一,应用免疫学方法抑制E7蛋白的表达对于喉癌的治疗有积极的意义,但其预防和治疗作用不应过分夸大.     

人端粒酶逆转录酶在喉鳞状细胞癌中表达与c-myc的相关性

目的研究人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA在喉鳞状细胞癌中和病理分级、临床参数的关系以及和c-myc的相关性。方法用原位杂交法检测40例喉鳞状细胞癌中hTERT mRNA的表达，用免疫组织化学法检测c—myc蛋白。结果喉正常组织、不典型增生、鳞癌组织中hTERT mRNA的阳性率分别为0％（0／10）、10％（1／10）、80％（32／40），喉鳞癌中hTERT mRNA的阳性率明显高于正常组织（P〈0．05）和不典型增生（P〈0．05），hTERT mRNA水平与c—myc的表达呈显著相关（r=0．5422，P〈0．01）。喉鳞癌中hTERT mRNA表达水平与病理分级不相关（P〉0．05），与年龄、性别、TNM分期和淋巴结转移情况不相关（P〉0．05）。结论喉鳞癌中hTERT mRNA的阳性率明显高于正常组织和不典型增生，有助于喉部良恶性病变的鉴别，c-myc的过度表达可能是喉鳞癌端粒酶活性升高的一个重要机制。     

Expression of Vascular Endothelial Growth Factor and Cyclooxygenase-2 in Laryngeal Squamous Cell Carcinoma and Its significance

n order to study the expressions of vascular endothelial growth factor （VEGF） and cyclooxygenase-2 （COX-2） in human laryngeal squamous cell carcinoma （LSCC） and its significance, the expression of VEGF mRNA and COX-2 mRNA in 62 cases of LSCC and 54 adjacent noncancerous laryngeal tissues and 9 normal human laryngeal mucous tissues was detected by using techniques of semi-quantitative RT-PCR. It was found that the expression level of VEGF and COX-2 mRNA was significantly increased in LSCC as compared with that in the normal human laryngeal mucous tissues （both P〈0. 01）, and the expression level of VEGF and COX-2 mRNA were significantly increased in stage Ⅲ＋ Ⅳtissues of LSCC as compared with the stage Ⅰ ＋ Ⅱ tissues of LSCC （P 〈0.01）. There was a high positive correlation between VEGF and COX-2 expression in LSCC （r= 0. 756,P〈0.01）. These data raise the possibility that VEGF and COX-2 may play key roles in the growth, invasion and metastasis of LSCC.     

miRNA-29c在喉癌组织中的表达及对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭的影响

目的 观察miRNA-29c 在喉癌组织和喉癌Hep-2 细胞株中的表达情况,研究其与肿瘤临床分期、淋巴转移及预后等临床病理参数的关系,并探讨miRNA-29c 对喉癌Hep-2 细胞增殖、侵袭的影响。 方法 选取2006 年1 月～2016 年12 月在我院确诊的86 例喉癌患者的蜡块标本,利用实时荧光定量聚合酶链式反应检测喉癌组织和癌旁正常喉黏膜上皮组织中miRNA-29c 的表达,并分析其与临床病理学特征的关系;通过Q-RT-PCR 检测转染后每组细胞中miRNA-29c 的表达;CCK-8 检测细胞增殖能力变化情况;Transwell 实验检测跨膜细胞数量的变化。 结果miRNA-29c 在喉癌组织中相对表达量明显低于癌旁组织（P<0.01）,其表达量与不同临床分型、TNM分期、淋巴转移密切相关（P<0.05）;转染miRNA-29c 模拟物组细胞中的miRNA-29c 表达水平显著高于无关序列组和空白对照组（P<0.01）,并可抑制喉癌Hep-2 细胞的增殖和侵袭力（P<0.01）。 结论 在喉癌中,miRNA-29c 是一个抑制性miRNA,miRNA-29c 低表达可能是影响喉癌预后的重要因素;过表达miRNA-29c 可显著降低喉癌Hep-2 细胞的增殖和侵袭能力,miRNA 表达水平的下调可能参与了喉癌的发生发展及侵袭转移过程。     

EphB4与MMP-9在肾癌中的表达及意义

目的:本实验从mRNA水平研究肾癌组织、癌旁肾组织及正常肾组织中受体酪氨酸激酶EphB4和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达规律及二者表达之间的相关性,探讨其在肾癌发生发展过程中的可能作用,为肾癌的诊断、治疗及预后判断提供新的方法和思路。方法:运用半定量RT-PCR技术检测肾癌组织、癌旁肾组织及正常肾组织中EphB4和MMP-9在mRNA水平的表达情况,分析其与肾癌临床病理因素的相关性,探讨其与肾癌细胞增殖、浸润和转移的关系。结果:EphB4和MMP-9在肾癌组织、癌旁肾组织中都表达,且癌旁表达低于肿瘤组织表达,差异有统计学意义(P<0.05)。二者在正常肾组织中几乎不表达(P<0.01)。两者在肾癌组织中的表达丰度与患者的年龄、性别无关(P>0.05),与肿瘤的临床分期、病理分级以及是否淋巴结转移密切相关(P<0.05)。二者在肾癌组织中表达呈明显正相关关系(r=0.631,P<0.01)。结论:EphB4和MMP-9在肾癌的发生、发展及侵袭转移中起非常重要作用,联合检测两者的表达对预测肾癌患者预后、指导治疗有一定临床意义。     

内镜活检食管癌组织E-CD蛋白的检测及其意义

目的　探讨内镜活检组织E -CD检测对食管癌浸润转移的诊断价值。方法　采用免疫组织化学LSAB技术检测食管癌活检组织和对照组中E -CD的表达 ,分析其表达与癌侵袭转移的关系。结果E -CD蛋白表达与食管癌患者年龄、性别、发生部位无关 (P >0 .0 5) ;与食管癌细胞分化程度相关 (P <0 .0 5) ,与食管癌浸润深度、淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 1 )。结论　E -CD与肿瘤侵袭转移相关 ,食管癌活检组织中E -CD蛋白表达可以作为预测癌浸润转移潜能标志之一。     

survivin在喉癌组织中表达及其与细胞凋亡的关系

目的：探讨凋亡抑制蛋白survivin在喉癌中的表达及其与凋亡和临床病理参数的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测喉癌细胞株Hep2、牙周膜细胞及40例喉癌组织和8例正常喉黏膜中survivin蛋白的表达,半定量逆转录PCR检测survivin mRNA表达,DNA原位末端标记技术(tunel)检测喉癌组织的细胞凋亡指数(AI)。结果：survivin在正常喉黏膜、牙周膜细胞中不表达,Hep2细胞株和57.5％（23例）喉癌组织表达survivin蛋白和mRNA。在病理学分级为Ⅰ级的喉鳞癌标本中,survivin蛋白阳性率（33.3％）明显低于Ⅱ、Ⅲ级的标本（72.7％,P<0.05);临床Ⅲ～Ⅳ期喉鳞癌患者survivin蛋白阳性表达率为76.2％,明显高于临床Ⅰ～Ⅱ期患者（36.8％, P<0.05）;喉癌颈部淋巴结转移组中survivin 蛋白阳性率（100％）显著高于未转移组（48.5％,P<0.05)。survivin表达阳性组的AI 为2.93±1.20,阴性组为4.05±1.42,两者比较,差异具有显著性(P<0.05)。结论：survivin在喉癌中高表达可能通过抑制细胞凋亡而在喉癌的发生发展中发挥一定作用。     

iNOS表达与喉癌组织中淋巴管生成及血管生成的相关性分析

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)在喉癌中的表达及其与喉癌淋巴管生成、血管生成及预后的相关性。方法:应用免疫组化法和实时荧光定量PCR方法检测iNOS在45例喉癌和20例声带息肉组织中的表达,5’-核苷酸酶染色法计数淋巴管密度(lymphatic microvessel density,LVD),CD34染色计数微血管密度(microvessel density,MVD),并结合临床病理特征和生存资料进行相关分析。结果:喉癌组织中iNOS的表达较声带息肉组显著增加(P<0.05),iNOS表达与瘤内和瘤周LVD、MVD、淋巴结转移、TNM临床分期、淋巴管侵润有关(P<0.05)。iNOS阳性表达与生存率负相关(P<0.05)。结论:喉癌组织中iNOS过表达能够促进喉癌淋巴管生成和血管生成。检测iNOS表达可成为判断喉癌预后新的生物学指标。