广东汉族人纤溶酶原激活剂抑制物-1基因4G／5G多态性与2型糖尿病肾病的相关性

OBJECTIVE: To understand the association between plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) gene 4G/5G polymorphism and type 2 diabetic nephropathy (DN) in Chinese Han patients in Guangdong Province. METHODS: PAI-1 gene 4G/5G polymorphism was analyzed in 26 normal individuals, 77 patients with type 2 diabetic nephropathy and 70 type 2 diabetic patients without nephropathy (DNN) by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism. RESULTS: The 4G/4G genotype frequencies of PAI-1 gene were higher in DN than in DNN patients (0.390 vs 0.171, chi(2)=13.008, P<0.01), with the odds ratio (OR) of 1.447 (95% confidence interval: 0.533-3.934, P<0.05) in comparison with 5G/5G genotypes between the 2 patient groups. The 4G allele frequencies of PAI-1 gene were similar in DN and DNN groups (0.57 vs 0.51, chi(2)=1.22, P>0.05). CONCLUSION: The PAI-1 4G/4G genotype is associated with increased risk for type 2 DN the Chinese Han population in Guangdong Province, and type 2 diabetic patients with 4G/4G PAI-1 genotype are more likely to develop DN than those with 5G/5G PAI-1 genotype.     

广东汉族人纤溶酶原激活剂抑制物-1基因4G/5G多态性与2型糖尿病肾病的相关性

目的 探讨纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)基因4G/5G多态性与广东汉族人2型糖尿病肾病(DN)发病的关系。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析,对147例病史7年以上的2型糖尿病患者[其中DN患者77例,糖尿病非肾病(DNN)患者70例]和26名健康人进行了PAI-1基因4G/5G多态性分析。结果 DNN组PAI-1基因的4G/4G基因型、基因频率显著高于DN组(χ²=13.008,P<0.01);与5G/5G基因型相比,DNN组PAI-1基因4G/4G型对DN组的比数比为1.447,95%的可信区间0.533~3.934(P<0.05),差异有显著性。而DN与DNN组PAI-1基因4G等位基因频率无显著差异(χ²=1.22,P>0.05);结论 PAI-1基因4G/4G基因型与广东汉族人2型DN的发病有关联,4G/4G基因型广东汉族2型糖尿病人易发生DN。     

PAI-1基因启动子区4G/5G多态性与肺心病的相关性

①目的　探讨血浆纤溶酶原激活物抑制因子 1 (PAI 1 )基因启动子区单核苷酸插入 /缺失 (4G/ 5G)多态性与肺心病的相关性。②方法　以外周血白细胞基因组为模板 ,应用多聚酶链反应 (PCR)检测 4 0例健康查体者和 6 0例肺心病病人 (其中并发肺栓塞 1 9例 )PAI 1基因启动子区 4G/ 5G多态性的基因型。③结果　对照组与肺心病组比较PAI 1基因启动子区 4G/ 5G多态性基因型差异无显著性。肺心病组女性 4G等位基因频率高于男性 ,差异有显著性 (χ2 =4 .30 ,P <0 .0 5 )。肺栓塞组 4G/ 4G基因型与 4G等位基因频率和对照组相比差异无显著性。④结论　PAI 1基因多态性与肺心病无明显相关性 ,4G等位基因在女性中有可能与其他因素协同促进肺心病的发生。     

2型糖尿病PAI-1基因启动子区4G／5G基因多态性与胰岛素抵抗

目的 探讨2型糖尿病血浆纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1）及其基因启动子区4G／5G多态性及其胰岛素抵抗的关系。方法 对近2年来我院诊断为2型糖尿病的住院患者156例，通过检测血浆纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1），并进行PCR扩增PAI-1基因启动子区4G／5G基因多态，同时测定血糖水平、糖化血红蛋白（GhbAl）、空腹血胰岛素、血浆胆固醇、甘油三脂，并与有关因素作相关分析研究PAI-1与胰岛素抵抗的关系。结果 （1）T2DM组与正常组相比，PAI-1基因型频率分布有明显的统计学差异，等位基因频率无明显统计学意义。（2）2型糖尿病组4G／4G组PAI-1水平显著高于其他两组。（3）对照组中3组基因型的PAI-1水平、TCH、TG、LDL-C、HDL-C、空腹胰岛素、HOMA差异均无显著性。（4）T2DM组3组基因型的PAI-1水平、TCH、TG、LDL-C、HDL-C、FBG、空腹胰岛素、HOMA均明显高于对照组中相应基因型者。在4G／4G组，PAI-1水平与BMI、TG、空腹胰岛素、WC、HOMA都有关。结论 在2型糖尿病中，PAI-1水平与PAI-1基因启动子区基因型有关；PAI-1水平与胰岛素抵抗有关，且PAI-1水平和甘油三酯和空腹胰岛素的关系与PAI-1基因启动子区基因型有关。     

急性脑梗死病人纤溶酶原激活物抑制物活性及其基因启动子区域4G/5G基因多态性的研究

①目的　探讨纤溶酶原激活物抑制物 1 (PAI 1 )活性及其启动子区 4G/ 5G基因多态性在急性脑梗死(ACI)发病过程中的作用。②方法　分别采取ACI组和正常对照组外周血 ,酚抽提法提取DNA ,然后应用聚合酶链反应限制性片段长度多态技术 (PCR RFLP)检测PAI 1基因 4G/ 5G多态性 ;发色底物法测定每个标本血浆PAI 1活性。③结果　ACI组PAI 1活性明显高于正常对照组 (t=2 .731 ,P <0 .0 1 ) ,但ACI组各基因型血浆PAI 1活性水平无显著性差异 (F =2 .2 4 ,P >0 .0 5 ) ;ACI组 5G5G纯合子基因型比正常对照组明显增多 (χ2 =5 .88,P <0 .0 5 ) ,两组 4G5G杂合子基因型和 4G4G纯合子基因型比较无显著性差异 (χ2 =1 .1 6、0 .30 ,P >0 .0 5 ) ;ACI组 5G等位基因分布频率 (0 .4 0 )明显高于正常对照组 (0 .2 7) (χ2 =4 .2 5 ,P <0 .0 5 )。④结论　 5G5G基因型个体可能是我国汉族人ACI的易患者 ,可考虑将PAI 1基因 4G/ 5G基因多态性检查用于ACI高危人群的筛查工作     

PAI-1基因多态性与包头地区汉族2型糖尿病并发肾病的相关性研究

目的：探讨血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1（plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1）基因多态性与2型糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）的相关性,并初步研究其可能机制。方法：50例正常对照组,120例2型糖尿病,测定任意尿白蛋白与肌酐比值（Ua/c）,根据比值将糖尿病组分为50例糖尿病非肾病组、70例糖尿病肾病组。提取DNA,聚合酶链反应扩增,产物以琼脂糖凝胶电泳分离确定PAI-1基因型。并收集体重、身高、血压、血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯、胆固醇等资料。结果：（1）正常人、糖尿病非肾病与糖尿病肾病组相比,PAI-14G/4G基因型的分布有明显的差别,糖尿病肾病组PAI-1基因中4G等位基因频率明显高于糖尿病非肾病组（0.550∶0.149,χ^2=35.685,P〈0.05）。（2）Logistic回归分析表明PAI-1基因是2型糖尿病肾病的独立患病危险因素。PAI-14G/4G基因型比其他基因型具有更高的糖尿病肾病发病危险。结论：2型糖尿病肾病组PAI-1基因4G/4G型和4G等位基因频率明显高于正常人、2型糖尿病非肾病组。PAI-1基因4G/4G型是2型糖尿病肾病发病的独立患病危险因素。PAI-14G/4G型为糖尿病肾病发病的易感性基因。     

PAI-1在糖尿病肾病患者中的变化

目的 探讨2型糖尿病（T2DM）患者血浆纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1）和组织型纤溶酶原激活物（t-PA）活性水平的变化及其与糖尿病肾病（DN）的关系.方法 选择133例T2DM患者,根据尿蛋白排泄率（UAER）分为无DN组67例、DN微量白蛋白尿组51例、DN临床蛋白尿组15例,正常对照组27例.测定其血浆t-PA、PAI-1的活性水平.结果 T2DM各组患者血浆PAI-1水平均显著高于正常对照组,且随着UAER的增高而递增（P＜0.05,P＜0.01）;DN患者血浆PAI-1活性与UAER、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、空腹胰岛素（FINS）、胆固醇（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、甘油三酯（TC）、体重指数（BMI）呈显著正相关;t-PA活性在各组间差异无显著性.结论 DN患者血浆PAI-1活性增高;胰岛素抵抗、高TG、高LDL、高TC血症及肥胖等因素可能与PAI-1活性增高有关.     

小儿单纯性肥胖PAI-1基因4G/5G多态性分析

目的分析小儿单纯性肥胖纤溶酶原激活抑制物-1(PAI-1)基因4G/5G多态性及其与血循环PAI-1水平变化的关系,探讨儿童期肥胖对纤溶系统活性的影响和有无与之相关的遗传倾向.方法用ELISA方法检测105例单纯性肥胖症儿童和81例正常对照儿童血浆PAI-1含量,同时应用聚合酶链反应加限制性片段长度多态(PCR-RFLP)技术检测PAI-1基因4G/5G多态性,并分析不同基因型肥胖儿童血循环PAI-1水平的变化.结果肥胖儿童血浆PAI-1含量显著升高(t=5.084,P＜0.01),PAI-1 4G/4G、4G/5G、5G/5G基因型频率无明显变化(X2=1.708,P＞0.05),4G/4G基因型肥胖儿童血浆PAI-1含量显著高于其他两种基因型者(t分别为2.117和2.612,P均＜0.05).结论肥胖儿童纤溶系统活性降低,与PAI-1基因4G/5G多态性无明显相关,但4G/4G基因型肥胖儿童更易致纤溶活性降低.     

PAI-1基因多态与中国人2型糖尿病肾病的相关性

目的 探讨纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)基因多态与上海地区中国人2型糖尿病肾病的相关性.方法 选取2型糖尿病(T2DM)患者247例组成T2DM组,其进一步分为糖尿病无肾病组(n=80)和糖尿病肾病组(n=167),后者又分为微量蛋白尿肾病组(n=129)和显著蛋白尿肾病组(n=38);同时设立非糖尿病对照组(n=87).应用等位基因特异性PCR法(ASP法)检测PAI-1基因启动子区--675 bp处的4G/5G多态,确定各组PAI-1基因的基因型.采用χ2检验对组间各基因型频率及等位基因频率进行比较,并比较组间携带纯合子风险等位基因4G/4G的基因型频率差异.结果 T2DM组与非糖尿病对照组相比,4G/4G基因型及4G等位基因频率无统计学差异(P＞0.05).与糖尿病无肾病组相比,糖尿病肾病组4G/4G基因型频率显著增加(P＜0.01,OR=2.4,95%CI=1.3～4.4),4G等位基因频率亦显著增加(P＜0.05,OR=1.6,95%CI=1.1～2.3).结论 PAI-1基因多态与中国人T2DM无肾病患者进展为糖尿病肾病显著相关;携带PAI-1基因的4G/4G纯合子基因型的糖尿病患者,其进展为糖尿病蛋白尿肾病的风险增加2.4倍.     

PAI-1基因多态与中国人2型糖尿病肾病的相关性

目的探讨纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)基因多态与上海地区中国人2型糖尿病肾病的相关性。方法选取2型糖尿病(T2DM)患者247例组成T2DM组,其进一步分为糖尿病无肾病组(n=80)和糖尿病肾病组(n=167),后者又分为微量蛋白尿肾病组(n=129)和显著蛋白尿肾病组(n=38);同时设立非糖尿病对照组(n=87)。应用等位基因特异性PCR法(ASP法)检测PAI-1基因启动子区——675 bp处的4G/5G多态,确定各组PAI-1基因的基因型。采用χ2检验对组间各基因型频率及等位基因频率进行比较,并比较组间携带纯合子风险等位基因4G/4G的基因型频率差异。结果T2DM组与非糖尿病对照组相比,4G/4G基因型及4G等位基因频率无统计学差异(P>0.05)。与糖尿病无肾病组相比,糖尿病肾病组4G/4G基因型频率显著增加(P<0.01,OR=2.4,95%C I=1.3～4.4),4G等位基因频率亦显著增加(P<0.05,OR=1.6,95%C I=1.1～2.3)。结论PAI-1基因多态与中国人T2DM无肾病患者进展为糖尿病肾病显著相关;携带PAI-1基因的4G/4G纯合子基因型的糖尿病患者,其进展为糖尿病蛋白尿肾病的风险增加2.4倍。     

子宫内膜癌组织uPA 和PAI-1 mRNA表达及其意义

目的 探讨纤溶酶原激活因子(uPA)及纤溶酶原抑制因子-1(PAI-1) mRNA在子宫内膜癌组织表达及意义.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测35例子宫内膜癌、18例子宫内膜增生和16例正常子宫内膜组织中uPA及PAI-1 mRNA的表达情况.结果 uPA 、PAI-1 mRNA在子宫内膜癌组织中表达水平均显著高于子宫内膜增生组织及正常子宫内膜组织(F=55.22、51.78,q=11.696～12.218,P<0.01);而子宫内膜增生组织中uPA 、PAI-1 mRNA的表达与正常子宫内膜组织比较,差异无统计学意义(q=0.215、0.441,P>0.05).子宫内膜癌组织中uPA、PAI-1 mRNA的表达水平随手术病理分期(F=17.28、21.88,q=9.347～84.716,P<0.01)及组织学分级的增高(F=31.22、27.95,q=6.960～10.931,P<0. 01)、肌层浸润深度的增加(t=2.885、3.316,P<0.01)及淋巴结的转移显著增高(t=5.177、3.954,P<0.01),与病人病理类型无关(t=0.060、0.115,P>0.05).结论 子宫内膜癌组织uPA及PAI-1 mRNA的高表达与子宫内膜癌发生、发展及浸润转移有一定关系,并且与疾病进展、预后有关.     

AR基因启动子区C-106T多态性与糖尿病肾病的相关性

①目的 探讨染色体7q35区醛糖还原酶（AR）基因启动子区C-106T多态性与2型糖尿病肾病（DN）相关性。②方法 运用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术（PCR—RFLP）、DNA测序技术及高浓度琼脂糖凝胶电泳分离技术,对139例按尿微量清蛋白排泄率（UAER）分为早期DN组（DN＋组,61例）和非DN组（DN—组,78例）2型DM病人的AR基因启动子区C-106T多态位点的等位基因和基因型进行了检测,并以63例健康成人作为对照（CON组）。③结果 AR基因启动子区C-106T多态位点存在T、C两种等位基因和CC、CT、TT三种基因型,DM组T、C等位基因频率和CT、CC基因型频率与CON组差异无显著性（X^2=1．77、1．23,P〉0．05）;DN＋组T等位基因频率和CT基因型频率明显高于DNG—组和CON组（X^2=8．63～12．71,P〈0．01）,C等位基因频率和CC基因型频率明显低于DN—组和CON组（X^=8．42～14．10,P〈0．01）。④结论 AR基因启动子区C-106T多态性与糖尿病肾病的发生、发展有关。     

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂cDNA表达质粒的构建及其在哺乳动物细胞中的表达

建立Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡⅠ－１）ｃＤＮＡ哺乳动物细胞表达体系。用人工合成的６个寡核苷酸连接成编码ＰＡⅠ－１Ｎ－端１０个氨基酸和２３个氨基酸的信号肽顺序；将构成的完整ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ插入真核表达质粒ｐＳＶ２ｄｈｆｒ中，获得真核表达质粒ｐＺＹＳ－１；将ｐＭＡ２１２中的ｈＭＴ－ⅡＡ的起动子再插入ｐＺＹＳ－１，使ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ受ＳＶ４０和ｈＭＴ－ⅡＡ双启动子控制，得ｐＺＹＳ－２。２个表达质粒分别在ＣＯＳ－７细胞中进行表达。结果：获得两个真核表达质粒，在ＣＯＳ－７细胞中得到表达，在培养液中的ＰＡⅠ－１活性和抗原含量分别为２３４．７ＩＵ／ｍｌ和３０μｇ／Ｌ。结论：ｐＺＹＳ－１和ｐＺＹＳ－２两株ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ真核表达质粒在ＣＯＳ－７细胞中能有效表达和分泌。     

风心病患者血浆tPA及PAI－1水平的变化

测定４０例风心病患者和２４例正常人血浆组织型纤溶酶原激活物（ｔＰＡ）及其抑制物（ＰＡＩ－１）活性。结果表明：风心病患者ｔＰＡ活性较对照组明显降低，ＰＡＩ－１则明显升高；且风心病合并房颤者ｔＰＡ活性明显低于无房颤者，ＰＡＩ－１则明显高于无房颤者。提示风心病患者存在纤溶功能的障碍，合并房颤者尤为严重。     

广西地区壮族1型糖尿病与CTLA4基因多态性关系的研究

目的：分析CTLA4基因多态性与广西地区壮族1型糖尿病（type l diabetes mellitus,T1DM）的关系.方法：提取37例广西地区壮族T1DM患者和40例正常对照组的外周血白细胞基因组DNA,应用聚合酶链反应检测CTLA4第4外显子的3’非翻译区包含（AT） n[CTLA4 （AT）n]重复序列的特异性等位基因,并对两组CTLA4 （AT）n等位基因频率分布进行比较.结果：广西地区壮族人CTLA4（AT）n基因中,发现有12种等位基因（86～122 bp）.壮族T1DM组88 bp等位基因频率共检出24例（64.9％）,与正常对照组8例（20％）比较明显增高,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论：广西壮族T1DM患者与CT-LA4基因多态性明显相关,CTLA4（AT）n 88 bp可能是广西壮族T1DM的易感等位基因.     

二甲双胍对2型糖尿病病人造影剂肾病的影响

目的观察2型糖尿病(T2DM)病人接受造影前服用二甲双胍对肾功能的影响。方法回顾心内科行造影检查的T2DM病人,根据造影前是否应用二甲双胍,分为二甲双胍组和非二甲双胍组。所有病人造影前及造影后3 d、1年检测肾功能及尿酸等的变化。结果两组造影剂肾病发生率比较差异无显著性(P>0.05)。两组内、组间血肌酐、肾小球率过率(GFR)造影前后比较差异无显著性(P>0.05)。当造影前GFR介于30~90 mL/min时,二甲双胍组造影后3 d的GFR明显下降(t=2.485,P<0.05)。结论未合并严重肾衰竭及造影前因急症不能停用二甲双胍的T2DM病人造影是相对安全的。     

eNOS基因第7外显子894G→T点突变与早期糖尿病肾病并高血压的关系

目的　探讨内皮细胞型一氧化氮合酶 (eNOS)基因第 7外显子 894位点多态性与糖尿病肾病并高血压的相关性。②方法　随机选择单纯 2型糖尿病病人 (2DM组 )、单纯糖尿病肾病病人 (DN组 )和糖尿病肾病并高血压病人 (DN +HP组 )为研究对象 ,应用PCR技术扩增目的片段 ,PCR产物以限制性内切酶BanⅡ进行酶切 ,2 0g/L的琼脂糖凝胶电泳分离。各组间等位基因频率及基因型频率的比较用卡方检验 ,危险因素分析用Logistic回归分析。③结果　DN病人组T等位基因和TG基因型频率显著高于单纯 2DM组 (χ2 =8.32～ 1 0 .2 3,P <0 .0 5 ) ,DN +HP组T等位基因及TG基因型频率与DN组比较差异无显著意义 (χ2 =0 .4 4、0 .6 1 ,P >0 .0 5 )。Lo gistic回归分析表明 ,体质量指数、HbA1c、TC、TG、eNOS基因第 7外显子 894G→T点突变是DN并高血压的危险因素。④结论　eNOS基因第 7外显子 894G→T点突变与糖尿病肾病并高血压有关。