多梳基因Bmi-1 在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的 研究多梳基因Bmi-1 在甲状腺乳头状癌组织中的表达及临床意义。方法 分别采用免疫组化法、Westernblot 法和RT-PCR 法检测30 例甲状腺乳头状癌组织、30 例结节性甲状腺肿组织及30 例正常甲状腺组织中多梳基因Bmi-1 及其mRNA 的表达情况,并分析Bmi-1与甲状腺乳头状癌临床病理特征的关系。结果 免疫组化法检测发现Bmi-1 在甲状腺乳头状癌组织中阳性表达率73.3%,与结节性甲状腺肿（36.7%）及与正常组织（16.7%）的阳性表达率相比差异有统计学意义（P＜0.05）。Western blot 法检测甲状腺乳头状癌中Bmi-1 表达量与结节性甲状腺肿组织及正常组织相比,差异有统计学意义（P＜0.05）。RT-PCR法检测甲状腺乳头状癌中Bmi-1mRNA 表达量与结节性甲状腺肿组织及正常组织相比,差异有统计学意义（P＜0.05）。Bmi-1 阳性表达在甲状腺乳头状癌有无淋巴结转移中的差异有统计学意义（P＜0.05）,在年龄、性别、肿瘤大小、分期等差异无统计学意义。结论 Bmi-1 在甲状腺乳头状癌中表达升高,可能在甲状腺乳头状癌的发生、发展过程中起重要作用,并可望作为甲状腺乳头状癌临床诊断的标记物之一。     

Annexin II、尿激酶型纤溶酶原激活剂在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的探究Annexin II、尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）在甲状腺癌发生发展和淋巴结转移中的作用。方法应用免疫组织化学法检测AnnexinII、uPA蛋白在35例甲状腺乳头状癌组织、10例甲状腺腺瘤组织、16例结节性甲状腺肿组织、7例甲状腺正常组织中的表达。结果Annexin II、uPA蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达较正常、结节性甲状腺肿和腺瘤组织中的表达显著增高（P〈0．05）,且2者在癌组织中的表达呈正相关（P〈0．05）。Annexin II蛋白的表达与肿瘤大小和淋巴结转移有关,uPA蛋白的表达只与淋巴结转移有关。结论Annexin II、uPA蛋白参与了甲状腺乳头状癌的发生发展;并在甲状腺乳头状癌淋巴结转移中发挥促进作用。     

甲状腺癌P53基因的表达及意义

为探讨Ｐ５３癌基因在人类甲状腺癌组织中的表达及意义，用免疫且化方法对１０３例甲状腺癌及伴乳头状增生的甲状腺腺瘤和结节性甲状腺肿进行研究。结果甲状腺未分化癌和发生淋巴结转移的分化型甲状腺癌，Ｐ５３基因的阳性表达率均为６３．６％。无淋巴结转移的乳头状癌和滤泡癌Ｐ５３基因阳性表达率分别为２０．８％和１０％。伴乳头状增生的甲瘃腺腺瘤和结节性甲状腺肿Ｐ５３蛋白仅有微弱表达。未分化甲状腺癌与分化型甲状腺癌；有     

Bcl-2基因在甲状腺癌组织中的表达及意义

目的探讨Bcl-2基因在甲状腺癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测了45例甲状腺癌、20例甲状腺腺瘤及20例结节性甲状腺肿中Bcl-2基因的表达。结果Bcl-2基因在甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、甲状腺癌、有淋巴结转移的甲状腺癌、无淋巴结转移的甲状腺癌中的表达率分别为20．0％、15．0％、62．2％、77．7％．38．8％;在甲状腺癌组织中Bcl-2基因阳性率高于甲状腺腺瘤组织（P〈0．01）及结节性甲状腺肿组织（P〈0．01）;临床Ⅲ、Ⅳ期病例中Bcl-2基因的阳性率明显增高;有淋巴结转移者的阳性率明显高于无淋巴结转移者（P〈0．01）。结论Bcl-2基因过度表达可能与甲状腺肿瘤的发生发展有关,Bcl-2基因可以作为判断甲状腺癌预后的参考指标。     

RECK在甲状腺乳头状癌及结节性甲状腺肿组织中的表达及意义

目的检测金属蛋白酶抑制基因RECK在甲状腺癌及结节性甲状腺肿组织中的表达,探讨其在甲状腺癌诊断和免疫治疗中的意义。方法采用免疫组织化学方法检测55例甲状腺乳头状癌、20例结节性甲状腺肿及20例正常甲状腺组织中RECK的表达。结果RECK在甲状腺正常组织中的表达显著高于其在甲状腺癌及结节性甲状腺肿组织中的表达,组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论RECK在甲状腺癌组织中的低表达及其分布的特点可为甲状腺癌的诊断提供帮助。     

甲状腺乳头状癌与基质金属蛋白酶抑制因子3（TIMP3）基因启动子甲基化的关系研究

目的 研究基质金属蛋白酶抑制因子3（TIMP3）基因启动子甲基化水平与甲状腺乳头状癌发生的内在联系,建立基于启动子高甲基化抑癌基因的甲状腺乳头状癌早期诊断方法 。方法 收集甲状腺手术切除的组织标本共46例,其中甲状腺乳头状癌（Papillary thyroid carcinoma,PTC）29例,结节性甲状腺肿（nodular goiter）17例。经提取DNA,设计并合成BSP引物,PCR扩增,采用亚硫酸氢盐法克隆测序（bisulfite sequencing）和Sequenom Mass ARRAY甲基化DNA定量分析法检测甲状腺乳头状癌组织TIMP3基因启动子CpG片段的甲基化水平。结果 亚硫酸盐修饰测序结果 显示TIMP3基因在甲状腺乳头状癌组织中的高甲基化克隆百分比为70％,显著高于结节性甲状腺肿的0％（P〈0．05）。TIMP3基因启动子区5个CpG位点在甲状腺乳头状癌组织中的甲基化有呈较高的甲状腺乳头状癌特异性。Sequenom Mass ARRAY提供的单一CpG位点甲基化定量数据显示TIMP3基因在甲状腺乳头状癌组织的甲基化率均值（0．28）高于结节性甲状腺肿的甲基化率均值（0．15）,差异有统计学意义（P〈0．05）。TIMP3基因启动子3个CpG位点在甲状腺乳头状癌组织中的甲基化率均值高于结节性甲状腺肿甲基化率,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 TIMP3基因CpG-16及CpG-17位点可能为甲状腺乳头状癌的启动子甲基化检测的关键位点,有望成为甲状腺癌早期诊断的分子标志物。     

细胞角蛋白、上皮钙粘蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达

目的检测细胞角蛋白（cytokeradn,CK19）、上皮钙粘蛋白（E—cadherin,E—cad）在甲状腺乳头状癌（PTC）组织中的表达,筛选甲状腺乳头状癌的辅助诊断指标及预测淋巴结转移的可能性。方法采用免疫组化S—P法,DAB显色检测结节性甲状腺肿伴乳头状增生15例,乳头状癌32例（无淋巴结转移22例,有淋巴结转移10例）中CK19、Ecadherin的表达。结果①CK19表达以甲状腺乳头状癌有淋巴结转移最强（100％）,无淋巴结转移较低（90．9％）,甲状腺乳头状增生更低（20％）,三者差异有显著性（x^2=29．371,P〈0．05）。②E—Cadhefin表达以甲状腺乳头状增生最强（100％）,甲状腺乳头状癌无淋巴结转移较低（36．4％）．有淋巴结转移更低（10％）,三者差异有显著性（x^2=25．647,P〈0．05）。③根据两种蛋白表达阳性率统计学分析,两种蛋白表达强度相互之间相关性没有统计学意义。结论①甲状腺乳头状癌组织中CK19表达率增高,而E—cadhefin表达率低。②CK19、E—cad．herin对于甲状腺乳头状癌的诊断具有一定的指导作用。③E—cadherin可作为预测淋巴结转移的指标。     

RET／PTC3在甲状腺乳头状癌中的表达

目的：探讨RET／PTC3在甲状腺乳头状癌中的表达。方法选择甲状腺乳头状癌、甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、正常甲状腺组织各20例,用免疫组织化学染色方法,观察RET／PTC3在甲状腺良恶性结节中表达的情况。结果20例甲状腺乳头状癌组织中RET／PTC3阳性表达15例（75．0％）,阴性5例（25．0％）;20例甲状腺腺瘤组织中阳性表达4例（20．0％）,阴性16例（80．0％）;20例结节性甲状腺肿组织中阳性表达2例（10．0％）,阴性18例（90．0％）;20例正常甲状腺组织中阳性表达1例（5．0％）,阴性19例（95．0％）。甲状腺乳头状癌组织中RET／PTC3阳性表达率明显高于甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿和正常甲状腺组织,差异有统计学意义（ P＜0．05）。 RET／PTC3阳性表达的平均光密度与积分光密度在各组织间均不相同,甲状腺乳头状癌RET／PTC3阳性表达的平均光密度及积分光密度显著增加,差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论 RET／PTC3在甲状腺乳头状癌中表达明显高于甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿和正常甲状腺组织,RET／PTC3有可能是鉴别甲状腺良恶性结节一个较好的分子标志物,尤其对甲状腺乳头状癌的诊断具有重要的临床意义。     

甲状腺乳头状癌患者血清与组织中三叶因子3的表达及意义

目的：研究三叶因子3（TFF3）在人甲状腺乳头状癌组织中的表达,探讨TFF3在甲状腺乳头状癌发生、发展中的作用。方法：采用RT-PCR、免疫组织化学法检测TFF3在75例甲状腺乳头状癌和10例结节性甲状腺肿组织中的表达,并进行分析。结果：甲状腺乳头状癌组织中TFF3mRNA水平高于结节性甲状腺肿,差异有统计学意义（P〈0.05）;血清中TFF3差异不明显。Western blot检测结果显示,TFF3蛋白在结节性甲状腺肿基本不表达,在甲状腺乳头状癌组织高表达（P〈0.05）;且甲状腺癌染成棕色的区域主要位于肿瘤边缘。TFF3的表达与甲状腺乳头状癌患者的年龄、性别、肿瘤个数无关,与肿瘤直径、淋巴结转移以及TNM分期相关。结论：TFF3在甲状腺乳头状癌中表达增高,TFF3可能通过影响多种细胞因子以及炎症细胞参与甲状腺癌的发生和发展。     

HMGA1在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的探讨高迁移率族蛋白A1（high mobility group protein A1,HMGAl）在人类甲状腺乳头状癌组织中的表达及临床意义。方法应用RT—PCR检测32例甲状腺乳头状癌组织及相应的癌旁正常组织和15例甲状腺腺瘤组织中HMGAl mRNA的表达情况;应用免疫组织化学法检测石蜡包埋的60例甲状腺乳头状癌组织和20例甲状腺腺瘤组织中HMGAl的蛋白表达水平。结果HMGAl mRNA在甲状腺乳头状癌组织中的表达量显著高于癌旁正常甲状腺组织（P〈0．01）及甲状腺腺瘤组织（P〈0．05）。HMGAl蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的阳性表达率显著高于甲状腺腺瘤组织（P〈0．01）,在有淋巴结转移组的阳性表达率高于无淋巴结转移组（P〈0．05）;HMGAl蛋白的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、包膜侵犯及TNM分期均无关（P〉0．05）。结论HMGAl的异常表达可能与甲状腺乳头状癌的发生发展和淋巴结转移有关,有望成为甲状腺乳头状癌诊治中的一个新的标志物。     

S100A4蛋白在甲状腺不同组织中的表达及与甲状腺癌转移的关系

目的:探讨S100A4蛋白的表达及与甲状腺癌转移的关系。方法:用免疫组化检测130份(例)甲状腺石蜡标本的S100A4蛋白表达情况,其中甲状腺癌80份(例)(乳头状癌55例、滤泡癌15例、髓样癌10例);甲状腺良性肿瘤50份(例)(结节性甲状腺肿、甲状腺滤泡型腺瘤各25例);癌旁甲状腺组织30例;正常甲状腺组织5例(对照)。结果:S100A4蛋白表达甲状腺癌组织阳性率77.5%(62/80),甲状腺良性肿瘤阳性率16.0%(8/50),癌旁甲状腺组织、甲状腺正常组织均呈阴性。甲状腺癌组织与后三者比,S100A4蛋白的表达均有统计学意义(P<0.01)。有、无淋巴结转移的癌组织S100A4蛋白表达阳性率分别为83.3%(25/30)和74.0%(37/50)(P<0.05)。有配对淋巴结转移的30例甲状腺癌中,S100A4表达率淋巴结转移癌高于相应原发灶(P<0.01)。结论:S100A4蛋白在甲状腺癌组织中过表达与转移有关,有希望成为一个能够预测肿瘤病情发展及指导临床治疗的标记物。     

叉头框转录因子M1在甲状腺乳头状癌组织中的表达及意义

 目的探讨叉头框转录因子M1（FoxM1 ）在人类甲状腺乳头状癌组织中的表达及其意义。方法利用实时荧光定量PCR、Western blot检测20例甲状腺乳头状癌组织及相应的20例癌旁正常组织和20例甲状腺腺瘤组织中FoxM1 mRNA和蛋白的表达水平并进行统计学分析。结果FoxM1 mRNA及蛋白表达在甲状腺乳头状癌组织中显著高于癌旁正常甲状腺组织及甲状腺腺瘤组织（均P <0.01）,癌旁正常甲状腺组织和甲状腺腺瘤组织比较差异无统计学意义（P >0.05）,甲状腺乳头状癌有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组（P <0.01）,包膜侵犯组高于包膜无侵犯组（P <0.01）。FoxM1 mRNA及蛋白表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小及TNM分期均无关（P >0.05）。结论FoxM1 mRNA及蛋白的异常表达可能与甲状腺乳头状癌的发生发展、淋巴结转移、包膜侵犯有关,有望成为甲状腺乳头状癌诊治中的一个新的标志物。     

MUC1黏蛋白及β-连锁蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的 了解MUCI黏蛋白、β-连锁蛋白(catenin)与甲状腺乳头状癌发生、生长、转移的相关性.方法 应用免疫组织化学方法,检测20例正常甲状腺标本、20例结节性甲状腺肿标本和53例甲状腺乳头状癌标本中MUCI黏蛋白、β-catenin的表达情况.根据甲状腺乳头状癌组织的大小、有无淋巴结转移、患者的年龄、性别将53例甲状腺乳头状癌组织分成亚组,通过计算机图像处理系统NIS-Elements BR 2.3测定MUC1表达的灰度值来显示表达量,光学显微镜下MUCI和β-catenin免疫组化染色判定来显示异常表达率.结果 甲状腺乳头状癌MUC1表达量(134±10,灰度值)显著高于正常甲状腺组织(99±6,灰度值)和结节性甲状腺肿组织(101±7,灰度值)(P<0.01);甲状腺乳头状癌MUCI异常表达率(56.6%)和β-catenin异常表达率(71.7%)显著高于结节性甲状腺肿组织(分别为15.0%和40.0%)和正常甲状腺组织(分别为5.0%和20.0%)(P<0.05或P<0.01).肿瘤直径≥1 cm组的MUC1表达量显著高于肿瘤直径<1 cm组(P<0.05);与无淋巴结转移组比较,有淋巴结转移组的MUC1表达量和MUC1异常表达率均显著增高(P<0.01).二分Logistic回归分析显示,显著影响甲状腺乳头状癌发生的因素有MUC1的异常表达、β-catenin的异常表达;与MUC1的表达有显著相关的因素为有无淋巴结转移、β-catenin的异常表达(P<0.05).结论 MUC1的异常表达在甲状腺乳头状癌的发生、进展和转移中有重要意义,MUC1的表达和β-catenin的表达有显著正相关.     

P57(KIP2)在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义

目的:研究P57(KIP2)在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组化S-P法检测10例结节性甲状腺肿、12例甲状腺腺瘤、43例甲状腺乳头状癌中P57(KIP2)的表达情况,并进一步分析其与临床病理因素间关系.结果:P57(KIP2)蛋白在结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤中均呈高表达(为100%),与其在甲状腺乳头状癌中的表达(为44.2%)差异有显著性(P＜0.01).P57(KIP2)蛋白的表达与甲状腺乳头状癌的有否淋巴结转移、有无包膜外侵犯有关(P＜0.05),而与年龄、肿瘤大小、临床分期无关(P＞0.05).结论:甲状腺乳头状癌组织P57(KIP2)蛋白表达下降,其在甲状腺乳头状癌发生、发展充当了重要角色,可以作为判断其恶性程度、是否易于淋巴结转移,包膜外侵犯等的标志物.     

层粘连蛋白在甲状腺乳头状癌组织的表达及其意义

目的: 探讨层粘连蛋白(laminin,Ln)与甲状腺乳头状癌的侵袭和淋巴结转移的相关性。方法: 应用免疫组织化学方法检测20例腺瘤、64例甲状腺乳头状癌的L n蛋白表达情况。结果: Ln的表达在甲状腺乳头状癌的阳性率为82.8%,腺瘤的阳性率为40.0%,差异有显著性(P<0.01)。Ln的表达Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级的病人中有淋巴结转移者分别占16.7%、58.1%、90.0%,差异有显著性(P<0.005)。L n在胞质表达的病人中有淋巴结转移者21.2%,无淋巴结转移者3.2%,差异无显著性(P>0.05)。结论: 在甲状腺乳头状癌中,Ln与良恶性、淋巴结转移特性有相关性;发现在淋巴结转移和浸润前缘的瘤细胞出现胞质表达及弥散分布和渗透现象。     

KAI1基因在甲状腺乳头状癌组织中的表达及意义

目的 探讨KAI1基因在人类甲状腺乳头状癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系.方法 应用Real Time-PCR检测21例甲状腺乳头状癌组织及相应的21例癌旁正常组织和7例甲状腺良性病变组织中KAI1 mRNA的表达情况,同时应用免疫组织化学法检测60例甲状腺乳头状癌组织和20例甲状腺腺瘤组织中KAI1蛋白的表达水平.结果 KAI1 mRNA在甲状腺乳头状癌组织中的表达量显著高于癌旁正常甲状腺组织（P＜0.05）及甲状腺良性病变组织（P＜0.05）.KAI1蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的阳性表达率为68.3%,在甲状腺腺瘤组织中阳性表达率为25%,二者差异有高度统计学意义（P＜0.01）.KAI1蛋白在甲状腺乳头状癌无淋巴结转移组的阳性表达率要高于有淋巴结转移组,差异有统计学意义（P＜0.05）;KAI1蛋白在男性和女性患者中的阳性表达率差异无统计学意义（P＞0.05）.KAI1蛋白的表达与患者的年龄、肿瘤大小、TNM分期及包膜侵犯均无关（P＞0.05）.结论 KAI1 mRNA及其蛋白的异常表达与甲状腺乳头状癌的发生、发展有关,有助于甲状腺乳头状癌的治疗和预后判断.     

趋化因子CXCL14在甲状腺乳头状癌中的表达水平及其临床意义

目的  探讨趋化因子CXCL14在甲状腺乳头状癌中的表达及其与临床病理的关系。方法  采用免疫组织化学方法、蛋白印迹法（Western blot）检测120例甲状腺乳头状癌、40例结节性甲状腺肿及40例正常甲状腺组织中CXCL14的表达水平，并分析其与甲状腺乳头状癌的临床病理特征的关系。结果  免疫组织化学结果表明，甲状腺乳头状癌组织中CXCL14蛋白阳性率（20.83%）较结节性甲状腺肿（85.00%）、正常甲状腺组织（75.00%）明显降低，差异有统计学意义（P <0.05）。Western blot结果表明，CXCL14蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达量为（0.823±0.143），明显低于结节性甲状腺肿组织（1.211±0.012）和正常甲状腺组织（1.219±0.004），差异有统计学意义（P <0.05）。CXCL14蛋白的表达与甲状腺乳头状癌的包膜浸润、淋巴结转移、肿瘤临床分期及肿瘤分化有关（P <0.05）。CXCL14高表达组的甲状腺乳头状癌患者的生存率明显高于CXCL14低表达组（P <0.05）。结论  CXCL14蛋白的表达可能成为判断甲状腺乳头状癌恶化程度及预后的指标。

     

eIF4E与磷酸化eIF4E结合蛋白1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的 观察真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)及磷酸化eIF4E结合蛋白1(p-4EBP1)在甲状腺乳头状癌组织中的表达,并探讨其与甲状腺乳头状癌的侵袭、转移等临床病理特征间的关系.方法 采用免疫组化EnVinsion法检测66例乳头状癌(经典型乳头状癌37例,滤泡型乳头状癌29例)、20例结节性甲状腺肿伴乳头状增生及上述病例的肿瘤旁正常甲状腺组织中eIF4E与p-4EBP1的表达.结果 在肿瘤旁正常甲状腺组织、甲状腺肿伴乳头状增生及乳头状癌中,eIF4E的阳性率分别为11.6%(10/86)、50.0%(10/20)和84.8%(56/66)(P＜0.01);p-4EBP1的阳性率分别为8.1%(7/86)、40.0%(8/20)和66.7%(44/66)(P＜0.01),并且p-4EBP1在滤泡型乳头状癌中的表达显著高于其在经典型乳头状癌中的表达(P＜0.01).eIF4E在有腺外侵袭和淋巴结转移的病例中的阳性率分别为96.7%(29/30)和100.0%(29/29),分别高于无腺外侵袭和无淋巴结转移的病例,后者阳性率分别为75.0%(27/36)和73.0%(27/37)(P＜0.05).而p-4EBP1在这两组病例中的表达差异则无显著性意义(P＞0.05).结论 和正常甲状腺及甲状腺良性病变相比,eIF4E和p-4EBP1在乳头状癌中存在过表达;eIF4E的过表达与乳头状癌的侵袭与转移关系密切,在乳头状癌的进展中可能发挥了重要作用.