两种消毒剂对分枝杆菌杀灭效果的比较

摘要 目的 比较两种消毒剂对分枝杆菌的杀灭效果,为实际消毒应用提供依据。方法 采用悬液定量杀菌试验方法,对某聚维酮碘和二氯异氰尿酸钠杀灭几种分枝杆菌标准株的效果进行比较实验。结果 用含有效碘250 mg/L消毒剂作用1 min,对悬液内龟分枝杆菌脓肿亚种杀灭对数值＞4.00;用含有效碘500 mg/L消毒剂作用1 min,对悬液内结核杆菌H37Rv株和H37Ra株的杀灭对数值均＞4.00。用含有效氯1 000 mg/L消毒剂作用2.5 min,对悬液内龟分枝杆菌脓肿亚种的杀灭对数值＞4.00;含有效氯1 000 mg/L和2 000 mg/L消毒剂作用10 min,对悬液内结核杆菌H37Rv株和H37Ra株的杀灭对数值均＞4.00。标准菌株H37Rv杀灭对数值＞4.00。结论 杀灭龟分枝杆菌和结核杆菌H37Rv株与H37Ra株所需含氯消毒剂浓度和作用时间均高于聚维酮碘。     

碘伏消毒液对结核分枝杆菌杀灭效果的研究

目的观察碘伏消毒液对结核分枝杆菌标准株H37Ra和三种临床分离出来的耐药结核分枝杆菌的杀灭效果。方法采用悬液定量杀菌试验方法,进行了实验室研究。结果用含有效碘250 mg/L的碘伏消毒液作用5min,对悬液内结核分枝杆菌标准菌株杀灭对数值>4.00。用含有效碘250 mg/L的碘伏消毒液作用3 min,对耐利福平结核分枝杆菌株杀灭对数值>4.00。含有效碘250 mg/L的碘伏消毒液作用1 min,对利福平与异烟肼复合耐药结核分枝杆菌株杀灭对数值>4.00。含有效碘250 mg/L的碘伏消毒液作用3 min,对4种药物联合耐药结核分枝杆菌株杀灭对数值>4.00。结论碘伏消毒液对结核分枝杆菌标准株H37Ra以及3种临床分离耐药结核分枝杆菌株具有良好杀菌作用,结核分枝杆菌标准菌株H37Ra对碘伏的抵抗力强于耐药菌株。     

大肠杆菌耐消毒剂基因检测与消毒剂抗性研究

目的研究临床分离的多重耐药大肠杆菌耐消毒剂基因携带状况及其对消毒剂抗性水平。方法采用聚合酶链反应(PCR)法和体外抗菌试验方法进行实验室检测。结果在检测的8株临床分离的大肠杆菌中,检出3株携带qacE△1基因,检出率37.5%。含氯消毒剂对3株qacE△1基因阳性大肠杆菌的MIC值均高于标准菌株。碘伏消毒剂和戊二醛消毒剂只对1株qacE△1基因阳性大肠杆菌的MIC值高于标准菌株,其他均与标准株相同。结论临床分离的多重耐药大肠杆菌qacE△1基因阳性率较高,携带qacE△1基因阳性的大肠杆菌对含氯消毒剂有产生抗性的倾向。     

MRSA对6种消毒剂耐药性及相关抗性基因的比较研究

目的观察医院分离的2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和金黄色葡萄球菌标准株(ATCC 6538)对6种消毒剂的抗性与耐药基因变化。方法选择最小抑菌浓度(MIC)试验、悬液定量杀菌试验和耐消毒剂基因PCR检测。结果 MIC检测,医院分离的2株MRSA,对6种消毒剂的MIC,明显高于标准菌株。只有醋酸氯己定对MRSA-1的MIC值与标准菌株相同。PCR检测,2株MRSA均未携带耐消毒剂基因qacA/B。定量杀菌实验,苯扎氯铵、过氧乙酸、双癸基二甲基氯化铵对MRSA-1菌株的杀灭对数值低于标准菌株;苯扎氯铵、过氧乙酸、有效氯对MRSA-2菌株的杀灭对数值低于标准株。结论医院分离的2株MRSA对消毒剂的抗性普遍高于标准菌株,PCR检测未发现qacA/B基因。     

鲍曼不动杆菌抗药基因检测及对消毒剂抗性研究

目的研究临床分离的鲍曼不动杆菌携带抗药基因qacE△1-sulI情况及对消毒剂抗性水平。方法采用PCR法和肉汤稀释法分别检测临床分离鲍曼不动杆菌qacE△1-sulI基因和对消毒剂抗性变化,并与大肠杆菌标准菌株进行比较。结果临床分离的7株鲍曼不动杆菌中,4株qacE△1-sulI基因阳性,3株阴性。醋酸氯己定对7株鲍曼不动杆菌的MIC值为2mg/L~4mg/L,MBC值为4mg/L~125mg/L,均高于大肠杆菌标准株。对氯间二甲基苯酚对7株鲍曼不动杆菌的MIC值为78mg/L~156mg/L;苯扎溴铵对7株鲍曼不动杆菌的MIC值为9.8mg/L~19.5mg/L;聚维酮碘与聚醇醚碘对7株鲍曼不动杆菌的MIC值与标准菌株相同,分别为1000mg/L和500mg/L,均未超过标准菌株。结论鲍曼不动杆菌携带qacE△1-sulI基因携带率较高,抗药基因阳性的菌株对多数消毒剂耐受浓度增加。     

三种常用消毒剂对分枝杆菌杀灭效果的观察

目的研究3种临床常用消毒剂对分枝杆菌的杀灭效果。方法采用悬液定量杀菌试验方法,对3种常用的卤素类消毒剂杀灭龟分枝杆菌的效果进行了实验室观察。结果在常温下,用含有效氯500 mg/L的含氯消毒泡腾片溶液作用10 min;有效氯1 000 mg/L二氯海因消毒泡腾片作用2.5 min;有效碘1 000 mg/L的碘伏消毒液作用1 min;对悬液内龟分枝杆菌的杀灭对数值均5.00。3种消毒剂均随着有效浓度的增加,作用时间的延长,杀灭效果逐渐递增。结论 3种卤素类消毒剂均在较低浓度下,能有效杀灭悬液内龟分枝杆菌。     

多重耐药鲍曼不动杆菌外排泵基因检测及其对消毒剂敏感性研究

目的检测多重耐药鲍曼不动杆菌外排泵基因携带情况及其对3种消毒剂敏感性。方法采用聚合酶链反应和悬液定量杀灭试验方法,对临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌外排泵基因和3种消毒剂对其杀灭效果进行了检测。结果从临床病人标本中分离的30株多重耐药鲍曼不动杆菌中,检出6种外排泵基因,包括5种阳性检出模式。用浓度为300 mg/L的苯扎溴铵消毒液作用2 min,600 mg/L的醋酸氯己定消毒液分别作用3 min,100 mg/L过氧乙酸消毒液分别作用3 min,对悬液内30株临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌平均杀灭对数值均≥5.00。结论临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌外排泵基因携带率较高,本组3种消毒剂在常规使用浓度和作用时间下,对其具有较好的杀灭效果,敏感性高。     

医院环境分离致病菌对常用消毒剂的抗性

摘要 目的 研究医院环境中分离出的致病菌株对常用消毒剂的敏感性,为科学选择有效消毒剂提供依据。方法 检测苯扎溴铵、含氯消毒剂和碘伏对临床分离的致病菌株的最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）,与标准范围比较判断致病菌的抗消毒剂情况;采用聚合酶链反应（PCR）检测抗性基因qacE△1-sul1的携带情况。结果 自医院内环境中分离的多重耐药菌包括铜绿假单胞菌30株、肺炎克雷伯杆菌10株、鲍曼不动杆菌6株。其中铜绿假单胞菌占65.2%,远高于其他两种致病菌。25株铜绿假单胞菌检出qacE△1-sul1抗性基因,携带率为80.33%;肺炎克雷伯杆菌2株检出qacE△1-sul1抗性基因,携带率为20.00%,鲍曼不动杆菌抗性基因未检出。三者差异的比较具有统计学意义。结论 医院外环境中有多重耐药致病菌株的存在,部分菌种或个别菌株对常用消毒剂存在抗性。建议临床根据监测情况对消毒剂的时间浓度做适时调整,及时更换产生耐药菌株较多的消毒剂,做好环境清洁和手卫生消毒,减少致病菌耐药菌株的产生。     

医院感染铜绿假单胞菌耐消毒剂基因研究

目的:了解医院感染多重耐药铜绿假单胞菌的消毒剂与磺胺类抗生素耐药相关基因存在状况,探讨铜绿假单胞菌对医院常用消毒剂的耐药机制.方法;琼脂稀释法测定50株多重耐药铜绿假单胞菌及标准菌株对医院常用消毒剂的最低抑菌浓度,并用PCR法检测消毒剂耐药基因qacE△1-sul1.结果:50株多重耐药铜绿假单胞菌对医院常用消毒剂苯扎溴铵的最低抑菌浓度为8～32 pg/mL,高于标准菌株最低抑菌浓度(P<0.01);消毒剂耐药基因qacE△1-sul1阳性率100%.结论:铜绿假单胞菌对医院常用消毒剂苯扎溴铵耐药;消毒剂与磺胺类等抗生素耐药相关基因qacE△1-sul1携带率较高,细菌携带qacE△1-sul1基因是消毒剂耐药主要因素.     

结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药基因突变快速检测方法的建立

目的建立结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药基因突变的快速检测方法。方法根据结核分枝杆菌标准株H37Rv序列，自行设计覆盖rpoB、katG、inhA基因突变区的系列寡核苷酸探针，并检测临床样品中结核分枝杆菌的基因突变情况，以此来判断耐药结果。结果在56个利福平耐药菌株中，有50个菌株都在rpoB基因上榆出有突变，利福平耐药突变检出率为89．3％（50／56）；有30个利福平敏感菌株rpoB基因上都未检出突变。有58个异烟肼培养的耐药菌株中有47个在katG或inhA基因上检出有突变，异烟肼耐药突变检出率为81．0％（47／58）；有30个异烟肼敏感菌株katG或inhA基因上未检出突变。结论用膜芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性，具有较高的特异性和敏感性，可用于临床结核分枝杆菌耐药性的检测。     

不同来源白色念珠菌标准株对常用消毒剂抗力的研究

目的观察不同来源(分别来自中国和美国)同为ATCC10231株的白色念珠菌对常用消毒剂的抗力。方法采用悬液定量杀菌试验法在实验室对不同来源白色念珠菌抗化学消毒剂能力进行了比较研究。结果用含1000mg/L有效氯的含氯消毒液作用5min,对中国白色念珠菌标准株平均杀灭率为99.01%,对美国标准株平均杀灭率为99.99%。用50mg/L有效碘的碘伏溶液作用0.5min,对中国白色念珠菌标准株平均杀灭率为98.90%,对美国标准株平均杀灭率为99.98%。用750mg/L苯扎氯铵作用0.5min,对中国白色念珠菌标准株平均杀灭率为99.35%,对美国标准株杀灭率为100%。用750mg/L醋酸氯己定消毒液作用0.5min,对中国白色念珠菌标准株平均杀灭率为99.00%,对美国标准株平均杀灭率为99.99%。结论同为标准株ATCC10231的白色念珠菌,对相同化学消毒剂的抗力国内使用的标准株明显高于美国标准株,提示用于消毒效果评价的标准菌株抗力存在差异。     

携带耐药基因的大肠杆菌对消毒剂抗力研究

目的研究临床分离的大肠杆菌耐消毒剂基因携带情况及其对消毒剂抗力水平。方法采用PCR检测法与肉汤稀释法对临床分离大肠杆菌耐药基因和对消毒剂的最小抑菌浓度进行检测,同时与消毒试验标准菌株作平行比较。结果临床分离的7株大肠杆菌中,有4株耐药基因qacE△1-sulIPCR扩增阳性;该7株大肠杆菌基因qacA/B均为阴性。醋酸氯己定对7株大肠杆菌的最小抑菌浓度为1~2mg/L,对大肠杆菌标准株为2mg/L。对氯间二甲苯酚对7株临床分离大肠杆菌与标准株的最小抑菌浓度均为156mg/L。苯扎溴铵对7株大肠杆菌的最小抑菌浓度为19.5mg/L,与标准菌株相同。聚维酮碘和聚醇醚碘对7株临床分离大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为1000mg/L与500mg/L,与标准株相同。结论临床分离大肠杆菌多数存在耐药基因,其对常用消毒剂的抗力与标准菌株相当。     

耐抗生素铜绿假单胞菌对消毒剂抗力试验观察

目的研究临床分离的铜绿假单胞菌对消毒剂的抗力水平,了解耐抗生素铜绿假单胞菌与消毒剂抗药性的相互关系。方法采用纸片扩散法和悬液定量杀菌试验方法,以铜绿假单胞菌标准株作比较进行了实验室观察。结果30株铜绿假单孢菌中,对β-内酰胺复合物(青霉素类)耐药率为100%,对氯霉素耐药率为90%;耐药率最低者是碳青霉素类为19.67%。含苯扎溴铵400 mg/L消毒液作用7 m in,对30株临床分离铜绿假单胞菌杀灭对数值<5.00者占43.33%;含400 mg/L本扎溴铵对铜绿假单胞菌标准株作用7m in,杀灭对数值全部<5.00。含有效氯200 mg/L的含氯消毒剂对临床分离的铜绿假单胞菌作用7 m in,杀灭对数值<5.00的菌株占10%,仍有部分不合格;对标准株作用3 m in杀灭对数值均>5.00即全部合格。有效碘75mg/L的碘伏消毒液对临床分离铜绿假单胞菌作用7 m in,杀灭对数值<5.00的菌株占16.67%,有部分不合格;对标准株作用5 m in杀灭对数值均>5.00即全部合格。结论具有对抗生素耐药率高、多重耐药特性的临床分离的铜绿假单胞菌对苯扎溴铵抗力水平与标准菌株一致,对碘伏和含氯消毒剂抗力水平略高于标准菌株。     

医院常用消毒剂对耐药金黄色葡萄球菌的杀灭效果观察

摘要 目的 观察医院常用消毒剂对耐药金黄色葡萄球菌的杀灭效果,为选购医院消毒剂提供参考。 方法 采用悬液定量杀菌试验,对4种医院常用消毒剂杀灭临床分离的耐药金黄色葡萄球菌效果进行观察。 结果 用60%乙醇、有效氯400 mg/L的含氯泡腾片消毒液、有效碘200 mg/L的碘伏消毒液均可在1 min之内完全杀灭耐药金黄色葡萄球菌。75%乙醇消毒液和某含聚六亚甲基胍复合醇手消毒液均可在30 s达到完全杀灭耐药金黄色葡萄球菌。 结论 4种医院常用消毒剂在日常使用浓度下均能有效杀灭临床分离的耐药金黄色葡萄球菌。     

凝固酶阴性葡萄球菌抗药基因检测及其对消毒剂抗性研究

目的研究医院分离的凝固酶阴性葡萄球菌抗药基因携带情况及其对消毒剂的抗性关系。方法采用PCR方法和肉汤稀释法,分别对凝固酶阴性葡萄球菌qacA基因及其对消毒剂抗性进行了检测。结果从医院环境和医务人员手上分离的63株凝固酶阴性葡萄球菌中,检出12株携带qacA基因,检出率为19.05%。聚维酮碘对12株携带抗药基因的菌株MIC值在250~500 mg/L之间,对其中3株菌的MBC为1 000 mg/L,超过标准菌株的500 mg/L。12株携带抗药基因的凝固酶阴性葡萄球菌中,二氯异氰尿酸对其中3株菌的MIC值为500 mg/L、对其中5株菌的MBC值为500 mg/L;三氯异氰尿酸对其中7株菌的MIC值介于500~1000 mg/L之间、有3株MBC值为1 000 mg/L,均超过标准菌株的250 mg/L。结论凝固酶阴性葡萄球菌抗药基因携带率为19.05%,携带qacA基因的凝固酶阴性葡萄球菌部分菌株分别对含碘消毒剂和含氯消毒剂的抗性有所增加。     

四种消毒剂对鲍曼不动杆菌杀灭效果的实验研究

目的观察四种常用消毒剂对临床分离的鲍曼不动杆菌的杀灭效果。方法采用悬液定量杀菌试验法,对碘伏等四种消毒剂杀灭目标细菌的效果进行了实验观察。结果用含有效碘125 mg/L的聚维酮碘消毒液、含体积分数50%的乙醇溶液、含2 000 mg/L醋酸氯己定的消毒液、50 mg/L季铵盐的消毒液对临床分离的鲍曼不动杆菌作用1.0 min,杀灭对数值均≥5.00。除乙醇之外,杀灭鲍曼不动杆菌标准株所需消毒剂浓度均低于临床分离菌株。结论除乙醇之外,另外三种常用消毒剂杀灭临床分离的鲍曼不动杆菌所需浓度比标准株更高,提示临床分离菌株可能产生了耐受性。     

嗜麦芽窄食单胞菌耐消毒剂-磺胺基因和I类整合酶基因的研究

目的 了解临床分离嗜麦芽窄食单胞菌消毒剂-磺胺耐药基因(qacEΔ1-sulI)和I类整合酶基因(intI 1)的存在情况.方法 收集临床分离的27株嗜麦芽窄食单胞菌,采用PCR法检测qacEΔ1-sulI基因和I类整合酶基因.结果 27株嗜麦芽窄食单胞菌检出qacEΔ1-sulI基因4株,检出率为14.8%.I类整合酶基因8株,检出率为29.6%.结论 临床分离嗜麦芽窄食单胞菌携带qacEΔ1-sulI基因和intI 1基因.     

四种消毒剂对两种临床感染菌的杀灭效果

目的观察4种临床常用消毒剂对医院感染白色念珠菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的杀灭效果,以了解其对消毒剂抗力变化情况。方法用悬液定量杀菌试验方法,对以碘、醛、有效氯和氯己定等4种杀菌成分的消毒剂杀灭两种医院感染菌的效果进行了实验室观察。结果以含有效碘5000mg/L的碘伏作用1.5min,20g/L戊二醛作用3min,有效氯1000mg/L的三氯异氰尿酸泡腾片消毒液作用1min,含40g/L葡萄糖酸氯己定溶液作用2min,对白色念珠菌和金黄色葡萄球菌标准株杀灭率均为100%。以含有效碘50mg/L碘伏、125mg/L戊二醛、有效氯250mg/L三氯异氰尿酸泡腾片、2500mg/L葡萄糖酸氯己定溶液,均作用10min,对白色念珠菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院感染菌株和标准株的杀灭率均达到100%。结论临床常用的4种消毒剂对白色念珠菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院感染菌株杀灭效果与标准株没有明显差别。     

qRT-PCR检测结核分枝杆菌蛋白抗原编码基因表达水平

目的运用实时定量PCR（quantitative real-time,qRT-PCR）检测结核分枝杆菌蛋白Ag85B、38kDa及MPT64编码基因的表达水平,探讨结核分枝杆菌耐药菌株和敏感株,北京基因型和非北京基因型的蛋白抗原在转录水平的差异性及qRT-PCR诊断活菌的价值。方法根据Genbank提供的序列,设计目的基因fbpB、psts1、mpt64及内参基因Sigа的特异性引物,将扩增片段克隆入载体pMD18-T simple,重组质粒经纯化及倍比稀释,应用SYBR GreenⅠ荧光染料建立检测fbpB、psts1、mpt64基因表达水平的实时定量PCR方法。选用46株结核分枝杆菌临床分离株,以及2株非结核分枝杆菌。应用qRT-PCR检测上述菌株、H37Rv国际标准株fbpB、psts1、mpt64基因的表达水平。结果结核分枝杆菌活菌的扩增结果呈典型的S型曲线,而结核分枝杆菌死菌和非结核分枝杆菌呈水平直线,没有检测到荧光信号;耐药组中的mpt64基因表达水平低于敏感组及H37Rv标准株,有统计学意义（t=3.093,P〈0.01;t=2.545,P〈0.05）,北京基因型组中的psts1基因表达水平低于非北京基因型组及H37Rv标准株。结论有统计学意义（t=2.567,P〈0.05;t=2.373,P〈0.05）。结论成功建立了fbpB、psts1、mpt64基因的qRT-PCR检测方法,该方法可以快速判断活菌与死菌。检测发现耐药组中的mpt64基因表达水平低于敏感组及H37Rv标准株;北京基因型组中的psts1基因表达水平低于非北京基因型组及H37Rv标准株。     

六种快分枝杆菌对含氯消毒剂的抵抗力比较研究

采用悬液定量杀菌试验方法,比较6种快生长的分枝杆菌对含氯消毒剂的抗力,筛选分枝杆菌消毒试验菌株,并选择出抗力较强者。结果,以作用5 m in、杀灭率达到99.9%为标准,偶发分枝杆菌和龟分枝杆菌脓肿亚种需要用含有效氯80 mg/L的二氯异氰尿酸钠;草分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、迪氏分枝杆菌和变黄分枝杆菌需要40 mg/L有效氯。结论,偶发分枝杆菌和龟分枝杆菌脓肿亚种对含氯消毒剂的抵抗力较强,可以作为含氯消毒剂效果评价参考菌株。