UPLC同时测定九味羌活颗粒中4种成分的含量

目的:针对九味羌活颗粒中4种成分的含量,建立超高效液相快速测定方法,有效评价九味羌活颗粒的质量。方法:采用UPLC-UV法,色谱柱为C18色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长310 nm。结果:紫花前胡苷在4.38~438 ng、阿米醇苷在0.91~91.29 ng、异欧前胡素在0.60~60.04 ng、羌活醇在1.30~130.20 ng的范围内线性关系良好(r=0.9999)。平均回收率分别为98.8%(紫花前胡苷)、97.0%(阿米醇苷)、95.6%(异欧前胡素)、102.8%(羌活醇)。结论:建立的含量测定方法专属性强、重复性好,操作简便,可以有效地评价不同样品之间的质量差异。     

羌活不同部位有机酸和香豆素类化合物含量的比较研究

目的:探究羌活不同部位有效成分的分布特征,为其药材质量评价和资源合理利用提供科学依据。方法:采用HPLC-DAD法同时测定羌活根部(根和根茎)、茎、叶片、叶柄、种子5个部位中绿原酸、阿魏酸、紫花前胡苷、补骨脂素、香柑内酯、欧前胡素、羌活醇和异欧前胡素的含量,并对测定结果进行分析比较。色谱柱:TSK gel ODS-80Ts QA C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流速:0.6 mL.min-1;进样量:10μL;流动相A相为纯甲醇,B相为0.3%的冰醋酸水溶液,梯度洗脱。结果:羌活不同部位间各活性成分的含量存在一定的差异,含量较高的羌活醇和异欧前胡素主要富集于根部,绿原酸在全草中广泛分布。不同部位中紫花前胡苷、补骨脂素和佛手柑内酯的含量均较少,且补骨脂素主要分布在叶片和叶柄中。结论:羌活根和根茎中活性成分总含量明显高于其他部位,与传统上以其根茎及根入药相符。地上部分绿原酸和一些未知成分的含量较高,也具有一定的开发价值。     

HPLC法测定紫花前胡中紫花前胡苷的含量

目的:建立HPLC法测定中药紫花前胡中紫花前胡苷含量的方法,为其质量控制提供依据.方法:采用反相高效液相色谱法,Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-水(40:60),流速为1mL·min-1,检测波长334 nm,柱温40℃.结果:紫花前胡苷在此色谱条件下获得良好分离,线性范围为25.0～300.0 ng(r2=0.9999),平均回收率为98.6%,RSD1.8%.结论:首次建立了两相系统HPLC法测定紫花前胡药材中紫花前胡苷含量的方法,该方法准确,可靠,对紫花前胡药材及其制剂的质量控制有较重要意义,已被2010版<中国药典>采纳.     

高效液相色谱-质谱联用法测定北沙参中欧前胡素和异欧前胡素的含量

目的建立北沙参中欧前胡素和异欧前胡素含量测定的方法。方法采用高效液相色谱-质谱法:色谱柱:赛默飞世尔Accucore C18(100 mm×2.1 mm,2.6μm);流动相:5 mmol·L-1甲酸溶液-甲醇(80∶20,v/v);流速:0.2 m L·min-1,柱温:20℃。结果欧前胡素和异欧前胡素均在10~5000ng·m L-1与峰面积具有良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.3%和99.1%,RSD分别为1.3%和1.1%(n=6)。结论本方法能够快速、准确、方便的检测北沙参中欧前胡素和异欧前胡素的含量,可作为北沙参质量评价的依据。     

高效液相色谱法同时测定清眩片中欧前胡素、异欧前胡素和阿魏酸的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定清眩片中欧前胡素、异欧前胡素和阿魏酸含量的方法.方法:采用UltimateTM C18分析柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为甲醇-1%冰醋酸梯度洗脱,流速1.0mL·min-1.检测波长为302nm.结果:欧前胡素、异欧前胡素、阿魏酸分别在0.20~20.40、0.05~11.60、0.16~16.20μg·mL-1内有良好的线性关系;平均回收率分别为99.37%±0.77%、101.40%±1.21%、98.63%±0.87%.结论:本法操作简便,结果可靠,重现性好,可用于测定清眩片中3种成分的含量.     

妇必舒阴道泡腾片中苦参碱、欧前胡素和蛇床子素的含量测定

目的采用HPLC测定妇必舒阴道泡腾片中苦参碱、欧前胡素和蛇床子素的含量。方法苦参碱色谱条件Kromasil100-5 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(用三乙胺调节p H值至7.6)(17∶83),检测波长为220 nm;流速为1 m L·min-1;欧前胡素、蛇床子素色谱条件:色谱柱为Agela Innoval C18(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈-水(65∶35);检测波长为248 nm;流速为1 m L·min-1。结果苦参碱、欧前胡素和蛇床子素线性范围分别为156.0~3 120.0 ng,10.26~256.50 ng和36.98~924.50 ng(r=1.000 0),平均回收率分别为97.0%,102.8%和99.5%,RSD值分别为1.8%,0.7%和0.3%。结论该方法简便,结果准确,重现性好,可用于妇必舒阴道泡腾片的质量控制。     

液相色谱-串联质谱法测定Beagle犬血浆中升麻苷H-1的浓度

目的:建立液相色谱-串联质谱的方法测定Beagle犬血浆中升麻苷H-1的浓度。方法:采用20(S)-人参皂苷Rg3为内标,血浆样品经液-液萃取后,以甲醇和水为流动相,梯度洗脱进行分离。通过液相色谱-串联质谱法以多反应监测(MRM)方式检测。用于定量的离子反应分别为m/z615.5→369.6(升麻苷H-1)和783.5→161.1(内标人参皂苷Rg3)。结果:血浆中升麻苷H-1的线性范围为0.5～1000 ng·mL-1,定量下限为0.5 ng·mL-1。在升麻苷H-1浓度为2.0,50,500ng·mL-1时的提取回收率分别为90.4%,94.0%,89.0%。方法的日内和日间精密度(RSD)分别为5.9%,4.7%,3.8%和10.8%,6.3%,7.8%。结论:该方法灵敏、准确,重复性好,可用于Beagle犬血浆中升麻苷H-1的浓度测定。     

UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中黄芩苷的浓度

目的建立UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中黄芩苷的浓度,并初步研究大鼠尾静脉注射黄芩苷纳米结晶后药动学特征。方法采用液液萃取法提取药物,以地西泮为内标,色谱柱为C8柱(100 mm×2.0mm,2.2μm),0.2%甲酸水溶液-甲醇为流动相,流速为0.4 mL·min-1。样品在三级四极杆串联质谱中经ESI源离子化后以多反应离子监测方式测定。结果黄芩苷的线性范围为5⁵ 000 ng·mL-1,定量下限为5 ng·mL-1,平均方法回收率在87.4%5 000 ng·mL-1,定量下限为5 ng·mL-1,平均方法回收率在87.4%¹00.9%,日内、日间变异系数均<15%。结论方法灵敏、准确、快速、专属性强,适用于黄芩苷的血药浓度测定和药物代谢动力学研究。     

HPLC同时测定宽叶羌活药材中5种成分含量

目的:建立同时测定宽叶羌活药材中5种成分含量的高效液相色谱法。方法:采用GL Sciences Wondasil C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm);乙腈(B)-0.3%醋酸水(A)为流动相;体积流量1 mL﹒min~(-1);梯度洗脱;柱温25℃;检测波长为315 nm;进样量10μL。结果:5种成分的分离度好,标准曲线在线性范围内相关性良好,r均大于0.9990,加样回收率均值为97.37%～102.59%,RSD为0.74%～3.36%。13批宽叶羌活紫花前胡苷的含量在0.661～20.059 mg﹒g~(-1),阿魏酸的含量在1.995～21.238 mg﹒g~(-1),佛手柑内酯的含量在0.425～20.990 mg﹒g~(-1),羌活醇的含量在0.398～45.303 mg﹒g~(-1),异欧前胡素的含量在7.079～102.393 mg﹒g~(-1)。结论:所建立的同时测定5种成分的方法操作简单、具有较好的重复性和稳定性,可以有效地评价宽叶羌活药材的质量。     

微波辅助萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定辣椒中3种辣椒素

目的:建立微波辅助萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定辣椒中3种辣椒素类化合物(辣椒素、二氢辣椒素、降二氢辣椒素)含量。方法:辣椒样品经微波辅助萃取甲醇稀释后分析。色谱分离采用C18反相色谱柱(150 mm×2.1 mm,3.5μm),流动相为0.1%甲酸水溶液和乙腈,梯度洗脱。串联质谱在多反应监测模式下检测目标分析物,以保留时间和特征离子对(母离子和2个碎片离子)信息比较进行定性和定量分析。结果:3种辣椒素的检出限为0.01～0.11 ng.mL-1,定量限为0.03～0.36 ng.mL-1,辣椒素、二氢辣椒素、降二氢辣椒素平均回收率分别为95.4%,94.3%,93.1%;RSD分别为2.1%,2.5%,2.7%。结论:该方法简便、准确、灵敏,可用于辣椒中3种辣椒素的分析。     

羌活水溶性部分的化学成分

目的对羌活(Notopterygium incisumTing ex H.T.Chang)的水溶性部分化学成分进行研究。方法采用开放ODS柱色谱和凝胶柱色谱分离纯化,NMR、MS等波谱技术分析鉴定结构。结果分离并鉴定了5个化合物,分别为绿原酸(chlorogenic acid,1)、紫花前胡苷(nodakenin,2)、香柑酚OβD吡喃葡萄糖苷(bergaptolOβDglucopyranoside,3)、前胡苷Ⅴ(decurosideⅤ,4)和阿魏酸(fer-ulic acid,5)。结论其中绿原酸为首次从羌活中分离得到。     

液-质联用法测定补虚颗粒中升麻素苷的含量

目的:通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS),采用选择监测离子法测定补虚颗粒中升麻素苷的含量。方法:样品用60%甲醇提取,通过液相色谱-串联质谱测定其中升麻素苷的含量,在正离子模式下,采用选择离子监测(SIM)方式进行测定,其监测离子对为m/z469→307。结果:升麻素苷在1～100μg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.998 3),平均回收率96.0%,检测限为1.0ng.mL-1。结论:该方法快速、灵敏,结果准确,适用于复杂中药基质中升麻素苷的检测。     

高效液相色谱波长切换法同时测定清凉膏药中7种成分的含量

目的建立高效液相色谱波长切换法测定清凉膏药中氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B1、马替诺皂苷的含量。方法采用Dikma Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃;采用甲醇-乙腈(3∶1)与0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.9 mL·min~(-1);氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素的检测波长为310 nm,梓醇的检测波长为210 nm,毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B1、马替诺皂苷的检测波长为330 nm。结果氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B1、马替诺皂苷的线性范围分别为2.17～43.40 mg·L~(-1)(r=0.9991),1.76～35.20 mg·L~(-1)(r=0.9998),0.88～17.60 mg·L~(-1)(r=0.9993),3.26～65.20mg·L~(-1)(r=0.9996),2.37～47.40 mg·L~(-1)(r=0.9999),1.19～23.80 mg·L~(-1)(r=0.9995),1.46～29.20 mg·L~(-1)(r=0.9994);平均加样回收率分别为98.3%(RSD=1.4%)、97.6%(RSD=1.1%)、97.0%(RSD=1.5%)、100.0%(RSD=0.69%)、99.2%(RSD=0.99%)、97.4%(RSD=1.0%)、98.4%(RSD=0.89%)。结论该方法操作便捷、重复性好,可用于清凉膏药的的定量分析和质量评价。     

HPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中槐角苷及染料木素

目的:建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱方法测定大鼠血浆中槐角苷及其苷元染料木素。方法:血浆经过乙酸乙酯提取,以大豆苷元为内标,采用Zorbax SB-C18(2.1 mm×30 mm,3.5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.001%甲酸铵溶液(加氨水调节pH至7.5)(45∶55),流速0.2 mL·min-1;质谱条件为电喷雾离子源(ESI源),负离子模式检测,扫描方式为多反应监测(MRM),定量离子对为m/z 252.9→223.7(大豆苷元)、m/z 431.1→267.6(槐角苷)、m/z 268.8→132.8(染料木素)。结果:槐角苷浓度在1.072～536 ng·mL-1,染料木素浓度在1.068～534 ng·mL-1的范围内线性关系良好(r>0.995);日间和日内精密度RSD均小于10%,低、中、高3个浓度的提取回收率在85%～97%之间。结论:本法可用于大鼠血浆中槐角苷和染料木素的测定及其药代动力学研究。     

荆防合剂质量标准提升研究

目的 提升荆防合剂的质量标准。方法 采用薄层色谱法对荆防合剂中的川芎、荆芥、羌活、防风、柴胡、甘草进行定性鉴别;采用双波长高效液相色谱法测定紫花前胡苷、柚皮苷、新橙皮苷3个指标性成分的含量,色谱柱为Agilent Zorbax SB C₁₈柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,检测波长分别为336 nm(紫花前胡苷)和283 nm(柚皮苷和新橙皮苷),进样量为5μL。结果 川芎、荆芥、羌活、防风、柴胡、甘草的薄层色谱鉴别特征明显,专属性强,且阴性对照均无干扰;紫花前胡苷、柚皮苷、新橙皮苷质量浓度分别在10.14～135.20μg/mL、10.49～157.29μg/mL、8.68～86.84μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 8,0.999 4,0.999 5(n=6);经方法学考察,各指标性成分的含量测定均符合要求。结论 该方法操作简单、结果可靠、专属性强、重复性好,可用于荆防合剂的质量控制。     

白芷提取物的HPLC指纹图谱研究

目的 建立白芷提取物HPLC指纹图谱分析方法.方法 采用Diamonil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-四氢呋喃,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长320 nm.结果 10批未熏硫白芷制备的提取物HPLC指纹图谱相似度均在0.9以上,确定了9个峰作为特征峰组成其对照指纹图谱,并对其中的8个峰进行了指认,分别为异紫花前胡内酯、8-甲氧基补骨脂素、佛手内酯、白当归脑、氧化前胡素、欧前胡素、水合氧化前胡内酯、异欧前胡素.熏硫白芷制备的提取物与对照HPLC指纹图谱比较,有色谱峰的大幅度降低或缺失.结论 建立的指纹图谱较全面地反映了白芷提取物中香豆素类成分的特征,分析方法简便、重复性好,为有效地控制白芷提取物的质量提供了新的评价方法和依据.     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆氯吡格雷浓度及其生物等效性评价

目的:建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血浆中氯吡格雷的浓度,研究2种硫酸氢氯吡格雷片的人体药动学及相对生物利用度。方法:血浆样品中加入内标美利曲辛,经乙腈沉淀蛋白提取,采用液相色谱-串联质谱法。用建立的方法测定20例健康男性受试者单剂量口服硫酸氢氯吡格雷受试制剂或参比制剂后的血药浓度,求得药动学参数,并对2种制剂的生物等效性进行评价。结果:在0.02～20 ng·mL-1内呈良好的线性关系,方法回收率98.4%～103.2%,日内、日间RSD均小于15%。单次口服75 mg硫酸氢氯吡格雷受试制剂或参比制剂后的Cmax分别为(1.9±1.5)ng·mL-1和(1.8±1.1)ng·mL-1;tmax分别为(0.8±0.5)h和(1.0±0.8)h;t1/2分别为(3.4±1.6)h和(3.5±1.5)h;AUC(0-48)分别为(4.4±4.3)h·ng·mL-1和(4.4±4.6)h·ng·mL-1;AUC(0-∞)分别为(4.7±4.4)h·ng·mL-1和(4.7±4.7)h·ng·mL-1。受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(98.2±32.8)%。结论:该方法灵敏,无杂质干扰。测得的受试制剂与参比制剂的主要药动学参数之间无明显差异,表明2种制剂在人体内生物等效。     

HPLC-MS法测定人血浆中异丁司特浓度

目的:建立HPLC-MS法测定人血浆中异丁司特的浓度.方法:以非那西丁为内标,色谱条件:Lichro-spher C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以0.5%乙酸水-甲醇(20:80)为流动相,流速为1.0mL·min-1,质谱检测.结果:异丁司特在2～200ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 7),最低定量浓度为1.0ng·mL-1.方法平均回收率为99.37%,提取回收率均大于95%,日内与日间RSD均小于5%.结论:本法快速简便、灵敏准确,适宜人血浆中异丁司特的浓度测定.     

高效液相色谱法测定抗风湿液中染料木苷、染料木素、去氢二异丁香酚、五味子甲素的含量

目的采用多波长HPLC梯度洗脱法建立同时测定抗风湿液中染料木苷、染料木素、去氢二异丁香酚和五味子甲素含量的方法。方法采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流速:1.0 mL·min-1;流动相A为乙腈,流动相B为0.5%醋酸溶液,梯度洗脱;检测波长:染料木苷和染料木素为263 nm,去氢二异丁香酚为274 nm,五味子甲素为250 nm;柱温为35℃。结果染料木苷、染料木素、去氢二异丁香酚和五味子甲素质量浓度分别在9.65¹93.00μg·mL-1(r=0.999 9)、7.25193.00μg·mL-1(r=0.999 9)、7.25¹45.00μg·mL-1(r=0.999 7)、5.90145.00μg·mL-1(r=0.999 7)、5.90¹18.00μg·mL-1(r=0.999 2)、5.30118.00μg·mL-1(r=0.999 2)、5.30¹06.00μg·mL-1(r=0.999 6)时与其峰面积呈良好的线性关系;染料木苷、染料木素、去氢二异丁香酚和五味子甲素的平均加样回收率分别为98.8%、99.1%、96.9%、98.1%,RSD分别为1.0%、1.3%、1.3%、1.5%(n=6)。结论该方法是一种快速、灵敏、准确的分析方法,可作为抗风湿液的含量控制方法。     

HPLC法测定蒲葵药材中6种组分含量

目的:建立HPLC法同时测定蒲葵中荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷、苜蓿素含量,并比较不同产地不同部位蒲葵中6种组分的含量。方法:采用Agilent TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以甲醇(B)-0.05%醋酸溶液(A)为流动相,梯度洗脱(0～25 min,B:33%→45%;25～40 min,B:45%→80%;40～45 min,B:80%→95%;45～50 min,B:95%→95%;50～60 min,B:95%→33%);流速0.800 mL·min-1;检测波长340 nm,柱温30℃。结果:6个成分的检测范围分别为荭草苷:8.59～550.0μg·mL-1(r=0.9997)、异荭草苷:9.37～600.0μg·mL-1(r=0.9999)、牡荆苷:8.59～550.0μg·mL-1(r=0.9998)、异牡荆苷:8.59～550.0μg·mL-1(r=0.9995)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷:7.81～500.0μg·mL-1(r=0.9999),苜蓿素:8.59～550.0μg·mL-1(r=0.9999);平均回...