深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的基因分型

目的分析深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的主要基因型。方法对50株产ESBLs大肠埃希菌分别用TEM、SHV、CTX-M和OXA-1群基因引物进行PCR扩增,并对PCR产物进行序列分析。结果 92%菌株检出CTX-M型ESBLs,测序结果显示,以CTX-M-14型ESBLs为主,其次为CTX-M-55型。结论 CTX-M-14型和CTX-M-55型是深圳地区大肠埃希菌ESBLs的主要基因型。     

吉林地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的基因分型

目的对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌携带的ESBLs耐药基因进行分型,为临床合理应用抗生素提供理论依据。方法收集住院患者标本中分离出的51株大肠埃希菌和32株肺炎克雷伯菌,经PCR对上述菌株所携带的ESBLs耐药基因进行分型。结果产ESBLs大肠埃希菌中耐药质粒编码TEM型、SHV型和非TEM非SHV型超广谱β-内酰胺酶基因的百分率依次为80.4%,7.8%和11.8%;而在肺炎克雷伯菌中的百分率依次为78.1%,71.9%和25.0%。多数产ESBLs肺炎克雷伯菌同时产生一种以上的β-内酰胺酶。结论获得了吉林地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的不同基因型,ESBLs基因型具有地区性差异。     

儿科产超广谱β-内酰胺酶志贺菌的基因型和耐药性研究

目的 探讨儿科临床分离志贺菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型及其耐药特点.方法 收集2004年1月至2008年12月北京儿童医院细菌性痢疾住院患儿粪便标本中分离出志贺菌共59株,按照美国临床和实验室标准协会推荐的表型确证试验检测ESBLs,用琼脂稀释法进行最低抑菌浓度(MIC)测定,对产ESBLs菌株进行PCR扩增明确其基因型,对扩增产物进行DNA序列分析确定基因亚型.结果 59株志贺菌中共检出产ESBLs者21株,占35.6%.21株产ESBLs志贺菌PCR均扩增到CTX-M型ESBLs,包括CTX-M-1型6株,CTX-M-9型15株,其中有4株同时伴有TEM型酶,6株伴有OXA型酶.DNA序列分析证实6株CTX-M-1型分别为CTX-M-3亚型(1株)、CTX-M-15亚型(2株)、CTX-M-57亚型(3株),15株CTX-M-9型均为CTX-M-14亚型,伴随存在的TEM型及OXA型耐药基因分别为TEM-1型广谱酶、OXA-1型广谱酶.药敏结果显示对产ESBLs菌株敏感性较好的抗生素有亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦和头孢西丁,其耐药率均小于15%.产不同CTX-M基因亚型的菌株对头孢他啶的耐药性不同.结论 本地区儿科分离志贺菌产ESBLs阳性率高,均为CTX-M型,其中以CTX-M-14亚型为主,少部分为CTX-M-3、CTX-M-15和CTX-M-57亚型.大部分产ESBLs菌株呈多重耐药,碳青霉烯类抗生素应作为治疗产ESBLs志贺菌的首选.     

大肠埃希菌耐药性分析

目的了解大肠埃希茵产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况;比较产ESBLs菌与非产ESBLs菌时10种抗生素的耐药率.指导临床合理用药.方法收集2007年7月～2008年6月临床分离的大肠埃希菌36株,用双纸片增效试验法和K-B法,进行产ESBLs细菌的检测和药敏试验.结果 36株大肠埃希茵中,共检出产ESBLs菌27株,栓出率为75%,除亚胺培南外,产ESBLs菌对其它10种抗生素的耐药率均显著高于非产ESBLs菌,亚胺培南未发现耐药株.结论本院大肠埃希菌产ESBLs率高,亚胺培南是治疗我院产ESBLs菌引起感染的有效抗生素.     

产ESBLs革兰阴性菌的TEM、SHV、CTX-M基因分型研究

目的:检测本院临床产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)革兰阴性菌的TEM、SHV、CTX-M基因型特征。方法:双纸片法确定产ESBLs的临床分离菌,提取质粒DNA,PCR法扩增ESBLs的TEM、SHV、CTX-M基因片段,对临床分离的12株肺炎克雷伯菌,17株大肠埃希氏菌和16株铜绿假单胞菌,共45株革兰阴性菌进行TEM、SHV、CTX-M基因分型研究。结果:本院临床分离出的45株产ESBLs临床分离菌的质粒中,有36株扩增出TEM基因片段,33株扩增出SHV基因片段,31株扩增出CTX-M基因片段,TEM、SHV、CTX-M基因片段的检出率分别为80%、74%和68%。结论:TEM、SHV、CTX-M已成为本院临床分离产ESBLs菌的主要耐药基因型,有必要进一步加强临床耐药基因的监测,为临床用药和医院感染监控提供参考。     

大肠埃希菌的耐药特性及其产超广谱β-内酰胺酶的分析

观察大肠埃希菌的耐药特性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况，为临床正确选择抗生素提供药敏依据。用微量稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)，用ESBLs表型确证试验检测出产ESBLs的大肠埃希菌。共检出314株大肠埃希菌。对其中298株大肠埃希菌进行了ESBLs检验，检出产ESBLs菌81株，检出率为27．2％；81株产ESBLs菌对多种药物耐药率较高，除亚胺培南、头孢哌酮，舒巴坦、庆大霉素和阿米卡星外，大肠埃希菌产ESBLs株对其他9种抗生素的耐药性明显高于非产ESBLs株。大肠埃希菌产ESBLs率高，应引起临床高度重视，对检测出的大肠埃希菌均应进行ESBLs检测，产ESBLs细菌有较高的交叉耐药性和多重耐药性，对亚胺培南和头孢哌酮，舒巴坦的敏感性好。     

检测产超广谱β-内酰胺酶菌株方法的探讨

目的 寻找一种敏感、特异、简单和经济的检测超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）方法。方法 采用抑制剂增强的肉汤稀释法（IPBDT）检测68株临床分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和10株标准产酶大肠埃希菌,并以此检测结果为标准,比较双纸片法（DDT）、浓度梯度法（E－test）和Vitek法的检测结果。对DDT和IPBDT检测结果不符合细菌进行β－内酰胺酶基因分型。结果 与IPBDT结果相比,DDT、E－test、Vitek法的特异度均较高,而灵敏度分别为96.4%、70.4%和75.9%。5株不符合细菌中,3株产TEM－1型β－内酰胺酶,另2株细菌产非TEM、SHV型β－内酰胺酶。结论 双纸片法是一种较好的超广谱β－内酰胺酶检测方法,可在临床实验室中推广使用。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希氏菌临床分离株药敏分析

目的了解郑州地区临床分离大肠埃希氏菌产超广谱β-内酰胺酶情况和耐药特征。方法双纸片法筛选及确证实验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),琼脂二倍稀释法对大肠埃希氏菌进行MIC检测。结果产ESBLs大肠埃希氏菌检出率为57.4%,产ESBLs菌株多数呈多重耐药,仅亚胺培南的耐药率在10%以下。结论本地区临床分离大肠埃希氏菌具有较高的产ESBLs流行率,对于产ESBLs大肠埃希氏菌应以亚胺培南为首选药物。     

超广谱β-内酰胺酶代表株的临床分布和药敏

大肠埃希氏菌是临床感染最广泛的细菌,这些菌对很多药物的敏感性很高,容易治疗。近来由于抗菌药物的不断开发及临床大量应用,出现了一些产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的菌株,而大肠埃希氏菌是这类细菌的代表株,因而有必要对它做出一些调查研究。为了解大肠埃希氏菌在重庆地区的耐药特性,以便临床医生合理选用抗生素和有效控制ESBL感染提供依据,将临床分离的大肠埃希氏菌对14种抗生素的耐药性进     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生的超广谱β-内酰胺酶和质粒AmpC型β-内酰胺酶的分子流行病学研究

目的 研究北京大学第三医院分离的大肠埃希菌（E.coli）和肺炎克雷伯菌（Klebsiellapneumoniae,Kpn）中超广谱β-内酰胺酶（ESBL）和质粒AmpC型β-内酰胺酶（p-AmpC）的分子流行病学特征.方法 收集2003年6月至2004年7月无重复临床分离E.coli和Kpn共293株,对其中产ESBL和/或p-AmpC的86株进行研究.采用琼脂稀释法测定抗生素最低抑菌浓度;等电聚焦电泳测定β-内酰胺酶等电点;接合实验判断β-内酰胺酶基因位置和移动性;PCR及其产物测序确定基因型;ERIC/BOX-PCR判断菌株克隆性（E.coli菌株分型同时结合种系进化群PCR结果）.结果 PGR产物测序结果显示：我院E.coli和Kpn中只产生ESBL、只产生p-AmpC、同时产生两种酶菌株的发生率分别是30.8%（60/195）、17.3%（17/98）、0.5%（1/195）和1.0%（1/98）、0.5%（1/195）、6.0%（6/98）;E.coli中ESBL以CTX-M-14型酶为主（70.5%）,Kpn中则以CTX-M-3（30.4%）、CTX-M-9（30.4%）、CTX-M-14（21.7%）常见,p-AmpC均为DHA-1型;发现blacrx-M-52（GenBank登录号DQ223685）,该基因编码的β-内酰胺酶和CTX-M-3相比有两处点突变（A77V和P167S）,导致对头孢他啶的水解活性比头孢噻肟高（临床株相应接合子MICCTX=16 μg/ml,MICCAz≥256 μg/ml）.产酶株多数呈多重耐药,对美罗培南敏感.E.coli种系进化群D群以一个克隆株为主,而Kpn则以两个克隆株常见.结论 我院存在分别或同时产生ESBL和p-AmpC酶的E.coli和Kpn,相应常见酶型分别是CTX-M型和DHA型,菌株间呈一定程度的同源性.应对产生两类酶的菌株进行持续的表型监测和深入的机制研究.     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的研究

目的 :了解四川大学华西医院产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)大肠埃希菌中CTX M基因的检出情况及产CTX M酶大肠埃希菌的耐药性和同源性。方法 :对 2 0 0 1年 1 0月～ 2 0 0 2年 5月我院临床分离的 30株产ESBLs大肠埃希菌采用琼脂平皿对倍稀释法和PCR方法进行耐药表型和 β 内酰胺酶基因型分析 ;对扩增的CTX M基因进行DNA序列分析 ;用脉冲场凝胶电泳 (PFGE)分型技术了解产CTX M酶大肠埃希菌同源性。结果 :1 3株菌携带CTX M基因 ,CTX M酶亚型为CTX M 3和CTX M 1 4。产CTX M酶菌株对第三代头孢菌素耐药率高 ,对头孢噻肟…     

产质粒介导AmpC酶和ESBLs细菌的耐药性及β-内酰胺酶基因型研究

目的　了解我院同时产质粒介导AmpC酶和超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌的耐药性及其 β 内酰胺酶的基因型特征。方法　 110株临床分离无重复肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌耐药株 ,采用酶提取物三维实验检测AmpC酶 ,美国临床实验室标准委员会 (NCCLS)表型筛选和确认实验检测ESBLs ;琼脂二倍稀释法测定抗生素对同时产AmpC酶和ESBLs菌株的最低抑菌浓度 (MICs) ;等电聚焦实验测定 β 内酰胺酶等电点 (pIs) ;质粒接合实验定位耐药基因 ;PCR通用引物扩增AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定以确定其基因亚型。结果　同时产AmpC酶和ESBLs菌株在肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌中的检出率分别为 7.7% (5 6 5 )、8.9% (4 4 5 )。该类产酶菌株产 2～ 3种pI5 .4～ 9.0 β 内酰胺酶 ,对第三代头孢菌素、氨曲南、头孢美唑和含酶抑制剂复合制剂的敏感性极低 ,但对亚胺培南均敏感。 9株质粒中均检出AmpC酶基因DHA 1亚型 ,其中 1株同时检出ACT 1亚型 ;ESBLs基因亚型分别为CTX M 14、CTX M 3、CTX M 9,各有 4、3、2株 ;有 3株还携带广谱酶TEM 1基因。结论　我院存在同时产质粒介导DHA 1、ACT 1型AmpC酶和CTX M型ESBLs肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌流行株 ,药敏检测结果显示对大多数新型广谱 β 内酰胺类抗生     

革兰阴性菌对头孢替坦的耐药性分析

目的了解临床分离革兰阴性菌对头孢替坦的耐药性。方法收集2012年1月至2013年6月从医院各种临床标本中分离的革兰阴性菌,使用VITEK2-compact微生物全自动分析仪进行鉴定和药敏试验,对结果进行回顾性调查。结果分离出革兰阴性菌1 045株,其中肠杆菌科细菌627株,占60.0%;非发酵菌402株,占38.5%。分离前3位的细菌分别为大肠埃希菌（27.7%）、铜绿假单胞菌（20.2%）、肺炎克雷伯菌（14.5%）。肠杆菌科细菌对头孢替坦耐药率低,53.3%的大肠埃希菌和29.6%的肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）、产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢替坦耐药率均低于6.0%。非发酵菌中铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对头孢替坦的耐药率均高于90.0%。结论头孢替坦可以作为临床治疗产ESBLs细菌感染性疾病的一种经验性治疗方案。     

第三代头孢耐药大肠埃希菌表型及其基因型分析

抗生素的广泛应用导致产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBL)的大肠埃希菌不断增加,产酶菌株不仅对青霉素类,三代头孢菌素和单环β-内酰胺类高度耐药,对氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类等抗菌药物的耐药性也明显高于非产酶菌株,给临床治疗带来极大困难.不同地区、医院抗生素使用策略不同,所分离的占优势的产酶株基因型也不相同.本研究对珠海市人民医院2005年1月到2007年12月期间产ESBL大肠埃希菌进行了分析.     

聚类分析在大肠埃希菌耐药性研究中的应用

目的 探讨聚类分析在大肠埃希菌临床分离株同类系株的分离及在耐药性监测中的实用价值。方法 用WHONETSE软件对收集的大肠埃希菌的监测数据进行处理，用SPSSl0．0对收集到的药敏试验数据进行聚类分析。结果( 1)聚类分析可以将同类系菌株与非同类系菌株分成不同的类别，以树状图的形式可以直观地反映菌株间的相似性。(2)变量的数量和种类的选择对聚类分析的结果会产生明显的影响。结论 利用大肠埃希菌的药物敏感试验数据进行聚类分析可以将产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌与普通株分开，对推断抗生素的临床疗效具有一定意义；同时可以辨别菌株间的相关性，为进行细菌基因同源性研究提供参考数据。     

ISEcp1-like插入序列与CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的水平播散

20世纪90年代后，中国多个地区不断发现产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（CTX-M-ESBL）肠杆菌科细菌的流行。近年，在4组CTX-M-ESBL（CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-9和CTX-M-25）基因上游均发现存在ISEcp1-1ike插入序列，其对CTX-M-19、CTX-M-2以及氨基糖苷类耐药基因rmtC的转移能力亦得到证实。目前CTX-M-ESBL在我国临床菌株中的传播与ISEcp1-like插入序列的关系尚不清楚。本文旨在探讨ISEcp1-like序列与CTX-M-ESBL在肺炎克雷伯菌临床株中传播的关系进行研究。     

北京发现同时产DHA-1质粒AmpC型及CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌

目的研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时产超广谱β内酰胺酶(ESBL)及质粒型Ampc酶菌株的比率及其基因型。方法收集北京两家教学医院2001--2002年产ESBL且对头孢西叮耐药的59株大肠埃希菌和21株肺炎克雷伯菌，采用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点；接合试验证实酶基因有无可转移性，并用碱裂解法提取质粒；采用多重聚合酶链式反应(multiplex polymerase chain reaction，MPCR)及序列分析确定质粒AmpC酶的基因型。脉冲场凝胶电泳(pulsed field gelel ectrophoresis，PFGE)确定耐药菌株的亲缘关系。结果北京两家医院ESBL中质粒型AmCZ酶的发生率，大肠埃希菌分别为0和2％，肺炎克雷伯菌则分别为9．7％和17．1％。1株大肠埃希菌及9株肺炎克雷伯菌产生DHA-1型质粒AmpC酶，同时也产CTX-3型(6株)或CTX—M-14(1株)或SHV-12(3株)型ESBL。10株中，3株肺炎克雷伯菌可将头孢西叮耐药性传给受体菌。这10株菌均至少携带1个约33—36kb的大质粒，未发现质粒的传播。PFGE发现这10株菌来自不同的克隆株。结论北京地区发现同时产DHA-1质粒AmpC型及CTX—M型ESBL的肺炎克雷伯菌，它们来自不同的克隆。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌遗传标记和耐药基因的研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum beta-lactamases,ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的遗传标记基因（整合子qacE△1、转座子tnpU）、氨基糖苷类修饰酶编码aac（6′）-Ib基因和喹诺酮类药物耐药qnrA基因分布状况,为临床使用药物治疗感染和消毒灭菌工作提供参考。方法收集本院的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共60株,采用PCR方法检测这些菌株中qacE△1、tnpU、aac（6′）-Ib和qnrA基因,MIC法药物敏感试验分析菌株的耐药性。结果 60株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中qacEΔ1基因检出率61.7%,tnpU基因检出率7.6%,aac（6′）-Ib检出率为11.7%,qnrA基因检出率3.3%。60株菌中有38株含1种或以上基因,其药敏敏感度最高的是亚胺培南、厄它培南、哌拉西林/他唑巴坦,敏感率均为97.4%,而对氨苄西林和头孢唑啉完全耐药。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药与耐药基因传递机制整合子和转座子系统密切相关,分离株携带qacE△1、tnpU、aac（6′）-Ib和qnrA基因是细菌呈多重耐药的主要原因,提示临床应慎重用药。     

某院产科2019～2022年产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌的分布及耐药性分析

目的 产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌(extended spectrum β-lactamases-producing Enterobacter)已成为临床常见的耐药菌之一,在产科领域中引起了广泛关注。本研究旨在调查某院产科2019～2022年间产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamase, ESBLs)肠杆菌的分布情况,并对其耐药性进行分析。方法 收集某院产科2019～2022年间的临床样本数据,包括血液、尿液和分泌物等。通过常规细菌培养和鉴定方法,筛选出产ESBLs肠杆菌的菌株。采用梅里埃VITEK MS质谱仪及梅里埃VITEK 2 COMPACT仪器进行菌株鉴定,并进行药敏试验,评估耐药性。结果 产科共筛选出152株产ESBLs肠杆菌菌株。这些菌株主要来源于产科患者的胎盘子母面以及伤口分泌物等样本。其中以产ESBLs大肠埃希菌为主,产ESBLs肺炎克雷伯菌次之。在β-内酰胺类抗生素中,59.9%的菌株对头孢菌素类药物显示耐药性,35.5%对类β-内酰胺酶抑制剂联合药物耐药,但是对碳青霉烯类抗生素耐药率仅为0.01%;在氟喹诺酮类抗生素中,73.4%...     

产超广谱β-内酰胺酶细菌感染及耐药率的分析

目的提高医务人员对超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌感染的认识,指导临床合理使用抗菌用药。方法对本院2004～2006年间分离出的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和不动杆菌进行超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测,比较每年发生率并对其做药物敏感试验。结果产ESBLs大肠埃希菌每年发生率分别为18.2%、23.5%、27.7%,产ESBLs肺炎克雷伯菌每年发生率为15.8%、20.3%、26.9%,产ESBLs不动杆菌每年发生率为14.6%、20.1%、28.1%。三种细菌对氨苄西林、哌拉西林及头孢菌素类耐药率约为72～100%。结论产ESBLs菌的发生率与耐药率呈逐年上升趋势,这与临床大量使用三代头孢类抗生素及不合理使用抗菌药物有关,同时ESBLs细菌对一些抗菌药物耐药率也不断提高,应引起临床治疗方面的足够重视。