大鼠局灶性脑缺血再灌注后Ref-1、NF-κB及IκB的表达

目的研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后Ref-1蛋白、NF-κB及IκB的动态变化。方法采用大脑中动脉线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组化法检测Ref-1、NF-κB、IκB的动态表达。结果与对照组及假手术组相比,脑缺血再灌注后,随着再灌注时间的延长,Ref-1蛋白、IκB阳性细胞数逐渐减少(P<0.05),NF-κB蛋白阳性细胞数逐渐增加(P<0.05)。结论脑缺血区再灌注损伤可导致Ref-1蛋白酶活性下降、IκB降解,引起NF-κB的激活,进一步导致自由基大量产生,加重了细胞内DNA的损伤,从而促进损伤区的神经元凋亡。     

阿斯匹林干预对沙鼠脑缺血再灌注后NF-κB、MCP-1表达的影响

目的 通过研究阿斯匹林干预对沙鼠脑缺血再灌注后NF-κB、MCP-1表达的影响，旨在进一步探讨阿斯匹林在脑缺血再灌注损伤中的作用。方法 将50只健康蒙古沙鼠随机分为正常对照组、假手术组、脑缺血再灌注组（I／R组）、阿斯匹林干预组；夹闭双侧颈总动脉10min后松夹，建立沙鼠全脑缺血再灌注模型；用免疫组化法检测缺血脑组织NF-κBp65、MCP-1的表达。结果缺血再灌注后6h～7d NF-κBp65的表达量显著高于正常对照组及假手术组（P〈0．01），且出现MCP-1阳性表达；同I／R组比较，阿斯匹林干预组在缺血再灌注后6h、1d、3d、7d NF-κBp65与MCP-1表达量均下降（P〈0．05）。结论 阿斯匹林能够下调NF-κB、MCP-1的表达而减轻脑缺血再灌注损伤。     

缺血后处理下调大鼠脑缺血再灌注时TLR4和NF-кB表达

目的探讨缺血后处理(IP)对大鼠局灶性脑缺血再灌注时Toll样受体4(TLR4)和核因子-кB(NF-кB)表达的影响。方法将110只成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术(sham)组(n=10)、缺血再灌注(I/R)组和后处理(IP)组,后两组根据再灌注的不同时间各分为6h、12h、24h、48h、72h 5个亚组(n=10)。建立局灶缺血再灌注和缺血后处理模型。观察大鼠的神经行为学评分、脑梗死体积、额顶叶皮层TLR4、NF-кB蛋白及mRNA表达情况。结果与I/R组相比,IP组大鼠神经行为学评分显著改善,脑梗死体积明显减少(P<0.05)。TLR4、NF-кB蛋白在I/R组和IP组的表达于再灌注6h时开始升高,24h达高峰。与I/R各相应亚组比较,IP各亚组TLR4、NF-кB蛋白表达均明显降低(P<0.05)。TLR4、NF-кB mRNA在I/R组和IP组的表达时间曲线与蛋白相一致。结论IP可通过抑制TLR4和NF-кB的表达,减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,改善神经功能。     

NF-κB信号通路在小鼠脑缺血再灌注细胞凋亡中的作用

目的初探核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路在小鼠脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)细胞凋亡中的作用。方法通过夹闭小鼠双侧颈总动脉建立动物模型。模型组分为3 h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d、14 d、21 d,共8组。TTC染色确定脑缺血损伤区域,TUNEL法检测不同时间缺血区细胞凋亡数,原位杂交法和Western blotting检测NF-κB信号通路靶基因/蛋白Bcl-2和C-myc mRNA及蛋白表达。PDTC抑制NF-κB信号通路后,TUNEL法和原位杂交检测建模后1 d、7 d、14 d神经细胞凋亡数及Bcl-2和C-myc mRNA变化情况。结果各模型组海马CA3区凋亡细胞数量、Bcl-2 mRNA和C-myc mRNA阳性细胞数及二者蛋白表达量高于正常组和假手术组(P0.05);PDTC抑制NF-κB信号通路后,各抑制组与对应时间点模型组相比,Bcl-2 mRNA阳性细胞数减少,TUNEL阳性细胞数和C-myc mRNA阳性细胞数增加(P0.05)。结论 CIRI早期即出现有凋亡细胞数的增加,并在其后较长一段时间内细胞凋亡过程仍存在着持续性的进展;NF-κB信号通路在CIRI病程进展中对神经细胞凋亡起抑制作用,其机制可能通过Bcl-2诱导和C-myc抑制共同发挥调节作用。     

大鼠脑缺血再灌注损伤后NF-κB蛋白、Caspase3 mRNA表达及细胞凋亡的研究

目的　研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后核蛋白因子 κB(NF κB)蛋白、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 3(Caspase3)mRNA表达及细胞凋亡的变化。方法　采用大脑中动脉线栓法复制局灶性脑缺血再灌注模型 ,应用免疫组化、原位杂交法检测NF κB蛋白、Caspase3mRNA的表达 ,利用原位缺口末端标记法 (TUNEL)研究凋亡细胞的变化。结果　与假手术大鼠相比 ,脑缺血再灌注后NF κB蛋白、Caspase3mRNA表达明显增强 ;凋亡细胞显著增多 (P <0 .0 1)。结论　大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤引发的神经细胞凋亡可能是与上调NF κB蛋白、Caspase3mR NA表达有关。     

银杏黄酮对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织的保护作用

目的 探讨银杏黄酮对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织的保护作用及其机制。方法 制备脑缺血再灌注脑损伤大鼠模型,并随机分为假手术组、模型组和银杏黄酮组,观察大鼠日常行为,并对实验大鼠脑进行病理组织学观察,检测脑组织匀浆中还原性谷胱甘肽(GSH)水平及过氧化氢酶(CAT)活力,Western blot检测大鼠脑组织中NF-κB蛋白表达水平。结果 模型组大鼠活动减少、部分大鼠出现明显的神经缺损症状; 模型组大鼠脑组织水肿,皮质神经细胞层次紊乱; 银杏黄酮组与模型组比较, 病理改变减轻; 模型组神经细胞基质密度减低,胞质内空泡形成,未见明显核仁结构; 银杏黄酮组神经细胞变性程度较模型组缓解,细胞核内染色质较均匀; 与模型组比较,银杏黄酮组的GSH水平及CAT活力均升高(P<0.05); Western blot检测显示,模型组NF-κB蛋白水平明显升高,与假手术组比较有明显差异(P<0.05); 银杏黄酮治疗后NF-κB蛋白水平降低,与模型组比较有明显差异(P<0.05)。结论 银杏黄酮对缺血再灌注损伤大鼠脑组织有保护作用。     

丹参多酚酸通过SIRT1/HMGB1路径改善大鼠脑缺血/再灌注损伤的机制研究

目的 研究丹参多酚酸通过沉默信息调节因子1(silent information regulator protein,SIRT1)/高迁移率蛋白1 (high-mobility group box 1,HMGB1)路径改善大鼠脑缺血再灌注损伤的机制.方法 选择雄性普通级健康132只SD大鼠,随机分为四组:假手术(Sha...     

雌激素对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织NF-κBi、NOS表达和细胞凋亡的影响

目的研究雌激素对大鼠局灶性脑缺血再灌注（I／R）损伤后NF-κB、iNOS蛋白和细胞凋亡变化的影响。方法采用线栓法复制局灶性脑I／R模型。应用免疫组化检测NF-κB、iNOS蛋白表达;利用原位缺口末端标记法（TUNEL）研究凋亡细胞的变化。结果与对照组大鼠相比,雌激素组脑缺血再灌注后NF-κB、iNOS表达明显减弱（P〈0．01）;凋亡细胞显著减少（P〈0．01）。结论雌激素能抑制脑I／R后NF-κB、iNOS表达,减少细胞凋亡,这可能是其脑保护作用的机制之一。     

基于TLR4/NF-κB通路探讨泊马度胺对帕金森病小鼠的作用机制

目的 探讨泊马度胺（Pom）通过TLR4/NF-κB通路对帕金森病（PD）小鼠模型的作用机制。方法 雄性C57BL6小鼠随机分为正常对照组（Control组）、MPTP组、泊马度胺组（Pom组）。MPTP组、泊马度胺组模型均腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）构建模型,对各组模型小鼠进行行为学评价。免疫荧光染色测定脑内活化的小胶质细胞,Western blotting检测炎症因子、TLR4/NF-κB通路蛋白等的表达。结果 与MPTP组小鼠相对比,Pom组小鼠神经功能明显改善,小胶质细胞活化的数量明显减少,且炎症因子的表达显著降低,差异有统计学的意义（P<0.05）。结论 泊马度胺可以通过TLR4/NF-κB通路抑制帕金森病小鼠小胶质细胞的增生,减少炎症因子的表达,有效改善帕金森病小鼠的神经功能。     

雌激素对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织NF—κB、iNoS表达和细胞凋亡的影响

目的 研究雌激素对大鼠局灶性脑缺血再灌注(I/R)损伤后NF-κB、iNOS蛋白和细胞凋亡变化的影响.方法 采用线栓法复制局灶性脑I/R模型.应用免疫组化检测NF-κB、iNOS蛋白表达;利用原位缺口末端标记法(TUNEL )研究凋亡细胞的变化.结果 与对照组大鼠相比,雌激素组脑缺血再灌注后NF-κB、iNOS表达明显减弱(P<0.01);凋亡细胞显著减少(P<0.01).结论 雌激素能抑制脑I/R后NF-κB、iNOS表达,减少细胞凋亡,这可能是其脑保护作用的机制之一.     

L-精氨酸通过抑制NF-кB途径减轻大鼠脑缺血-再灌注损伤

目的观察L-精氨酸(L-Arg)对大鼠脑缺血-再灌注(I/R)损伤的作用并探讨其机制。方法成年健康SD大鼠36只随机分3组,假手术(Sham)组、I/R组、L-Arg治疗(ARG)组,每组12只,采用大脑中动脉阻塞(MCAO)法建立大鼠局灶脑缺血模型。I/R组、ARG组于缺血2 h再灌注时分别给予生理盐水和L-Arg,实验中监测大鼠血压。于再灌注72 h后进行神经功能评分,TTC染色检测各组脑梗死体积百分比,Western blot测定大鼠缺血脑组织内NF-κB p65、IκBα的表达水平并进行组间比较。结果 1各组大鼠血压比较,差异无统计学意义(P>0.05);2与I/R组相比较,I/R后72 h,ARG组神经功能缺损程度评分明显改善(P<0.05),脑梗死体积显著缩小(P<0.05);3与Sham组比较,I/R组NF-κB p65表达明显升高(P<0.01),IκBα蛋白的表达明显降低(P<0.01);ARG组NF-κB p65的表达水平显著低于I/R组、高于Sham组(P<0.05),ARG组IκBα的表达水平显著高于I/R组、低于Sham组(P<0.05)。结论 I/R后早期给予L-Arg可减轻脑组织损伤,其机制与一氧化氮(NO)抑制NF-кB激活有关。     

阿托伐他汀预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及炎症机制

目的探讨阿托伐他汀预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其炎症机制。方法 45只健康雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组和预处理组,每组15只。预处理组每日给予阿托伐他汀10 mg/(kg·d)灌胃,其余2组每日等体积生理盐水灌胃,共干预2周。末次灌胃24h模型组和预处理组均制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型,假手术组仅分离血管不插入线栓。再灌注后2 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h行神经功能评分并收集外周血,术后72 h处死大鼠,采集脑组织,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死体积;采用ELISA检测各时点血清及72 h脑中TNF-α、NF-■B的表达。RT-PCR检测脑中TRL4、NF-■B mRNA表达。结果神经评分及TTC结果显示,模型组神经评分及脑梗死体积最大,预处理组神经评分及梗死体积显著减小(P0.05)。ELISA结果显示,与假手术组比较,模型组和预处理组大鼠血清及脑TNF-α、NF-■B表达升高(P0.05);与模型组比较,预处理组大鼠血清及脑组织TNF-α、NF-■B表达下降(P0.05)。RT-PCR检测结果显示,与模型组比较,预处理组大鼠脑组织TRL4、NF-■B mRNA表达下降(P0.05)。结论阿托伐他汀可改善大鼠脑缺血再灌注后神经功能损伤,减小梗死体积。其保护机制可能与下调TLR4/NF-■B信号转导通路进而降低炎症因子TNF-α的释放有关。     

β-七叶皂甙钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注后NF-κB、ICAM-1、VCAM-1表达的影响

目的 探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注脑组织缺血区不同时间点NF-κB、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达的变化,及β-七叶皂甙钠干预效果.方法 采用大鼠大脑中动脉闭塞法(MCAO)制作局灶性脑缺血再灌注模型,用免疫组织化学方法观察大鼠脑缺血再灌注不同时间段,NF-κB、ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达.并在大鼠于脑缺血前24h、1h及再灌注即刻分别腹腔给予β-七叶皂甙钠5mg/kg,2h MCAO,再灌注24h、48h后取脑,运用TTC染色测算脑梗死体积,免疫组化染色检测NF-κB、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达,分析β-七叶皂甙钠的干预效应.结果 (1)脑缺血后缺血区脑组织NF-κB及ICAM-1、VCAM-1表达均增加,NF-κB于再灌注后12～24h表达达高峰,ICAM-1于再灌注后24h表达达高峰,VCAM-1于再灌注后24～48h表达达高峰.(2)NF-κB的表达与血管内皮ICAM-1、VCAM-1的表达呈正相关.(3)β-七叶皂甙钠能显著降低脑缺血再灌注后24h和48h缺血区NF-κB、ICAM-1及VCAM-1的表达增加.(4)β-七叶皂甙钠能明显减轻脑缺血再灌注后的脑组织损伤,再灌注24h脑梗死体积减少41.8%.结论 (1)脑缺血再灌注后NF-κB、ICAM-1、VCAM-1大量表达,这可能是脑缺血再灌注损伤机制之一.(2)脑缺血后NF-κB的活化可能与微血管内皮细胞ICAM-1、VCAM-1蛋白表达调控有关.(3)β-七叶皂甙钠能够减轻脑缺血后的脑组织损伤,有神经保护作用.     

依达拉奉治疗急性脑梗死的TLR4/NF-κB信号通路水平与脑血流量的相关性研究

目的 研究依达拉奉在治疗急性脑梗死(ACI)的过程中TLR4/NF-κB信号通路水平的变化与脑血流量的关系.方法 选取在2018年3月至2019年3月期间海口市中医院收治的ACI患者80名,随机分成对照组和观察组.对照组进行常规治疗,治疗组加用依达拉奉注射治疗.提取各组的静脉血观察血液中TNF-α、IL-10、IL-6...     

阻断UPP对大鼠局灶性脑缺血梗死体积和NF-κB表达的影响

目的探讨阻断泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)产生神经保护作用的机制。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注模型,用clasto-lactacystinβ-lactone阻断UPP,TTC染色测梗死体积,免疫组织化学方法检测NF-κB蛋白的表达。结果脑缺血后,随着再灌注时间的延长,NF-κB表达增多,梗死体积逐渐增大,24h达高峰。阻断UPP后,NF-κB表达减少;梗死体积缩小,24h缩小了44%,7d缩小了36%。结论阻断UPP可通过抑制NF-κB的激活而产生神经保护作用。     

NF-κBp65和MCP-1在脑缺血再灌注后脑组织局部炎症反应中的作用

国内外大量研究表明，脑缺血再灌注后的脑组织局部过度的炎症反应是造成脑损伤的主要原因之一，而在过度炎症反应中，已证明单核巨噬细胞的浸润与细胞趋化因子MCP-1的表达有关致炎细胞因子诱导MCP-1表达的具体机制目前尚不清楚我们于2001年1月至2002年1月观察脑缺血再灌注后脑组织不同时间点NF-κBp65和MCP-1表达，     

Caspase-1抑制剂对大鼠局灶脑缺血再灌注后神经元损伤的影响

目的：研究YVAD-FMK(Caspase-1抑制剂)对大鼠局灶脑缺血再灌注后神经元损伤的影响。方法：采用大鼠局灶脑缺血再灌注模型,动态测量脑组织中IL—1β含量、脑含水量及血清NSE含量的变化以及YVAD-FMK对上述指标的影响。结果：YVAD-FMK能够减少脑组织IL-1β的含量,减轻脑水肿及能显著降低血清NSE升高的幅度。结论：YV4D-FMK对局灶脑缺血再灌注后神经元的损伤具有保护的作用。     

急性脑梗死患者TLR4/NF-κB信号通路水平与脑血流量的相关性研究

目的 评价急性脑梗死患者血清中toll 样受体4(TLR4)和核转录因子(NF-κB)信号通路水平与脑血流量的相关性。方法 选取在本院接受治疗的100例大脑中动脉(MCA)供血区域脑梗死患者作为试验组,再选取同期接受体检健康的100例正常人作为对照组,采用免疫组织化学方法检测2组患者的TLR4和NF-κB水平,分析2组研究对象的大脑前动脉(ACA)、MCA收缩期血流峰值与TLR4、NF-κB的相关性。结果 试验组ACA血流峰值(55.54±4.22)cm/s高于对照组(48.65±3.54)cm/s(t=9.145,P<0.001),而试验组MCA血流峰值(132.45±5.65)cm/s低于对照组(141.54±3.54)cm/s(t=8.436,P<0.001)。试验组TLR4水平(4.29±0.46)ng/mL及NF-κB水平(144.43±23.67)ng/mL均高于对照组TLR4(3.65±0.57)ng/mL及NF-κB(115.63±24.45)ng/mL(t=5.861、5.677,P=0.012、0.0018); TLR4及NF-κB水平与ACA血流速度呈正相关,与MCA血流速度呈负相关(P<0.05)。结论 急性脑梗死患者MCA、ACA血流峰值与TLR4及NF-κB水平存在相关性。     

NF-κB在脑缺血缺氧再灌注损伤中的双重作用

1986年,Sen和Baltimere首先在成熟B细胞核提取物中发现一种与许多靶基因的转录启动有关的快速反应转录因子.因其能与免疫球蛋白κ轻链基因的增强子中一段特定核苷酸序列(GCGACTTTCC)结合位点结合,故命名该蛋白为核转录因子(nuclclear factor kappa B,NF-κB)此后.NF-κB一直成为研究的热点.     

胰岛素对缺氧/复氧神经元上的HMGB1、NF-κB表达的影响

目的探讨胰岛素(insulin,In)对缺氧/复氧诱导新生大鼠皮质神经元损伤的保护作用及其机制。方法将培养7 d的大鼠皮质神经元随机分为3组,A组为正常对照组,B组单纯采用缺氧/复氧(H/R),C组采用In预处理加H/R,各组在H/R后0、3、6、12、24h各时间点,以TUNEL比较各组凋亡细胞,免疫组化比较各组高迁移率族蛋白B1(high mobilitygroup protein box 1,HMGB1)、核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)表达。结果①B组凋亡神经元明显多于A组,C组显著少于B组,3组比较差异有统计学意义。②B组HMGB1、NF-κB的表达较正常对照组明显增加,C组HMGB1、NF-κB表达较B组明显减少。结论In可使H/R后神经元HMGB1、NF-κB表达降低,抑制神经元凋亡,这可能是其脑保护作用的机制之一。