钻孔抽吸对膝骨性关节炎骨内压变化的实验研究

目的观察钻孔抽吸对膝骨性关节炎的治疗作用。方法将健康家兔32只随机分为两组,A组为钻孔抽吸治疗组,B组为空白对照组。通过管型石膏伸直位固定家兔右膝关节造成右膝骨性关节炎模型。造模后6周A组给予钻孔治疗,7、8周给予钻孔抽吸治疗。B组喂以普通饲料,不予任何治疗。A、B组同时于造模前和造模后5、6、7、8周抽样作右股骨、胫骨骨内压测定.结果伸直位固定右膝关节5周后两组骨内压显著升高(P<0.01),A组于6、8周骨内压有明显下降(P<0.05),7周变化不明显(P>0.05),伸直位固定膝关节能有效造成骨内持续高压。B组于6、7、8周骨内压无明显变化(P>0.05)。结论钻孔抽吸疗法能有效降低骨内压,延缓骨性关节炎的发生和发展。     

MMP-1、TIMP-1在兔实验性膝骨关节炎中的表达

目的 观察基质金属蛋白酶1(MMP-1)及其抑制剂(TIMP-1)在兔实验性骨关节炎中的表达,探讨骨关节炎的发病机制是否与MMP-1及TIMP-1的异常表达有关.方法 20只日本大耳白兔随机分为2组:A组正常对照组,B组模型组.B组用1.6%木瓜蛋白酶膝关节腔内注射,建立兔膝骨关节炎模型,4周后观察软骨组织形态学的变化及软骨中MMP-1、TIMP-1的表达.结果 B组软骨病理损害程度重于A组(P<0.01),MMP-1表达明显高于A组(P<0.01),TIMP-1表达高于A组(P<0.05).结论 MMP-1与TIMP-1与骨关节炎软骨退变有关,其异常表达在骨关节炎关节软骨退变的病理过程中发挥关键作用.     

兔膝骨关节炎关节软骨细胞凋亡的实验研究——超微结构观察

目的 为探讨骨关节炎关节软骨退变的发生机理。方法 按照Hulth法建立兔膝关节炎模型实验组，12只实验兔随机分为2组，每组6只，自身健侧做实验对照组，分别为建模后2周组和4周组后取材，分别制作光镜电镜标本进行系统观察研究。结果 不同时期的骨关节炎关节软骨有程度不一的软骨细胞凋亡，以4周组最为显著，特别是在电镜下软骨细胞凋亡的形态学改变更具特征、更为典型。结论 (1)膝骨关节炎的关节软骨细胞退变时，软骨细胞数目的减少有软骨细胞凋亡的参与。(2)关节软骨退变的程度与软骨细胞数目的减少即与软骨细胞凋亡的程度有关。(3)形态学的特征性表现可作为判断软骨细胞是否发生凋亡的“金指标”。     

关节内注射透明质酸钠对兔膝关节退变软骨的影响

目的：观察关节内注射透明质酸钠对兔膝关节炎模型中退变软骨的影响。方法：以２４只成年新西兰兔为实验对象,建立Ｈｕｌｔｈ膝关节骨关节炎模型。实验组（１２只）于术后第８周开始,每周关节内注射１％透明质酸钠１ｍｌ,连续注射５次,对照组（１２只）不作任何治疗。注射后６周处死动物,在手术显微镜下观察膝关节表面,取股骨内髁软骨标本进行透射电镜观察;取内侧胫骨髁软骨作氨基己糖测定。结果：实验组动物软骨细胞退变程度     

MMP-13、TIMP-1在兔骨关节炎模型的表达及其意义

目的 评价切断家兔膝关节内侧副韧带、前交叉韧带,切除内侧半月板制作骨关节炎模型的方法的可行性;研究MMP-13、TIMP-1在软骨退变过程中的病理作用.方法 30只实验家兔随机平均分成3组,左侧膝关节仅打开后缝合作为自身对照,右侧膝关节制作骨关节炎模型.分别在术后4w、8w、12w处死动物,观察关节软骨的病理变化并按照标准给予评分.检测MMP-13、TIMP-1的蛋白表达.结果 三组模型的实验侧关节软骨退变程度随造模时间延长而逐渐加重.MMP-13、TIMP-1分别在术后4w、8w表达最强.MMP-13、TIMP-1积分光密度值比值逐渐减小.结论 MMP-13、TIMP-1在骨关节炎软骨退变过程中起着重要的作用.MMP-13/TIMP-1比值的大小与软骨退变程度成负相关,可以作为反映软骨退变程度的参考指标.     

超声诊断对木瓜蛋白酶致早期兔膝骨关节炎模型可行性研究

目的:探讨超声检查对兔膝关节炎模型早期病变的诊断效能。方法:将32只长耳大白兔随机分为正常组和模型组,每组16只。模型组以木瓜蛋白酶右侧膝关节腔内注射诱导建立兔膝骨关节炎模型,造模后第2、4周采用超声观察两组兔膝关节超声SZKUDLAREK评分,ELISA法检测血清金属基质蛋白酶3(MMP-3)含量水平、显微镜下观察膝关节炎评分、免疫组化观察膝关节软骨Ⅱ型胶原、骨形态发生蛋白(BMP)的表达,观察超声诊断与各观察指标相关性。结果:Spearman相关分析显示,造模2周时,超声学评分结果与血清MMP-3、病理学评分、膝关节软骨Ⅱ型胶原、骨形态发生蛋白的表达成正相关(P<0.05),相关系数分别为0.662、0.685、0.698、0.784;造模4周时,相关系数分别为0.762、0.752、0.717、0.802。结论:超声诊断对木瓜蛋白酶致早期兔膝骨关节炎模型具有确切诊断价值。     

骨康合剂对兔实验性膝骨关节炎关节软骨中iNOS表达的影响

目的 采用免疫组化及图象分析方法检测骨康合剂对兔实验性骨关节炎关节软骨中诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达的影响,以探讨其防治膝骨关节炎的作用机理.方法 新西兰兔32只,建立兔Hulth膝骨关节炎模型,术后随机分为3组:模型组、关节壮骨丸组和骨康合剂组.个组采取相应处理方法,分别于术后11周、14周处死取材,进行免疫组化并采用图象分析系统对其表达检测.结果 3组iNOS的表达强度相比较,骨康合剂组明显低于关节壮骨丸组和模型组.结论 iNOS在膝骨关节炎的病理进程中具有重要作用,骨康合剂可通过下调其在关节软骨中的表达,达到防治膝骨关节炎的作用.     

关节镜下有限清理术加系统康复训练治疗膝关节骨性关节炎

目的探讨关节镜有限清理术配合系统的康复训练措施对中重度软骨退变的膝关节骨关节炎的治疗作用。方法对17例中重度软骨退变的膝关节骨关节炎患者,根据关节镜下软骨退变的不同程度,在关节镜下行不同程度和范围的膝关节有限清理术,辅以较完善的术前术后康复训练以及出院康复指导。结果随访5个月-3年,平均21个月,良好6例(8膝),占35.3%;尚可9例(11膝),占52.9%;差2例(2膝),占11.8%。结论关节镜下膝关节有限清理术配合完善的康复训练措施对中重度软骨退变的膝关节骨关节炎有一定的治疗效果。     

化痰祛湿剂对兔膝骨性关节炎软骨及滑膜的影响

目的:观察化痰祛湿剂膝痹康对兔实验性膝骨性关节炎模型关节软骨及滑膜病理学变化的影响。方法:健康家兔40只,体重2.8~3.2kg,随机分为模型组、膝痹康组(为本院制剂,批号050411,主要由制南星、制川乌、薏苡仁、刺五加、丹参、地龙等组成,含生药2.0g/mL的合剂,功效化痰祛湿、消肿止痛)、阳性药(美洛昔康)对照组、假手术对照组,每组家兔10只。模型组、膝痹康组、阳性药(美洛昔康)对照组家兔通过改良的Hulth法复制兔膝关节炎动物模型,假手术组仅切开膝关节表面的皮肤,膝痹康组、阳性药对照组家兔于造模成功后开始用药,连续用药8周,4组家兔于造模后全部处死,切除患侧胫骨全层关节软骨及滑膜进行肉眼、光镜组织学检查,并对关节软骨进行透射电镜检查。结果:显示模型组兔患侧关节软骨表面粗糙,变暗呈灰黄色,并有裂纹、糜烂及溃疡形成;滑膜存在不同程度增生、粘连,关节液量增多,且呈泡沫状、浑浊,Mankin’s评分显著高于假手术对照组;膝痹康组关节软骨及滑膜虽未能恢复到正常状态,但Mankin’s评分较模型组显著降低。结论:膝痹康可明显减轻膝骨性关节炎兔关节软骨及滑膜的病理损伤,对软骨及滑膜的退变有较好的延缓趋势。     

回医烙灸对兔膝骨关节炎软骨细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的 观察回医烙灸对兔膝骨性关节炎软骨细胞Bcl-2(B-cell lymphomas,B淋巴细胞-2蛋白)和Bax(Bcl-2 AssociatedXprotein,B淋巴细胞-2的相关X蛋白)的表达的影响.方法 将新西兰兔30只,随机分为正常对照组、模型对照组和回医烙灸组,每组各10只.采用Hulth造模方法制备兔膝骨性关节炎模型.回医烙灸组在造模4周后,在膝关节局部行回医烙灸疗法,1次20 min/次,治疗4周.正常对照组和骨关节炎模型组不予干预.3组动物8周后处死,进行标本的大体形态学和光镜检测,Bcl-2、Bax蛋白的表达采用免疫组化方法进行检测.结果 回医烙灸组关节软骨的组织学评分、软骨细胞Bax的表达灰度低于模型组(P＜0.05),软骨细胞Bcl-2的表达灰度高于模型组(P＜0.05).结论 回医烙灸疗法可以调节兔膝骨性关节炎软骨细胞Bcl-2和Bax的表达平衡,从而延缓膝骨性关节炎软骨的退变.     

强力霉素对制动兔骨关节炎模型对侧膝关节早期退变的影响

目的：研究口服强力霉素对制动兔骨关节炎模型对侧膝关节早期退变的影响及作用机制。方法：36只新西兰大白兔随机分为空白对照组,模型对照4、8、12周组,给药8、12周组。模型组与给药组均给予石膏固定左下肢。石膏固定4周后,给药组给予强力霉素。分别在8周、12周处死动物,观察指标包括：软骨大体形态、软骨man—kin评分、软骨Ⅱ型胶原、uPA、MMP-13。结果：与模型对照组比较,给药组软骨面光滑,mankin评分较低,Ⅱ型胶原含量较高,uPA、MMP-13活性较低（P〈0．01）。结论：强力霉素对制动兔骨关节炎模型对侧膝关节软骨早期退变有缓解作用,作用机制与抑制MMP-13、uPA的表达有关。     

回医烙灸疗法对实验性兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的观察回医烙灸疗法对兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法将30只新西兰兔随机分为正常对照组、模型组和回医烙灸组,每组10只。采用石膏固定的方法制作兔左膝骨性关节炎模型。造模6周后,回医烙灸组在膝关节局部行回医烙灸疗法,每2d1次,每次20min,治疗4周;正常对照组和模型组不予干预。治疗4周后处死3组动物,取胫骨平台和股骨内侧髁软骨,进行标本的形态学观测,末端标记（TUNEL）法检测软骨细胞凋亡情况。结果模型组TUNEL阳性软骨细胞散在于软骨全层,且数量多,凋亡指数显著高于正常对照组,2组比较差异有统计意义（P〈0．05）;回医烙灸组表层也有TUNEL阳性软骨细胞,但凋亡指数显著低于模型组,2组比较差异有统计意义（P〈0．05）。结论回医烙灸疗法可以减少兔膝骨性关节炎软骨细胞的凋亡,从而延缓膝骨性关节炎的病情进展。     

独活寄生汤对兔膝骨性关节炎关节液中白介素-1β、肿瘤坏死因子-α和Ⅱ型胶原的影响

目的观察独活寄生汤对兔膝骨性关节炎关节液中白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)表达水平的影响,探讨其治疗骨性关节炎的机制。方法将40只实验用新西兰大白兔分五组,即空白对照组、模型组、独活寄生汤低剂量组、高剂量组和玻璃酸钠组,每组各8只,采用改良伸直位石膏固定兔膝关节造模,造模后立即干预,独活寄生汤组浓缩液给药,每日1次;对照组关节内注射玻璃酸钠注射液,0.5m L/关节,1周1次,造模8周,采用双抗体夹心酶免疫吸附法(ELISA)和免疫组化法,分别测定兔膝关节液中的IL-1β、TNF-α表达水平以及Collagen II的表达水平。结果兔膝骨性关节炎造模后,兔的Mankin评分明显升高(P0.01),独活寄生汤和玻璃酸钠可降低Mankin评分(P0.01),且两者的比较差异无显著意义(P0.05)。结论独活寄生汤可以通过降低关节液中IL-1β、TNF-α的水平以及保护Collagen II以对兔膝骨性关节炎起到防治作用;     

富血小板血浆对兔骨关节炎软骨中基质金属蛋白酶-13表达的影响

目的 探讨富血小板血浆(platelet-rich plasm,PRP)抑制兔骨关节炎软骨表达基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达而发挥软骨保护作用。方法 选取30只成年清洁级新西兰大白兔,采用数字表法随机分为对照组、关节炎组、PRP组,每组各10只。关节炎组和PRP组按Hulth法制备后肢左膝关节炎模型,对照组行假手术。造模后第1周开始,各组抽取耳缘静脉血制备PRP 0.2 mL,仅PRP组给予关节腔注射。至第6周处死实验动物,获取各组左膝关节,分别行软骨组织HE染色测量软骨厚度,免疫组织化学染色计数MMP-13阳性细胞数,免疫荧光及Western blotting法检测MMP-13表达量。结果 对照组显示关节软骨形态接近正常,关节炎组软骨破坏明显,而PRP干预组较关节炎组,关节厚度得以保留,MMP-13阳性细胞及其表达量明显受到抑制。结论 PRP可减少MMP-13软骨细胞的数量和抑制MMP-13表达而发挥软骨保护作用。     

转GGCX基因治疗兔骨性关节炎的体外实验研究

目的 探索GGCX基因对兔骨性关节炎软骨细胞MMP13的影响及其在兔骨性关节炎软骨退变中的作用.方法 取体质量(2.0±0.2)kg日本大耳兔6只,随机分为3组,每组设立一只对照兔,分别在2、4、6周使用膝前交叉韧带切断术构建模型,6周后模型兔构建成功,分离关节软骨,经消化分离后将软骨细胞接种到6孔细胞培养板,将软骨细胞分为空白组、阴性对照组(转染不合GGCX基因慢病毒)、转染组(转染含GGCX基因慢病毒)3组.转染组则均以LipofectamineTM 2000为转染媒介.用PCR法及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测GGCX和MMP13的表达.结果 转染组GGCX有较高的表达水平;转染组MMP13的表达水平降低,且二者与空白组及阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P＜o.05).结论 GGCX基因过表达可明显降低其软骨细胞MMP13的表达,为将基因治疗运用于体外骨性关节炎提供实验基础.     

伤速康贴膏对兔膝骨性关节炎模型关节液中IL-1、IL-6及TNF-α水平的影响

目的探讨伤速康贴膏对兔膝骨性关节炎模型关节液中IL-1、IL-6及TNF-α水平的影响。方法选用日本大耳白兔30只随机分成模型组(A组)、伤速康贴膏组(B组)及骨通贴膏组(C组),B、C组采用改良Hulth造模法5周后成功复制出兔膝骨性关节炎模型,A组不做任何治疗,B、C组分别予伤速康贴膏和骨通贴膏右膝关节外敷4周,并于用药后第2周、4周2个时相点行右膝关节DR摄影并测定关节液中IL-1、IL-6及TNF-α含量。结果 2个时相点右膝关节DR摄影示B、C组关节退行性改变较A组轻。3组关节液中均可检测到IL-1、IL-6及TNF-α,B、C组在2个时相点含量均低于A组,差异有显著统计学意义(P<0.01),B、C组在2个时相点均无统计学差异(P>0.05)。结论伤速康贴膏可能通过降低关节液IL-1、IL-6及TNF-α的含量,对膝骨性关节炎具有防治作用。     

改良Hulth模型复制膝不同时期骨关节炎的实验研究

目的：通过观察改良Hulth法造模后不同时期兔膝关节的大体和病理特点及对各期血清NO含量和软骨细胞凋亡的检测．研究其复制不同时期骨关节炎的可行性，并探讨骨关节炎的发病机制。方法：取成年新西兰大白兔16只，雌雄各半．随机分组．将其右膝关节作为实验侧，作膝关节前交叉韧带切断、内侧半月板切除，左膝作为对照侧。分别于造模后2，6．10，14周时观察膝关节的大体和组织病理学特点，采用Mankin评分进行评定。检测血清NO含量和软骨细胞凋亡率。结果：对照各组各时间点Mankin评分无统计学差异（P〉0．05），造模各组与对照组，造模各组间Mankin评分有统计学差异（P〈0．01）;正常组和造模2周组与造模6周、10周、14周组血清NO含量有统计学差异（P〈0．01），造模6周、10周及14周组间无统计学差异（P〉O．05）；经x^2检验各时间点软骨细胞凋亡率有统计学差异（P〈0．01）。结论：改良Hulth模型14周内可以成功复制膝不同时期骨关节炎，造模2周即有早期骨关节炎改变，6周为中期，10周为晚期，14周为极晚期骨关节炎改变。血清NO造模6周前急剧升高，后进入平台期。而随着病理分级进展，软骨凋亡率相应增加。     

IL-15在兔膝创伤性关节炎模型中的表达研究

目的观察兔膝创伤性关节炎早期白介素15(IL-15)炎性因子的表达及其变化,以进一步探讨创伤性关节炎的发生机制。方法将48只健康新西兰大白兔随机分为实验组和对照组,每组24只。实验组行左后膝关节前后交叉韧带切断和内侧半月板切除术;对照组行单侧膝关节切开术作为假手术对照。2组分别在术后6、12、24h,1、2、3、4周7个时间点抽取关节液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定关节液中IL-15含量表达。组织学观察其关节软骨和滑膜的变化。结果48只大白兔中进入结果分析29只。2组术后6h兔膝关节液中IL-15含量较其他时间点明显增高(P<0.05);术后1周IL-15表达较术后24h明显降低(P<0.05);术后1、2、3、4周4个时间点的IL-15表达成升高趋势;实验组术后各时间点IL-15含量均高于对照组(均P<0.05)。实验组术后4周,关节软骨失去原有的光泽,呈灰黄色,有裂纹,HE染色见表层略不平整,有小裂隙,纤维组织增生,玻璃样变性,局灶性软骨基质异染性减弱,软骨细胞减少,软骨基质纤维化。结论创伤后兔膝创伤性关节炎早期IL-15高表达,关节软骨及滑膜退变,创伤性关节炎早期与IL-15关系密切。     

膝关节退行性变模型及松解疗法对其影响

目的观察膝关节退行性变模型经松解局部挛缩组织治疗前、后变化,探讨其治病机理.方法30只家兔随机分为正常对照组、模型空白组及模型治疗组各10只.观察各组大体解剖、X光片及膝关节被动活动度的变化.结果模型治疗组膝关节被动活动度与模型空白组及正常组比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05);肉眼观察膝关节及X线稍有变化.结论局部松解可改善实验性膝关节退行性变模型的被动活动度.