金欣口服液含药血清抗呼吸道合胞病毒间接抑制作用实验研究

目的:研究金欣口服液对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的人喉癌上皮细胞(Hep-2)细胞的间接抑制作用。方法:含药血清先作用细胞一段时间再感染RSV。用MTT法测病变抑制率及测上清滴度观察金欣口服液含药血清对RSV的间接抑制作用。结果:MTT法测定病毒抑制率均大于50%,含药血清组上清滴度与空白血清组和病毒对照组比较有显著差异,滴度低于后两组。结论:金欣口服液含药血清可能有抑制RSV胞膜上的吸附蛋白与细胞表面受体结合的作用。     

金欣口服液含药血清对呼吸道合胞病毒感染细胞早期凋亡的影响

目的:探讨金欣口服液含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染细胞早期不同时点凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响。方法:采用细胞培养、血清药理学、流式细胞术等实验技术检测金欣口服液含药血清抗RSV,影响细胞早期凋亡作用途径的影响。结果:RSV感染人胚肺成纤维细胞(HELF)细胞12、24h后凋亡率均低于细胞对照组(P<0.05),Bcl-2/Bax比例逐步上调,金欣口服液作用后,凋亡率明显高于病毒组(P<0.05),Bcl-2/Bax比值明显低于病毒组(P<0.05)。结论:金欣口服液在RSV感染早期,可能通过调控凋亡相关基因拮抗其抑制细胞凋亡的作用,从而影响进入细胞内的病毒复制增殖的过程,阻止病毒的扩散。     

金欣口服液含药血清对呼吸道合胞病毒感染RAW264.7细胞Toll样受体3表达的调控作用

目的:通过研究金欣口服液含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)活化诱导的Toll样受体3(TLR3)的干预作用,探讨其治疗RSV肺炎可能的免疫学机制。方法:RSV感染体外培养的RAW264.7细胞,采用金欣口服液含药血清进行干预,并设利巴韦林阳性对照,24h后收集细胞,Real time RT-PCR法测定TLR3 mRNA的表达变化;激光共聚焦显微镜观察免疫荧光细胞化学染色法处理的各组细胞TLR3表达水平;ELISA法检测各组细胞培养上清中白细胞介素-6(IL-6)含量,在核酸及蛋白水平探讨金欣口服液含药血清抗RSV感染的作用机制。结果:RSV感染RAW264.7细胞后24h,细胞中TLR3 mRNA和蛋白表达水平以及细胞培养上清中IL-6表达明显升高(P0.01),而金欣组TLR3及IL-6表达均显著低于RSV感染组(P0.01,P0.05),且效果优于利巴韦林组(P0.01,P0.05)。结论:金欣口服液含药血清能下调RSV活化诱导的TLR3及其下游炎症因子IL-6的高表达,推测其为金欣口服液抗RSV感染的机制之一。     

清肺口服液在组织培养上对腺病毒3I、3Ⅱ型致细胞病变作用研究

目的：观察腺病毒3I、3Ⅱ两个不同基因型在细胞培养上对清肺口服液的敏感性。方法：用组织培养体外抗病毒实验方法观察细胞病变抑制率。结果：清肺口服液和含药血清均能抑制病毒感染后细胞病变。结论：清肺口服液和含清肺口服液的血清能抑制腺病毒3I、3Ⅱ型感染后的细胞病变。     

基于RSV对细胞的感染周期研究金欣口服液的干预作用

目的基于呼吸道合胞病毒(RSV)的感染周期观察金欣口服液含药血清对RSV感染细胞的干预作用。方法分别在RSV感染Hep-2细胞前后用含药血清干预,观察细胞病变效应、检测细胞存活率和病毒滴度,以及RSV的F融合蛋白表达,判断药物对RSV感染的预防及治疗作用。结果在RSV感染前或感染早期干预,金欣口服液对细胞病变抑制率均超过50%,与病毒对照组比较,细胞存活率显著增高,上清病毒滴度显著降低,后期干预只能延缓病变。金欣含药血清作用后F蛋白表达显著降低、融合病变较少。结论金欣口服液含药血清在RSV感染早期干预效果更显著,其抗病毒作用靶点可能与F融合蛋白或该蛋白在细胞上的相应受体有关。     

平肺口服液成药及其含药血清体外抗肿瘤作用的比较

目的:通过观察中药复方平肺口服液成药及其含药血清在体外的抗肿瘤作用,探讨中药直接添加法和血清药理学方法的一致性。方法:中药复方直接添加法及血清药理学方法观察平肺口服液对人肺腺癌A549细胞增殖作用的影响,CCK-8法检测细胞增殖情况。结果:平肺口服液5 mg/mL和10 mg/mL在作用24、48和72 h均对A549细胞增殖存在影响,表现为生长抑制作用,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);在常规培养体系中添加20%含药大鼠血清培养至48 h时即对A549细胞增殖存在生长抑制作用,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P0.05),这种抑制作用随时间增长而增强。结论:中药复方平肺口服液成药及含药血清均具有抗肿瘤活性。     

清肺口服液多途径给药体外抗腺病毒3I 7b作用研究

目的:探讨清肺口服液体外抗腺病毒3I、7b作用及作用环节.方法:用100TCID50腺病毒3I、7b攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞造成腺病毒感染模型,分别在感染前、感染时、感染后加入清肺口服液含药血清,同时设空白血清组、病毒唑组及正常细胞对照组,MTT法比较结果.结果:含药血清各组OD值显著大于病毒组及空白血清组,与病毒唑组无显著性差异.结论:清肺口服液具有多环节体外抗腺病毒作用.     

清肺口服液对腺病毒3I7b型拮抗作用研究

目的：观察清肺口服液在细胞培养上对腺病毒3I7b基因型的拮抗作用。方法：采用组织培养体外抗病毒实验方法,比较不同组之间细胞病变抑制率。结果：含清肺口服液的血清均有抑制病毒感染后细胞病变的作用。结论：含清肺口服液的血清作1：2、1：4、1：9稀释后均能抑制腺病毒3I7b型感染后的细胞病变。     

清肺口服液多途径给药体外抗腺病毒3I 7b作用研究

目的：探讨清肺口服液体外抗腺病毒3I、7b作用及作用环节。方法：用100TCID50腺病毒3I、7b攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞造成腺病毒感染模型，分别在感染前、感染时、感染后加入清肺口服液含药血清，同时设空白血清组、病毒唑组及正常细胞对照组，MTT法比较结果。结果：含药血清各组OD值显著大于病毒组及空白血清组，与病毒唑组无显著性差异。结论：清肺口服液具有多环节体外抗腺病毒作用。     

金欣口服液对感染RSV大鼠血清IL-6、IL-8的影响

目的：观察金欣口服液对感染呼吸道合胞病毒（RSV）大鼠血清中IL-6、IL-8的影响。方法：将56只SD大鼠随机分为7组,分别为正常组,模型组,金欣高、中、低剂量治疗组,预先给药组,利巴韦林治疗组。用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组SD大鼠血清中IL-6、IL-8的水平。结果：大鼠感染RSV后血清中IL-6、IL-8水平均高于正常组（P〈0．05）,金欣治疗组及利巴韦林组干预后IL-6、IL-8水平显著降低（P〈0．01）;与利巴韦林组相比,金欣高剂量组、预先给药组的IL-6的水平明显降低（P〈0．01）;预先给药组中,血清IL-6的水平低于中、低剂量组（P〈0．01）,而IL-8水平比高、中、低剂量组均显著降低（P〈0．01）。结论：金欣口服液能降低两者的水平,且以预先给药方式更为有效,推测可以预防和治疗感染RSV的大鼠。     

金欣口服液对RSV感染人胚肺成纤维细胞细胞凋亡的研究

目的:探讨细胞凋亡在RSV肺炎发病中的作用以及金欣口服液干预RSV感染的可能机制。方法:体外建立呼吸道合胞病毒A型LONG株攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞(HELF)模型,设正常细胞组、病毒组、空白血清组、利巴韦林组和金欣口服液组。采用流式细胞术检测其对感染细胞不同时间点的总凋亡率、早期凋亡率。结果:RSV感染12、24h HELF细胞的总凋亡率、早期凋亡率均低于细胞对照组,且有显著性差异(P<0.05);空白血清组、利巴韦林组、金欣口服液组12、24h的总凋亡率、早期凋亡率均高于病毒对照组,且有显著性差异(P<0.05)。但增加的程度不同,12、24h HELF细胞的总凋亡率和24h早期凋亡率依次排序是空白血清组、利巴韦林组、金欣口服液组;12h早期凋亡率依次排序是利巴韦林组、空白血清组和金欣口服液组。RSV感染48、72、96h HELF细胞的总凋亡率、早期凋亡率均高于细胞对照组,且有显著性差异(P<0.05);空白血清组48、72、96h的总凋亡率均高于病毒对照组(P<0.05)、48h早期凋亡率无变化(P>0.05),72、96h早期凋亡率低于病毒对照组,且有显著性差异(P<0.05);利巴韦林组、金欣口服液组48、72、96h总凋亡率、早期凋亡率均低于病毒对照组,且有显著性差异(P<0.05)。但降低的程度不同,排序依次是金欣口服液组、利巴韦林组、空白血清组(P<0.05)。结论:金欣口服液直接或间接调控细胞凋亡,实现阻止RSV感染早期抑制细胞凋亡、感染后期促进凋亡的作用,从而阻止病毒在细胞内的进一步复制和清除,这可能是金欣口服液抗RSV病毒的作用机制之一。     

清肺口服液拮抗呼吸道合胞病毒感染的血清药理学研究

目的 评价清肺口服液抗呼吸道合胞病毒(RSV)的活性.方法 采用MTT法,以利巴韦林为对照组,观察清肺口服液及不同给药方式对RSV的拮抗作用.结果 清肺口服液具有明显抗RSV的作用,与利巴韦林比较差异无统计学意义;清肺口服液的作用机制可能为抑制病毒吸附或增殖.结论 清肺口服液可以通过不同环节拮抗RSV病毒,是治疗RSV感染的有效复方制剂.     

阿胶强骨口服液含药血清对大鼠成骨细胞的影响

目的:探讨喂饲阿胶强骨口服液大鼠的血清对体外培养的成骨细胞的生物学作用。方法:在新生SD大鼠头颅骨第2代成骨细胞培养液中加入不同浓度(低、中、高)的阿胶强骨口服液血清,并与空白组对照,分别观察成骨细胞的增殖、分化和矿化功能。结果:阿胶强骨口服液血清具有刺激成骨细胞增殖的作用,可提高碱性磷酸酶活性并增加矿化结节形成的数量。结论:阿胶强骨口服液血清具有刺激体外培养的成骨细胞增殖及分化成熟的功能。     

清肺口服液在组织培养上对腺病毒3Ⅰ、3Ⅱ型致细胞病变作用研究

目的观察腺病毒3Ⅰ、3Ⅱ两个不同基因型在细胞培养上对清肺口服液的敏感性.方法用组织培养体外抗病毒实验方法观察细胞病变抑制率.结果清肺口服液和含药血清均能抑制病毒感染后细胞病变.结论清肺口服液和含清肺口服液的血清能抑制腺病毒3Ⅰ、3Ⅱ型感染后的细胞病变.     

利胆排毒口服液兔含药血清药理学研究

目的研究含药血清对内毒素的体外灭活作用。方法给兔灌服利胆排毒口服液后,采取血清进行血清药理研究。结果与正常对照组比较,用药组灭活内毒素作用明显增强。结论利胆排毒口服液能增强机体对内毒素的直接灭活作用。     

清肺口服液对腺病毒3I、7d诱导细胞凋亡调控作用研究

目的:观察清肺口服液(含药血清)对腺病毒3I、7d所致人胚肺成纤维细胞凋亡的影响作用.方法:采用体外培养细胞,流式细胞仪检测病毒攻击及用药后细胞凋亡率的改变,Giemsa染色及荧光染色观察细胞形态.结果:腺病毒攻击24h可致人胚肺细胞凋亡,清肺口服液具有抑制凋亡的作用.结论:清肺口服液可通过抑制腺病毒所诱导的细胞凋亡达到抗病毒作用.     

六神丸含药血清诱导HL-60细胞凋亡实验研究

目的:观察六神丸含药血清诱导白血病细胞凋亡,探讨六神丸治疗急性白血病的部分机制。方法:制备含药血清,用MTT法、胎盘蓝染色法观察六神丸对HL-60细胞的增殖抑制作用。用吉姆萨染色法观察细胞凋亡的形态学变化,流式细胞仪、原位末端标记法(TUNEL)定量检测细胞凋亡程度。结果:六神丸含药血清对白血病细胞有明显的抑制,且随药物血清浓度和培养时间的延长而增加,吉姆萨染色、流式细胞仪检测、原位末端标记检测均证明六神丸含药血清能诱导HL-60白血病细胞凋亡。结论:六神丸含药血清能诱导细胞凋亡,这可能是六神丸治疗白血病的机制之一。     

清热抗感冲剂及其含药血清体外抑制腺病毒（ADV3）作用的实验研究

目的：通过清热抗感冲剂体外抑制腺病毒（ADV，）和呼吸道合胞病毒（aSV）的研究，探讨清热抗感冲荆体外抗病毒作用。方法：通过细胞培养，采用观察细胞病变（CPE）和活细胞染色计数法（MTT），观察清热抗感冲剂及其含药血清在Hep-2细胞中，抑制ADV，和RSV的作用。结果：清热抗感冲剂及其舍药血清具有抑制ADV3病毒复制作用。其，T℃50如分别为4760μg／mL、1／4．35稀释度；IC50为817μ9／mL、1／9．14稀释度；治疗指数（TI）分别为：5．8、2．03。清热抗感冲剂及其含药血清具有不同程度抑制RSV病毒复制作用，其TC50分别为4760μg／mL、1／4．35稀释度；IC50为178μg／mL、1／54稀释度；治疗指数（TI）分别为：26．7、12．3。结论：清热抗感冲剂及其舍药血清具有抑制ADV，和RSV在Hep-2细胞内的复制作用。     

田基黄不同提取物含药血清体外抗乙肝和抗肝癌作用的实验研究

目的观察田基黄不同提取物的含药血清体外抗乙肝和抗肝癌的作用。方法采用酶链免疫法,观察田基黄不同提取物的含药血清对2215细胞分泌HBeAg和HBsAg的抑制作用。采用MTT技术,观察田基黄不同提取物的含药血清对肝癌细胞BEL-7404增殖的抑制作用。结果当含药血清浓度为5%时,田基黄乙醇总提取物和正丁醇提取物对HBeAg和HBsAg呈现较好抑制作用,抑制率分别为34.84%和57.95%,以及76.02%和53.15%（P〈0.05）;当含药血清浓度为20%时,醋酸乙酯提取物对HBeAg和HBsAg呈现较好的抑制作用,抑制率分别为79.79%和57.22%（P〈0.05）;水提取物3种浓度的含药血清对HBeAg和HBsAg都有较好的抑制作用,抑制率分别达到了70%和30%以上（P〈0.05）。田基黄各提取物对肝癌BEL-7404细胞都有一定的抑制作用,该抑制作用呈明显的量效关系,当含药血清浓度为20%时,乙醇总提取物、醋酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物的抑制率分别为29.74%,53.80%,40.79%和54.24%（P〈0.01）。结论田基黄不同提取物含药血清能抑制2215细胞分泌HBeAg和HBsAg,并且能抑制肝癌细胞BEL-7404的增殖。其抗乙肝的有效成分主要分布在田基黄的水提取物中,而抗肝癌的有效成分则均衡分布于各种极性部位。     

蒲葵子的含药血清体外抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察蒲葵子的含药血清体外抗肿瘤作用。方法:采用MTT法,观察蒲葵子提取物的含药血清对肉瘤细胞(S180)和肝癌细胞(H22)增殖的抑制作用。结果:蒲葵子提取物的20%含药血清在体外对S180细胞和H22细胞有明显的抑制作用,抑制率分别为41.15%、47.43%。结论:蒲葵子含药血清能抑制S180肉瘤细胞和H22肝癌细胞的增殖。