汉族志愿者阿米替林代谢与异喹呱羟化代谢的关系

8名男性健康志愿者po阿米替林100 mg后,以阿米替林及其3种代谢物的血浓度曲线下面积(AUC_0~∞)计算阿米替林的脱甲基化代谢及羟基化代谢能力。结果提示个体间阿米替林及其3种代谢物的AUC差异很大。其中7名志愿者测定异喹呱羟化代谢表型,6例为异喹呱强代谢者,1例为弱代谢者。尿中异喹呱的羟化代谢率与阿米替林的羟基化代谢率、阿米替林和10-羟基阿米替林的AUC_0~∞呈显著相关。阿米替林总血浆清除率与异喹呱羟化代谢率呈弱相关。此结果表明阿米替林和异喹呱的羟化代谢可能由同一酶控制,阿米替林的羟基化代谢和脱甲基化代谢可能为两个独立的代谢途径。     

环孢素A代谢物的研究概况

环孢素A是具有免疫抑制活性的环状多肽,在临床上被用于多种器官或骨髓移植患者的抗排斥反应,并可治疗自身免疫性疾病。环孢素A主要在胃肠道由肝药酶CYP3A家族代谢,得到超过30种代谢物,经胆汁排泄。初级代谢物AM1、AM9、AM4N等具有较显著的免疫抑制活性和肝肾毒性。免疫法可同时检测环孢素A及其代谢物的总浓度,而高效液相色谱法则可分别检测二者的浓度。患者的生理或病理状态也影响环孢素A及其代谢物在体内的分布。     

液相色谱-串联质谱法测定肾移植患者全血中环孢素A及其2种代谢物浓度

目的:建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定肾移植患者体内环孢素A及其两个代谢物浓度。方法:全血样品用乙腈沉淀蛋白后直接进样分析,流动相为乙腈-10mmol.L-1甲酸铵溶液-甲酸(85∶15∶0.5,v/v/v),流速0.5mL.min-1,采用电喷雾离子化源,检测方式为正离子多离子反应监测(MRM)。血药浓度数据用Topfit2.0软件,按非室模型计算药动学参数。结果:对所建分析方法进行了较全面的验证,考察了环孢素A及其代谢物的药动学特征。环孢素A的主要药动学参数谷浓度C0为(74.0±25.9)μg.L-1,峰浓度Cmax为(566.2±170.3)μg.L-1,达峰时间tmax为(1.8±0.4)h,消除半衰期t1/2为(4.6±0.9)h,0~12h药时曲线下面积AUC0-12为(2 173.5±580.1)μg.h.L-1。结论:所建方法灵敏,重现性好,选择性强,样品处理简单,可用于环孢素A及其代谢物浓度的监测和药动学研究。     

汉族志愿者阿米替林代谢与异喹呱羟化代谢的关系

8名男性健康志愿者po阿米替林100 mg后,以阿米替林及其3种代谢物的血浓度曲线下面积(AUC₀^∞)计算阿米替林的脱甲基化代谢及羟基化代谢能力。结果提示个体间阿米替林及其3种代谢物的AUC差异很大。其中7名志愿者测定异喹呱羟化代谢表型,6例为异喹呱强代谢者,1例为弱代谢者。尿中异喹呱的羟化代谢率与阿米替林的羟基化代谢率、阿米替林和10-羟基阿米替林的AUC₀^∞呈显著相关。阿米替林总血浆清除率与异喹呱羟化代谢率呈弱相关。此结果表明阿米替林和异喹呱的羟化代谢可能由同一酶控制,阿米替林的羟基化代谢和脱甲基化代谢可能为两个独立的代谢途径。     

LC-MS/MS法和mFPIA法测定全血环孢素A浓度的相关性比较

目的:对高效液相色谱电喷雾串联质谱(LC-MS/MS)法和单克隆荧光偏振免疫(mFPIA)法测定肾移植术后稳定期患者不同时间点的全血环孢素A(CsA)浓度进行相关性比较。方法:分别采用LC-MS/MS法和mFPIA法测定患者全血CsA浓度,对测定结果进行双侧配对t检验比较差异性,用Passing-Bablok回归分析法比较不同采血时间点2种方法测定结果的相关性。结果:2种方法测定值之间具有显著性差异;服药后0、3.0、4.0h时2法测定值的相关性最好,0.5、0.75、12.0h相关性最差。结论:对CsA血药浓度监测结果的分析需考虑监测方法以及不同采血时间点的影响。     

FPIA法测定环孢素全血样的稳定性考察

目的:应用FPIA法测定全血环孢素浓度,考察保存条件和保存时间对测定结果的影响。方法:取肾移植术后服用环孢素患者的全血标本分别置室温、冰箱冷藏、冰柜冷冻保存2周,期间重复测定标本以考察其稳定性。结果:保存于室温、冷藏、冷冻条件下的标本的测定结果与保存前均无明显差异(P>0.05)。结论:全血标本在室温下至少可稳定保存2周。     

再生障碍性贫血患者环孢素A血药浓度测定方法的比较

目的：寻找在监测再生障碍性贫血（再障）患者环孢素Ａ（ＣｓＡ）浓度时高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法和多克隆荧光偏振免疫（ＰＦＰＩＡ）法两者之间的差异和相关性。方法：建立一种特异性测定再障患者血清服药后全血中ＣｓＡ原药的ＨＰＬＣ法，并与非特异性测定ＣｓＡ原药及其代谢物总浓度的Ｐ〈０．０１，经相关与回归分析呈线性关系，方程为：ＹＦＦＰＬＡ＝２．４７ＸＨＰＬＣ＋６９．５２，ｒ＝０．９１２４，ｎ＝３８，（Ｐ〈０     

全血环孢素A样品的预处理保存

目的:考察荧光偏振免疫分析法(FPIA)测定预处理后全血环孢素A浓度时样品的保存方法和保存时间对测定结果的影响。方法:取临床肾移植术后患者的全血标本经预处理后在室温或冰箱冷藏条件下保存7,14,21d,分别测定标本,考察测定结果稳定性。结果:预处理后的全血标本经室温或冷藏后测定结果均与保存前差异无显著性。结论:预处理后的全血标本在室温或冷藏条件下至少可稳定保存3周,两种保存条件间差异无显著性。     

人尿中奥美拉唑代谢物的提取与精制

目的对奥美拉唑在人体内代谢后尿中2种代谢物进行提取与精制后推测其结构并测定其含量。方法24名健康受试者单剂量口服奥美拉唑肠溶胶囊40mg后,收集服药后12h内尿液,用乙醚提取和浓缩,以高效液相色谱法进行分离,将相对纯品进行质谱扫描测定,推测其结构并计算含量。结果经分离得到的2种代谢物推测为吡啶5’—或3’—甲基氧化生成的羟基砜型代谢物、吡啶环上5’—甲基羟化硫醚型代谢物,含量分别为96.54%、97.26%。结论本方法分离得到的奥美拉唑尿中代谢物质纯度较高。     

肾移植患者的CYP3A4基因型与体内环孢素浓度相关性评价

目的:评价肾移植患者的CYP3A4基因型与体内环孢素浓度相关性.方法:采用特异性荧光偏振免疫法,测定肾移植患者677例(7个民族)次术后不同时间点的体内全血环孢素浓度,利用CYP3A4芯片检测387例患者的CYP3A4酶的基因型,分组(移植术后时间0～1,1～2,2～3,3～4,4～5,5年以上)计算每次用药剂量及血药浓度均值和标准差.结果:12例(汉族)的CYP3A4基因型为突变型,突变率为3.1%.其中8例突变型患者(基因位点13989A→G*4,15820C→15820 G*5)的每公斤体重用药剂量显著高于野生型的患者(P＜0.05);4例基因位点-444T→G*1C和21973C→21973T*11发生改变的突变型患者用药剂量与野生型患者的用药剂量无显著差异.结论:CYP3A4基因位点突变13989A→G*4,15820C→15820 G*5的肾移植患者服用环孢素的剂量应加大.     

Measurement of cyclosporine A in rat tissues and human kidney transplant biopsies--a method suitable for small (<1 mg) samples

Therapeutic drug monitoring is used to individualize cyclosporine A (CsA) dosing after transplantation. However, immunosuppressant concentrations within the graft may better predict clinical outcomes, including toxicity. This study aimed to develop a method suitable for CsA measurement using routine fine-needle biopsy samples. CsA was quantified retrospectively in kidney and liver tissues from 10 rats administered CsA, and 21 core needle kidney biopsies taken from renal transplant patients with suspected graft dysfunction. Dried biopsies were weighed (mean ± SD weights of 0.22 ± 0.18 mg), enzymatically solubilized, and then CsA was extracted and quantified using online 2-dimensional liquid chromatography-tandem mass spectrometry. The method was linear (r2 > 0.997, n = 10), accurate, and precise (quality control and calibrator coefficient of variation and bias <15%), with minimal matrix effects (coefficient of variation and bias <15%). Reproducibility of tissue weight measurements was confirmed by retrospective DNA quantitation, with a significant linear correlation between weight and total DNA concentration (r2 = 0.988). In rats, there was a significant linear correlation between CsA concentrations in liver and kidney tissues (r2 = 0.996) but there was no correlation between blood (C0) and tissue CsA concentrations (Spearman r = 0.430 and 0.503, P > 0.05). Similarly, in 16 transplant patients, for whom blood CsA concentrations (C2) were available within 1 day of the renal biopsy being performed, there was no significant correlation between CsA concentrations in blood and kidney tissue (Spearman r = 0.168, P > 0.05). In situ CsA measurements acquired using this method could make an easy transition into clinical use due to their retrospective nature and minimal disruption to current clinical protocols and could provide an additional tool for optimizing clinical outcomes in the future.     

FPIA法与RP-HPLC法检测肾移植患者环孢素血药浓度的比较研究

目的比较反相高效液相色谱法(RP-HPLC)法与荧光偏振免疫(FPIA)法检测肾移植患者环孢素血药浓度结果,评价二者的相关性。方法分别采用RP-HPLC和FPIA方法测定20份血样,并对结果进行统计学处理。结果两种测定方法所得结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论RP-HPLC和FPIA方法应用于肾移植患者环孢素血药浓度监测真实可信。     

肾移植患者环孢素A血药浓度与胱抑素C的相关性分析

目的:研究肾移植患者术后不同时期的环孢素A(CsA)血药浓度与血清胱抑素C(CysC)和血清肌酐(Scr)的相关性。方法:118例肾移植患者术后肾功能稳定(肌酐清除率>40 ml/min),其中男性60例,女性58例,共监测307例次。术后同时监测CsA血药浓度、CysC值和Scr。结果:随着术后时间的延长,CsA血药浓度呈逐渐下降趋势,CysC的均值高于正常参考范围,而Scr值均在正常参考范围内。术后不同时间段组、不同药物浓度组的CsA血药浓度与CysC和Scr均无显著相关性。结论:肾移植术后CsA血药浓度的高低,不影响CysC、Scr对移植肾功能的评价。     

联苯双酯对肾移植受者环孢素A全血浓度的影响及肝毒性的防护作用

目的 :研究肾移植受者应用联苯双酯 (bifen date ,BFD)对环孢素A(cyclosporinA ,CsA)全血浓度的影响及肝毒性的防护作用。方法 :2 8例患者 (合用组 )合用CsA与BFD ,30例患者 (对照组 )单服CsA ,以CsA全血浓度及肝功能作为临床评价指标。结果 :BFD能有效降低肾移植受者异常升高的ALT和AST ,合用BFD后CsA全血浓度与合用前比较降幅达 17.7% ,与对照组比较亦有显著性降低 (P <0 .0 1) ,停用BFD后CsA全血浓度明显升高 ,增幅达36 .3%。结论 :BFD能防护肾移植受者CsA肝毒性并能明显降低CsA血浓度。     

Relationship between development of nephrotoxicity and blood concentration of cyclosporine A in bone-marrow transplanted recipients who received the continuous intravenous infusion

This study was undertaken to investigate the relationship between blood concentration of cyclosporine A (CsA), administered intravenously by a 24-h continuous infusion, and drug-induced nephrotoxicity or hepatotoxicity. It was investigated retrospectively in 8 patients who had received an allogeneic bone marrow transplant (BMT). The correlation between daily doses and blood concentration of CsA was not significant. Then, the data of blood concentration of CsA and renal or liver function test result were divided into 5-d periods from the date of transplantation, and the mean value for each period was calculated. The maximum values of blood urea nitrogen (BUN) and serum creatinine (SCr) were consistently observed only after the period when the 5-d mean CsA concentration reached the peak level: the maximum BUN and SCr values were witnessed at Periods 2 to 10 and at Periods 1 to 9, respectively. On the other hand, no consistent correlation was found between the 5-d mean CsA concentrations and liver function test result. We also investigated the relationship between renal function and the cumulative dose or AUC of CsA. The parameters of renal function tests reached peak levels at the cumulative dose of 4000 to 10000 mg and at the cumulative AUC of 280000 to 660000 ng/ml.h. These results suggest that: 1) a deterioration of renal function occurs usually after the peak blood concentration of CsA is attained, and 2) the monitoring of the blood concentration of CsA is useful in predicting renal dysfunction in post-BMT patients.     

肾移植术后环孢素A血药浓度与肝毒性的关系

目的研究肾移植术后用环孢素(CsA)为主的免疫抑制剂治疗的患者CsA血药浓度和CsA致肝毒性的关系。方法分别用单克隆荧光偏振免疫分析法测定肾移植术后患者环孢素全血浓度;同时,酶速率法、酶循环及比色法监测丙氨酸氨基转移酶(ALT)活力及血清总胆红素(TBiL)、总胆汁酸(TBA)等肝功能指标。结果术前肝功能正常的46例肾移植受者中,确诊有16人发生了环孢素致药物性肝功能损害。结论移植术后应用环孢素的患者应密切监测CsA的血药浓度,并结合临床肝功能指标,调整环孢素的用量,以避免或减轻肝中毒。     

肾移植术后患者体内病理生理因素对环孢素血药浓度的影响

目的：探讨肾移植术后患者环孢素（CsA）血药浓度与体内病理生理因素的相关性。方法：采用回顾性调查方法在空军总医院收集58例肾移植术后使用CsA的患者病历资料,记录患者性别、年龄、体重、CsA剂量、血药浓度及相应生化检验值。应用SAS软件（6.04版）对数据进行多元线性回归分析。结果：CsA单位剂量血药浓度与总胆红素（TBil）、用药时间（Time）和年龄（Age）之间存在明显正相关性（P〈0.05）。结论：患者体内总胆红素、年龄与用药时间对CsA血药浓度有显著影响。     

肾移植中环孢素的血药浓度与多药耐药基因多态性的关系

目的 探讨肾移植术后患者的MDR1C3435T、G2677T/A和C1236T位点的基因多态性对环孢素(CsA)血药浓度的影响.方法 使用荧光偏振免疫分析法(AxsYM)测定65例肾移植患者在术后1 wk和1 mo时的CsA血药浓度(包括峰浓度ρ2和谷浓度ρ0),使用等位基因特异扩增法(ASA-PCR)对患者进行MDR1基因分型,比较不同基因型之间CsA浓度剂量比的差异.结果 在65例患者中,C3435T,CC型25例(38.5%),CT型35例(53.8%),TT型5例(7.7%);G2677T/A,GG型15例(23.1%),GT型21例(32.3%),TT型10例(15.4%),GA型12例(18.5%),AT型6例(9.2%),AA型1例(1.5%);C1236T,CC型10例(15.4%),CT型32例(49.2%),TT型23例(35.4%).C3435T的CT型患者的CsA浓度剂量比略大于CC型和TT型;G2677T/A的从型患者的CsA浓度剂量比略大于其他基因型;C1236T的TT型患者的谷浓度剂量比略大于CC型和CT型,CC型患者的峰浓度剂量比略大于CT型和TT型,但差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 在肾移植患者中,MDR1多态性与CsA血药浓度无明显相关性,有待进一步确认.     

环孢素血药浓度监测及其临床意义

目的:监测肾移植患者环孢素(CsA)血药浓度,探讨其临床意义。方法:458例肾移植受者术后口服CsA达稳态时,用荧光偏振免疫分析法(FPIA)测定其全血CsA浓度。结果:随着移植肾存活时间的延长,CsA治疗浓度水平呈逐渐下降趋势。结论:每个患者的病情、用药情况都不尽相同。监测CsA血药浓度时必须结合患者的实际情况作具体分析,及时调整用药方案,确保正确地指导临床合理用药,提高治疗水平。     

地尔硫对环孢素A肾毒性的防护及血药浓度的影响

目的 :了解肾移植术后患者应用地尔硫对环孢素A (CsA)血药浓度的影响及肾保护作用。方法 :选用25例肾移植患者分为两组 ,治疗组加用地尔硫 ,采用荧光偏振免疫分析法测定CsA的全血谷浓度。结果 :治疗组CsA的用量明显低于对照组 ,地尔硫能降低尿酸、血清肌酐、尿素氮水平。结论 :地尔硫能减少CsA用量 ,防护CsA肾毒性 ,还可减少患者费用