半边莲生物碱对肺动脉高压大鼠ET-1信号通路的影响

目的 观察半边莲生物碱对肺动脉高压(PAH)大鼠肺小动脉重构的影响并探讨其机制.方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组和半边莲生物碱组,每组8只.腹腔注射野百合碱(MCT)复制PAH模型.半边莲生物碱干预4周后, HE染色观察肺小动脉病理学变化,ELISA法检测大鼠血浆内皮素-1(ET-1)水平,免疫组化法检测肺组织内皮素受体A(ET_A)的表达.结果 半边莲生物碱可显著改善肺小动脉重构,降低血浆ET-1水平及肺组织ET_A的表达.结论 半边莲生物碱可抑制MCT所致的PAH大鼠肺小动脉重构,这可能与其显著降低大鼠血浆ET-1水平及肺组织ET_A的表达有关.     

西地那非对野百合碱所致大鼠肺动脉高压的影响

目的：探讨西地那非对野百合碱（MCT）所致大鼠肺动脉高压的影响。方法：Wistar大鼠30只随机分为对照组（C组）、模型组（H组）和干预组（S组）。H组及S组一次注射MCT60mg／b制作肺动脉高压模型,4周后,S组大鼠灌喂西地那非25mg／kg·d^-12周。测定平均肺动脉压（mPAP）、体循环平均动脉压（mPA）、右心室肥厚、肺小动脉管壁增厚指标和血浆中cGMP浓度。结果：S组mPAP明显低于H组（P〈0．01）,3组循环平均动脉压比较,差异无统计学意义（P〉O．05）。右心室游离壁（RV）与左心室＋室间隔（LV＋s）的重量比和肺小动脉平均血管壁面积与血管总面积的百分比（WA）（％）,S组均明显低于H组（P〈0．01）,而血管腔面积与血管总面积的百分比（VA）（％）高于H组（P〈0．01）。S组肺小动脉管壁及管腔狭窄较H组显著减轻,心肌细胞的显微结构比H组好转。S组cGMP浓度显著高于H组（P〈0．01）。结论：西地那非扩张肺血管和逆转肺血管重构,降低肺动脉高压,改善右心室重构,但西地那非不影响体循环动脉压,可能与血浆中cGMP浓度增加有关。     

冬虫夏草早期干预对COPD模型大鼠气道重塑及血管内皮功能的影响

目的观察冬虫夏草早期干预对慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)模型大鼠气道重塑及血内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)、一氧化氮(Nitric Oxide,NO)及血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)水平影响。方法取雄性SD大鼠60只随机分为模型组、冬虫夏草预防组、对照组,各20只。前2组SD大鼠采取烟熏及实验第1、14天气道内滴入脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)的方法复制COPD大鼠模型,冬虫夏草预防组在造模前7 d开始胃饲受试药物。第29天每组随机取10只大鼠采用图像分析方法测定肺组织病理及其形态计量学改变。每组剩下的10只大鼠继续灌胃相应药物,第57天处死全部大鼠,采用双抗体夹心ELISA法及硝酸还原酶法检测血浆ET-1、血清VEGF及NO的水平。组间两两比较采用t检验。结果采用烟熏及气道内滴入LPS的方法能成功复制COPD大鼠模型;与模型组比较,冬虫夏草预防组大鼠气道重构减轻(P<0.01),血ET-1、VEGF水平降低(P<0.01~0.05)、NO含量升高(P<0.01)。结论冬虫夏草早期干预能减轻气道重构,调节ET-1、NO及VEGF的平衡,改善肺血管内皮功能。     

丹参川芎嗪对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠ET-1、NO和RVHI的影响

目的 观察丹参川芎嗪对野百合碱（MCT）诱导的肺动脉高压大鼠血浆中内皮素-1（ET-1）、一氧化氮（NO）含量、大鼠的平均肺动脉压（mPAP）、右心室肥厚指数（RVHI）的影响.方法 SD大鼠90只,随机分为对照组、模型组、丹参川芎嗪组.采用MCT进行一次性皮下注射（60 mg/kg）造模,28天后测定血浆中ET-1、NO的含量及mPAP、RVHI.结果 模型组及丹参川芎嗪组mPAP、ET-1、RVHI高于对照组（P＜0.05）,模型组及丹参川芎嗪组NO含量低于对照组（P＜0.05）.结论 丹参川芎嗪可能通过抑制血管壁的炎症、调节血管扩张和收缩失衡、减轻右心室肥厚,从而降低mPAP.     

薯蓣皂苷元对肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

目的：探讨薯蓣皂苷元（Dio）对野百合碱（MCT）诱导的肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响。方法：将30只雄性 SD 大鼠随机分为正常对照组、MCT 组和 Dio 组,每组10只。MCT 组和 Dio 组一次性腹腔注射野百合碱60 mg/kg,建立大鼠肺动脉高压模型。Dio 组每天给予 Dio 80mg/kg 灌胃,对照组和 MCT 组给予相同量溶剂灌胃。待药物干预满4周后,分别测量各组干预后平均肺动脉压力（mPAP）、右心室肥大指数（RVHI）、肺小动脉管壁厚度占管径的百分比（WT％）和管壁面积占血管总面积的百分比（WA％）;采用免疫组化检测肺组织核因子-κB（NF-κB）的表达。结果：MCT 组的 mPAP、RVHI、WT％、WA％及 NF-κB 的表达水平均显著高于对照组和 Dio 组;经薯蓣皂苷元干预后,mPAP、RVHI、WT％、WA％及 NF-κB 的表达水平均明显降低。结论：薯蓣皂苷元能够缓解 MCT诱导的肺动脉高压大鼠肺血管重构,其机制可能与抑制 NF-κB 的表达有关。     

波生坦对肺纤维化大鼠肺血管重构、血浆ET-1的影响

目的:探讨波生坦对肺纤维化(PF)大鼠肺血管重构、血浆ET-1的影响.方法:将48只Wistar大鼠均分为6组:对照2,4周组(C2、C4组)、模型2,4周组(M2、M4组)及治疗组(T1、T2组).予博莱霉素建模,T1、T2组分别于第2,15天开始每天予波生坦灌胃至第28天.HE染色观察肺血管病理,ELISA法测定血浆ET-1浓度.结果:①M2组大鼠肺血管内皮脱落,平滑肌增殖致管腔狭窄,M4组较M2组进展;T1组肺血管重构明显减轻;T2组与M4组比较差异无统计学意义.②M2、M4组大鼠肺动脉管壁厚度(VT)较C2、C4组增加[(33.0±8.1)μm、(49.8±7.6)μm比(23.2±5.6)μm、(21.5±6.3)μm](P＜0.05),T1组[(31.3±6.5)μm]较M4组[(49.8±7.6)μm]明显下降.③M2、M4组血浆ET-1浓度明显高于C2、C4组,T1组较M4组下降,P＜0.05.结论:波生坦可减轻PF大鼠的肺血管重构,可能通过早期阶段抑制ET-1起作用.     

HMGB1表达水平与慢性阻塞性肺病大鼠模型气道、肺血管重构的关系及其临床意义

目的：探讨慢性阻塞性疾病（Chronic obstructive pulmonary disease,COPD）大鼠模型气道、肺血管重构与高迁移率族蛋白B1（High mobility group protein B1,HMGB1）表达水平的相关性。方法：健康无特定病原体（Specific pathogen free,SPF）级SD雄性大鼠24只,分为3组,每组8只。正常对照组（A）：正常饲养6周;COPD组（B）：第 1、14天经气道内注入脂多糖（Lipopolysac－charide,LPS）溶液,200 μg/次,烟熏1 h/d,共6周;COPD并低氧组（C）：第 1、14天经气道内注入LPS,200 μg/次,熏香烟1 h/d,共6周,实验最后2周在烟熏的同时,给予18％低氧8 h/d。造模结束后观测各组大鼠气道炎症、重构以及肺小动脉的病理改变,用Western blot检测各组肺组织中HMGB1蛋白的表达。结果：①B、C组气道重构指标细支气管管壁厚度与气管外径比值（MT％）、管壁面积和气管总面积比值（MA％）与A组比较均明显增高（P<0．05）。②B、C组肌化型动脉百分比与A组相比增多（P<0.05）;C组肺小动脉管壁厚度与血管外径比值（WT％）以及管壁面积与血管总面积比值（WA％）与A组相比较均增大（P<0．05）。③Western blot电泳结果显示：B、C组HMGB1蛋白表达水平与A组相比明显增强（P<0.05）,C组较B组HMGB1蛋白表达增强（P<0.05）。结论：随着COPD疾病进展出现进行性加重的气道、肺血管重构,同时HMGB1的表达逐渐增强,说明HMGB1的表达与COPD的气道、肺血管重构有关。     

红霉素对烟草烟雾暴露致肺气肿大鼠肺血管超微结构的影响

目的：观察烟草烟雾暴露致肺气肿大鼠肺血管超微结构改变特点及使用红霉素（EM）干预的影响.方法：24只健康雄性Wistar大鼠随机分成对照组（A组）、烟草烟雾暴露组（B组）、EM预防组（C组）,红霉素治疗组（D组）,每组6只.A组予伪烟草烟雾暴露,B,C,D组于第1和第14天予气道内注入脂多糖（LPS）,烟草烟雾暴露2 h/d,持续8周制备模型;除第1天和第14天,C组每日EM灌胃,持续8周;D组烟草烟雾暴露4周后开始每日EM灌胃,持续4周;A、B组每日予等量的生理盐水灌胃,持续8周.对各组大鼠肺组织病理进行肺气肿和肺血管及其超微结构评估.结果：电镜下B组毛细血管内皮细胞线粒体减少、水肿,饮泡增多,与基底膜连接处增厚,肺小动脉内弹力膜菲薄,断裂,管壁大量胶原纤维增生.C组预防性干预超微结构上肺小动脉及毛细血管可见正常线粒体,内皮细胞无明显脱落,管壁平滑肌增殖但胶原纤维增生明显减少.D组毛细血管内皮细胞部分线粒体肿胀,基底膜连接处增厚,管壁可见增生的胶原纤维.结论：烟草烟雾暴露及LPS可引起大鼠肺血管内皮细胞损伤、血管壁平滑肌及胶原纤维增殖而致血管重构,早期使用EM干预可改善肺血管重构.     

粉防己碱对肾性高血压大鼠小血管重构的影响

目的：探讨肾血管性高血压大鼠小血管重构特点及粉防己碱的预防作用。方法：用两肾一夹法制备肾血管性高血压大鼠病理模型，术后第5周给予粉防己碱（Tet,50mg.kg^-1.d^-1）或依那普利（Ena,6mg.kg^-1.d^-1)连续8周，观察两药对高血压大鼠小动脉血管结构的影响，结果：肾血管性高血压（RH）大鼠尾动脉和股动脉湿重增加；尾动脉，冠状动脉，肾小动脉管壁厚度和壁／腔比值均明显增大；肾小动脉管壁平滑肌细胞数明显增加，粉防己碱和依那普利用药后上述变化明显减轻。结论：肾血管性高血压大鼠小动脉主要呈肥厚性重构。粉防己碱烽依那普利可有效防止RH大鼠小血管重构。     

紫杉醇脂质体对肺动脉高压大鼠 肺血管重构的干预作用

目的 探讨紫杉醇脂质体对野百合碱（monocrotaline,MCT）诱导肺动脉高压模型大鼠肺血管重构的影响。方法 将30只雄性Sprague–Dawley大鼠随机分为正常对照组（正常组）、野百合碱模型组（MCT组）和紫杉醇脂质体组（治疗组）,每组各10只;MCT组和治疗组大鼠腹腔注射1%MCT溶液造模,造模第21天起,治疗组大鼠予尾静脉注射紫杉醇脂质体,正常组和MCT组大鼠予尾静脉注射等量生理盐水,每3d注射1次,35d后测定各组大鼠右心室收缩压（right ventricular systolic pressure,RVSP）和右心室肥厚指数（right ventricular hypertrophy index,RVHI）;观察肺组织病理形态并检测肺动脉中膜厚度百分比、血管壁面积指数、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）及α–平滑肌肌动蛋白（α–smooth muscle actin,α–SMA）表达水平。结果 MCT组大鼠的RVSP、RVHI、肺动脉中膜厚度百分比、血管壁面积指数、PCNA及α–SMA表达均显著高于正常组（P<0.05）,治疗组大鼠的RVSP、RVHI、肺动脉中膜厚度百分比、血管壁面积指数、PCNA及α–SMA表达均显著低于MCT组（P<0.05）。结论 紫杉醇脂质体可降低MCT诱导肺动脉高压大鼠的肺动脉压力,缓解肺血管重构。     

野百合碱复合单肺切除诱导实验性肺动脉结构重建病理形态学改变

目的　观察野百合碱 (MCT)复合单肺切除诱导的实验性肺动脉重建的病理形态学特征。　方法　 16只雄性 SD大鼠随机分为 2组 (n=8)。 (M+P)组 :大鼠行左肺切除 ,7d后皮下注射 MCT6 0 mg/ kg;对照组 :大鼠仅行假手术处理。每组大鼠于术后 5周检测肺动脉压、右心室 /左心室 +室间隔 [RV/ (L V +S) ]的比值 ,同时观察右肺动脉病理形态学改变。　结果　与对照组相比 ,(M+P)组大鼠肺动脉压力和 RV/ (L V+S)比值明显增高 (P<0 .0 1) ;病理观察显示 (M+P)组大鼠 MCT注射后 4周肌型肺小动脉中膜明显增厚 ,肺腺泡内小动脉明显肌化、内膜增厚。对照组大鼠肺小动脉未见血管结构重建。与对照组相比 ,(M+P)组大鼠肺小动脉内皮细胞坏死及内弹力膜断裂明显增加。　结论　肺小动脉内皮损伤、肌型肺小动脉中膜增厚和肺腺泡内小动脉肌化、内膜增厚是 MCT复合单肺切除诱发的大鼠肺动脉高压的病理基础。     

大鼠原发性肺动脉高压模型中循环血小板和白细胞的活化及其作用

目的：探讨循环血小板和白细胞活化在原发性肺动脉高压发生发展中的作用。方法：雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠皮下注射2％野百合碱（MCT）以建立原发性肺动脉高压模型。采用流式细胞术检测3周末（MCT3w组）模型组和正常对照组大鼠全血血小板纤维蛋白原结合率、白细胞活化标志物CD11b的表达以及血小板与白细胞聚集体的形成。结果：大鼠注射MCT3周后，右心室收缩压、平均肺动脉压均较正常对照明显上升（P〈0．01），而平均动脉压和心率无统计学差异（P〉0．05）。大鼠肺标本Masson三色染色显示肌性小肺动脉中膜严重增厚。血小板纤维蛋白原结合率MCT1w组较对照组高[（4．08&#177;1．59）％vs（1．45&#177;0．61）％，P〈0．01]。MCT3w组除淋巴细胞亚群外，中性粒细胞和单核细胞亚群CD11b表达的平均荧光强度较对照组显著增加（P〈0．01）。MCT3w组的血小板一中性粒细胞聚集体形成较对照组均明显增多（P〈0．01）。结论：在大鼠原发性肺动脉高压模型中，循环血小板和白细胞的活化可能促进肺动脉高压的发生和病理生理改变。     

雷米普利对肺动脉高压大鼠肺血管平滑肌细胞的增殖和重构的影响

目的探讨雷米普利对野百合碱（monocrotaline,MCT）诱导的肺动脉高压大鼠肺血管平滑肌细胞的增殖和重构的影响.方法雄性SD大鼠30只,随机分为：正常对照组、MCT组、MCT＋雷米普利组.后两组颈部注射MCT60mg/kg后,用雷米普利灌胃4周.对照组颈部注射生理盐水后,用生理盐水灌胃4周.测定大鼠的右室收缩压（RVSP）和心室重量变化,测定肺小动脉管壁厚度（WT）占动脉外径（ED）的百分比（WT%）及管壁面积（WA）占血管总面积的百分比（WA%）.采用免疫组化比较肺血管平滑肌细胞（VSMC）α-平滑肌肌动蛋白（α-actin）及增殖细胞核抗（PCNA）的阳性表达.结果MCT组与正常对照组相比,RVSP、右心室（RV）/左心室加室间隔（LV＋S）、RV/体重（BW）、（LV＋S）/BW、WT%、WA%、PCNA阳性率显著升高,MCT＋雷米普利组上述指标低于MCT组.MCT组与正常对照组相比α-actin染色IOD值显著降低,而MCT＋雷米普利组与MCT组相比α-actin染色IOD值显著升高.结论在MCT诱导的肺动脉高压模型中,雷米普利抑制肺血管平滑肌细胞由收缩表型向合成表型转化,抑制平滑肌细胞的增生,减缓肺血管重构进程.     

TENASCIN在野百合碱诱导肺动脉高压大鼠右心室结构重建中的表达及意义

目的观察Tenascin(TN)在野百合碱诱导肺动脉高压(肺高压)大鼠右心室组织中的表达变化,探讨其在心室结构重建过程中的作用.方法72只SD大鼠随机分为模型组和对照组,野百合碱一次性皮下注射法复制肺动脉高压模型,右心导管法测定肺动脉压力并计算右室/(左室+室间隔)[RV/(LV+SP)]比值,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)等方法检测TN表达变化.结果用药14d后大鼠出现右心室肥大,模型组大鼠(RV/(LV+SP)(0.282±0.0472),与对照组(0.237±0.154)相比差异有显著性(P＜0.05);第21天mPAP升高,模型组大鼠肺动脉压力(26.38±3.86)mmHg明显高于对照组(15.12±1.78)mmHg(P＜0.01);TN mRNA在对照组大鼠右心室组织中微量表达,模型组大鼠TN mRNA表达水平于用药7 d后显著升高(0.34±0.14),与对照组(0.19±0.07)比较差异有显著性(P＜0.01).模型组大鼠右心室组织中TN-C蛋白表达量明显增加.结论TN在肺动脉高压右心室组织中表达增加,可能在右心室结构重建过程中发挥重要作用.     

转录因子NKx2-5表达在大鼠右心室心肌重塑模型的变化

目的:观察增加大鼠右心室压力负荷后,右心室心肌重塑与同源盒转录因子NKx2-5表达的变化。方法:注射野百合碱(MCT)制作大鼠肺动脉高压模型,测量大鼠不同时间点肺动脉压和右心室肥厚指数;采用RT-PCR法和Westernblot分析,分别测定右心室心肌NKx2-5及其下游基因心房利钠因子(ANF)的mRNA及蛋白表达。结果:注射MCT后第14天,右室心肌明显肥厚,NKx2-5与ANF的mRNA及蛋白表达亦明显增加,与其呈明显正相关。结论:右心室壁压力负荷增加可作为原发性刺激,使在心脏胚胎发育早期表达的心脏同源盒基因NKx2-5表达增加,NKx2-5在成熟心肌重塑中可能起作用。     

MCC950在野百合碱诱导大鼠肺动脉高压模型中的治疗作用及其机制研究

目的 探讨MCC950是否可缓解野百合碱（monocrotaline,MCT）诱导的大鼠肺动脉高压。方法 雄性SD大鼠27只,采用数字表法随机分为对照组、MCT组和MCT+MCC950 3组,MCT+MCC950组于腹腔注射MCT第16天给予MCC950干预,每2 d 1次,共7次。至第31天,检测右心室收缩压、右心肥厚指数;观察肺细小动脉结构,计算血管中膜厚度百分比（media thickness,MT%）,检测肺组织中NLRP3、白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）和相关分子的mRNA及蛋白表达情况。结果 与对照组比较,MCT组RVSP升高显著［（50.72±3.65）mmHg（1 mmHg=0.133 kPa） vs（24.29±1.28）mmHg,P=0.000］,而MCT+MCC950组与MCT组相比显著降低［（34.19±1.94）mmHg vs（50.72±3.65）mmHg,P<0.01］。对照组右心肥厚指数为0.29±0.01,MCT组（0.61±0.04）明显较高,差异有统计学意义（P=0.000）,MCT+MCC950组与MCT组相比降低（0.48±0.03 vs 0.61±0.04,P<0.01）。与对照组比较,MCT组大鼠各级肺血管MT%均显著增高（P=0.000）,MCT+MCC950组与MCT组相比降低,且差异有统计学意义（P<0.01）。MCT组大鼠肺组织中NLRP3、IL-1β和相关分子的mRNA及蛋白表达较对照组均上调,而MCT+MCC950组肺组织中NLRP3、IL-1β和相关分子的表达量与MCT组相比均降低。结论 MCC950可能通过抑制NLRP3信号通路明显改善肺血管重塑,延缓肺动脉高压进程,具应用于肺动脉高压治疗的潜在价值。     

染料木黄酮通过上调血红素氧合酶-1表达减缓野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压

目的研究染料木黄酮对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响,探讨其减缓肺动脉高压的机制。方法 60只雄性SD大鼠随机分成对照组、野百合碱组、小剂量染料木黄酮治疗组和大剂量染料木黄酮治疗组。监测血流动力学变化,通过电子显微镜观察肺小动脉结构重塑,Western blotting检测肺组织HO-1的表达。结果染料木黄酮治疗组较野百合碱组大鼠平均肺动脉压降低(P<0.01),右心肥厚指数下调(P<0.01),大剂量组更显著(P<0.01)。染料木黄酮治疗组较野百合碱组大鼠肺组织HO-1表达上调(P<0.01),大剂量组更显著(P<0.01)。结论染料木黄酮能减缓野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压,可能与其上调大鼠肺组织HO-1表达有关。     

甘草素对肺动脉高压大鼠肺血管重塑及右心重构的影响

目的　探讨甘草素对肺动脉高压（PAH）大鼠肺血管重塑及右心重构的影响。方法　采用腹腔注射野百合 碱（MCT）诱导法建立PAH大鼠模型。MCT建模 2 周后分别给予 60 和 20 mg/kg甘草素干预 2 周,观察大鼠右心室收 缩压（RVSP）、右心室肥厚指数（RVHI）、大鼠肺动脉组织和右心室心肌组织HE染色结果,以及检测大鼠血浆环磷酸鸟苷 （cGMP）和肺动脉组织蛋白激酶G（PKG）水平。结果 60 和 20 mg/kg甘草素均能降低MCT诱导的PAH大鼠RVSP及 RVHI,增加cGMP和PKG蛋白表达（P<0.01 或 0.05）。结论　甘草素对PAH大鼠肺血管重塑及右心重构有一定的效果。