糖尿病大鼠胃粘膜细胞色素C表达的变化

目的:探讨糖尿病胃粘膜变化的相关机制.方法:SD大鼠随机分为两组:对照组和糖尿病模型组,造模成功10周后免疫组织化学检测胃粘膜细胞色素C(cytC)的表达情况.结果:①模型组大鼠于造模后出现糖尿病症状;平均体重明显低于对照组(P<0.05);平均血糖浓度显著高于对照组(P<0.05).②糖尿病大鼠胃粘膜细胞cytC蛋白阳性表达显著高于对照组(P<0.05).结论:糖尿病大鼠胃粘膜细胞高表达cytC蛋白,引起粘膜细胞死亡,特别是凋亡增加,导致胃粘膜功能异常,这可能是糖尿病胃病的重要发病机制之一.     

糖尿病大鼠胃黏膜细胞色素C异常表达及大黄素调控

目的：探讨糖尿病胃病的相关机制及大黄素干预。方法：SD大鼠随机分为对照组（正常组）、实验组（糖尿病组）与大黄素组,实验组应用腹腔一次性注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）建立糖尿病大鼠模型,造模成功10周后免疫组织化学检测胃黏膜腺细胞细胞色素C（cyt c）的表达情况。结果：①实验组和大黄素组大鼠于造模后均出现多尿、多饮、多食症状,体重减轻,平均体重明显低于对照组（P＜0.05）;平均血糖浓度显著高于对照组（P＜0.05）等糖尿病症状。但应用大黄素干预组大鼠的血糖浓度显著低于实验组。②实验组cyt c蛋白阳性表达的胃黏膜细胞数明显高于对照组（P＜0.05）;大黄素组cyt c蛋白阳性表达的胃黏膜细胞数明显少于实验组（P＜0.05）。结论：糖尿病引起大鼠胃黏膜细胞高表达cyt c蛋白,导致细胞死亡增加,参与糖尿病胃病的发生,而大黄素可降低胃黏膜细胞cyt c蛋白表达,从而缓解糖尿病胃病。     

细胞色素C在糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的作用

目的 探讨链脲佐菌素（STZ）制备的糖尿病心肌病（DCM）大鼠心肌细胞凋亡中的信号转导机制.方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组（CON,15只）,糖尿病心肌病组（DCM,25只）.CON组喂养标准饲料,DCM组给予高脂高糖饮食.7周后检测空腹血糖（FBG）、血浆胰岛素（INS）、胰岛素抵抗指数（ISI）,证实DCM组产生胰岛素抵抗后给予腹腔注射STZ 30mg/kg,72h后断尾取血测定FBG≥16.7mmol/L确定2型糖尿病模型成功,继续高脂高糖饮食8周后采用TUNEL法检测大鼠心肌细胞的凋亡;以比色法检测caspase8和caspase-3的相对活性;Western Blotting检测胞浆及线粒体内细胞色素C（Cyt C）漏出情况.结果 与CON组相比,6周的高脂高糖饮食后DCM组FBG无明显差异（P＞0.05）,INS及ISI均明显升高（p均＜0.01）;15周时,与CON组相比,心肌组织中凋亡指数明显升高（P＜0.01）;caspase-3活性显著升高（P＜0.01）,但caspase-8没有明显变化;糖尿病心肌病大鼠心肌细胞线粒体中Cyt C表达降低而胞浆中的表达增加.结论 糖尿病心肌病大鼠心肌中存在明显的细胞凋亡现象,细胞凋亡的机制可能与线粒体过度释放Cyt C激活caspase-3有关.     

抑郁模型大鼠杏仁核神经元细胞色素C和Bax的表达

目的观察细胞色素C（CytC）和凋亡相关蛋白Bax在抑郁模型大鼠杏仁核神经元的表达。方法将成年健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组和模型组,每组15只。采用慢性强迫游泳（4周）制备慢性强迫游泳应激抑郁模型。采用TUNEL和流式细胞术检测杏仁核神经元凋亡和凋亡率,Western Blot检测CytC和Bax蛋白的表达。结果模型组和对照组凋亡细胞阳性率分别为（24.08±4.30）%和（3.08±0.91）%,凋亡率分别为（17.14±2.71）%和（3.34±0.80）%,凋亡相关蛋白Bax以及CytC蛋白明显高于对照组。结论抑郁模型大鼠杏仁核存在明显的神经元凋亡,Bax上调和CytC释放可能是抑郁患者杏仁核神经元凋亡的机制之一。     

尼莫地平对脑缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡及细胞色素C表达的影响

目的：：探讨尼莫地平对缺血再灌注大鼠脑组织细胞凋亡和细胞色素 C 蛋白(cytochrome C, Cytc)表达的影响。方法：将大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组,每组27只。采用线栓法栓塞大脑中动脉3 h 制作大鼠脑缺血再灌注模型;分别于6 h、12 h、24 h 用 TUNEL 法检测大脑皮层细胞凋亡、Western blot 检测大脑皮层 Cytc 蛋白的表达。结果：TUNEL 法和 Western blot 结果显示：(1)尼莫地平组各时间点神经细胞凋亡较模型组明显减少(P <0.01);(2)模型组 Cytc 蛋白各时间点表达较假手术组有显著性差异(P <0.01、P <0.05);(3)尼莫地平组各时间点较模型组有显著性差异(P <0.01)。结论：尼莫地平对脑缺血再灌注损伤保护机制与抑制 Cytc 蛋白表达有关。     

整体低氧预处理对大鼠肺组织细胞色素C表达和细胞凋亡的影响

目的：探讨整体低氧预处理（HPC）对肺缺血-再灌注损伤（I/R）的保护效应。方法：重复低氧5次,建立大鼠HPC模型,用无创微血管夹夹闭左侧肺门45min,1h后松开再灌注180min建立肺I/R模型;设立假手术组、肺I/R组、HPC＋肺I/R组,HE染色观察各组肺组织病理学改变,称重计算各组肺湿重与干重比值,免疫组织化学染色方法检测肺组织内细胞色素C的表达,TUNEL法检测肺细胞凋亡。结果：与假手术组相比,肺I/R组肺组织病理学改变明显,肺组织湿/干重比、肺组织细胞色素C表达及凋亡指数显著增高（P〈0.05）;与肺I/R组比较,HPC＋肺I/R组肺组织病理学改变明显改善,其余各检测指标均降低（P〈0.05）。结论：大鼠整体低氧预处理可减少肺组织细胞线粒体释放细胞色素C,抑制细胞凋亡从而保护肺I/R损伤。     

甲基苯丙胺诱导神经元凋亡及细胞色素C的表达

目的　探讨甲基苯丙胺 (MA)所致神经元凋亡及细胞色素 C(Cyt C)的表达。方法　建立 MA不同给药时间的动物模型 ,实验组给予 MA,对照组给予等量生理盐水。采用 TU NEL法检测神经元凋亡 ,免疫组织化学方法检测 Cyt C的表达。结果　给予 MA后 ,大鼠各脑区有凋亡细胞形成 ,Cyt C有不同程度的表达。结论　 MA可导致神经元的凋亡 ,在凋亡过程中可能有相关因子 Cyt C的参与。     

芸香诱导K562细胞凋亡时细胞色素C表达变化

【目的】研究芸香诱导白血病K562细胞凋亡过程中细胞色素C的表达。【方法】体外培养K562细胞,Hoechst33342/PI双荧光染色后,荧光显微镜下观察细胞核形态,分离细胞线粒体和胞浆,经SDS-PAGE电泳分离蛋白,Western Bloting检测线粒体、细胞浆细胞色素C表达。【结果】芸香浓度为2×10-5、4×10-5、8×10-5mol/L时,细胞生长受到显著抑制,并呈剂量依赖性;Hoechest33342/PI双荧光染色可观察到明显核固缩、凝集等细胞凋亡表现,Western Bloting检测4×10-5mol/L药物处理细胞后线粒体细胞色素C表达水平下调,细胞浆出现明显细胞色素C蛋白条带。【结论】芸香诱导白血病细胞发生凋亡,可能与线粒体途径有关。     

利多卡因对大鼠缺血脑损伤后海马 CA1区神经元凋亡及细胞色素C释放的影响

目的:观察利多卡因对大鼠缺血脑损伤后海马CA1区神经元凋亡的影响.方法:雄性SD大鼠,随机分成假手术组、模型组(制作缺血脑损伤模型)、利多卡因治疗组,每组10只.手术后24 h分离右侧海马组织.TUNEL法检测3组大鼠海马CA1区细胞凋亡,免疫组化染色测定细胞色素C(Cyt C)蛋白和Bax蛋白的表达.结果:①与对照组相比模型组凋亡细胞数明显增加,与模型组相比治疗组凋亡细胞数明显降低(P均＜0.001).②与对照组相比,模型组Cyt C阳性细胞数明显减少,Bax蛋白阳性细胞数明显增多(P＜0.001);与模型组相比,治疗组Cyt C阳性细胞数明显增加,Bax蛋白阳性细胞数明显下降(P＜0.001).结论:利多卡因可减少脑缺血后海马CA1区神经元Cyt C的释放并降低Bax蛋白的表达,对海马CA1区神经元有保护作用.     

糖尿病大鼠肾脏MCP-1 mRNA的表达及意义

目的 :研究单核细胞趋化蛋白 1(monocytechemoattractantprotein 1,MCP 1)在糖尿病大鼠肾脏的表达。方法 :Wistar大鼠随机分 3组 :正常对照组 (NC组 ) ,糖尿病未干预组 (DM组 ) ,糖尿病大鼠胰岛素干预组 (DI组 )。以链脲佐菌素 (streptozotocin ,STZ)制备糖尿病大鼠模型 ,大鼠饲养 2 ,4周分别取出肾脏检测MCP 1mRNA的表达。收集2 4h尿测定尿白蛋白排泄率 (urinaryalbuminexcretionrate ,UAER)及肌酐 ,并心脏采血检测血肌酐、尿素氮。mRNA的表达采用RT PCR ,以GAPDH作内对照。结果 :2 ,4周肾组织中MCP 1mRNA的表达DM组高于NC组 (P <0 .0 1) ,DI组低于DM组 (P <0 .0 5 )。 2周时DM组、DI组UAER较NC组有升高趋势 ,但无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;4周时DM组、DI组UAER较NC组显著增加 (P <0 .0 1) ,DI组UAER较DM组显著降低 (P <0 .0 1) ,其变化趋势与MCP 1mRNA的表达基本相似。结论 :在糖尿病大鼠肾组织MCP 1mRNA表达明显增加 ;经胰岛素治疗后肾组织MCP 1mRNA的表达降低 ,肾功能改善     

黄连素对2型糖尿病大鼠脂联素基因表达的影响

目的观察黄连素对高脂膳食加小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病(2-DM)大鼠胰岛素抵抗指数及肾周脂肪组织脂联素基因mRNA表达的影响。方法选用高脂饲料加小剂量STZ建立2-DM大鼠模型共40只,将2-DM大鼠随机分为模型组(水)和黄连素高、中、低剂量组(0.20、0.10、0.05g/kg),每组10只,另选10只大鼠为正常组,各组灌胃8周后,空腹取材,采用逆转录聚合酶链式反应检测肾周白色脂肪组织脂联素基因mRNA水平,放射免疫法测定空腹胰岛素并计算胰岛素抵抗指数(IRI)。结果正常对照组大鼠与2型糖尿病模型组大鼠脂联素基因表达、IRI间比较差异有统计学意义(P<0.01);模型组与黄连素高、中剂量组大鼠脂联素基因表达、IRI间差异有统计学意义(P<0.01)。结论黄连素可增加2-DM大鼠脂联素基因mRNA的表达,降低IRI。     

健胰方通过调控胰高血糖素样肽-1表达改善糖尿病大鼠胰岛细胞功能的研究

【目的】从胰高血糖素样肽-1(GLP-1)合成、分泌和灭活3个环节探索健胰方影响GLP-1改善胰岛细胞功能的可能机制。【方法】采用高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)法诱导糖尿病模型大鼠,随机分为模型组、复方组与正常组,干预4周。快速血糖仪测定血糖,Luminex液相蛋白芯片技术测定血浆GLP-1和胰岛素(insulin)水平,实时荧光定量PCR检测胰腺组织胰岛—十二指肠同源盒基因-1(PDX-1)m RNA表达,免疫组织化学法检测回肠L细胞合成GLP-1,酶联免疫法检测Ⅳ型二肽基肽酶(DPP-Ⅳ)。【结果】健胰方可显著降低糖尿病模型大鼠的空腹及糖负荷后血糖水平(P0.05),促进糖尿病大鼠血中胰岛素的分泌(P0.05),提高胰腺PDX-1 m RNA表达(P0.05),提高血浆GLP-1水平与回肠组织GLP-1阳性反应面积及累积光密度值(P0.05);但血清DPP-Ⅳ各组间比较无显著性差异(P0.05)。【结论】健胰方可能是通过调控GLP-1的合成与分泌,从而促进PDX-1基因表达和胰岛素分泌以降低糖尿病大鼠血糖水平的。     

丝胶对2 型糖尿病大鼠海马HO-1 表达的影响

 目的探讨丝胶对2 型糖尿病大鼠海马血红素加氧酶1（HO-1）表达的影响。方法30 只雄性SD 大鼠随机分为正常对
照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组,每组10 只。糖尿病模型组和丝胶治疗组大鼠均采用链脲佐菌素连续腹腔注射建立2 型糖尿
病大鼠模型,以血糖逸16.7 mmol/L 作为成模标准。待模型成功建立后,模型组大鼠不再作任何处理,丝胶治疗组大鼠给予丝胶
（2.4 g·kg^-1·d^-1）灌胃35 d。HE 染色观察海马的形态变化;分别采用Western blot 和RT-PCR 法检测海马HO-1 蛋白及mRNA的
表达。结果糖尿病模型组大鼠海马CA1 区神经细胞出现明显的病理变化,HO-1 蛋白及mRNA的表达明显高于正常对照组
大鼠（ P<0.01）。丝胶治疗组大鼠海马CA1 区神经细胞的病理变化明显减轻,HO-1 蛋白及mRNA的表达明显低于模型组大鼠
（ P<0.01, P<0.05）。结论丝胶可通过下调海马HO-1 的表达,减轻糖尿病时HO-1 高表达对海马神经细胞的毒性损害,发挥
对糖尿病神经系统损伤的保护作用。     

辛伐他汀对链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠血糖的影响

[目的]探讨辛伐他汀对链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病大鼠血糖的影响.[方法]选取100只Wistar雄性大鼠适应性喂养1周后随机分为4组,每组各25只.A组(正常对照组)普通饲料喂养4周后腹腔注射柠檬酸钠缓冲液;B组(糖尿病模型组)、C组(他汀早期诱导组)和D组(他汀晚期诱导组)高脂饲料喂养4周后一次腹腔注射STZ 35 mg/kg溶液建立2型糖尿病大鼠模型,C组在高脂饲料喂养的同时给予辛伐他汀10 mg/kg·d-1的剂量灌胃,D组在糖尿病模型建立后给予相同剂量辛伐他汀灌胃,B组在糖尿病模型建立后给予等量蒸馏水,成模后均连续观察4周.测定各组0、4和8周大鼠体质量、空腹血糖和血脂水平,并于第8周末行OGTT试验.[结果]在第4周末和第8周末,2型糖尿病大鼠与正常对照组大鼠相比,空腹血糖(FPG)水平均显著升高(P＜0.05)、血清胰岛素(Ins)水平显著降低(P＜0.05),差异有统计学意义;与糖尿病大鼠相比,第4周末他汀晚期诱导组轻微升高FPG和降低Ins (P＞ 0.05)、他汀早期诱导组显著升高FPG和降低Ins (P＜0.001)以及更容易诱导糖尿病大鼠模型的建立;第8周末他汀晚期诱导组FPG显著高于糖尿病模型组(P＜0.05).[结论]对高脂饲料喂养的大鼠进行辛伐他汀(10 mg/kg· d-1)早期诱导更容易引起胰岛β细胞功能的减退从而升高FPG和诱发糖尿病模型的建立;在糖尿病模型建立之后,对糖尿病大鼠进行他汀治疗可以引起FPG升高.     

西格列汀对老年2型糖尿病轻度认知障碍患者血糖漂移和认知功能的影响研究

目的　研究西格列汀对老年2型糖尿病（T2DM）轻度认知障碍（MCI）患者血糖漂移及认知功能的影响。方法　选择老年T2DM轻度认知障碍患者78例,随机分为研究组39例（西格列汀+二甲双胍组）和对照组39例（格列齐特+二甲双胍组）。两组患者联合用药前及用药24周后测量体质指数（BMI）、空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖（2 hPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）。所有患者治疗前后均接受72 h动态血糖监测（CGMS）,根据监测结果计算日内平均血糖漂移幅度（MAGE）、日间血糖漂移幅度（MODD）、血糖水平标准差（SDBG）、平均餐后血糖漂移幅度（MPPGE）,治疗前后用蒙特利尔认知评估量表（MoCA）评估认知功能。观察治疗前及药物治疗6个月后血糖、血糖漂移、认知功能的变化。结果　治疗前,两组BMI、FBG、2 hPG、HbA1c、MAGE、MODD、SDBG、MPPGE、MoCA评分差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后,研究组MAGE、MODD、SDBG、MPPGE低于对照组,MoCA评分高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组BMI、FBG、2 hPG、HbA1c差异无统计学意义（P>0.05）。结论　西格列汀可能通过降低老年T2DM轻度认知障碍患者的血糖漂移进而改善其认知功能。     

糖尿病大鼠肾脏病变及其SnoN蛋白表达的变化

目的：复制2型糖尿病动物模型,并观察其肾脏病变及snoN蛋白表达的变化。方法：SD大鼠随机分为正常对照组（NC）、高脂高糖组（HG）。高脂、高糖饮食12周后又随机分为高脂高糖对照组（HC）、糖尿病组（DM）。采用高脂、高糖饮食12周加小剂量链脲佐菌素注射（30mg／kg）的方法复制2型糖尿病动物模型,成模大鼠随机分别于糖尿病8周（DM8）、12周（DM12）和16周（DM16）处死;Western印迹法检测肾皮质SnoN蛋白的水平;牛物化学方法测血糖、血清胰岛素水平、甘油三酯、总胆固醇、血肌酐及24h尿蛋白;光镜检查肾组织形态学改变。结果：DM组大鼠出现高血糖、高血脂、肾功能和肾组织形态学改变;HG组血清胰岛素水平、甘油三酯和总胆固醇明显升高,血糖与NC组相比差异无统计学意义;Western印迹检测发现DM8组肾组织中SnoN蛋白的表达明显低于NC组,且随病程进展逐渐减少,至DM16时减至NC组的64．20％。结论：成功复制了2型糖尿病动物模型;SnoN蛋白的表达变化可能参与了2型糖尿病肾脏病变的发生、发展过程。     

石菖蒲水煎剂对癫痫大鼠脑部神经发生及认知功能的影响

目的：探讨石菖蒲水煎剂对癫痫大鼠脑部神经发生的影响和对癫痫认知障碍的治疗作用。方法：SD大鼠30只,随机分为正常对照组、癫痫模型组和石菖蒲灌胃组,每组10只。癫痫模型组和石菖蒲灌胃组采用印防己碱（PTX）建立癫痫动物模型,采用5一溴脱氧尿苷嘧啶（-brolTlO-2-deoxyuridine,BrdU）腹腔注射标记内源性神经干细胞（NSC）。正常对照组、癫痫模型组予生理盐水灌胃,石菖蒲灌胃组予石菖蒲水煎剂10mg／（kg·d）灌胃,共30天。治疗前后进行鼠癫痫发作Racine评级、皮层脑电图检测、脑内BrdU阳性细胞免疫组化检测和Morris水迷宫检测。结果：Morris水迷宫检测显示,癫痫模型组逃避潜伏时间长于石菖蒲灌胃组和正常对照组（P〈0．05）;癫痫模型组目标象限内的游泳时间占整个游泳时间的百分率明显低于石菖蒲灌胃组和正常对照组（P〈0．05）。石菖蒲灌胃组大鼠Ⅲ～Ⅴ级癫痫发作频率、皮层脑电图频率、波幅降低、Brdu阳性细胞数升高,与癫痫模型组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：大鼠发生癫痫后,启动自我保护机制,石菖蒲干预后明显增强了保护机制。     

糖尿病动物模型P物质含量的变化及其意义

目的：研究P物质在糖尿病大鼠血浆和肠道组织中的变化及意义。方法：用放射免疫法分别检测糖尿病大鼠（10只）和正常大鼠（10只）血浆和十二指肠、远端结肠组织中P物质的含量。结果：糖尿病大鼠血浆P物质含量明显低于正常对照组（P＜0．05）。十二指肠、远端结肠中含量明显高于正常对照组（P＜0．05）。结论：肠道组织中P物质的变化在糖尿病胃肠功能障碍中起一定作用。     

BMP-7在糖尿病肾病发生发展中表达的变化

目的: 探讨BMP-7在糖尿病(DM)肾病发病机制中的作用.方法: 以免疫组织化学、Western blot及荧光实时定量PCR(RT-PCR)的方法动态观察链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病肾病发生过程中大鼠肾脏BMP-7蛋白及mRNA表达.结果: 在正常大鼠及DM大鼠肾小管均有BMP-7蛋白表达,以胞浆表达为主,DM大鼠肾小管和集合管BMP-7蛋白表达较正常对照组明显增多(P＜0.05),BMP-7mRNA的表达呈现先增加后降低的趋势.结论: 作为TGF-β超家族的一员,BMP-7信号通路在糖尿病肾病发生早期可能起到重要的反馈性抑制作用.