银杏叶提取物对肝纤维化大鼠TGF-β1表达的影响

目的：观察银杏叶提取物（GbE）的抗大鼠肝纤维化作用及其作用机理。方法：采用CCl4诱导大鼠肝纤维化，同时分别以3个剂量的GbE进行干预，并设复方鳖甲软肝片为对照组，6周后取肝组织进行HE及Masson染色，观察肝组织炎症活动度及肝纤维化程度，采用免疫组化法测定肝组织α-SMA、TGF-β1蛋白表达，采用RT-PCR检测TGF-β1 mRNA的表达。结果：GbE各剂量组及复方鳖甲软肝片组肝组织炎症活动度及肝纤维化程度较模型组明显改善，α-SMA蛋白表达及TGF-β1 mRNA和蛋白表达也较模型组显著下降。结论：GbE可能通过抑制肝星状细胞的激活和转化，降低α-SMA蛋白表达及TGF-β1的转录及表达，抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化的发生及发展。     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠肝脏TGF-β1及其受体表达的影响

目的:观察银杏叶提取物(GbE)对肝组织TGF-β1及其受体表达的影响。方法:采用CCl4诱导大鼠肝纤维化,同时分别以200、100、50mg/kg.d的GbE进行干预,6周后取肝组织,采用免疫组化法测定肝组织TGF-β1及其受体TβRⅠ、Ⅱ、Ⅲ蛋白的表达。结果:模型大鼠肝组织TGF-β1及其受体TβRⅠ、Ⅱ、Ⅲ蛋白表达较正常组明显增高,GbE各剂量组肝组织TGF-β1及其受体表达也较模型组显著下降。结论:GbE可能通过降低TGF-β1及其受体的表达,抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化的发生及发展。     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠肝脏低氧诱导因子1α及血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察银杏叶提取物(GbE)对肝纤维大鼠肝组织低氧诱导因子1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨GbE抗肝纤维的作用机制。方法:采用40%的CCl4皮下注射(3mL.kg-1.d-1,2次/周,首剂加倍),连续6周诱导大鼠肝纤维化模型,同时分别以高、中、低剂量(200、100、50mg.kg-1.d-1)GbE灌胃干预6周,常规HE和Masson染色观察大鼠肝组织炎症和纤维化程度,RT-PCR及免疫组化法检测肝组织HIF-1α和VEGF基因的mRNA及蛋白表达。结果:模型组大鼠肝组织炎症和纤维化程度计分较正常组明显增高(P0.01),肝组织HIF-1α和VEGF基因的mRNA及蛋白的表达较正常组明显增强(P0.05,P0.01),HIF-1α蛋白表达水平与肝纤维化程度、VEGF mRNA表达水平呈明显的正相关;应用高、中、低剂量GbE干预后,大鼠肝组织炎症和纤维化程度显著减轻(P0.05,P0.01),肝组织HIF-1α和VEGF基因的mRNA及蛋白表达明显下降(P0.05)。结论:GbE下调肝纤维化大鼠肝组织HIF-1α及其下游分子VEGF的转录和表达可能是其抗肝纤维化作用的机制之一。     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠肝脏血管紧张素Ⅱ及其受体表达的影响

目的:研究银杏叶提取物(Gb E)对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其受体表达的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法:建立CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型,同时以50、100、200mg.Kg~(-1).d~(-1)的Gb E干预6周;采用Masson胶原染色光镜观察肝纤维化程度,碱水解法检测肝脏Hyp含量,放免法和ELISA法分别测定血浆Ang Ⅱ和ACE含量,荧光定量PCR技术检测肝组织AngⅡ及其受体AT1的m RNA表达,Wester blot检测大鼠肝组织中AT1蛋白表达。结果:肝纤维化模型组大鼠肝脏Hyp含量及肝纤维化程度较正常组明显增加(P0.01);血浆Ang Ⅱ、ACE含量及肝组织AngⅡm RNA、AT1m RNA和蛋白表达水平均较正常组明显增高(P0.01);不同剂量Gb E组大鼠肝脏Hyp含量及肝纤维化程度,血浆Ang Ⅱ、ACE含量,肝组织AngⅡm RNA、AT1m RNA和蛋白表达水平均较模型组明显降低(P0.05,P0.01)。结论:CCl4诱导的肝纤维化肾素-血管紧张素系统被激活,Gb E能通过抑制肝组织AngⅡ及其受体的过表达防止肝纤维化的进展。     

银杏叶提取物抗肝纤维化作用的研究

目的探讨银杏叶提取物(GbE)对实验性大鼠肝纤维化的防治作用.方法采用CCl4诱导大鼠肝纤维化,同时分别以200、100、50mg/(kg·d)的GbE进行干预,并设复方鳖甲软肝片为阳性对照组,6周后取血和肝组织,全自动生化仪检测血清ALT、AST、ALP含量,放免法检测血清HA、LN水平,HE及Masson染色观察肝组织炎症活动度及肝纤维化程度.结果GbE高、中、低剂量组及复方鳖甲软肝片组肝纤维化大鼠血清ALT、AST、ALP及HA、LN的含量能明显降低,肝组织炎症活动度及肝纤维化程度改善.结论GbE有明显的抗肝细胞损伤、促进肝功能恢复的作用,对大鼠实验性肝纤维化具有较好的防治作用.     

银杏叶提取物在实验性大鼠肝纤维化中对RAS的影响

目的:研究银杏叶提取物抗肝纤维化作用及对CCl4肝纤维化大鼠RAS的影响。方法:采用CCL4造模的同时,分别给以银杏叶提取物及易善复混悬液灌服,共6周,光镜下观察病理改变;检测血清ALT、AST、ALP水平;HA、LN和血浆AngⅡ的水平;检测大鼠肝组织中α-SMA蛋白和AT1RmRNA表达。结果:银杏叶提取物可促使大鼠肝组织的炎症和纤维化程度减轻;使肝组织中血浆AngⅡ水平降低(P<0.01);AT1RmRNA、α-SMA蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论:银杏叶提取物具有一定改善肝功能、抗肝纤维化的的作用。其抗肝纤维化作用的机制之一可能与其降低肝纤维化大鼠血浆AngⅡ水平,抑制肝组织AT1R的基因表达有关。     

银杏叶提取物抗四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的实验研究

目的:探讨银杏叶提取物(GBE)抑制NF-kappa Bp65的表达在四氧化碳(CCl4)诱导Wistar大鼠肝纤维化中肝细胞损伤的意义。方法:采用CCL4诱导的大鼠肝纤维化模型。生化检测各组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天氨酸氨基转移酶(AST)。采用免疫组化S-P方法检测肝细胞NF-kappa Bp65和ICAM-1表达并分析与肝细胞损害的关系。结果:治疗组大鼠的血清肝功能指标和肝纤维化病理分级与模型组比较都有显著的改善(P<0.05);治疗组大鼠肝组织细胞因子水平与模型组比较也显著降低(P<0.05)结论:银杏叶提取物可减轻肝组织的损伤及其纤维化程度,通过抑制NF-kappa Bp65的表达,进一步减弱了ICAM-1的表达,可能是其抗肝纤维化作用的靶点之一。     

红花总黄素对肝纤维化大鼠肝功能和相关血清指标的影响

目的：观察红花总黄素对肝纤维化大鼠肝功能和相关血清指标的影响,探讨红花总黄素抗肝纤维化作用。方法：将大鼠随机分成4组：每组10只：对照组,模型组,红花总黄素低、高剂量组。除正常组外,其余各组皮下注射CCl4制备肝纤维化大鼠模型,低、高剂量红花总黄素组灌胃相应剂量红花总黄素水溶液。检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（Bil）、总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）和Ⅳ型胶原（CⅣ）含量。结果：与正常组比较,模型组大鼠血清GPT、GOT、Bil、HA、LN、IV-C、PCⅢ水平明显升高（P〈0.01）,TP、ALB水平明显降低（P〈0.05）;与模型组比较,红花总黄素组大鼠血清Bil、GPT、GOT、HA、LN、IV-C、PCⅢ水平明显降低（P〈0.05或P〈0.01）,TP、ALB水平明显升高（P〈0.05）。结论：红花总黄素能明显改善CCL4致肝纤维化大鼠肝功能和相关血清指标,具有抗肝纤维化作用。     

银杏叶提取物对大鼠纤维化肝脏NF-κB活性的抑制作用

目的探讨银杏叶提取物对大鼠纤维化肝脏核因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法采用四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化模型。设立银杏叶提取物治疗组,秋水仙碱治疗对照组,模型组及空白组,分别灌胃给药。实验末期采用自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST),放射同位素检测血清透明质酸酶(HA)。免疫组化SP法检测NF-κBp65蛋白表达的改变,光镜下观察肝组织病理学变化。结果银杏叶提取物可以显著降低CCl4诱导的肝纤维化大鼠血清ALT、AST水平;银杏叶提取物组HA含量大幅度下降;模型组的肝脏损伤及其纤维化分级均明显高于正常组,银杏叶提取物的肝损伤及其纤维化分级均轻于模型组;银杏叶提取物显著抑制纤维化肝脏组织NF-κBp65蛋白的活性。结论银杏叶提取物可减轻肝组织的损伤及其纤维化程度,抑制NF-κB的表达可能是其抗肝纤维化作用的靶点之一。     

柴胡桂枝汤对肝纤维化大鼠TNF-α、CTGF表达的影响

目的：观察柴胡桂枝汤对肝纤维化大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）和结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法：用CCl4复合法制备实验动物模型;用免疫组化方法检测肝纤维化大鼠肝脏中TNF-α和CTGF的表达情况。结果：中药高浓度组CTGF的表达明显低于模型组和西药组,有极显著性差异（P〈0.01）;中药高浓度组TNF-α的表达水平明显低于模型组、中药低浓度组和西药组,有极显著性差异（P〈0.01）。结论：柴胡桂枝汤可以降低肝纤维化大鼠的TNF-α和CTGF的表达水平。抑制HSC被激活和ECM合成而发挥抗肝纤维化作用。     

川芎嗪对肝纤维化大鼠Fas和FasL表达的影响

目的观察川芎嗪对肝纤维化大鼠Fas和FasL表达的影响。方法将36只SD大鼠随机分为正常组、模型组、川芎嗪组，采用CCl4制备肝纤维化模型，用免疫组化法观察川芎嗪对Fas和FasL表达的影响。结果川芎嗪可降低肝纤维化大鼠Fas和FasL的表达，川芎嗪组与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论川芎嗪可有效防治大鼠肝纤维化，其作用机制可能是通过下调Fas、FasL蛋白的表达，抑制肝细胞的凋亡实现的。     

复方六月青对肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ型胶原合成的抑制作用

目的:研究复方六月青(CLYQ)对四氯化碳(CCl4)致肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ型胶原(Col I)合成的抑制作用。方法:SD大鼠sc CCl4建立肝纤维化模型,随机分为5组:模型对照组、秋水仙碱组、CLYQ高剂量组、中剂量组、低剂量组,并设正常SD大鼠为空白对照组。模型组和空白对照组ig生理盐水,其他组ig相应的药物,连续4周。采用实时荧光定量PCR法检测各组肝组织Col I mRNA表达情况,采用免疫组织化学法检测各组肝组织Col I蛋白表达情况。结果:与模型对照组比,CLYQ各剂量组大鼠肝组织Col I mRNA的表达均下调(P0.01),且表现一定的剂量依赖性;CLYQ各剂量组大鼠肝组织Col I蛋白阳性表达面积和强度显著减少和减弱(P0.01或P0.05),且呈明显的剂量依赖性。结论:CLYQ可下调肝纤维化大鼠肝组织Col I mRNA表达及其蛋白质合成以抑制细胞外基质的沉积,从而发挥其抗肝纤维化的作用。     

两种不同治法对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1及其mRNA表达的影响

目的：研究两种不同中药复方对CCl4致肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子-β1及mRNA表达的影响,探讨不同中医治法防治肝纤维化的作用机制。方法：皮下注射法制备CCl4大鼠肝纤维化模型,给予两种不同中药复方煎剂灌胃,观察大鼠肝组织匀浆TGF-β1浓度及TGF-β1mRNA表达。结果：与空白对照组比较,模型组大鼠TGF-β1的mRNA和蛋白水平均明显异常表达;治疗1组、2组均可降低肝组织匀浆TGF-β1含量及TGF-β1mRNA表达水平,与模型组比较有显著性差异（P〈0.01或P〈0.05）,尤以滋肾清肝饮组疗效更加明显。结论：滋肾清肝化瘀法与滋肾化瘀法皆可有效防治CCl4大鼠肝纤维化,配伍清热利湿解毒中药后作用可能更加明显。     

柔肝化纤颗粒对肝纤维化大鼠ACT A表达的影响

目的 研究柔肝化纤颗粒抗肝纤维化的作用及其机制.方法 采用四氯化碳(CCl4)复合法大鼠肝纤维化模型,以秋水仙碱及大黄(庶)虫丸为对照,观察治疗前后血清卵泡抑素(FS)、肝组织病理学、激活素A(ACT A)表达及肝细胞凋亡的影响.结果 与病理模型组大鼠相比,柔肝化纤颗粒治疗组纤维化分级、ACT A的表达、肝细胞的凋亡低于模型组;各治疗组血清FS水平均显著高于模型组.结论 柔肝化纤颗粒对肝纤维化大鼠具有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与调控ACT A和FS表达有关,从而减少肝细胞的凋亡,促进肝细胞再生.     

黄芪多糖对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的保护作用

目的：观察黄芪多糖（APS）对四氯化碳（CCl4）致大鼠肝纤维化的治疗作用。方法：采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,造模成功后,取大鼠血清和肝组织进行检测。测定血清肝纤维化四项、肝脏组织中羟脯氨酸（HYP）含量;HE染色比较炎症及肝纤维化程度;免疫组织化学法分析肝组织中I型胶原（Col-I）、平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)表达量。结果：与模型组相比,APS中、高剂量组的肝纤四项水平、炎症及肝纤维化程度明显降低（P<0.05）;APS中、高剂量组肝脏组织中HYP含量显著降低（P<0.01）;APS中剂量组Col-I、α-SMA表达显著减少（P<0.01）;APS高剂量组Col-I、α-SMA表达明显减少（P<0.05）。结论：APS对大鼠肝纤维化具有一定的防治作用,作用机制可能与其抑制Col-I、α-SMA表达有关。     

五味子藤茎提取物抗大鼠肝纤维化作用及机制探讨

目的:观察五味子藤茎提取物抗四氯化碳(CCl4)及乙醇所致肝纤维化的作用及机制。方法:50只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、五味子藤茎提取物高、中、低剂量组,采用ip CCl4,并饮用乙醇、饲用高脂饲料等复合因素制造肝纤维化模型,造模后,给药组分别ig高、中、低不同剂量(5.0,2.5,1.25 g·kg-1)五味子藤茎提取物,正常组和模型组灌服等量的生理盐水。末次给药后,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT),天冬氨酸转氨酶(AST)活性,层粘蛋白(LN),透明质酸(HA),Ⅲ型前胶原(PCⅢ)水平,同时取大鼠肝组织,分别用于苏木素-伊红(HE)染色观察病理变化,蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测转化生长因子-β_1(TGF-β_1),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清AST,ALT活性及HA,LN,PCⅢ水平均显著升高,肝组织TGF-β_1,α-SMA蛋白表达水平显著增高(P0.01);与模型组比较,五味子藤茎提取物能显著降低肝纤维化大鼠血清ALT,AST活性及HA,LN,PCⅢ水平,病理组织学检查结果显示,五味子藤茎提取物各剂量组大鼠肝组织结构明显改善,肝纤维化程度减轻,五味子藤茎提取物各剂量组均可显著降低肝组织TGF-β_1,α-SMA蛋白表达水平(P0.01)。结论:五味子藤茎提取物对CCl4及乙醇所致肝损伤有明显保护作用,其机制可能与降低肝组织TGF-β_1,α-SMA蛋白表达、抑制肝星状细胞活化有关。     

黄芪后处理对大鼠肝纤维化中的影响及TGF-β1/Smad2、p38MAPK 作用

目的：研究黄芪对CCl4 诱导的大鼠肝纤维化肝组织中TGF-β1、Smad2 和p38MAPK 表达的影响,探讨TGF-茁信号通路在黄芪后处理中可能的抗纤维化机制。方法：60 只Wistar 大鼠被随机分成对照组、模型组、黄芪后处理组及鳖甲软肝片组,其中黄芪后处理组又分为小剂量组、常规剂量组和大剂量组,大鼠背部皮下注射CCl4 构建肝纤维化模型,分别用HE 和VG 染色法染色,肝纤维化程度直接在光学显微镜下观测。同时采用SABC 免疫组化方法检测各实验组TGF-β1、Smad2 和p38MAPK 的表达情况。结果：与对照组比较,模型组TGF-β1、Smad2 表达明显增强（P < 0.05）,而p38MAPK 表达显著下降（P <0.05）。与模型组比较,黄芪后处理各组中大鼠肝组织中TGF-β1 表达均有减弱（P < 0.05）,且随着黄芪剂量的增加而减少;随着黄芪剂量增加逐步下调Smad2 的表达（P < 0.05）、上调p38MAPK 的表达（P <0.05）。此外,黄芪组大鼠肝脏病理变化显著改善。结论：黄芪后处理明显影响大鼠肝组织TGF-β1 信号表达,且对CCl4 诱导的大鼠肝纤维化的作用呈剂量依赖性增强,其可能的机制为负性调节TGF-β1,减少Smad2 及增强p38MAPK 的表达。     

茵陈蒿汤对酒精性肝纤维化模型大鼠内质网应激介导肝细胞凋亡相关分子的影响

目的观察茵陈蒿汤对酒精性肝纤维化大鼠肝组织内质网应激凋亡通路的影响,探讨茵陈蒿汤抗酒精性肝纤维化的作用机制。方法将40只SD大鼠采用白酒-玉米油-吡唑混合液灌胃联合小剂量CCl_4腹腔注射复制大鼠酒精性肝纤维化模型,8周后随机分为对照组、模型组和茵陈蒿汤低剂量组、茵陈蒿汤高剂量组,每组10只。模型组以白酒混合物低剂量(6 mL/kg)持续灌胃,茵陈蒿汤低剂量组、高剂量组分别给予茵陈蒿汤1.75 g/kg(5 mL/kg)、3.5 g/kg(10 mL/kg),对照组灌胃给予等量的0.9%NaCl溶液。4周后检测大鼠肝指数及血清AST、ALT水平;采用流式细胞学技术检测各组大鼠肝细胞悬液凋亡率的比例;采用Western blot法检测各组大鼠肝脏GRP78、Cleaved-Caspase-12和Cleaved-Caspase-3蛋白表达情况。结果①与对照组比较,模型组大鼠肝指数水平显著升高(P0.05);与模型组比较,茵陈蒿汤各剂量组大鼠肝指数水平显著降低(P0.05);与茵陈蒿汤低剂量组比较,茵陈蒿汤高剂量组大鼠肝指数水平显著降低(P0.05)。②与对照组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST水平显著升高(P0.05);与模型组比较,茵陈蒿汤各剂量组ALT、AST水平显著降低(P0.05);与茵陈蒿汤低剂量组比较,茵陈蒿汤高剂量组大鼠血清中ALT、AST水平显著降低(P0.05)。③与对照组比较,模型组大鼠肝细胞晚期凋亡率及总凋亡率显著升高(P0.05);与模型组比较,茵陈蒿汤各剂量组晚期凋亡率及总凋亡率显著降低(P0.05);与茵陈蒿汤低剂量组比较,茵陈蒿汤高剂量组大鼠肝细胞早期、晚期及总凋亡率均明显降低(P0.05)。④与对照组比较,模型组大鼠肝组织Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平显著上调(P0.05);与模型组比较,茵陈蒿汤各剂量组大鼠肝组织GRP78、Cleaved-Caspase-12和Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平显著下调(P0.05);与茵陈蒿汤低剂量组比较,茵陈蒿汤高剂量组大鼠肝组织GRP78和Cleaved-Caspase-12蛋白表达水平显著下调(P0.05)。结论茵陈蒿汤可明显改善酒精性肝纤维化大鼠的肝组织损伤,抑制内质网应激介导的肝细胞凋亡。     

强肝软坚丸对肝纤维化大鼠肝组织HGF表达的影响

目的：观察强肝软坚丸对肝纤维化模型大鼠肝组织肝细胞生长因子（HGF）表达的影响,分析强肝软坚丸抗肝纤维化的治疗作用并探讨其作用机制。方法：雄性Wistar大鼠120只,随机分为6组：正常对照组、模型组、秋水仙碱预防组、秋水仙碱治疗组、强肝软坚预防组、强肝软坚治疗纽,采用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型。各组于10周后随机取10只大鼠断头处死,取肝组织,免疫组化染色,用图像分析法检测HGF。结果：强肝软坚丸有明显的抑制肝纤维化模型大鼠肝组织HGF的表达的作用,且抑制作用要优于秋水仙碱（P〈0．05）。结论：强肝软坚丸能够抑制肝脏纤维化病理改变,增加HGF的表达,具有明显的抗肝纤维化作用。     

复方鳖甲软肝片对肝纤维化大鼠肝组织环氧合酶-2表达影响的实验研究

目的：观察复方鳖甲软肝片对肝纤维大鼠肝组织环氧合酶-2（COX-2）表达的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法：采用40%的CCl4皮下注射6周建立大鼠肝纤维化模型,同时以1g/kg·d-1的复方鳖甲软肝片灌胃干预6周,原位杂交检测肝组织COX-2mRNA表达,免疫组化检测肝组织α-SMA、COX-2蛋白表达,放免法检测肝组织匀浆血栓烷B2（TXB2）和6-酮-前列腺素F1α（6-KetoPGF1α）含量。结果：模型组大鼠肝组织α-SMA蛋白、COX-2mRNA和蛋白表达均较正常组明显增强,肝组织TXB2含量及TXB2/6-Keto-PGF1α比值也较正常组显著增高,COX-2与α-SMA表达呈明显正相关;应用复方鳖甲软肝片干预后,大鼠α-SMA蛋白、COX-2mRNA和蛋白表达均明显减少,肝组织TXB2含量及TXB2/6-Keto-PGF1α比值显著下降。结论：COX-2参与CCl4诱导肝纤维化的发病,复方鳖甲软肝片下调肝纤维化大鼠肝组织COX-2表达可是其抗肝纤维化的作用机制之一。