应用多重聚合酶链反应检测结核杆菌

作者合成两对引物，建立结核杆菌ＤＮＡ多重ＰｃＲ法，用以检测分枝杆菌标准菌株，仅人型和牛型结核杆菌呈阳性，灵敏度≥７ｃｆｕ结核杆菌呈阳性。４０例肺结核患者痰，经多重ＰＣＲ法检测２７例呈阳性，而采用Ｂａｃｔｃｃ４６０ＴＢ系统快速培养法培养仅１９例阳性；多重ＰＣＲ法栓出率较一对引物ＰＣＲ法高１５％～１７．５％，具有较好的敏感性和林异性。     

三指标联合检测对痰涂片阴性肺结核诊断价值的研究

为探讨３指标联合检测对肺结核患者的诊断意义，本文对痰涂片阴性肺结核患者１３３例及非结核患者２９例（对照组）作血清抗ＰＰＤＩｇＧ、痰ＰＣＲ检测结核杆菌和ＰＰＤ皮试３项指标检测，综合评估它们对肺结核的诊断价值。结果痰涂片阴性肺结核患者血清抗ＰＰＤＩｇＧ、痰ＰＣＲ检测结核杆菌和ＰＰＤ皮试的阳性率分别为７５．９％、６０．２％和５４．１％，血清抗ＰＰＤＩｇＧ加痰ＰＣＲ或加ＰＰＤ皮试或３项联合检测可进一步提高阳性检出率。认为３项指标联合检测对痰涂片阴性而Ｘ线胸片有结核可疑病灶者，可提高肺结核的检出率。     

聚合酶链反应检测泌尿系结核患者尿中结核杆菌

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对３４例泌尿系结核病人的２４小时尿液标本进行结核杆菌染色体中３３６－ｂｐ重复序列ＤＮＡ片段的扩增检测，阳性率为９４．１％。ＰＣＲ检测２４小时尿样中结核杆菌比尿沉淀物涂片法找抗酸杆菌（阳性率５６％）及结核杆菌快速培养法Ｂａｃｔｅｃ培养结核杆菌（阳性率７０．６％）更敏感。我们还用ＰＣＲ、涂片法、Ｂａｃｔｅｃ培养法检测了１０例非泌尿系结核者中结核杆菌，阳性结果分别为０、０、３     

用聚合酶链反应快速检测痰液中结核杆菌

本研究以结核杆菌染色体中重复出现的长度为１２３个碱基对（ｂｐ）的ＤＮＡ片段作为聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增的模板，合成一对寡核苷酸引物。痰液标本先经三羟甲基氨基甲烷（Ｔｒｉｓ），乙二胺四乙酸二钠（ＥＤＴＡ－２Ｎａ）和三硝基甲苯（Ｔｒｉｔｏｎｘ－１００）加热、震荡处理，裂解结核杆菌，再作ＰＣＲ扩增和琼脂糖凝胶电泳。同时，与痰液直接涂片、抗酸染色镜检抗酸染色阳性杆菌作比较。用该ＰＣＲ检测的检出率为９１．４％（３２／３５），而涂片抗酸染色的检出率仅为３４．３％（１２／３５）。两者相比有非常显著性差异（ｘ２＝２４．４７６，Ｐ＜０．００１）。由于改进了ＰＣＲ前痰液标本的处理方法，使整个ＰＣＲ检测过程所需时间缩短至９ｈ。我们认为该ＰＣＲ检测结核杆菌是特异、敏感和快速的，可在临床实验室应用。     

运用聚合酶链反应技术检测结核分枝杆菌

ＰＣＲ检测结核分枝杆菌是一种高效的实验方法，具有极高的敏感性和特异性；检测出结果所用时间比生物培养法综合了约１００倍，比涂片法更加敏感，甚至可检测到１个结核杆菌。     

肺结核患者外周血中结核杆菌DNA检测的意义

用ＰＣＲ技术对肺强核患者外周血１０８例和痰９６例中结核杆菌ＤＮＡ进行检测，结果患者外周血和痰中结核杆菌ＤＮＡ阳性率分别为７７．７８％和５７．２９％；其中５２例患者外周血和痰标本配对同时检测总阳性率达９２．３％，提示外周血结核杆菌ＤＮＡ检测可提高肺结核诊断敏感性和阳性检出率，可作为肺结核诊断有用的指标。     

采用聚合酶链反应检测肺结核病患者中的结核杆菌

目的：建立一种快速，敏感及特异的早期诊断肺结核病方法。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，检测了６４例肺结核患者的外周血与痰标本结核杆菌－ＤＮＡ。结果：外周血结核杆菌－ＤＮＡ的阳性率为６７．２％（４３／６４），痰标本的阳性率为２９．６％（１９／６４）（Ｐ〈０．０５），结论：用ＰＣＲ技术诊断肺结核病，可提高临床检测的特异性和敏感性。     

PCR快速检测结核杆菌的临床应用

本文应用聚合酶链反应技术对２８５例痰液、９２例胸水、３８例脑脊液标本中的结核杆菌进行了快速检测。ＰＣＲ法的敏感性为１００％，阳性率分别为２７．４％、２１．７％、１８．４％，明显高于浓缩集菌涂片法，另外对２５例结核病患者痰标本用酶法和热裂解法提取结核杆菌ＤＮＡ获得了相同的敏感性。     

应用PCR快速诊断小儿结核性脑膜炎的研究

作者报道特异性寡核苷酸引物引导聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测脑脊液中结核杆菌ＤＮＡ。所用引物来自于编码结核杆菌的６５ＫＤａ蛋白质抗原基因，产生特异的３８３ｂｐ片段。对１０倍连续稀释的人型结核杆菌ＤＮＡ进行ＰＣＲ，可检测出１ｐｇ结核杆菌ＤＮＡ，相当于１０～１００个细菌。应用ＰＣＲ检测４２例结脑脑脊液，阳性率为５７．１４％，直接涂片镜检和细胞培养阳性率分别为７．１４％和１４．２８％；４６例非结脑脑脊液中，３种检测结果均阴性。研究结果表明，ＰＣＲ检测脑脊液中结核杆菌ＤＮＡ有较高的敏感性和特异性，它快速、简便，有望成为一种临床常规检测结核杆菌方法。     

PCR诊断肾结核的价值

应用ＰＣＲ技术检测１９例疑为肾结核者尿结核杆菌，并与细菌学方法作比较。结果，ＰＣＲ检测检出阳性率比镜检细菌阳性率高２２％。ＰＣＲ（＋）者抗结核治疗有效。说明ＰＣＲ对确诊肾结核有价值。     

PCR诊断肾结核的价值

应用ＰＣＲ技术检测１９例疑为肾结核者尿结核杆菌，并与细菌学方法作比较．结果，ＰＣＲ检测检出阳性率比镜检细菌阳性率高２２％。ＰＣＲ（＋）者抗结核治疗有效。说明ＰＣＲ对确诊肾结核有价值．     

聚合酶链反应检测结核杆菌的质量控制探讨

应用ＰＣＲ技术，同时设立各种质量控制实验，对５３例结核病人痰标本中结核杆菌的检测分析结果显示：通过设立各种质量控制实验，可以提高ＰＣＲ技术的灵敏度（ＰＣＲ—ＴＢ阳性检出率由４９．０６％增加到６６．０４％）、特异性及结果的可信度。避免各种抑制因子造成假阴性，使ＰＣＲ技术得到进一步完善。     

应用聚合酶链反应斑点杂交法检测结核杆菌

实验室诊断结核杆菌主要依靠涂片法和分离培养法。我院虽然采用集菌涂片法,但检出率仍然不高,而分离培养所需时间又太长,近年来应用ＰＣＲ技术直接测定结核杆菌的ＤＮＡ［１～３］,不失为一种理想的方法。我们通过应用ＰＣＲ斑点杂交法对１３７份样本进行了检测,并同时用集菌涂片和分离培养法进行比较,以了解ＰＣＲ斑点杂交法的诊断价值。１．材料:１３７份痰液标本由我院肺科和杭州市结核病防治所提供。其中８３份来自肺结核患者(根据病史、临床表现、胸部Ｘ线检查诊断为肺结核),５４份来自非结核病患者。结核杆菌引物及探针均由上海复星实…     

SRID和PCR法诊断结核病的比较研究

以多聚酶链反应技术（ＰＣＲ）和单向免疫扩散法（ＳＲＩＤ）对１８９例肺内结核病和１１２例肺外结核病患者进行结核杆菌ＤＮＡ检测和活动性结核标记物（ＡＴＭ）检测，结果表明：ＰＣＲ法和ＳＲＩＤ法在诊断结核病方面，二者均具有较高敏感性，阳性率分别为８８．９％和９０．５％．，而假阳性率ＰＣＲ法明显高于ＳＲＩＤ法。提示：检测ＡＴＭ诊断结核病，具有较大实用性。     

聚合酶链反应在诊断肺结核中的应用

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对７８例患者的痰、支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）和胸水标本进行结核菌检测；并同时进行涂片抗酸染色、皮肤结核菌素试验及血结核菌抗体检测。结果：ＰＣＲ阳性率为４６．１５％，与涂片镜检、结核菌素试验强阳性、血结核菌抗体阳性率（分别为３．８５％、１７．９５％、１１．５４％）相比均有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。由此可见ＰＣＲ方法比传统方法具有更高的结核杆菌检出率。     

尿标本不同的预处理法对PCR检测泌尿系结核的影响及临床应用探讨

尿标本不同的预处理法对ＰＣＲ检测泌尿系结核的影响及临床应用探讨四川省人民医院（６１００７２）张玲英杜琼潘慈康刘华周忠华杨明清病原学检查是泌尿系结核的重要诊断指标。随着ＰＣＲ技术检测结核杆菌ＤＮＡ的不断完善，已越来越多地运用于临床。我们对ＰＣＲ法检测尿...     

用聚合酶链反应快速检测痰液中结核杆菌

本研究以结核杆菌染色体中重复出现的长度为１２３个碱基对（ｂｐ）的ＤＮＡ片段作为作为聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增的模板，合成一对寡核苷酸引物。痰液标本先经三羟甲基氨基甲烷（Ｔｒｉｓ），乙二胺四乙酸二钠（ＥＤＴＡ－２Ｎａ）和三硝基甲苯（Ｔｒｉｔｏｎ ｘ－１００）加热、震荡处理，裂解结核杆菌，再作ＰＣＲ扩增和琼脂糖凝胶电泳。同时，与痰液直接涂片、抗酸染色镜检抗酸染色阳性杆菌作比较。用该ＰＣＲ扩增和琼脂糖凝     

应用PCR快速诊断小儿结核性脑膜炎的研究

作者报道特异性寡核苷酸引物引导聚合酶链反应技术检测脑脊液中结核杆菌ＤＮＡ。所用引物来自于编码结核杆菌的６５ＫＤａ蛋白质抗原基因，产生特异的３８３ｂｐ片段。对１０倍连续稀释的人型结核杆菌ＤＮＡ进行ＰＣＲ，可检测出１ｐｇ结核杆菌ＤＮＡ，相当于１０－１００个细胞。应用ＰＣＲ检测４２例结脑脑脊液，阳性率为５７．１４％，直接涂片镜和细胞培养阳性率分别为７．１４％和１４．２８％；４６例非结脑脑脊液中，３种检测     

PCR对结核性胸水诊断价值的探讨

采用ＰＣＲ技术检测６７例胸水标本中的结核杆菌ＤＮＡ，并与细菌学检查（细菌培养）进行对比观察，结果表明：用ＰＣＲ方法检测结核性胸水中结核杆菌ＤＮＡ阳性的检测率达５２．２４％（３５／６７）；胸水细菌培养出结核杆菌者１３．４６％（７／５２），两者相比具有高度显著性（ｐ＜０．０１）。对３例大量的结核性胸水患者进行动态观察，经抗痨治疗２～３周后复查胸水ＰＣＲ仍为阳性。认为ＰＣＲ是敏感、快速、特异性的方法，对结核性胸水诊断和治疗具有实用价值。     

聚合酶链反应在732份临床标本检测中的应用

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测７３２份痰、血清、尿、分泌物、胸腹水、脑脊液等临床标本中之结核杆菌、乙型肝炎病毒和淋球菌的ＤＮＡ。结果表明，活动性肺结核病人痰标本阳性率最高，达７４．２３％；乙型肝炎病毒阳性率为３２，１４～６９．２３％，淋球菌阳性率为４４．１２％，内一例病人分泌物涂片阴性而ＰＣＲ阳性。本技术具有灵敏、特异、简便、快速和不需培养等优点，适合于临床应用。