左归饮对不同月龄衰老大鼠免疫调节作用比较

目的：比较左归饮对不同月龄大鼠免疫机能的影响。方法：选择15、25月龄健康雄性SD大鼠，以3月龄青年鼠作为对照。采用放免法测定大鼠血清白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-6（IL-6）含量。结果：衰老大鼠胸腺体重指数及IL-2、IL-4明显下降，IL-6水平升高，并且变化与月龄有关；左归饮对IS月龄大鼠的免疫调节效果较好，对25月龄组作用不及补肾益寿胶囊。结论：左归饮具有一定抗衰老作用；其最佳适应期为老年前期。     

清肺饮合百令胶囊对哮喘大鼠血清IL-4、IL-5和IFN-γ的影响研究

目的:探讨清肺饮合百令胶囊对哮喘急性发作期大鼠Th1／Th2细胞亚群的影响及防治哮喘的作用机制。方法:将50只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、清肺饮合百令胶囊组、清肺饮组、地塞米松组,每组10只。除正常组外,以OVA混悬液诱发哮喘,造模第15d后分别给予相对应的药物灌胃,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、干扰素-γ(IFN-γ)的变化。结果:与正常组比较,哮喘模型组大鼠IL-4、IL-5含量显著升高,IFN-γ含量明显降低(P<0．01),IL-4／IFN-γ比例明显失衡。与哮喘模型组比较,各药物治疗组IL-4、IL-5含量显著下降(P<0．01),IFN-γ含量明显升高(P<0．01),IL-4／IFN-γ显著下降(P<0．01),结论:清肺饮合百令胶囊具有调节Th1／Th2的失衡和抑制IL-5的异常增多所导致的嗜酸粒细胞(Eos)趋化和募集的作用。     

不同方药对大鼠急性酒精性胃黏膜损伤炎性因子的影响

目的研究中医不同治法及复方对大鼠急性酒精性胃黏膜损伤的预防和治疗效果。方法建立酒精所致大鼠急性胃黏膜损伤的模型,用ELASE法测定胃黏膜组织匀浆后的白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)以及肿瘤坏死因子(TNF)含量的变化。结果柴胡疏肝散组、保和丸组、黄芪建中汤组分别能升高15、30及60 min大鼠胃液中IL-2含量。保和丸组30 min时大鼠胃液中IL-6含量最高。黄芪建中汤组和丹参饮合失笑散组均能显著降低酒精作用15 min后大鼠胃液IL-10含量。酒精损伤30及60 min时,各个方药组大鼠胃液中IL-10含量均显著降低,其中作用最强的是丹参饮合失笑散组。酒精作用15、30及60 min时各个方药均能使大鼠胃液TNF含量显著降低,其中15 min时黄芪建中汤组作用最强,30 min时丹参饮合失笑散组作用最强,60 min时黄芪建中汤组作用最强。结论不同方证中药在抗炎、降低炎性介质等方面均可起到有效作用,其结果的不同可为临床治疗急性酒精性胃黏膜损伤性疾病提供科学的选药组方规律以及指导意义。     

不同月龄SD大鼠IL-2及细胞免疫水平的测定

目的 通过不同月龄清洁级SD大鼠血清IL-2及细胞免疫水平的测定,了解大鼠机体的免疫状况.方法 选用2、5、8、11、14月龄清洁级SD雄性大鼠,采用双抗夹心ELISA法测定血清白细胞介素2(IL-2)水平;进行T淋巴细胞转化实验,采用MTT法测定OD差值a判定淋巴细胞的增殖能力;常规病理方法测量胸腺厚度.结果 各月龄大鼠血清IL-2含量、淋巴细胞的增殖能力、胸腺厚度随着大鼠月龄的增大而降低,其中11、14月龄的IL-2含量与2月龄相比降低显著(P＜0.05);8、11、14月龄淋巴细胞的增殖能力与2月龄相比降低显著(P＜0.05);5、8、11,14月龄的胸腺厚度与2月龄相比降低显著(P＜0.01).结论 各月龄大鼠机体的免疫水平随月龄的增大而下降,8月龄大鼠细胞免疫水平下降显著.     

沙尘暴PM2.5对大鼠呼吸系统免疫损伤机制研究

目的探讨沙尘暴细颗粒物(PM2.5)染毒对大鼠呼吸系统的炎症免疫损伤情况及其损伤机制。方法将40只正常成年雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组和各染毒组低、中、高剂量4个组,每组10只。采用气管直接注入染毒法,分别给大鼠灌注0、1.5、7.5、37.5mg/kg剂量的颗粒物悬浮液。灌注24h后处死大鼠,并对其肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-13(IL-13)水平及免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)的含量进行检测。结果高剂量组大鼠BALF中IL-1、IL-6、IL-8、TNF水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),IL-4、IL-10及IL-13在各剂量组间表达水平差异无统计学意义;高剂量组大鼠BALF中IgG与IgM的含量与对照组比较显著升高(P<0.01),各组IgA含量的变化差异无统计学意义。结论沙尘暴细颗粒物PM2.5可引起大鼠呼吸系统显著的免疫损伤,其中以高剂量的PM2.5染毒对机体的损伤尤为显著,机体暴露于高剂量沙尘暴细颗粒物PM2.5环境可增加呼吸系统疾病发生的危险。     

大黄水煎液对实热证模型大鼠血浆中IL-1β、IL-6、TNF-α水平的影响

目的:探讨大黄水煎液对实热证模型大鼠细胞解热作用的机制。方法:采用2,4-二硝基苯酚造实热证大鼠模型,黄连水煎液灌胃治疗。用ELISA法测定血浆中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果:大黄组与模型组比较,IL-1β、IL-6、TNF-α含量均明显降低(P<0.01)。结论:大黄通过降低发热大鼠血浆中IL-1β、IL-6、TNF-α细胞因子的含量水平而发挥其细胞解热作用。     

温经化瘀汤对寒凝血瘀证慢性盆腔炎模型大鼠白细胞介素-2及白细胞介素-6的影响

目的观察温经化瘀汤对寒凝血瘀证慢性盆腔炎模型大鼠免疫学方面的影响,从而探讨其治疗寒凝血瘀证慢性盆腔炎的作用机制。方法采用苯酚胶浆法叠加冰浴法建立寒凝血瘀证慢性盆腔炎大鼠模型,分别灌胃给药后,测定各组大鼠血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)的含量变化。结果与假手术组比较,模型组大鼠血清IL-2含量显著降低、IL-6含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,温经化瘀汤高剂量组与对照组大鼠血清IL-2含量显著升高(P<0.05或P<0.01),温经化瘀汤高、低剂量组与对照组大鼠血清IL-6含量显著降低(P<0.01)。结论温经化瘀汤能够通过升高血清IL-2含量,降低IL-6含量,发挥免疫调节作用。     

唾液乳杆菌对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠模型的脾脏T细胞及炎症因子影响

目的 探讨唾液乳杆菌对类风湿性关节炎（RA）的治疗效果及作用。方法 选择牛Ⅱ型胶原为免疫原,对雄性SD大鼠建立胶原诱导性关节炎（CIA）模型。随机选取24只造模成功的大鼠,随机分成CIA模型组、唾液乳杆菌组、甲氨蝶呤组,每组8只,另外选择8只大鼠作为健康组。健康组和CIA模型组均给予细菌培养基灌胃;唾液乳杆菌组给予唾液乳杆菌灌胃;甲氨蝶呤组给予甲氨蝶呤药物灌胃,每组连续灌胃4周。结束后评定关节炎指数,测量发病足厚度,观察踝关节组织病理改变并进行组织病理学染色;检测脾脏辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞（Treg）的含量,评估各组大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果 与健康组相比,CIA模型组、唾液乳杆菌组及甲氨蝶呤组的关节炎指数评分（t=82.31、257.33、234.21）,发病足厚度（t=21.47、56.14、51.44）,血清中IL-1β(t=3...     

大黄素对大鼠肝移植排斥反应相关细胞因子的影响

目的探讨大黄素对肝移植大鼠排斥反应中相关细胞因子表达的影响。方法采用大鼠原位肝移植模型,随机分为3组:对照组、移植组、大黄素组,于术后第5天取血。用ELISA法检测血清中白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(INF-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果移植组IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α表达明显升高,IL-4、IL-10表达显著降低,与对照组相比,差异非常显著(P<0.01)。大黄素组IL-2、IL-12、INF-γ、TNF-α表达显著降低,而IL-4、IL-10表达显著升高,与移植组相比,差异非常显著(P<0.01)。结论大黄素抑制肝移植排斥反应主要与其抑制IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α等Th1型细胞因子的表达,促进Th2型细胞因子IL-4、IL-10的表达,使免疫反应由Th1型向Th2型偏移有关。     

赤芍总苷通过NF-κB通路对慢阻肺大鼠肺组织炎症及凋亡的作用研究

目的 观察赤芍总苷对慢性阻塞性肺疾病大鼠炎症和凋亡的影响,以及探究其分子机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为健康对照组、模型组、赤芍总苷高剂量组和赤芍总苷低剂量组,每组10只。采用烟熏联合气管内滴入脂多糖构建慢阻肺大鼠模型。赤芍总苷高剂量组和赤芍总苷低剂量组烟熏前1h分别给予150mg/kg和75mg/kg赤芍总苷灌胃,健康对照组和模型组给予等量的生理盐水,1次/d连续4周。HE染色观察各组大鼠肺组织病理学形态;ELISA检测大鼠血清中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6);TUNEL计数检测大鼠Ⅱ型肺泡细胞的凋亡;Western Blot检测大鼠肺组织中核细胞表面Toll样受体4(TLR4)、内核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、细胞凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、水溶性相关蛋白(Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白。结果 与健康对照组比较,模型组大鼠的气道狭窄,肺泡囊状扩展,TNF-α、IL-1β、IL-6的表...     

老年雄性大鼠股骨皮质骨、松质骨骨量增龄性丢失的定量研究

通过将24月龄SD雄性大鼠饲养至30月龄．分别测定24月龄组和30月龄组大鼠股骨以松质骨为主的近段、远段以及以皮质骨为主的中段的骨密度,来定量研究老年雄性大鼠股骨皮质骨、松质骨骨量的增龄性丢失。结果表明：30月龄雄性大鼠股骨各段骨密度明显低于24月龄雄性大鼠。提示：大鼠增龄性骨量丢失模型复制成功。     

幼龄和老龄大鼠液压脑损伤后NGF、Bcl-2、Bax蛋白的表达

目的:研究衰老因素对神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)表达的影响,探讨老年颅脑损伤恢复不良的分子生物学机制。方法:采用侧方液压打击颅脑损伤模型,应用免疫组化方法和计算机显微图像分析技术,比较幼龄(2～3个月)和老龄(15个月)大鼠脑损伤后12 h脑内NGF、Bcl-2、Bax蛋白表达水平的差异。结果:液压打击伤后NGF、Bcl-2、Bax蛋白在损伤侧大脑皮质、海马表达明显增强,老龄组大鼠伤侧皮质NGF蛋白表达和Bcl-2/Bax蛋白表达比率显著低于幼龄组(P<0.05)。结论:老龄和幼龄大鼠液压脑损伤后NGF、Bcl-2和Bax蛋白表达的差异提示老龄哺乳动物受损神经元修复和生存能力下降,为认识创伤性脑损伤后年龄相关性神经功能缺失的病理生理学机制提供了帮助。     

瓜石汤对初老大鼠卵巢Bcl-2表达影响的实验研究

目的:探讨瓜石汤延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理。方法:选10～12月龄、阴道细胞学涂片显示动情周期长、动情周期紊乱者作为初老大鼠模型随机分组,灌药4周后处死,取同侧卵巢用于检测Bcl-2。结果:与模型组比较,瓜石汤组Bcl-2的表达均有所增强,其中瓜高组与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。结论:瓜石汤具有抑制卵巢细胞凋亡的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一。     

哮喘患儿25-羟维生素D3与部分Th1/Th2因子相关性探讨

目的探讨25-羟维生素D3(25-OH-D3)在哮喘免疫调节中的作用。方法选取60例6个月至5岁哮喘患儿为观察组,选取同期儿童保健门诊健康体检儿60例为对照组。采用放射免疫分析法(RIA)测定血清25-OH-D3浓度,采用双抗体夹心ELISA法检测血清白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-8(IL-8)、白介素-12(IL-12)浓度。观察哮喘儿童血清中25-OH-D3与部分Th1/Th2因子的变化及相关性。结果血清25-OH-D3、IL-2、L-12哮喘儿童明显低于健康儿童,IL-4、IL-12哮喘儿童明显高于健康儿童,哮喘患儿血清25-OH-D3与IL-2、IL-4、IL-8和IL-12均显著相关。结论 25-OH-D3参与哮喘患儿的免疫调节机制。     

硝化应激参与衰老血管内皮功能障碍

目的 观察硝化应激对自然衰老大鼠血管内皮形态和功能的影响,探讨衰老时血管内皮功能障碍的机制。方法 3月龄和20月龄两个年龄段健康雄性SD大鼠各12只,分组如下:1 青年对照组(3月龄对照组);2 青年+过氧亚硝基(peroxynitrite,ONOO^-)清除剂内消旋-四(N-甲基-4-吡啶)卟啉五氯化钠(Ⅲ)〔Fe(III) meso-tetra(N-methyl-4-pyridyl) porphine pentachloride,FeTMPyP,3月龄〕;3 老年对照组(20月龄对照组);4 老年+过氧亚硝基清除剂组(FeTMPyP,20月龄)。为抑制过氧亚硝基,腹腔注射给予过氧亚硝基清除剂FeTMPyP(3 mg/kg,每3天1次,共5次)。蛋白印记法(Western blotting)检测肝脏组织衰老相关蛋白P53和P21表达情况;离体胸主动脉血管环灌流,观察血管环对不同浓度乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)的反应;HE染色观察胸主动脉血管结构改变;免疫组织化学法检测血管3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine,3-NT)、内皮标志物血管假性血友病因子(von willebrand factor,vWF)及内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)。结果 20月龄衰老大鼠胸主动脉内皮依赖性舒张功能较3月龄大鼠显著下降,采用过氧亚硝基的清除剂FeTMPyP干预可明显提高衰老血管内皮依赖性舒张功能;HE及免疫组织化学染色结果显示20月龄衰老大鼠胸主动脉较3月龄大鼠均出现较明显的损伤,采用过氧亚硝基的清除剂FeTMPyP干预可明显减轻衰老血管形态学损伤;免疫组织化学结果显示衰老大鼠胸主动脉3-NT升高,提示出现明显的硝化应激反应,采用过氧亚硝基的清除剂FeTMPyP干预可明显降低3-NT。结论 衰老时过氧亚硝基生成增多,硝化应激反应增强,参与血管形态学损伤和血管内皮依赖性舒张功能降低。     

左归丸含药血清对成骨细胞IL-1、IL-6和COX-2表达的影响

目的通过观察左归丸含药血清对成骨细胞白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)和环加氧酶-2(COX-2)表达的影响,探讨其治疗骨质疏松症的作用机制。方法体外分离、培养成骨细胞,实验分为3组:正常血清组、卵巢切除(OVX)血清组和OVX含药血清组。采用免疫组化法,检测成骨细胞IL-1、IL-6和COX-2的表达。结果OVX血清组成骨细胞IL-1、IL-6和COX-2的表达明显强于正常血清组,而OVX含药血清组的表达较OVX血清组明显减弱,与正常血清组比较,则无显著性差异。结论在去势状态下,左归丸可能是通过抑制成骨细胞IL-1、IL-6和前列腺素E2(PGE2)的分泌,进而达到治疗骨质疏松的作用。     

18 kDa 转位蛋白在异氟醚麻醉致大鼠认知损伤中的神经保护作用

目的：观察18 kDa转位蛋白（ TSPO ）在异氟醚麻醉所致的大鼠认知功能损伤中的神经保护作用。方法选取4月龄SD雄性青年大鼠10只,随机分为青年对照组（ AC组）和青年麻醉组（ AA组）;20月龄SD雄性老年大鼠10只,随机分为老年对照组（ OC组）和老年麻醉组（ OA组）。麻醉组吸入2％异氟醚6h,对照组吸入空气6h。麻醉后1d,2d,3d,4d进行水迷宫测试,检测海马组织TSPO蛋白表达。测定麻醉前（ T1）、麻醉诱导6h（T2）、麻醉后24h（T3）、麻醉后48h（T4）血清TNF-α,IL-1β含量。结果与对照组比较,吸入异氟醚后大鼠逃避潜伏期延长（P＜0．05）,老年大鼠延长明显（P＜0．01）;麻醉后大鼠海马区TSPO蛋白表达增加（P＜0．05）,老年大鼠增加显著（P＜0．01）;与T1相比,T2时大鼠血清TNF-α,IL-1β水平均升高（P＜0．05）,T3,T4时逐渐降至正常水平。结论异氟醚可能通过诱发神经炎症导致大鼠认知功能下降,而其认知功能的恢复可能与海马区TSPO蛋白表达增加有关。     

大鼠脾脏形态学的年龄变化

本文用组织学和组织化学方法对SD大鼠脾脏的年龄变化进行了观察。大鼠脾脏中白髓随增龄而逐渐减少,结构紊乱,淋巴细胞密度下降。白髓和红髓分界不清。巨噬细胞及中性粒细胞数量增多。ANAE、ACP、AlP活性随增龄而加强。ATP酶无明显变化,SDH、LDH和5-Nase活性下降,说明老龄鼠脾脏细胞中的代谢活动发生了一定的变化。     

补肾方药延缓老年大鼠学习记忆减退的分子机制

目的:观察补肾方药左归丸、右归丸对老年大鼠空间学习记忆能力,氨基酸神经递质以及NMDA受体、Ca2+/CaMKⅣ信号通路相关分子的mRNA表达变化的影响,以探讨老年大鼠学习记忆减退的分子机制以及补肾方药的药理作用。方法:以青年大鼠(5月龄)为对照,以自然衰老大鼠(23月龄)为模型;Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力;HPLC-荧光法检测大鼠杏仁核、海马氨基酸类神经递质含量;RT-PCR法检测大鼠海马NR1、CaMKⅣ、CREB、c-fos mRNA的表达变化;观察补肾方药左归丸、右归丸对老年大鼠上述各项指标的影响。结果:与青年对照组比较,老年大鼠上述指标都有不同程度的异常变化,而左归丸、右归丸可改善老年大鼠退化的空间学习记忆能力;降低老年大鼠杏仁核、海马Glu的含量;显著上调老年大鼠NR1、CaMKⅣmRNA的表达,对CREB及c-fos mRNA的表达也有升高。结论:左归丸、右归丸可以通过降低老年大鼠杏仁核、海马Glu含量,纠正NMDA受体介导的CaMKⅣ信号通路的异常变化,改善老年大鼠空间学习记忆能力,延缓衰老。     

三仁汤对脾胃湿热证大鼠血清Th1/Th2细胞因子的影响

目的探讨三仁汤改善脾胃湿热证大鼠免疫功能的作用机理。方法将50只雄性SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、脾胃湿热模型组、三仁汤(高、中、低剂量)组,观察大鼠体质量、肛温等形态学改变,检测血清Y.干扰素(IFN-y)和白细胞介素-4(IL-4)表达水平,取大鼠胃、十二指肠和结肠组织行病理切片,HE染色观察胃肠道炎症情况。结果与正常对照组比较,模型组大鼠肛温升高,饮水量和摄食量减少,病理提示胃肠道存在炎症损伤,血清IFN-γ和IL-4显著增高(P<0.01),IFN-γ/IL-4比值有升高趋势(P>0.05)。三仁汤高、中、低剂量组对脾胃湿热证大鼠的形态改变有恢复作用;中、低剂量组能降低湿热证大鼠IFN-γ、IL-4水平(P<0.01);高剂量组能降低IL-4水平(P<0.01),有降低IFN-γ水平的趋势(P>0.05),IFN-γ/IL-4比值反而升高(P≮0.05)。结论脾胃湿热证大鼠细胞免疫和体液免疫均呈亢进状态,Th1/Th2平衡有向Th1反应漂移的趋势,三仁汤能调节脾胃湿热证大鼠的免疫功能,保护胃肠道粘膜。