牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤水通道蛋白表达的影响

目的：观察牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤纤维化水通道蛋白表达的影响。方法：静脉注射内毒素1.5 mg/kg、腹腔注射D-氨基半乳糖100 mg/kg造成内毒素休克模型,用牛珀至宝微丸干预处理,HE染色观察肺损伤,Van Gieson法染色检测肺胶原纤维表达,免疫组化染色观察AQP-1和AQP-5表达。结果：内毒素造成严重的急性肺损伤,肺组织胶原纤维染色显著增强,AQP-1和AQP-5表达减弱;牛珀至宝微丸能减轻急性肺损伤及肺组织胶原纤维表达,并能提高AQP-1和AQP-5表达。结论：牛珀至宝微丸能减轻内毒素急性肺损伤和纤维化的机理可能与调节AQP-1和AQP-5表达相关。     

牛珀至宝微丸对内毒素休克鼠肺组织中一氧化氮合酶活性的影响

目的：观察牛珀至宝微丸（由水牛角、麝香、地黄、牛砂、牛黄、郁金等组成）对内毒素休克时肺损伤的保护作用和肺一氧化氮合酶（NOS）表达的影响。方法：静脉注射脂多糖（LPS）1．5mg/kg、腹腔注射D－氨基半乳糖（D－Gal）100mg/kg造成内毒素休克模型，用牛珀至宝微丸和氨基胍（AG）作对照干预处理，用硝酸还原酶法检测血浆一氧化氮（NO）浓度，同位素标记法测肺组织匀浆NOS活性，免疫组化方法检测诱生型一氧化氮合酶(iNOS）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）在肺组织内的表达。结果：牛珀至宝微丸可以降低内毒素休克时血浆NO浓度，降低肺组织iNOS活性，使肺内iNOS表达减弱、eNOS表达增强，肺损伤减轻。结论：牛珀至宝微丸可以减轻内毒素休克造成的肺损伤，这种保护作用可能是通过调节肺组织NOS表达而产生的。     

牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠脑神经型一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠脑神经型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase, nNOS)表达的影响.方法:将SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、牛珀至宝微丸组.模型组静脉注射内毒素脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)1.5 mg/kg、腹腔注射D-氨基半乳糖(D-galactosamine, D-GalN)100 mg/kg造成内毒素休克模型,牛珀至宝微丸组用药7 d后再作以上处理.用免疫组织化学方法检测各组nNOS在不同脑区的表达.结果:nNOS阳性细胞广泛分布于大脑皮质Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ层,海马分子层,齿状回多形层,脑干网状结构,小脑分子层、颗粒层和普尔基涅细胞层.在大脑皮质、海马、脑干及小脑各部位,牛珀至宝微丸组的nNOS阳性细胞数略高于正常对照组,但明显低于模型组(P<0.05).结论:牛珀至宝微丸有部分下调内毒素休克所致广泛脑区nNOS过度表达的作用.     

牛珀至宝微丸影响内毒素休克大鼠急性肺损伤胶原纤维的表达

目的　观察牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤时胶原纤维表达的影响。方法　静脉注射内毒素(LPS) 1 5mg/kg、腹腔注射D -氨基半乳糖 (D -Ga1N) 10 0mg/kg造成内毒素休克模型 ,用牛珀至宝微丸作干预处理 ,VanGieson法染色检测胶原纤维在肺组织内的表达。结果　内毒素造成严重的急性肺损伤 ,肺组织胶原纤维染色显著增强 ;牛珀至宝微丸能减轻肺损伤 ,肺组织胶原纤维染色明显减弱。结论　牛珀至宝微丸能减轻内毒素急性肺损伤和纤维化 ,可能有治疗急性肺损伤纤维化的作用。     

甲基强的松龙对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤高迁移率蛋白1表达的影响

目的 探讨高迁移率蛋白1 （HMGB1）在脂多糖诱导的急性肺损伤中的作用,以及甲基强的松龙注射剂干预后其在急性肺损伤中的表达变化.方法 将54只清洁级成年雄性SD大鼠随机分成3组：①正常对照组（N组）：每只大鼠经尾静脉途径给予生理盐水2 mL/kg,1h后再经尾静脉途径给予生理盐水1 mL/kg;②急性肺损伤组（ALI组）：尾静脉注射脂多糖6 mg/kg,1h后再经尾静脉途径给予生理盐水1 mL/kg;③甲基强的松龙干预组（MPN组）：每只大鼠经尾静脉途径给予脂多糖6 mg/kg,1h后再经尾静脉途径给予甲基强的松龙20 mg/kg.三组分别于注射后12、24、36 h麻醉处死后采集标本,每个时相点取6只大鼠.采用免疫组织化学法和实时定量PCR（Real-Time PCR）法检测各组各时相点大鼠肺组织HMGB1表达水平,同时观察肺组织病理学改变,并测定干湿重比（W/D）.采用SPSS 20.0统计学软件分析,数据处理采用方差分析.结果 N组中大鼠肺组织有少量HMGB1mRNA及其蛋白表达,ALI组和MPN组大鼠肺组织中HMGB1 mRNA及其蛋白表达水平明显高于N组,差异均有统计学意义（均P＜ 0.05）,24 h表达达峰值;同一时相点ALI组大鼠肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白表达水平高于MPN组,差异有统计学意义（P＜0.05）.ALI组大鼠与MPN组不同时相点W/D增高,与N组比较差异有高度统计学意义（P＜ 0.01）,MPN组与ALI组比较W/D下降（P＜ 0.05或P＜ 0.01）.与N组比较,ALI组和MPN组组织病理学有不同程度的病理损害,MPN组比ALI组坏死程度轻,炎症细胞浸润少.结论 HMGB1在炎症后期持续性高水平表达,在ALI发生、发展过程中,尤其是ALI后期失控性炎性反应过程中可能发挥重要作用.甲基强的松龙注射剂通过影响HMGB1 mRNA及其蛋白表达,对脂多糖所致的急性肺损伤有一定的保护作用.     

丙氨酰谷氨酰胺对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用

目的：探讨丙氨酰谷氨酰胺对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法：静脉注射内毒素（LPS）3mL（6mg／kg）复制大鼠脓毒症急性肺损伤模型,40只健康Wistar大鼠,分为4组,即对照组（静脉注射等量生理盐水28mL／kg）、内毒素组[先后静脉注射生理盐水25mL／kg和内毒素3mL／kg（6mg／kg）]、丙氨酰谷氨酰胺治疗组[先后静脉注射4．5％力太（丙氨酰谷氨酰胺注射液）25mL/kg和内毒素3mL／kg（6mg／kg）]、谷氨酰胺治疗组[先后静脉注射3％谷氨酰胺25mL／kg和内毒素3mL／kg（6mg／kg）]。在静脉注射前（T0）,注射后6h（T1）,各抽血1mL。注射6h后,处死大鼠,用EusA法测定各时点血清TNF-α,IL-1β,IL-8的浓度,测定肺组织湿／干重比、支气管肺泡灌洗液的总蛋白浓度,光学显微镜下观察肺组织病理改变,原位TUNEL技术进行肺组织细胞凋亡检测分析。结果：与LPs组比较,丙氨酰谷氨酰胺治疗组、谷氨酰胺治疗组的肺组织湿／干重比、支气管肺泡灌洗液的总蛋白浓度,血清TNF-α,IL-1β,IL-8浓度明显降低（P＜0．05）;丙氨酰谷氨酰胺治疗组、谷氨酰胺治疗组的肺组织损伤程度明显减轻而且凋亡指数也较LPS组显著降低（P＜0．05）。结论：静脉给予丙氨酰谷氨酰胺对脓毒症大鼠急性肺损伤有保护作用。     

氯胺酮、咪唑安定与感染性休克大鼠肝HSP70的表达

目的：观察氯胺酮,咪唑安定对感染性休克大鼠肝热休克蛋白70（HSP70）表达的影响。方法：健康成年SD大鼠88只,分为对照组（NS,E组）和试验组（EK,EKM组）,NS组为正常对照组,E组给予内毒素20mg/kg,EK组,EKM组在同E组处理前分别给予氯胺酮80mg/kg,氯胺酮80mg/kg 咪唑安定0．5mg/kg。在A时点（内毒素处理后2h)和B时点（以内毒素组大鼠临终时为时点）测定肝HSP70表达及TNF－α血浆水平,并观察各组生存时间,结果：E组较NS组HSP70表达明显上调,TNF－α血浆水平明显升高（P＜0．05）,与E组比较,EK组HSP70表达明显上调,TNF－α血浆水平明显降低（P＜0．05）,大鼠存活率明显升高（P＜0．05）,EKM组与EK组比较各组数据无明显差异,结论：氨胺酮提高感染性休克大鼠肝HSP70的表达,抑制内毒素刺激的TNF－α的释放,提高氯胺酮的作用。α     

宣肺止咳合剂对LPS诱导的急性肺损伤大鼠AQP1蛋白表达及炎症反应的调节作用

目的 探讨宣肺止咳合剂对LPS诱导的急性肺损伤大鼠AQP1蛋白表达及炎症反应的调节机制。方法 取健康SPF级雄性Wistar大鼠60只,随机分为六组：正常对照组(ig生理盐水,iv生理盐水)、LPS模型组(ig生理盐水,iv LPS 5mg/kg)、宣肺止咳合剂组(7.5、15、30mg/kg,iv LPS 5mg/kg)、阳性对照组(ig地塞米松DEX 0.135mg/kg,iv LPS 5mg/kg),每组10只。HE染色观察肺组织病理改变;免疫组化、Western blot 、qPCR检测肺组织中AQP1的表达;ELISA检测血清中TNF-α、IL-1、IL-4、IL-6、L-10水平。结果 肺组织HE染色结果可见,模型组肺泡间质渗出明显,可见大量炎性细胞浸润;宣肺止咳合剂中、高剂量组及阳性药物组大鼠肺组织肺泡结构可见,损伤明显减轻。免疫组化和Western blot结果显示,与正常组相比,模型组AQP1表达显著降低（P<0.01）,给予宣肺止咳合剂和地塞米松治疗后,AQP1表达较模型组升高,宣肺止咳合剂中、高剂量组和阳性对照组差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。qPCR结果显示,模型组AQP1mRNA水平较正常组显著下降（P<0.01）,宣肺止咳合剂中、高剂量组和阳性对照组大鼠肺组织中AQP1mRNA水平较模型组有显著升高趋势（P<0.01或P<0.05）。ELISA结果显示,中、高剂量宣肺止咳合剂和阳性药能抑制LPS引起的TNF-α、IL-1、IL-6水平升高,增加IL-4、IL10水平（P＜0.05或P＜0.01）。结论 宣肺止咳合剂对内毒素性ALI的保护作用可能是通过调控AQP1的表达,抑制（TNF-α、IL-1、IL-6等）促炎因子,促进（IL-10、IL-4等）抗炎因子的释放,调节促/抗炎平衡来实现的。     

宣白承气汤对内毒素致急性肺损伤大鼠肺组织MD-2mRNA、MyD88蛋白及其mRNA表达的影响

目的：探讨宣白承气汤对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织髓样分化蛋白-2（myeloid differentiation protein-2,MD-2）mRNA、髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88,MyD88）蛋白及其mRNA表达的影响。方法：将32只雄性Wistar大鼠随机分为：正常对照组、模型对照组、地塞米松组、宣白承气汤组,每组8只。尾静脉注射LPS 6 mg/kg制备大鼠ALI模型。宣白承气汤组在造模前灌胃3 d,按7.56g生药/kg宣白承气汤水煎液灌胃,1次/d;地塞米松组在造模前1 h按5 mg/kg腹腔注射地塞米松,造模6 h后麻醉取材。采用免疫组化ABC法和实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测MD-2mRNA、MyD88蛋白及其mRNA的表达,并于光镜下观察大鼠肺组织病理变化。结果：与正常对照组相比,模型组MD-2mRNA、MyD88蛋白及其mRNA的表达均明显上调（P〈0.01）;与模型组相比,地塞米松组和宣白承气汤组MD-2mRNA、MyD88蛋白及其mRNA表达明显降低（P〈0.01）;地塞米松组和宣白承气汤组相比无显著差异（P〉0.05）。病理学观察,与正常组相比,模型对照组大鼠肺组织出现大片出血及坏死,宣白承气汤组和地塞米松组大鼠肺组织病理改变明显轻于模型对照组,肺细支气管偶见炎症改变,水肿较轻,炎性细胞渗出较少。结论：宣白承气汤能减轻内毒素致ALI大鼠肺组织损伤,对肺损伤有保护作用,其机制可能与其能降低内毒素致ALI大鼠MD-2mRNA、MyD88蛋白及其mRNA的表达有关。     

脂多糖诱导急性肺损伤大鼠肺组织GRK2变化的实验研究

目的：探讨脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)的变化规律。方法：Wistar大鼠18只，随机分为3组。LPS组自尾静脉注射LPS 8mg/kg，LPS 山莨菪组注射LPS8mg/kg 山莨菪碱10mg/kg，正常对照组注射等量生理盐水。90min放血处死后取肺脏，用Western blot检测各组GRK2的变化。结果：LPS组和LPS 山莨菪碱组GRK2表达较正常对照组显著增加，LPS组和LPS 山莨菪碱组GRK2表达无显著差异。结论：Wistar大鼠肺组织有GRK2表达；LPS诱导的ALI大鼠肺组织GRK2表达显著增加，山莨菪碱对LPS诱导的ALI大鼠肺组织GRK2表达增加无显著抑制作用。     

间充质干细胞对脂多糖诱导急性肺损伤大鼠亲环素A表达的影响

目的观察亲环素A(CyPA)在脂多糖诱导急性肺损伤大鼠肺组织的表达变化及间充质干细胞对CyPA表达的影响。方法 90只SD大鼠随机分为5组,即:正常对照组、模型组、干细胞对照组和高、低剂量干细胞治疗组,每组18只。模型组经尾静脉注射脂多糖(LPS)5mg/kg;干细胞对照组经尾静脉注射骨髓间充质干细胞2×106/ml,0.5 ml;正常对照组经尾静脉注射等量生理盐水;高、低剂量干细胞治疗组分别经尾静脉同时注射LPS 5mg/kg和骨髓间充质干细胞2×106/ml、1×106/ml,0.5 ml。分别于造模后6、24和72 h处死动物收取标本,测定右下肺组织髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及肺组织细胞核内的CyPA表达。结果模型组、两种剂量干细胞治疗组MPO、TNF-ɑ、IL-1β及CyPA表达三个时间点均较正常对照组显著升高(P<0.05);高剂量干细胞治疗组CyPA蛋白和mRNA表达均较模型组明显降低(P<0.05)。结论 CyPA参与了内毒素诱导急性肺损伤大鼠的发病过程,骨髓间充质干细胞可能通过降低CyPA的活性对急性肺损伤发挥治疗作用。     

黄芪注射液对大鼠失血性休克并内毒素所致急性肺损伤的影响

目的：探讨黄芪注射液对大鼠失血性休克合并急性肺损伤的影响及机制。方法：雄性SD大鼠36只随机分为三组,分别用生理盐水,黄芪注射液低剂量（10g/kg）,黄芪注射液高剂量（20g/kg）复苏,采用失血性休克复合内毒素打击大鼠动物模型的制作及实验方法,分为A组生理盐水组12只、B组黄芪注射液低剂量组12只、C组黄芪注射液高剂量组12只,通过检测肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-a（TNF-a）、白细胞介素-6（IL-6）,及测定肺湿重/干重比值（W/D）来观察黄芪注射液对大鼠失血性休克并内毒素所致急性肺损伤的影响。结果：黄芪注射液高剂量组肺组织匀浆中TNF-α、IL-6含量和肺W/D低于低剂量组（P〈0.01）,两组各项指标均低于对照组（P〈0.01）。结论：黄芪注射液对大鼠失血性休克并内毒素所致急性肺损伤有保护作用,且高剂量组优于低剂量组。     

K252a对内毒素诱导急性肺损伤大鼠的保护作用

目的观察K252a（MLK3阻断剂）对内毒素性急性肺损伤大鼠肺病理组织学改变及生存率的影响。方法采用尾静脉注射脂多糖（1ipopolysacharide,LPS）复制内毒素性急性肺损伤模型。90只大鼠随机分为6组（n=15）：对照组（control组）、LPS组、K252a50μg/kg组（K50组）、K252a75μg／kg组（K75组）、K252a100μg/kg组（K100组）和溶剂对照组（DMSO组）。模型制备成功后6h取肺脏进行光镜检查,观察48h内大鼠死亡情况并比较累计生存率。结果48h内LPS组、K50组、K75组和K100组以及DMSO组大鼠生存率分别为6．3％、27％、72％、57％及6．7％。光镜下可见LPS组大鼠肺组织结构明显被破坏,主要表现为肺泡内出血、肺问质水肿、肺泡萎陷以及肺组织内大量炎性细胞浸润。与LPS组相比,预先应用K252a组肺组织的损伤程度较轻微、肺间隔轻度增宽、无明显出血、少量炎性细胞浸润,尤其K75组,减轻程度最明显。结论K252a延迟LPS大鼠死亡时间,并呈现剂量依赖性,75μg/kgK252a剂量可以明显提高其生存率。并可改善内毒素性急性肺损伤大鼠肺脏的病理组织学结果。     

牛磺酸对大鼠急性肺损伤的保护作用与分子机制

目的：复制脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的大鼠急性肺损伤（acute lung inj ury,ALI）模型,探究牛磺酸（taurine,Tau）对大鼠ALI的保护作用机制。方法：将54只大鼠随机分为3组,每组18只：正常对照组、LPS组和LPS＋Tau 干预组。腹腔注射 LPS（5 mg/kg）建立 ALI 模型,腹腔注射 Tau（5 mg/kg）干预,各组动物分别于注射后3、6、9 h 检测肺组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性和丙二醛（malonaldehyde,MDA）含量的改变,蛋白印迹法检测 p-p38蛋白在肺组织中的表达变化并在光镜下观察肺组织形态学改变。结果：LPS 组与对照组相应时间点比较,肺组织中的 MDA 含量和 p-p38蛋白表达显著升高（P〈0.01）,而 SOD 活性显著降低（P 〈0.01）;LPS＋Tau 干预组与 LPS 组比较,肺组织MDA含量（P〈0.01）及p-p38蛋白表达明显降低（P 〈0.05,P 〈0.01）,而 SOD 活性明显升高（P〈0.01）,且肺组织的病理改变显著减轻。结论：Tau对大鼠ALI时的肺脏起明显的保护作用,保护机制可能与其抗氧化作用及抑制p38MAPK信号通路的过度激活有关。     

法舒地尔对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤的影响

目的：探讨法舒地尔通过RhoA/ROCK（ Rho激酶）通路是否能减轻脂多糖（ LPS）诱导的大鼠急性肺损伤（ ALI）。方法：18只Wistar健康大鼠随机分为对照组（ NS组）、脂多糖组（ LPS组）及法舒地尔干预组（ FAS组）各6只;LPS组和FAS组采用小剂量LPS 1 mg/kg腹腔注射16 h后,气管内滴注LPS 3 mg/kg建立ALI模型。 FAS组在腹腔注射LPS前30 min和气管滴注LPS后1 h给予腹腔注射法舒地尔10 mg/kg。于气管滴注LPS造模后,观察3 h后处死大鼠,通过HE染色观察各组肺组织形态学改变,测肺组织湿/干重比、丙二醛含量、髓过氧化物酶活性,反转录-聚合酶链反应及Western blot法检测肺组织匀浆中ROCK2（Rho激酶2）mRNA及蛋白的表达情况。结果：与NS组比较,LPS组肺组织病理形态学改变明显,FAS组较LPS组相比明显减轻;LPS组肺湿/干重比、丙二醛含量和髓过氧化物酶活性均较NS组明显增高（P〈0.01）,而FAS组较LPS组均有不同程度降低（P〈0.05-P〈0.01）;LPS组ROCK2 mRNA 表达较NS组明显增高（P〈0.01）,而FAS组与LPS组差异无统计学意义（P〉0.05）;LPS组ROCK2蛋白表达较NS组明显增高（P〈0.01）,而FAS组较LPS组表达水平降低（P〈0.05）。结论：法舒地尔通过RhoA/Rho激酶信号通路能够减轻LPS诱导的大鼠ALI。     

川芎嗪对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的保护作用

目的：探讨川芎嗪（TMP）对内毒素（LPS）诱导大鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用。方法：24只健康Wistar大鼠随机分为4组：对照组、LPS组、TMPⅠ组（40 mg/kg）和Ⅱ组（80 mg/kg）,每组各6只。腹腔注射LPS 1 mg/kg,16 h后再次气管滴注LPS 3 mg/kg,造成内毒素二次打击,建立大鼠ALI模型。于气管滴注LPS后3 h处死大鼠,4%多聚甲醛固定后制作病理切片,同时测肺湿/干重比,测量肺组织中髓过氧化物酶（MPO）活性、丙二醛（MDA）含量。Western-blot测肺组织中RhoA、ROCK2蛋白表达量,RT-PCR测肺组织中ROCK2 mRNA表达量。结果：与对照组比较,LPS组病理切片显示大鼠肺间质水肿,肺泡腔内可见出血及大量炎性细胞渗出,肺湿/干重比、MPO活性及MDA含量均明显增加（P〈0.01）,RhoA及ROCK2蛋白表达显著升高（P〈0.01）,ROCK2 mRNA表达明显升高（P〈0.01）。而TMPⅠ组和Ⅱ组的肺湿/干重比、MPO活性、MDA含量、RhoA及ROCK2指标均较LPS组显著减轻（P〈0.05~P〈0.01）,而TMPⅠ组和Ⅱ组上述各指标间差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：TMP对LPC诱导的大鼠ALI可能有保护作用。     

丹参与甲基泼尼松龙联用治疗急性肺损伤的实验研究

目的探讨丹参和甲基泼尼松龙联合应用对内毒素（lipopolysaccharide,LPS）所致急性肺损伤（acute lung injury,ALI）大鼠的治疗作用及其机制。方法建立大鼠LPS吸人性ALI模型（LPS3mg／kg气管内注射）。50只大鼠随机分为5组：生理盐水对照组;LPS损伤组;甲基泼尼松龙组（LPS＋甲基泼尼松龙）;丹参组（LPS＋丹参）;联合用药组（LPS＋甲基泼尼松龙＋丹参）。观察支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中蛋白含量、肺脏的大体、光镜下病理改变,以及肺组织湿／干重（W／D）比值,并测定肺组织中一氧化氮（nitric oxide,NO）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH—Px）的变化。结果经气道吸入LPS可致大鼠发生ALI。与LPS损伤组相比,单用甲基泼尼松龙或丹参组BALF中蛋白含量、肺组织W／D比值和MDA、NO水平均明显降低（P〈0．05）,肺组织SOD、GSH—Px活性则明显升高（P〈0．05）,以联合用药组更为明显（P〈0．01）。结论联合应用甲基泼尼松龙和丹参通过抗氧化作用、调整氧化／抗氧化平衡,对ALI大鼠具有较好的治疗作用。